冰核活性细菌发酵生产冰核活性蛋白产物的研究进展

对国内外关于冰核活性细菌 (简称INA细菌 )发酵生产冰核活性蛋白的条件 ,发酵过程的调控手段 ,及其对发酵生产的相关技术方法进行了较为详尽的综述 ,为研究开发这一新型蛋白资源提供较为全面的背景材料     

冰核活性细菌Xanthomonas ampelina TS206的两种固定化方法的比较

冰核活性细菌固定化在食品冷冻浓缩中具有重要意义,冰核活性和抗渗漏能力是衡量其性能的两个重要技术指标.研究采用共固定化和海藻酸盐直接固定化两种方法,建立了冰核活性细菌Xanthomonas ampelina TS206的包埋技术.结果表明包埋量对冰核活性有较大影响,利用海藻酸盐直接固定化冰核活性较高,但渗漏量较大;利用共固定化冰核活性较低,但渗漏量很低.两种固定化方法的凝胶珠添加量与综合评分相关不大;海藻酸盐固定化综合评分与固化时间正相关,共固定化综合评分与固化时间略呈负相关.     

冰核活性细菌在5L发酵罐上培养条件的研究

对5L发酵罐上培养冰核活性细菌XanthomonasampelinaTS206的发酵工艺条件进行了系统的研究,确定了最适的工艺条件为:通气量2L/(L·min),搅拌速度500r/min,接种量10%,最适培养时间48h,所获得的Xan-thomonasampelinaTS206菌体干重为12·934g/L,冻滴率为100%。     

冰核活性细菌发酵培养基的优化筛选

研究了不同营养构成及添加不同营养物质对冰核细菌生长和冰核活性的影响 ,采用正交试验优化了培养基组成。优化后的培养基最佳配方为 :在MPDA培养基中添加 0 4%半乳糖、1 5 %酵母粉、0 0 1%粗磷脂。在优化后的培养基中培养供试菌 ,菌体收获量 (干重 )比在MPDA培养基中培养增加 2 4g/L ,冰核活性增加 2 4 3 %。     

冰核活性细菌Erwinia herbicola发酵培养条件的研究

研究了不同培养条件对冰核活性细菌冰核活性和菌体生物量的影响。结果表明：培养时间、温度、低温诱导和培养基pH值对培养液中冰核活性细菌的总活性有不同的影响。研究确定的最适发酵条件组合为培养温度18℃，培养基pH6．5，培养时间32h。     

培养条件对冰核生产菌Xanthomonas ampelina TS206产胶率的影响

培养条件影响冰核细菌的生物量、冰核活性和产胶率。通过单因子试验确定了TS206的最适培养条件：最适装液量为100ml，培养基的最适起始pH值为7．0，最佳培养时间为48h，但是通过上述培养条件的调整并不能明显降低黄原胶的产率。采取从30℃到J18℃的双温培养可以在保持较高的生物量和冰核活性的前提下，降低黄原胶的产量，并明显缩短了培养时间。     

Xanthomonas ampelina发酵培养基组成的优化

本文采用正交实验的方法优化了Xanthomonas ampelina TS206发酵培养基的配方,从而达到了提高冰核活性细菌发酵所得的生物量和细菌的冰核活性的目的。实验结果表明较优化的培养基配方为:牛肉膏3.0g/L、蛋白胨5.0g/L、甘油25.0g/L、蔗糖20.0g/L、山梨醇2.0g/L、酵母粉20.0g/L、玉米浆20.0g/L、K2HPO4 1.5g/L、pH=7.0;最终发酵液的生物量达到8.2g/L(干重),冻滴率达到81%。     

黄单胞冰核活性细菌发酵制备的初步研究

应用正交设计与均匀设计对黄单胞冰核活性细菌的发酵制备条件进行了初步研究。结果表明 ,琥珀酸抑制了黄单胞菌生长与冰核活性的表达 ,甘油、蔗糖、乳糖、谷氨酸钠不同程度地促进了冰核活性和单胞菌的生长。较优培养基配方为酵母粉 1%、大豆蛋白胨 1%、MgSO4 ·7H2 O 0 0 5%、甘油 1%、蔗糖 2 %、乳糖 1%、谷氨酸钠 0 3% ,pH 7 0 ;较优发酵组合为细菌种龄 72h ,发酵时间 4 5h     

植物抽取物对冰核活性细菌表达冰核活性蛋白的影响

植物提取物对于冰核活性细菌表达冰核活性蛋白具有明显的促进作用。通过添加适量的芥菜籽热水抽取物培养冰核活性细菌 (XanthomonasampelinaTS2 0 6) ,细菌的冰核活性比原来提高了 37.5 %,菌体的生物量提高了 36.2 %。芥菜籽抽提物作为一种效应物分子激活启动子 ,在冰核蛋白基因的表达中起到了重要作用 ,从而显著地提高了细菌高水平表达冰核活性蛋白的能力。     

冰核活性细菌中冰核活性蛋白质的分离与纯化的研究

解决生物冰核应用中的安全问题,从产冰核活性的细菌中分离纯化天然冰核活性蛋白质是一条重要途径,对其应用具有重要价值。本研究以冰核活性细菌(Erwinia herbicola 10025A)为实验菌种,经培养获得高浓度发酵液,离心处理后,采用超声波破碎、凝胶层析的方法,分离纯化得到了Erwiniaherbicola10025A的I型冰核活性蛋白质。该蛋白质经SDS-PAGE的分析鉴定,证实了该冰核活性蛋白质的分子量为150kD左右。     

培养基组成对冰核生产菌Xanthomonas ampelina TS206产胶率的影响

培养基中不同的碳源、氮源和无机盐影响冰核细菌的生长、冰核蛋白的表达及黄原胶的产率。蔗糖、麦芽糖和山梨醇均有利于冰核蛋白的生产,而且麦芽糖和山梨醇的产胶率要明显低于其它碳源;蛋白胨和玉米浆均可以作为冰核蛋白生产的优良氮源使用,无机氮不适合作为唯一氮源使用,但适量的KNO3和蛋白胨结合使用时,可以促进菌体的生长和冰核活性的表达,但同时也促进了黄原胶的形成;适量地添加无机盐对菌体的生长和冰核活性的表达有一定的促进作用,对黄原胶的合成没有明显的抑制作用。     

降低冰核生产菌X．ampelina TS206黄原胶产率的研究

培养基中不同的碳源影响冰核细菌的冰核活性、生物量和产胶率，麦芽糖、山梨醇、蔗糖等均可做为促进冰核细菌生长碳源，麦芽糖作为碳源加入发酵培养基中生物活性和生物量均较高，同时产胶率低于葡萄糖和蔗糖十倍左右。麦芽汁代替麦芽糖可以降低产胶率，但效果不如麦芽糖。在培养基中加入0．1ml，100ml乳酸可以有效地抑制黄原胶的产生，而对冰核活性和生物量影响不大。     

海藻酸钙固定化对Xanthomonas campestris206冰核活性的影响

应用正交法研究了海藻酸钙固定化对Xanthomonascampestris 2 0 6冰核活性的影响。结果表明 ,对固定化小球冰核活性影响程度大小的顺序依次为 :菌悬液用量 >海藻酸钠用量 >CaCl2 浓度 >固化时间 ,而对渗漏量影响程度大小的顺序依次为 :菌悬液用量 >固化时间 >CaCl2 浓度 >海藻酸钠用量。研究中还发现 ,将冰核活性细菌固定化在热稳定性方面实际意义不大。     

光合细菌R_1发酵产类胡萝卜素的研究

对光合细菌R1产类胡萝卜素进行发酵条件优化 ,初步确定了获得类胡萝卜素较高产率的合适培养条件 ,以 0 3%的NaAc为碳源 ,0 3%的 (NH4 ) 2 SO4 为氮源 ,加入 0 15 g/L的MgSO4 ,接种量为 8% ,在 pH值 7 0左右 ,15 0 0lx的光照度下 ,30℃ ,经 5d的发酵后 ,类胡萝卜素在 4 76nm下的OD值可达 1 2 80。     

藏灵菇源乳酸菌复合发酵剂分批发酵条件的优化

利用筛选自藏灵菇产胆盐水解酶的干酪乳杆菌J1、嗜热链球菌Tx和乳酸乳球菌乳酸亚种P5研究发酵条件与生长因子对酸奶复合发酵剂活菌数及球杆菌比例的影响。采用5L自动发酵罐进行四因素三水平(L9(34))正交试验,确定分批发酵的优化条件。结果表明：在发酵温度40℃、发酵液pH6.5、发酵时间6h的条件下,以5%胡萝卜汁为生长因子时,复合发酵剂活菌数最高,为6.7×109CFU/mL。在此优化条件下,发酵剂的活菌数是优化前的近70倍。