芽孢乳酸杆菌抑菌物质特性的研究

芽孢乳酸杆菌1033在乳酸发酵过程中能产生抑菌物质,通过对这种抑菌物质的产生与培养基组成关系的分析,对抑菌物质的分离和提取的研究,以及对理化性质和抑菌谱的测定,初步探明了芽孢乳酸杆菌1033产生的这种抑菌物质能抑制常见的肠道病原菌.     

产抑菌物质乳酸菌的筛选及其抑菌特性研究

目的 本文旨在筛选具有广谱抑菌活性的乳酸菌,为其在食品保鲜中的应用奠定基础。方法 以MRS和M17为培养基,对韩国传统泡菜中乳酸菌进行分离鉴定,通过琼脂孔扩散法筛选具有广谱抑菌活性的乳酸菌,并分析它的耐酸、耐胆盐能力,以及对温度、pH、发酵时间的敏感性。结果 以大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、肠炎沙门氏菌、枯草芽孢杆菌为指示菌进行抑菌活性筛选,获得一株抑菌效果最佳的植物乳杆菌PC4-5。植物乳杆菌PC4-5在酸性条件（pH=2）处理2 h后存活率达到43.79%,0.5%胆盐处理2 h后存活率达到21.02%,说明植物乳杆菌PC4-5具有较好的耐酸、耐胆盐能力。经排酸排过氧化氢试验后,发酵上清依然保留抑菌活性,蛋白酶处理后抑菌活性丧失,表明该抑菌物质为细菌素。该细菌素在pH为2-6的范围有抑菌能力,且有较好热稳定性。结论 植物乳杆菌PC4-5适用于酸性食品的防腐保存,在食品保鲜中的应用有较大的潜力。     

戊糖乳杆菌S1-4所产抑菌物质的生物学特性研究

以内蒙古东部地区酸菜中分离得到的具有产抑菌活性的戊糖乳杆菌S1-4为供试菌,以大肠杆菌（Escherichia coli）3301为指示菌,采用双层琼脂扩散法对其所产抑菌物质的生物学特性进行研究。结果表明,戊糖乳杆菌S1-4所产的抑菌物经木瓜蛋白酶处理后,其抑菌活性明显降低,但对胃蛋白酶和胰蛋白酶不敏感。该抑菌物质经热处理后,对大肠杆菌仍保持较强的抑菌活性,在p H3.5⁵.5条件下,其抑菌活性较稳定。该菌株的发酵上清液分别经部分化学试剂和紫外线照射处理后,仍保持较好的抑菌活性。      

一株粪肠球菌8-1所产抑菌物质的生物学特性研究

为获得具有应用潜力的抑菌活性菌株,本实验采用双层琼脂平板扩散法对内蒙古传统乳制品酸马奶中分离的一株粪肠球菌（Enterococcus faecalis）8-1进行研究。排除有机酸和过氧化氢的干扰后,其无细胞发酵上清液对指示菌单核增生李斯特氏菌（Listeria monocytogenes）有明显的抑菌作用。且经过胰蛋白酶、蛋白酶K、胃蛋白酶和木瓜蛋白酶处理后,抑菌活性几乎完全丧失,表明该抑菌物质是蛋白类物质。该抑菌物质在酸性条件下抑菌活性明显,且具有良好的热稳定性。对有机溶剂、金属离子、紫外线不敏感,与SDS和EDTA共同作用抑菌效果增强。有较广的抑菌谱,能抑制多种革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌,初步推断属于类细菌素。      

副溶血性弧菌拮抗菌的筛选鉴定及抑菌物质特性研究

为获取既可抑制食源性致病菌又可抑制水产致病菌的益生菌株,以人畜共患致病菌副溶血性弧菌(Vibrio parahaemolyticus ATCC17802)为指示菌,采用点种法初筛以及打孔扩散法复筛,得到1株来源于上海东海海水的H19菌株,其抑菌物抑菌圈直径达(17.16±0.28)mm。通过形态观察及16SrDNA序列分析可知,菌株H19为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis H19,GenBank登录号:MG383451)。将菌株H19进行抑菌谱试验,探究菌株H19抑菌物的理化性质,并且抑菌物通过硫酸铵沉淀及不同孔径透析袋截留粗提,粗提物经蛋白酶处理及Tricine-SDS-PAGE蛋白质凝胶电泳可知,该抑菌物具有广谱抑菌活性,既可抑制革兰氏阳性菌又可抑制大部分革兰氏阴性菌,且具有较好的热、pH以及紫外线稳定性,该抑菌物可能为2种新型抗菌肽,分子量分别在6.5~9.5kDa以及27.0~35.0kDa。由此可见,枯草芽孢杆菌H19所产抗菌肽具有防治食源性疾病以及水产疾病的应用潜力。     

海洋真菌Fy-04生长特性及产抑菌物质

对从海泥中筛选到的1株海洋真菌Fy-04的生长特性及产抑菌物质的培养条件进行了初步研究.结果表明,海洋真菌Fy-04耐盐度2g/100mL,培养基初始pH值6.0～7.0,在基础发酵培养基中生长达到生长高峰时间72h～96h,产抑菌物质高峰时间72h.在优化条件下,菌株Fy-04产抑菌物质抑菌效果,对金黄色葡萄球菌抑菌圈直径34.1mm,对大肠埃希氏菌抑菌圈直径23.7mm.     

产抑菌活性物质菌株的筛选及其抑菌机理的研究

从内蒙古锡林郭勒盟地区酸马奶酒中分离出的9株乳酸菌和5株酵母菌中筛选抑菌效果较好的菌株,并对其发酵液的抑菌机理进行研究。以金黄色葡萄球菌、肠炎沙门氏菌肠亚种和荧光假单胞菌作为指示菌,通过牛津杯琼脂扩散法筛选出乳酸菌E13和D6与酵母菌J10A1的共生发酵液具有较强的抑菌能力,比乳酸菌单独发酵抑菌效果分别增加2.48 mm和1.45 mm。两株乳酸菌产生的抑菌活性物质使沙门氏菌生长曲线延滞期延长,对数期缩短,对数期峰值降低;电解质、可溶性总糖外渗,导致菌液电导率和可溶性总糖含量增加;糖吸收利用能力下降,磷代谢先变缓慢,随后趋于平稳。E13产生的抑菌活性物质的抑菌性更强。结果表明,乳酸菌产生的抑菌活性物质,不仅破坏细菌的细胞壁和细胞膜结构,还会影响菌体细胞代谢,导致细菌无法进行正常的生长和繁殖,从而发挥抑菌作用。     

荸荠皮抑菌物质稳定性及抑菌特性研究

目的研究荸荠皮提取物的稳定性及多菌种抑制作用。方法首先,采用热水浸提法得到荸荠皮提取物,将其在不同温度、pH值、不同紫外线照射时间、不同糖、盐溶液中放置,测定其抑菌效果。其次,用滤纸片法测定荸荠皮提取物对多种菌类的抑制作用。结果荸荠皮提取物在温度和紫外光的处理后稳定性保持不变;提取物在不同浓度的盐溶液、糖溶液和pH环境中其稳定性有一定的变化。提取物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和巨大芽孢杆菌的抑制作用较好。结论本文的研究结果符合荸荠皮提取物的特性,对今后深入研究荸荠皮提取物有重要的意义。     

乳杆菌ALAC-4产抑菌物质的分离纯化及特性研究

以内蒙古传统发酵食品中筛选出的具有抑制霉菌活性的乳杆菌ALAC-4为研究对象,对其代谢产生的抑菌物质进行分离纯化及特性研究。结果表明:ALAC-4的代谢产物经过饱和硫酸铵粗提、凝胶过滤层析中提、超滤离心管精提后可得到抑制霉菌的活性组分NS3,经SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳检测其相对分子质量为31.06 ku。对其进行特性研究后发现NS3在pH3.0~6.0的范围内有抑菌活性,有良好的热稳定性,121℃处理30 min后仍有抑菌活性,且其对黄曲霉的最低抑菌浓度为13.66μg/m L。     

西沙诺尼果汁抑菌特性与抑菌物质研究

以西沙诺尼果汁为研究对象,检测其对5种常见食源性致病菌和3种乳酸菌的抑制活性,研究温度、p H和蛋白酶K等因素对果汁抑菌活性的影响。考察了不同溶剂对抑菌成分的萃取活性,并对果汁中的有机酸组成和抑菌性能进行检测。结果表明,诺尼果汁对肠炎沙门氏菌、大肠埃希氏菌O157、福氏志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌5株常见食源性致病菌具有明显的抑制作用,而对动物双歧杆菌、植物乳杆菌和德氏乳杆菌3种常见肠道益生菌未表现出抑制活性。抑菌物质在酸性条件下作用较强,热稳定性良好,对蛋白酶K不敏感,经乙醇萃取后的果汁溶解及沉淀部分均具有抑菌活性。西沙诺尼果汁总酸含量为7.26 g/L,采用离子色谱法检测,其有机酸主要组成为苹果酸(7 114.5 mg/L)、3-甲基戊酸(6 113.30 mg/L)、乙酸(2 036.00 mg/L)和己酸(1 969.3mg/L)。抑菌试验表明有机酸是诺尼果汁的主要抑菌物质。     

唾液乳杆菌O2A及其所产抑菌物质应用于水产品防腐的研究

以鳙鱼为研究对象,将鱼肉浸泡于唾液乳杆菌O2A菌液或发酵上清液中,通过感官评定,测定菌落总数、pH值、挥发性盐基氮总量,探究唾液乳杆菌O2A保鲜液及其复合保鲜液对鱼肉的保鲜作用。结果表明:唾液乳杆菌O2A菌液浸泡处理后的鱼类保鲜效果显著,唾液乳杆菌O2A菌液处理鱼肉菌落总数最少,pH值上升最缓慢,产生挥发性盐基氮最少;唾液乳杆菌O2A菌液联合海氏肠球菌A菌液处理鱼肉保鲜效果要好于单用唾液乳杆菌O2A菌液。唾液乳杆菌O2A菌液具有良好的保鲜效果,具有应用在水产品保鲜的广阔前景。     

植物乳杆菌MXG-68所产细菌素的抑菌特性分析

研究乳酸菌细菌素的抑菌特性,为其作为生物防腐剂奠定基础。以酸马奶来源的植物乳杆菌MXG-6所产的细菌素为研究对象,对其抑菌谱、作用方式、相对分子质量及耐受性进行分析。该细菌素对革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌均具有抑菌活性,属于广谱细菌素,作用方式为杀菌,而不是抑菌和溶菌。变性聚丙烯酰胺凝胶电泳法(SDS-polyacrylamide gels electrophoresis,SDS-PAGE)确定植物乳杆菌MXG-6所产细菌素的分子质量约6 ku。60、80、100、121℃处理30 min及4、-20℃处理30 d对抑菌活性影响不显著(P 0. 05),在pH 1～10均表现出抑菌活性,表明细菌素具有较好的温度耐受性和酸碱耐受性。有机溶剂及表面活性剂对细菌素的抑菌活性基本无影响(P 0. 05),而EDTA有利于提高抑菌活性。细菌素的抑菌特性分析可为更好地实现细菌素的开发及应用提供一定的理论依据。     

凝结芽孢杆菌TQ33所产抗菌物质及特性

芽孢乳酸杆菌ＴＱ３３在乳酸发酵过程中能产生抑菌物质，这种抑菌物质的产生与培养基的组成有密切关系，同时通过对该抑菌的分离和提取，以及其理化性质和抑菌谱的测定，发现这种抑菌物质对酸，热和蛋白酶稳定，以碱敏感，能抑制常见的肠道病源菌。     

一株副溶血性弧菌拮抗菌的筛选、鉴定及其抑菌物质特性研究

副溶血性弧菌是一种常见的食源性病原菌和水产致病菌。该研究通过琼脂扩散法从芦潮港海泥中筛选对副溶血性弧菌具有较强抑制作用的菌株,对其进行形态观察和16S rDNA分子鉴定,并对其所产抑菌物质进行抑菌谱和理化特性研究。结果表明,筛选出的枯草芽胞杆菌H5对副溶血性弧菌ATCC 17802具有强烈的抑制作用,抑菌圈直径达（32.05±0.10）mm,其产生的抑菌物质具有广谱抑菌活性,对革兰氏阳性菌的抑制作用大于革兰氏阴性菌。通过理化性质研究发现,H5所产抑菌物质在121℃处理30 min和较宽的pH值范围内（2～12）可保持良好的稳定性,并具有良好的紫外线稳定性和有机溶剂稳定性,且Mn²⁺和Zn²⁺可提高其抑菌活性而Ca²⁺和Mg²⁺可抑制其活性。H5所产抑菌物质经过蛋白酶处理后活性下降,证明其是一种抗菌肽。综上所述,枯草芽胞杆菌H5所产抗菌肽不仅具有良好的稳定性,而且抑菌谱广、抑菌活性强,在食品工业和医药行业具有广阔的开发和应用前景。     

乳杆菌代谢产生抑菌物质的特性研究

从内蒙古传统发酵食品中筛选出具有抑酵母作用的乳杆菌,对其特性进行研究。结果表明,ALAC-3和ALAC-4菌株经排酸后,对酵母仍有抑菌效果。活性物质对热有很好的稳定性,并且对紫外线辐射不敏感。Ca2+、Mn2+对ALAC-3代谢产物的抑菌作用起促进作用,而K+、Na+、Mg2+对其代谢产物的抑菌作用起抑制作用。K+,Ca2+,Na+,Mg2+,Mn2+对ALAC-4代谢产物的抑菌作用均起抑制作用。经过氧化氢酶处理后,仍有抑菌效果。经木瓜蛋白酶、蛋白酶K、胰蛋白酶、胃蛋白酶处理后,抑菌活性均有不同程度降低,说明抑菌物质对蛋白酶敏感,故判定抑菌物质中有蛋白类物质。     

凝结芽孢杆菌抑菌物质的理化特性研究

以益生菌凝结芽孢杆菌Bacillus coagulans LL1103为对象,研究了其生长情况与p H值和抑菌活性的关系,发现其最佳抑菌发酵时间为18 h。制备了其抑菌产物粗品并测定其抑菌谱,结果表明,抑菌产物对革兰氏阴性菌和革兰氏阳性菌均有明显的抑菌效果,具有广谱抗菌性。随后对抑菌产物粗品的理化性质进行了研究,发现它在MRS培养基中培养后,最适温度37℃,最适p H=6.0下具有最强的抑菌活性。此外,进行了抑菌物质的初步鉴定,在排除酸性末端产物和菌体的干扰后,用蛋白酶K等多种蛋白酶和过氧化氢酶去处理抑菌产物粗品,发现其对蛋白酶K、胰蛋白酶、胃蛋白酶较敏感,对氧化氢酶不敏感,初步推断抑菌物质的主要成分是对蛋白酶敏感的细菌素类物质。     

一株产抑菌物质的蜡样芽胞杆菌的鉴定及其抑菌物质性质

从酱渣中分离到一株产抑菌物质的新菌株,暂命名为菌株B。研究表明,该菌株经碱中和后的无细胞发酵液对革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和真菌均有抑制作用;其发酵上清液经硫酸铵盐析和透析后,仍然有抑菌活性;双缩脲和茚三酮实验表明,抗菌活性物质为肽类物质。生理生化实验、16S rDNA序列比对及系统发育分析表明,菌株B为蜡样芽胞杆菌,其生长和抑菌最适培养基为NB培养基,在pH 7.0的NB培养液中培养40h其抑菌活性达到最大。     

副干酪乳杆菌Q-1-4的筛选鉴定及抗菌物质特性分析

为获得应用潜力较高的抗菌菌株,对内蒙古地区传统乳制品中分离的8株乳酸杆菌进行抗菌菌株筛选,获得了一株具有广谱抗菌活性的菌株(编号为Q-1-4)。经常规生理生化及分子生物学实验,鉴定该菌为副干酪乳杆菌(Lactobacillus paracasei)。通过实验排除有机酸和过氧化氢干扰后,L.paracasei Q-1-4发酵离心后的无细胞发酵上清液(cell-free fermentation supernatant,CFS)对鼠伤寒沙门氏菌Salmonella typhimurium CMCC50115仍具有抑制作用,且经蛋白酶处理后抗菌活性下降,说明L.paracasei Q-1-4所产抗菌物质中含有蛋白类物质。其在pH 2.0~5.5范围内对鼠伤寒沙门氏菌有抑制作用,且在此pH值范围内该抗菌物质对热稳定,对紫外线不敏感;与十二烷基硫酸钠、乙二胺四乙酸共同作用效果好于单一作用,而其他的表面活性剂、有机溶剂、金属离子对其无明显影响;该抗菌物质具有一定的贮藏稳定性且抑菌谱较广。     

1株产广谱细菌素乳酸菌的筛选及其抑菌物质的特性

从植物性材料中筛选到1株对大肠杆菌有明显抑制作用的乳酸菌,在排除有机酸和过氧化氢的干扰后,该菌株的发酵上清液仍有较强的抑菌性;胃蛋白酶处理后,抑菌活性明显降低,说明其抑菌物质为蛋白质类物质,是一种细菌素。通过形态学和生理生化分析,初步鉴定该菌株为植物乳杆菌。生物学特性研究表明,该菌株发酵上清液经高温、吐温-80、SDS、EDTA处理后,仍保持较好的抑菌活性;在酸性条件下稳定;对蛋白酶K和胰蛋白酶较胃蛋白酶敏感。抑菌谱显示,该菌株的发酵上清液具有广谱抑菌性。     

副干酪乳杆菌PC-01益生特性和安全性研究

目的：副干酪乳杆菌是一种具有益生作用和广泛应用前景的乳酸菌,其健康作用得到研究者的关注。本研究以分离自西藏拉萨地区当雄县龙仁乡酸牦牛奶的一株副干酪乳杆菌PC-01为研究对象,评估其益生特性和安全性。方法：通过人工胃肠液耐受能力和胆盐耐受能力评价其益生潜力,同时评估其安全性。结果：副干酪乳杆菌PC-01在模拟人工胃肠液中培养11 h的存活率为88.60%;胆盐耐受结果表明其延迟时间为0.34 h,具有在肠道内存活继而发挥抗氧化应激作用的潜力;安全性评价显示该菌株对6种抗生素敏感,对万古霉素、克林霉素耐药;溶血试验阴性;动物实验证实副干酪乳杆菌PC-01无毒副作用。结论：副干酪乳杆菌PC-01具有益生特性及安全性,为其广泛应用提供参考依据。