二烯丙基二硫下调β-catenin抑制人胃癌MGC803细胞EMT

目的研究二烯丙基二硫(DADS)抑制人胃癌MGC803细胞EMT与形态学变化。方法应用相差显微镜与透射电镜观察30 mg·L-1DADS处理后的MGC803细胞形态学与超微结构的变化。RT-PCR与Western blot检测β-catenin和EMT标记E-cadherin与Vimentin表达。结果 30 mg·L-1DADS处理MGC803细胞24 h后,相差显微镜显示,与未处理比较,细胞圆形、椭圆形,核浆比值降低,巢状分布,均未见伪足。透射电镜显示,细胞表面微绒毛数目减少,细胞核变规整,核浆比值下降,异型性降低,细胞与细胞之间出现连接结构,细胞器增多。RT-PCR与Western blot表明,DADS可呈时间依赖性分别下调MGC803细胞β-catenin和Vimentin mRNA与蛋白和上调E-cadherin mRNA与蛋白。结论 DADS可通过下调β-catenin上调E-cadherin与下调Vimentin抑制EMT和伪足形成。     

槲皮素对转化生长因子-β_1诱导的肾小球足细胞转分化抑制作用的实验研究

目的研究槲皮素(Qu)不同给药时间对转化生长因子-β_1(TGF-β_1)诱导的肾小球足细胞向间充质细胞转分化(EMT)的影响。方法取经过鉴定的体外原代培养的足细胞,随机分为对照组、模型组、Qu先干预组、Qu同时干预组和Qu后干预组,共5组。对照组常规培养;模型组采用5 ng/m L TGF-β_1诱导48 h;Qu先干预组采用50μmol/L Qu干预24 h后,再用5 ng/m L TGF-β_1继续诱导24 h;Qu同时干预组采用50μmol/LQu和5 ng/m L TGF-β_1同时干预48 h;Qu后干预组先用5 ng/m L TGF-β_1干预24 h,再用50μmol/L Qu干预24 h。将上述5组细胞分别采用Western blot、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测足细胞裂孔膜蛋白(Nephrin)、Wilms瘤抑癌因子-1(WT-1)和足细胞EMT标志物波形蛋白(Vimentin)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的蛋白及mRNA表达量,并进行组间比较。结果 1)蛋白表达量:与对照组比较,模型组足细胞Nephrin,WT-1的蛋白表达量明显降低,Vimentin,α-SMA的蛋白表达量明显升高(P<0.01);与模型组比较,3种不同干预方法中,Nephrin的蛋白表达量以Qu后干预组最高,WT-1的蛋白表达量以Qu同时干预组最高,Vimentin的蛋白表达量以Qu先干预组最低,α-SMA的蛋白表达量以Qu先干预组最低(P<0.01)。2)mRNA表达量:与对照组比较,模型组足细胞Nephrin mRNA和WT-1 mRNA的表达量明显降低,Vimentin mRNA和α-SMA mRNA的表达量明显升高(P<0.01);与模型组比较,3种不同干预方法中,Nephrin mRNA的表达量以Qu同时干预组最高(P<0.05),WT-1 mRNA的表达量以Qu先干预组最高(P<0.01),Vimentin mRNA和α-SMA mRNA表达量均以Qu先干预组最低(P<0.01)。结论 Qu能够抑制T GF-β1诱导的足细胞EMT,且Qu先干预组能够更好地抑制TGF-β_1诱导的足细胞EMT,其作用机制可能与抑制TGF-β信号转导通路中的相关信号分子、维持足细胞生理结构的完整性从而保护肾小球滤过屏障有关。     

外周血循环肿瘤细胞及其变化在局部晚期鼻咽癌疗效判断及预后预测中的作用

目的:探讨外周血循环肿瘤细胞(circulating tumor cells,CTCs)及其变化在局部晚期鼻咽癌疗效判断及预后预测中的作用。方法:收集2016年6月-2017年6月本院收治的局部晚期鼻咽癌患者60例,利用抗体标记和流式细胞仪联合方法,分别检测患者在接受治疗前、治疗后3周及治疗后3个月的外周血CTCs数量,且平均随访24个月,对包括CTCs在内的预后因子进行统计分析,探索CTCs及其变化与局部晚期鼻咽癌疗效、预后之间的关系。结果:单因素分析结果显示,CTCs水平与N分期明显相关(P<0.05);Logistic多因素回归分析结果显示,CTCs水平与N分期有相关性(P<0.05),CTCs阳性患者的N分期更晚;与治疗前相比,治疗后3周、3个月的CTCs数目及阳性率均显著降低(P<0.05);治疗后3个月CTCs阴性患者的RR显著高于CTCs阳性患者(P<0.05);根据Kaplan-Meier生存分析结果显示,CTCs阳性患者的总生存时间(overall survival,OS)明显短于CTCs阴性患者,2年总生存率分别为83.26%和91.23%,差异有统计学意义(P<0.05);且治疗后随访期间,CTCs阴性组转移复发率均明显低于CTCs阳性组(P<0.05)。结论:外周血CTCs检测可用于局部晚期鼻咽癌的疗效评价,且对患者疗效具有一定的预后预测价值,可能成为鼻咽癌患者早期发现疾病进展及预后评估的一个辅助指标,进而为制定个体化诊断和治疗提供可靠依据。     

乳腺癌患者新辅助化疗前后Ki-67、Tau表达水平与化疗效果的关系分析

目的:研究新辅助化疗前后乳腺癌患者Ki-67、Tau表达水平与化疗效果的关系。方法:回顾性分析本院2015年5月-2018年5月收治的乳腺癌患者67例,均接受紫衫类药物新辅助化疗后实施手术治疗,并取手术前后标本进行病理检测。观察化疗前后乳腺标本中Ki-67、Tau表达水平,统计新辅助化疗后疗效情况及其与Ki-67、Tau表达水平间关系。结果:新辅助化疗后乳腺标本中Ki-67蛋白阳性表达低于新辅助化疗前(P<0.05),新辅助化疗后乳腺标本中Tau蛋白阳性表达高于新辅助化疗前(P<0.05)。67例乳腺癌患者中完全缓解(complete response,CR)患者4例(5.97%)、部分缓解(partial response,PR)患者42例(62.69%)、疾病稳定(stable disease,SD)患者21例(31.34%)、疾病进展(progressive disease,PD)患者无。新辅助化疗后CR+PR及SD患者乳腺组织中Ki-67表达情况比较,差异无统计学意义(P>0.05),新辅助化疗后CR+PR患者乳腺组织中Tau阳性表达高于SD患者(P<0.05)。结论:紫衫类药物新辅助化疗方案对乳腺癌治疗效果较好,其近期治疗效果可能与乳腺癌组织中Ki-67、Tau蛋白表达水平有关,临床治疗应予以重视。     

骨膜蛋白表达与肾透明细胞癌患者预后的关系

目的:探究骨膜蛋白表达与肾透明细胞癌患者预后的关系。方法:选取2012年1月-2014年1月于本院接受根治性肾切除术的肾透明细胞癌患者118例,失访11例,以肾癌骨膜蛋白相对表达量中位数(1.12)为界分为高表达组(≥1.12)50例和低表达组(<1.12)57例。采用免疫组织化学法观察两组患者骨膜蛋白阳性表达情况,采用Western blot检测两组患者骨膜蛋白表达情况,分析骨膜蛋白表达与临床病理参数及术后生存率的关系。结果:骨膜蛋白高表达组的肿瘤直径>7 cm、肿瘤低分化、淋巴转移患者例数均显著多于骨膜蛋白低表达组,差异均有统计学意义(P<0.05)。骨膜蛋白高表达组POSTN表达相对表达量显著降低于骨膜蛋白低表达组,差异有统计学意义(t=29.933,P=0.000)。免疫组化结果显示,高表达组骨膜蛋白阳性表达率显著高于低表达组,差异有统计学意义(χ~2=22.202,P=0.000)。骨膜蛋白低表达组1年生存率为91.20%,高于高表达组的76.00%,差异有统计学意义(P<0.05);骨膜蛋白低表达组5年生存率为43.86%,高于高表达组的20.00%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:骨膜蛋白表达与肾透明细胞癌患者肿瘤大小、病理分级、临床分期、总体生存率密切相关。     

敲低ACTL8基因对子宫内膜癌细胞增殖与迁移的影响

目的探讨采用携带shRNA特异序列的载体转染子宫内膜癌细胞敲低肌动蛋白样蛋白8(ACTL8)基因对细胞增殖、侵袭迁移能力的影响及其机制。方法选取人子宫内膜癌Ishikawa细胞株进行实验研究,以携带shRNA特异序列的载体及空载质粒分别转染Ishikawa细胞株,形成敲低ACTL8基因的shACTL8组和以空载质粒转染的对照组。荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测两组细胞中ACTL8 mRNA表达,Western blot法检测两组细胞ACTL8蛋白表达,Transwell迁移和侵袭实验分析Ishikawa细胞侵袭和迁移能力,CCK8细胞增殖实验及平板克隆实验检测细胞的增殖情况,Western blot法检测两组细胞的E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、P21蛋白的表达情况。结果 shACTL8组的ACTL8 mRNA、ACTL8蛋白相对表达强度均低于对照组(P<0.05);shACTL8组的Ishikawa细胞侵袭、迁移水平均低于对照组(P<0.05);在细胞培养后1天、2天、3天,shACTL8组的Ishikawa细胞数目测定OD值显著低于对照组(P<0.05);平板克隆实验培养3天,可见shACTL8组培养皿中细胞生长数目明显少于对照组(P<0.05);shACTL8组E-cadherin蛋白、P21蛋白表达强度高于对照组(P<0.05);shACTL8组N-cadherin蛋白、MMP-9蛋白表达强度低于对照组(P<0.05)。结论敲低ACTL8基因抑制子宫内膜癌Ishikawa细胞增殖、迁移、侵袭。     

烟草烟雾暴露对气道上皮细胞转分化改变的初探

目的:观察烟草烟雾暴露人气道上皮细胞(16HBE)后,发生间充质转分化(EMT)样改变。方法:(1)以不同浓度(5~50μg/mL)CSC刺激16HBE 7 d,用CCKit-8检测细胞总体活性,筛选最佳浓度。(2)用CSC最大活性影响浓度刺激16HBE 7 d,观察细胞形态改变,经Western-blot法和细胞免疫荧光技术检测上皮细胞标志物E钙黏蛋白(E-cad)及EMT标记物1型胶原(COL1)、波形蛋白(Vimentin)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)的表达水平。结果:(1)不同浓度CSC刺激后,16HBE在10μg/mL时OD值最高,为(2.562±0.045)。各浓度间OD值比较差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)经10μg/mL CSC刺激后,部分16HBE形态由鹅卵石状向长梭形、多角形或星形改变。(3)Western-blot检测发现试验组COL1、MMP-9的蛋白表达量分别为(0.566±0.011)和(0.463±0.003),高于对照组(0.272±0.020)和(0.201±0.023),差异均有统计学意义(P<0.05);而E-cad蛋白表达量则明显低于对照组,分别为(0.301±0.041)和(0.591±0.068),差异有统计学意义(P<0.05)。(4)细胞免疫荧光检测发现试验组COL1、Vimentin和MMP-9蛋白表达量均高于对照组(P<0.05);而E-cad蛋白表达量明显低于对照组(P<0.05)。结论:经CSC刺激后,16HBE可出现转分化样改变。     

卵巢癌患者p53蛋白、COX-2、Bcl-2、GST-π表达情况及其与预后的关系研究

目的:探究卵巢癌患者p53蛋白、环氧合酶-2(COX-2)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2及谷胱甘肽S转移酶-π(GST-π)表达情况及其与预后的关系。方法:选取南昌大学第三附属医院及江西省妇幼保健院2016年6月-2018年1月80例卵巢癌患者为观察组,另选取同期80例卵巢良性肿瘤患者为对照组。比较两组p53蛋白、COX-2、Bcl-2及GST-π表达情况。比较观察组中不同分化程度、分期及预后的p53蛋白、COX-2、Bcl-2及GST-π表达情况。结果:观察组p53蛋白、COX-2、Bcl-2及GST-π阳性表达率均高于对照组(P<0.05)。观察组中分化程度越低阳性表达率越高(P<0.05);TNM分期越高者阳性表达率越高(P<0.05);死亡或复发者阳性表达率高于生存者(P<0.05)。结论:卵巢癌患者p53蛋白、COX-2、Bcl-2及GST-π均呈现高表达状态,且死亡复发患者的表达相对更高,具有较高的临床检测价值。     

RIP1在肝癌组织中的表达意义及其对细胞侵袭、迁移的影响

探讨受体相互作用蛋白激酶-1(RIP1)在肝癌组织及癌旁组织中的表达情况,并探索其对肝癌细胞侵袭和迁移的分子调控机制。收集肝癌和癌旁组织,免疫组化检测RIP1蛋白的表达,筛选高表达RIP1的肝癌细胞系。对肝癌细胞系进行RIP1沉默处理并设置阴性对照。采用western blot及RT-PCR法检测RIP1的表达量;Tranwell观察细胞侵袭能力;细胞划痕观察细胞迁移能力。结果显示,48例肝癌组织中,22例存在RIP1蛋白阳性表达,阳性率为45.83%,其中,强阳性患者为15例,中等及弱阳性7例,该研究中有6例复发患者。RIP1在肝癌组织中的表达明显高于癌旁组织(P<0.05),高表达RIP1患者的总生存率和无复发生存率显著低于低表达RIP1的患者(均P<0.05)。抑制RIP1基因后其相对表达量、细胞侵袭、迁移能力均下降(P<0.05)。RIP1在肝癌中存在高表达,可能参与肝癌细胞侵袭与迁移过程。     

补肾益肺消癥方对TGF-β_1诱导的A549细胞凋亡及Caspase12信号通路关键蛋白表达的影响

目的:观察补肾益肺消癥方对TGF-β_1诱导A549细胞凋亡的影响及其对半胱天冬氨酸蛋白12 (cysteme aspartate specific protease 12,Caspase12)信号通路中关键蛋白表达的影响。方法:通过CCK-8筛选两种浓度的中药冻干粉干预TGF-β_1诱导的A549细胞,以TGF-β_1抑制剂为阳性对照,流式细胞仪检测细胞凋亡,western-blot检测Caspase12信号通路中相关蛋白的表达情况。结果:模型组细胞凋亡率较正常组显著增高(P<0.01),对照组及中药组细胞凋亡率较模型组显著降低(P<0.01);模型组细胞中Caspase12通路相关蛋白表达较正常组显著增高(P<0.05或P<0.01);对照组及中药组Caspase12通路相关蛋白表达较模型组均显著降低(P<0.05或P<0.01)。结论:补肾益肺消癥方可通过缓解Ⅱ型肺泡上皮细胞中持续的内质网应激及其诱导的Caspase12凋亡信号通路中关键蛋白的表达,减少Ⅱ型肺泡上皮细胞的凋亡,延缓肺纤维化的病理进程。     

Considerations on Stability of Embankments on Clay

This paper is part of a Special Lecture presented at the International Symposium on Coastal Geotechnical Engineering, IS Yokohama 2000, held in Yokohama in September 2000. It examines the different approaches that have been proposed for the evaluation of stability of embankments on soft clays. Stability of embankments constructed in one stage is well controlled. However, experience shows that engineers have to be careful when they want to apply in a given geological context an empirical approach that has been developed in a different one. For stage-constructed embankments, there are indications that the methods proposed up to now have a tendency to underestimate stability.     

城市边缘区村庄规划初探

一、引言 城市边缘区是指城市建成区的外围地带,从城市形态上看,该地带位于市区向郊区过渡的地带。位于城市边缘区的村庄是指集镇规模以下的中心村、行政村、自然村等。城市边缘区村庄作为城市发展中较活跃、变化迅速的地域实体,其功能及结构逐步发生了变化,与广大的乡村存在很大的差异,在社会经济、土地利用等方面均有不同,主要体现在以下几个方面: (一)经济发展条件的优势明显:村庄的经济发展之所以迅速,与其所处的良好区位而产生的边缘效应是密切相关的。1、城市边缘区村庄有着优越的地理位置,可优先吸收市区经济、技术、信息等,而…     

从业主的角度看BIM——BIM在上海中心的全过程运用研究

这一年BIM发展很快,年初我们以BIM专栏开场,现在又要以BIM收尾。作为同类期刊中最早全面报道BIM的,我们一直关注它的发展态势。不得不承认,它势头强劲,比我们想象的更猛——观望质疑的越来越少,投入其中的越来越多;既有设计大院全员参与的磅礴大气,又有中小院采用团队配合的四两拨千斤,更有越来越多业主的强势要求和强力推进——总包、分包不得不BIM或者说是"被BIM"……,让我们不得不感慨:BIM时代来临了。作为媒体的我们,也只能认清行业发展的趋势,随行就市,推波助澜。为此,本期特精选了2011年欧特克AU大师汇及中国建筑设计研究院第二届BIM大会的部分报告并邀请更多精彩内容,力争从业主、设计院管理、规划、设计、营建、服务多角度深入探讨BIM的应用,以期给读者更多的启示,也从而推动BIM在建筑行业的全面发展。(注:BIM=Bilding Information Model,三维建筑信息模型。若您还没听说过或听说过但不知道是干啥的,那就离out不远了,就也快hold不住了,得抓紧跟上了——编者笑批)     

从业主的角度看BIM——BIM在上海中心的全过程运用研究

项目地点 上海市浦东新区陆家嘴金融中心高度632m项目总用地面积/总建筑面积30 368m2/573 223m2建设单位 上海中心大厦建设发展有限公司方案及初步设计Gensler施工图设计 同济大学建筑设计研究院(集团)有限公司施工单位 上海建工集团动工时间/预计竣工时间2008年11月29日/2014年底缘起我个人接触BIM是在2007年,当时上海中心正处在方案设计阶段.除了超高、超大规模、系统超复杂外,大楼没有一个标准层,项目该怎么表达?参与单位接近40个,而业主团队整个技术管理人员不到10个人,采用什么方法才不会导致因为很多人为的错误而引起现场大量返工?作为这幢楼的技术主管,我内心非常忐忑不安.因此当有人跟我提到BIM理念的时候,我马上意识到它将会对我们有非常大的帮助.上海中心从2007年筹划使用BIM到现在已经过去4年的时间了,从我个人感觉来说,有非常多的体会,在这里跟大家交流一下.     

骨料对混凝土力学性能的影响分析

利用颗粒流方法,实现了相同条件下混凝土的骨料大小和空间位置对其破坏形态、应力-应变曲线、峰值应力和割线模量的影响规律研究.通过对比砂浆与骨料的不同质量比(5∶5,4∶6,3∶7,2∶8)以及不同级配(一级配、二级配、三级配、四级配)骨料的混凝土单轴压缩仿真试验结果,发现骨料有阻止混凝土裂纹扩展的作用,且骨料越大,阻止混凝土裂纹扩展的作用越强,而微裂纹多绕骨料产生和发展;砂浆中加入骨料对混凝土强度和变形特性具有明显的改善作用,相对于砂浆的峰值应力5.2MPa和割线模量30.7GPa而言,在砂浆与骨料质量比为5∶5和4∶6时,不同级配混凝土的峰值应力约增加22%~48%、割线模量增加-8%~99%,其平均值基本维持在6.5MPa和7.2MPa,37.4GPa和42.6GPa;在砂浆与骨料质量比为3∶7和2∶8时,不同级配混凝土的峰值应力急剧增加40%~228%、割线模量急剧减小79%~92%,其平均值分别为9.2MPa和15.4MPa,15.8GPa和4.4GPa.当砂浆与骨料的质量比相同时,骨料级配越高,越容易形成架空结构,造成局部不稳定,影响骨料增强效果;级配相同时,混凝土强度随骨料质量占比的增大而增大,且其应力-应变曲线呈现出单峰到双峰再到单峰的变化趋势,这说明骨料空间结构的稳定程度决定了混凝土应力-应变曲线的形状变化.     

水对高速公路路基影响的探讨

探讨了地下水位变化对路基的影响,分析了考虑地下水位影响的路基高度的确定,研究了高速公路路基综合排水的设计,以不断完善道路排水系统,从而延长公路的使用寿命。     

某结构隔震层布置的改进研究

针对国内某大型隔震建筑,借助SAP2000建立下部结构—隔震层—上部结构整体系统的空间模型,就隔震结构的振型与频率、质心分布进行了分析和橡胶垫布置的改进计算。以减小上、下部结构地震响应为目的,对不同型号橡胶垫的选用及布置方案进行改进。对改进后的刚心位置、周期与振型、隔震垫扭转角变化、隔震垫面压变化、水平位移限值进行了分析,结果表明,通过改进,能够有效地减少扭转现象,达到了较好的效果,为隔震结构设计提供了方法与实例。     

激发剂对天然硬石膏的改性研究

通过测定凝结时间和不同龄期绝干抗折、抗压强度,分析研究盐类和碱性激发剂对天然硬石膏的改性效果,对比优选出硫酸钠作为合适单一激发剂.在自制激发剂基础上通过与硫酸钠复配,最终获得掺量小、效果好,对硬石膏制品副作用小的高效复合激发剂.研究结果表明,在合适激发剂的激活下能够获得凝结硬化快,7d抗折、抗压强度分别达9.00MPa、30.0MPa的天然硬石膏建筑胶凝材料.     

碳化对混凝土微观结构的影响研究

对不同水胶比和掺加粉煤灰的混凝土进行快速碳化试验,使用电镜扫描、压汞测试手段,对混凝土微观形貌、孔结构、孔级配进行了分析,研究结果表明:水胶比是混凝土微观结构的决定因素,低水胶比混凝土微观结构更加致密;碳化虽然降低了混凝土孔隙率,但会使临界孔径和最可几孔径增大,孔隙连通性提高,使得外界环境中有害物质更容易进入混凝土内部,不利于混凝土耐久性。     

智能化系统全网络架构（All on IP）的探讨

本文通过对目前智能化各子系统IP化的分析,提出了“All on IP”的概念,并阐述了该架构的可行性,同时展望了该架构的意义。