用棉秆制备活性炭的初步研究

介绍了以棉秆为原料，用二氯化锌活化法制取活性炭，对炭化、活化等工艺条件及产品的脱色性能进行了研究，产品质量优良。     

流行性出血热病毒单克隆抗体的研究

应用流行性出血热病毒(EHFV)Z_(10)株制备的疫苗免疫BALB/c小鼠,取脾细胞与BALB/c小白鼠骨髓瘤SP2/0细胞融合,获得10株能分泌ENFV特异性单克隆抗体(McAb)的杂交瘤细胞,其McAbs小鼠腹水荧光抗体滴度达1:2000～1:51200。经免疫印迹试验及ELISA夹心法证明1 0株McAbs为抗EHFV核蛋白(NP)的McAb,均不具有中和抗体活性,有低滴度的血凝抑制活性;经间接免疫荧光试验(IFAT)证明,2株为组特异性的McAb,5株为亚组特异性的McAb,3株为型特异性的McAb。实验用冻存免疫脾细胞进行杂交获得成功,为杂交瘤细胞的研究提供了经验。     

细胞工厂培养沙鼠肾原代细胞制备肾综合征出血热灭活疫苗

目的用细胞工厂代替转瓶培养沙鼠肾原代细胞,制备肾综合征出血热(HFRS)疫苗,减少原代沙鼠用量,提高产量。方法在细胞工厂内培养沙鼠肾原代细胞,以15L转瓶培养作对照,比较两种容器内细胞生长及收获的病毒滴度和抗原含量;病毒液经超滤浓缩后,采用Sepharose-4FF介质色谱纯化,并进行各项检定。结果细胞工厂只需接种转瓶培养所需1/3量的沙鼠肾细胞,就能在同期与转瓶细胞数量相当。接种病毒后,转瓶中的细胞在收获第5次后已脱落(10～20)%,而细胞工厂中的细胞几乎没有脱落;收获至第9次时,细胞工厂中的细胞脱落率才达20%;每次收获的病毒液病毒滴度和抗原含量均较高,且稳定在一定范围。浓缩纯化后,各项检定指标均合格。结论使用细胞工厂培养沙鼠肾原代细胞制备HFRS疫苗不仅提高了收率,而且减少了培养空间,降低了污染,可替代转瓶大规模生产HFRS疫苗。     

流行性出血热病毒于原代地鼠肾细胞传代适应和适应株病毒的生物学性状研究

为提高流行性出血热病毒（简称EHFV）在金黄地鼠肾细胞（简称GHKC）的增殖力和原液的毒力满度，将6株乳鼠脑腔适应系毒株，在GHKC进行传代适应，各系毒株均传12代以上。适应后的毒株毒力满度明显升高而且稳定．适应株病毒ELISA、HA和RPHA抗原县均明显高于用乳鼠脑系毒株感染细胞。     

三株流行性出血热病毒免疫原性的比较研究

三株病毒用不同方法制备的疫苗，免疫家兔后都能诱导产生免疫荧光抗体（IF）。其中Z10和L99株用细胞冻融以β-丙内酯灭活制备的疫苗还可以测到HI抗体。以β-丙内酯灭活的疫苗所产生的中和抗体，以Z10株最高（1：80～1：160），L99株较低（1：10），而LR1株未测出。但三株病毒感染的细胞培养上清液，用两种灭活剂均未产生HI或NT抗体。     

肾综合征出血热病毒在Vero细胞中增殖动态观察

目的观察Ⅰ型和Ⅱ型肾综合征出血热病毒在Vero细胞中的增殖动态。方法将Ⅰ型和Ⅱ型出血热病毒分别感染Vero细胞,并同时采用免疫荧光法检测病毒滴度。结果Ⅰ型和Ⅱ型出血热病毒感染Vero细胞后9～16d内病毒滴度均大于6.0LgCCID50/ml;用两种不同方法,在感染10～30d中,每隔3d收获一次病毒液,感染后第13天和第16天收获的病毒液病毒滴度均大于7.0LgCCID50/ml。结论Ⅰ型和Ⅱ型出血热病毒能够在Vero细胞中增殖并达到高滴度,感染后10～25d病毒毒力保持稳定。     

肾综合征出血热病毒84-Fli株单克隆抗体的制备及鉴定

目的制备抗肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndromes,HFRS)病毒特异性单克隆抗体。方法以汉坦病毒84-Fli株抗原纯化液免疫BALB/c小鼠,采用细胞融合技术获得单克隆抗体,利用IFA、SDS-PAGE和Western blot法鉴定其生物学特性。结果成功筛选出阳性杂交瘤细胞株4F6,能稳定且持续分泌抗HFRS病毒的单克隆抗体,亚类鉴定结果为IgM,可与HFRS病毒蛋白在相对分子质量约50 000处发生特异性反应,具有较好的专属性。结论成功制备了1株抗HFRS病毒的单克隆抗体,为进一步研究该病毒感染的诊断、治疗及其预防方法奠定了基础。     

流行性出血热病毒于原代地鼠肾细胞传代适应和适应株病毒…

为提高流行性出血热病毒（简称ＥＨＦＶ）在金黄地鼠肾细胞（简称ＧＨＫＣ）的增殖力和原液的毒力滴度，将６株乳鼠脑腔适应系素株，在ＧＨＫＣ进行传代适应，各系毒株均传１２代以上，适应后的毒株毒力滴度明显升高而且稳定。适应株病毒ＥＬＩＳＡ、ＨＡ和ＲＰＨＡ抗原量均明显高于乳鼠脑系毒株感染细胞。     

流行性出血热病毒在地鼠肾细胞中增殖动态的形态学及形态发生学研究

用普通电镜及免疫电镜对流行性出血热病毒(EHFV)不同毒株感染地鼠肾细胞(GHKC)的形态及形态发生学特点、其特征性包含体的形态及感染细胞超微结构的改变,以及感染后不同天数的病毒增殖动态进行了观察。     

高效价巨细胞病毒免疫球蛋白的制备及初步应用

应用ELISA法筛选巨细胞病毒（CMV）IgG效价≥1：30000的人血浆，合并后，按低温乙醇法精制出高效价CMV－IgG。经小规模人体应用观察无不良反应，且有71．4％（50／70）的CMV－IgM或CMV-IgA阳性人的血清转阴。     

重组SARS病毒N蛋白的制备及其初步应用

目的在大肠杆菌中表达重组SARS-CoVN蛋白,并进行纯化,为进一步研制SARS早期诊断试剂奠定基础。方法通过RT-PCR获得SARS-CoVN蛋白基因片段,并克隆至大肠杆菌表达载体pQE30中,构建重组质粒。转化E·coliM15,IPIG诱导表达。经SDS-PAGE和Western blot鉴定,采用Chelating-Sepharose Fast Flow纯化融合蛋白,并免疫BALB/c小鼠,检测小鼠血清抗体水平。结果所构建的重组表达载体pQE30-N经诱导可表达重组SARS病毒N蛋白。该蛋白纯化后,纯度可达90%左右。Western blot检测表明,重组SARS病毒N蛋白可与SARS患者恢复期血清呈现特异的免疫反应。免疫BALB/c小鼠可获得高效价抗血清。结论重组SARS-CoV N蛋白具有良好的抗原性,可用于SARS-CoV感染的早期诊断。     

由活性炭制备富氧用炭分子筛的初步研究

本文初步研究了由商品活性炭直接制备富Ｏ２用炭分子筛的可能性，考察了工艺条件对炭分子筛空分性能的影响。批出可以通过调变商品活性炭的孔隙分布直接获得有一定空分能力的炭分子筛。     

痘苗病毒滴度测定用国家标准品的制备

目的制备病毒载体疫苗滴度测定用国家标准品。方法以鸡胚成纤维细胞制备痘苗病毒,经密度梯度超速离心纯化后,加入天花疫苗保护剂,分装冻存,分发至我国4个不同实验室,按照统一的结晶紫染色蚀斑法实验方案进行协作标定,每次实验稀释后取2个稀释度,每个稀释度设5个平行孔,计算各实验室检测结果的几何均数,对标准品中痘苗病毒滴度进行赋值。检测病毒标准品于不同温度下保存不同时间的稳定性,并对病毒标准品的各项质量指标进行检定。结果 4个实验室共测定44次,4个实验室间的检测结果差异无统计学意义(P>0.05),各实验室检测结果的几何平均数为3.05×106PFU/ml,95%CI为2.00×106～4.65×106PFU/ml,标准差为0.09,总变异系数1.41%。制备的痘苗病毒标准品于4℃可稳定放置10 d,37℃放置稳定性较差。制备的痘苗病毒标准品装量检查合格(1 ml/支);pH值为6.9;无菌试验合格;分装重量精密性为0.95%。结论制备的痘苗病毒标准品可作为痘病毒载体疫苗滴度测定用标准品。     

生物反应器培养Vero细胞制备Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗

目的在生物反应器中用微载体连续灌流培养Vero细胞,制备Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗。方法在50 L体积的生物反应器中,加入含10 g/L微载体的DMEM培养基,接种Vero细胞,当细胞密度约达5×10~6个/ml时,感染肾综合征出血热(hemorrhagic fever with renal syndrome,HFRS)毒种,接毒后72 h开始收获,连续收获17 d,收获的病毒原液经浓缩、灭活、Sepharose 4FF凝胶层析纯化后制备疫苗,检测病毒滴度、抗原含量及残余牛血清白蛋白、DNA、宿主蛋白含量,并接种新西兰家兔,检测疫苗效力。结果确定最佳Vero细胞接种浓度为1×10~5个/ml,病毒最佳MOI为0.015。利用优化后的培养条件收获的病毒滴度在6.5~8.0 log CCID_(50)/ml,且各项检测指标均符合《中国药典》三部(2010版)相关规定。结论用生物反应器微载体灌流培养制备Ⅱ型肾综合征出血热灭活疫苗的小试工艺可行。     

3种细胞基质制备的麻疹血凝素效价的比较

目的比较3种细胞两种培养基制备的麻疹血凝素的效价。方法分别采用含10%新生牛血清的MEM培养基和含0.2%水解乳蛋白的199培养基培养原代人羊膜细胞、传代人羊膜细胞(FL)和Vero细胞,以0.01 MOI麻疹病毒L4株感染细胞,收获原制血凝素,采用Tween-80/乙醚处理,经血凝试验监测血凝素最佳收获时间,并测定原制血凝素和血凝素效价。结果采用MEM培养基培养的FL和Vero细胞在感染麻疹病毒后10~11 d,血凝素效价最高,均可达1∶16,原代人羊膜细胞在感染麻疹病毒后14~15 d,血凝素效价最高,可达1∶128;采用199培养基培养的FL和Vero细胞所制备的麻疹原制血凝素和血凝素效价均大于1∶32,高于MEM培养基组(1∶16),而原代人羊膜细胞所制备的麻疹原制血凝素和血凝素效价均为1∶128。结论 3种细胞两种培养基均可用于制备麻疹血凝素。     

亚磷酸亚铁制备的初步研究

提高亚磷酸盐的品质以及对新型亚磷酸盐产品的研究与开发具有很大现实意义。简介了一种以亚磷酸代替磷酸并采用氢氧化钠调节体系pH值制备亚磷酸亚铁的方法,并通过研究了硫酸亚铁—亚磷酸—氢氧化钠三元反应体系中的产物亚磷酸亚铁的性质,探索影响其制备的工艺参数,如原料配比、终点pH值、加料顺序等,为亚磷酸亚铁制备的后续研究提供参考。     

纳米二氧化钛制备的初步研究

本文采用溶胶凝胶技术制备纳米ＴｉＯ２粉末，并用扫描差热分析（ＤＴＡ），Ｘ射线衍射（ＸＲＤ）、透射电子显微镜（ＴＥＭ）等实验技术分析其微观形貌和相结构变化的规律。研究表明，采用该技术可以制造纳米ＴｉＯ２，随温度升高，出现锐钛矿向金红石相的转变。     

流行性出血热病毒不同结构蛋白单克隆抗体的免疫学特性研究

本文比较了12株出血热病毒不同结构蛋白的单克隆抗体的免疫学特性,结果大多数抗外膜糖蛋白G_1和G_2单抗具有较高的中和及血凝抑制(HI)活性,一株有低HI滴度而无中和滴度,表明与HA有关的位点不一定有中和活性。抗核蛋白(NP)单抗,除一株(3G_1)外均无中和活性,但具有低的HI滴度,表明核蛋白上亦存在HA位点。所有NP单抗均显示对A_(35)(抗NP)致敏血球的凝集抑制作用(RPHI),而G_1和G_2单抗则均无抑制作用。 3G_1株显示较高的中和及HI活性,但又与A_(35)(抗NP)单抗有明显的交叉RPHI反应,因此可能是针对二种结构蛋白的特殊单抗。     

稀土磷酸盐制备的初步研究

对磷矿石酸解液中提取稀土及草酸盐先驱体法制备稀土磷酸盐的反应条件进行了实验和探索,结果表明:制备稀土磷酸盐的合适沉试剂为磷酸氢二铵,沉淀所需的最佳p H值为5~6,在最佳条件下,可获得的稀土沉淀量最多且最易处理,为提取磷矿石中伴生稀土和合成稀土磷酸盐进一步的探索研究提供了依据,并且具有一定的参考价值。     

纳米二氧化硅制备的初步研究

采用溶胶凝胶技术探索制备SiO2纳米材料，并用扫描差热分析（DTA）、X射线衍射（XRD）、透射电子显微镜（TEM）等实验手段分析了所制备的SiO2的结构和形貌特征，表明SiO2属非晶态，其粒子在常规温度下呈球形，粒径随温度升高而增大，在300℃烧结的样品中平均粒径仅为14mm。