荧光光密度薄层扫描法测定玉米中黄曲霉毒素B_1的方法

目前粮食分析中测定黄曲霉毒素B_1常用的方法有薄层色谱法,微柱筛选法,薄层及高效液相色谱法等,这些方法对测定样品的处理过程主要是把样品经提取、浓缩、薄层分离后,在365nm紫外灯照射下,观察薄层板上的荧光斑点的荧光强度,或把斑点刮下来,溶解,用高压液相色谱仪测定黄曲霉毒素B_1的荧光强度.虽然高压液相色谱仪法测黄曲霉毒素B_1的方法灵敏度高,但由于受仪器昂贵限制,不易推广.而用365nm紫外光灯照射薄层板上的黄曲霉毒素B_1斑点的目视测定黄曲霉毒素B_1斑点 所发生的荧光强     

花生中黄曲霉毒素B_1提取方法的优化

主要研究了酶联免疫法检测花生中黄曲霉毒素B_1的提取条件,通过单因素试验分别研究料液比、甲醇体积分数、提取时间和超声波功率对黄曲霉毒素B_1提取效果的影响,通过正交试验法确定花生中黄曲霉毒素B_1的最佳提取条件。结果表明,各因素影响花生中提取黄曲霉毒素B_1含量的大小为:超声波功率甲醇体积分数提取的时间物料比。最佳提取条件为:料液比为1︰5 g/m L,甲醇体积分数60%,提取时间为11 min,超声波功率70 W。试验以为花生中黄曲霉毒素B1的检测提供简便、可靠、准确的分析方法。     

酶联免疫法检测混合植物油中黄曲霉毒素B1的含量

目的建立酶联免疫法测定混合植物油中黄曲霉毒素B_1含量的分析方法。方法采用直接竞争酶联免疫吸附法对样品进行测定。样品经甲醇溶液提取,提取的抗原及黄曲霉毒素B_1标记物与微孔板上的黄曲霉毒素B_1特异性单克隆抗体竞争结合,洗涤除去未结合杂质。将底物加入孵育,产生蓝色产物,加入终止液终止反应蓝色产物变成黄色产物,450nm处测量吸光度。结果本方法在2h内完成混合植物油中黄曲霉毒素B_1含量的测定。黄曲霉毒素B_1的加标浓度在1.0～20.0μg/kg之间时的回收率为76.5%～120.2%,方法定量限为1.00μg/kg。结论该方法快速、准确、灵敏,适合测定混合植物油中黄曲霉毒素B_1。     

酶联免疫法检测混合植物油中黄曲霉毒素B_1含量

目的建立酶联免疫法测定混合植物油中黄曲霉毒素B_1含量的分析方法。方法采用直接竞争酶联免疫吸附法对样品进行测定。样品经甲醇溶液提取,提取的抗原及黄曲霉毒素B_1标记物与微孔板上的黄曲霉毒素B_1特异性单克隆抗体竞争结合,洗涤除去未结合杂质。将底物加入孵育,产生蓝色产物,加入终止液终止反应蓝色产物变成黄色产物,450nm处测量吸光度。结果本方法在2h内完成混合植物油中黄曲霉毒素B_1含量的测定。黄曲霉毒素B_1的加标浓度在1.0～20.0μg/kg之间时的回收率为76.5%～120.2%,方法定量限为1.00μg/kg。结论该方法快速、准确、灵敏,适合测定混合植物油中黄曲霉毒素B_1。     

生物传感器法检测奶粉中黄曲霉毒素B_1含量

建立了一种基于酶电极技术快速检测奶粉中黄曲霉毒素B_1含量的方法。将样品用75%甲醇溶液溶解,60Hz超声提取15min,在以黄曲霉毒素酶电极为核心元件,在pH7.2、0.2mol/L的磷酸盐缓冲液和300ug/kg的黄曲霉毒素B_1标准溶液反应体系中直接进行检测。结果表明:生物传感器法在黄曲霉毒素B_1浓度为1～300ug/kg的范围内检测线性良好,线性方程为y=1.0042x-3.4714,R~2=0.9999;稳定性好,连续测定十次,标准偏差为1.63%;加标回收率为99.1%～101.8%之间;只对黄曲霉毒素B_1进行测定,专一性强。将结果与酶联免疫法、高效液相色谱法测定结果进行比较,该方法测定奶粉中黄曲霉毒素B_1含量具有专一性好、准确度高、分析速度快、样品处理简单等特点,可用于奶粉中黄曲霉毒素B_1含量的检测。     

乳与乳制品中黄曲霉毒素M_1的测定及卫生评价

黄曲霉毒素是黄曲霉及寄生曲霉中能产毒的菌株在繁殖过程中所产生的一类毒素,在粮食中以黄曲霉毒素B_1、B_8、G_1、G_2为主。本文对乳与乳制品中黄曲霉毒素M_1的测定方法进行了专题研究。样品经提取、净化制备成样液、通过硅胶G薄层板点样、经乙醚预展、展开剂展开,最后经乙醚上下反展,在紫外光365nm下观察其结果。本法不同于GB5009.24-85所规定的横展法,可一板点多个样液,提高了工作效率;同时,经反展后杂质上下移位,AFM_1出现背景无其它杂质干扰的蓝紫色萤光,避免了使用横展时由样液杂质与AFM_1斑点重叠而影响结果的观察。本法简便、快速、斑点清晰、灵敏度高,作者认为此法是目前工矿企业测定乳及乳制品中AFM_1含量较为理想的方法。     

高效液相色谱-柱后光化学衍生法测定油茶中黄曲霉毒素B1的方法研究

目的建立高效液相色谱-柱后光化学衍生法测定油茶中黄曲霉毒素B_1含量的方法。方法市售油茶样品粉碎,经80%甲醇-水溶液涡旋提取、离心,吸取上清液稀释,专用免疫亲和柱净化后,采用高效液相色谱荧光检测器串联光化学衍生器测定黄曲霉毒素B_1。同时,对样品提取条件的选择、样品净化过程、流动性比例选择等进行优化实验研究。结果黄曲霉毒素B_1在0.5～20 ng/mL范围内线性关系良好,相关系数r=0.9996,在5、10、20μg/kg添加水平下的回收率为84.0%～91.6%,相对标准偏差0.1%～1.7%。结论该方法简单、快速、准确、重现性好,适用于油茶中黄曲霉毒素B_1的定量分析。     

免疫亲和柱净化-UPLC-MS/MS测定花生中黄曲霉毒素B_1

为提高花生中黄曲霉毒素B_1的检测效率和准确性,试验通过对提取溶剂、色谱条件和质谱条件的优化,建立了免疫亲和柱-超高效液相色谱串联质谱(UPLC-MS/MS)快速测定花生中黄曲霉毒素B_1的方法,并对方法进行了评估。结果表明,用甲醇-水(60∶40,V/V)对样品进行提取,采用黄曲霉毒素免疫亲和柱萃取、净化,以0.1%甲酸水溶液、0.1%甲酸乙腈溶液作为超高效液相色谱的流动相,在电喷雾离子源(ESI)正离子模式下采用多反应监测(MRM)对花生中黄曲霉毒素B_1进行定性、定量检测,在5.5 min内完成一个样品的分析。结果表明,黄曲霉毒素B_1在0.1~56.0 ng/m L的线性定量范围,相关系数高达0.999 42,检出限低至0.02μg/kg,定量限精确至0.1μg/kg,低、中、高浓度回收率为82%~92%,相对标准偏差5%。该方法具有前处理简单、净化效果好和准确度高的优点,适用于花生等复杂基质样品的黄曲霉毒素B_1定性和定量检测。     

免疫亲和净化-液相色谱-串联质谱法测定广式莲蓉月饼中黄曲霉毒素

目的建立广式莲蓉月饼中的4种黄曲霉毒素(黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2)定性和定量的液相色谱-串联质谱检测方法。方法样品经甲醇-水(7:3,v:v)提取后,用免疫亲和柱净化,经甲醇洗脱,在C_(18)色谱柱上梯度洗脱分离,采用电喷雾正离子多反应监测(MRM)模式测定。结果标准曲线在0.1~20.0 ng/mL范围内线性良好;用本法测定4种黄曲霉毒素的回收率在78.4%~107.8%之间,相对标准偏差在2.5%~9.8%之间。采用该方法对市售5种广式莲蓉月饼中黄曲霉毒素进行分析,其中1份月饼样品能够检测到含有少量的黄曲霉毒素B_1(1.2μg/kg)和B_2(0.21μg/kg)。结论该方法具有简单快速,准确可靠等特点,适用于广式莲蓉月饼中4种黄曲霉毒素的同时测定。     

黄曲霉毒素B_1和G_1的快速确证法

这里介绍一种在薄层层析前鉴定黄曲霉毒素B_1和G_1的简易乙酰化方法.将含有黄曲毒素B_1与G_1的提取液点于硅胶板上,用醋酸酐和盐酸覆盖该点.反应后,展开薄层板,将反应过的黄曲霉毒素B_1与G_1的R_1值与同样处理过的标     

酶联免疫吸附法测定植物油中黄曲霉毒素B1

目的对酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)快速检测植物油中黄曲霉毒素B_1进行方法验证,考查植物油中黄曲霉毒素B_1污染情况。方法对酶联免疫吸附法检测植物油中黄曲霉毒素B_1进行了准确性与回收率、重复性、复现性等方法学实验。用验证后的试剂盒检测156份植物油中黄曲霉毒素B_1含量。结果酶联免疫吸附法的回收率在102.8%~113.8%,相对标准偏差为2.0%~6.1%,重复性相对标准偏差为4.3%,复现性相对标准偏差为7.1%和7.6%。156份植物油中黄曲霉毒素B_1检出率为60.90%,其中山茶油的检出率为78.38%,高于平均水平。结论试剂盒检测植物油稳定性较好,定量准确。156份植物油中黄曲霉毒素B_1含量均符合国家标准,花生油中黄曲霉毒素B_1检出浓度最高,其次是玉米油。茶油的加工生产过程可能存在污染黄曲霉毒素B_1的情况,应注意加工过程中黄曲霉毒素B_1的污染。     

棉籽及棉籽相关产品中黄曲霉毒素B1含量的测定及迁移规律分析

建立了棉籽及棉籽相关产品中黄曲霉毒素B_1含量的测定方法。将样品混合均匀粉碎,称样量5 g,提取溶剂为86%乙腈溶液,固液比1∶10,超声提取10 min,提取液经免疫亲和柱层析净化后,利用高效液相色谱法检测其中的黄曲霉毒素B_1,并对黄曲霉毒素B_1的迁移规律进行分析。结果表明,该方法的日内精密度为1. 82%～4. 41%,日间精密度为6. 00%,样品加标回收率为97%～108%,可满足日常实际检测及质量控制要求。在棉籽加工过程中,黄曲霉毒素B_1绝大部分迁移到棉籽蛋白中,棉籽油中几乎没有。这一结果说明生产过程中黄曲霉毒素B_1污染主要来源于棉籽原料且易迁移到棉籽蛋白中。     

食品中黄曲霉毒素B_1的测定方法

黄曲霉毒素是部分黄曲霉菌所产生的代谢产物,具有较强毒性的物质。在天然被污染的食品中一般以黄曲霉毒素B_1最多,而其他如黄曲霉毒素B_2、G_1、G_2小部分。食品中以花生,玉米等最只占很易污染黄曲霉毒素。在本方法中用双向展开法可进一步除去样液中的杂质,提高了方法的灵敏度,因而改进省略了国外需用层析柱净化的操作步骤。若同时测定食品中黄曲霉毒素B_1、B_2、G_1、G_2、时,方法见附录二。     

花生油、花生中黄曲霉毒素的微柱层析测定法

花生油、花生中黄曲霉毒素的微柱层析测定法是参考资料1、2中介绍的薄层法,将花生油、花生,用石油醚、甲醇、水脱油提取,再用一定量氯仿提取甲醇水中的黄曲霉毒素,氯仿经水洗,脱水后,直接上氧化铝——硅镁型吸附剂为主的微柱进行层析.样液中的杂质被氧化铝吸附或被展开剂洗脱,而黄曲霉毒素则被硅镁型吸附剂吸附,后者可在紫外光灯(365毫微米)下显兰     

光化学衍生-高效液相色谱法测定大米中黄曲霉毒素B_1含量

建立了一种测定大米中黄曲霉毒素B_1含量的光化学衍生-高效液相色谱方法:试样经乙腈与水的混合液(体积比84:16)提取,多功能净化柱净化、浓缩、高效液相色谱分离,在线光化学柱后衍生,荧光检测器检测,外标法定量,在优化的条件下,黄曲霉毒素B_1的浓度分别为1.0~40.0μg/L时,浓度与峰面积线性关系良好,相关系数0.9996;加标浓度为5~10μg/kg,样品回收率为80.9%~98.7%,平行相对偏差为3.87%,该方法简单快速、灵敏度高、重现性好,用于大米中黄曲霉毒素B_1的测定,效果更好。     

免疫亲和柱-液相色谱法快速测定面粉中黄曲霉毒素B_1的条件优化

建立了免疫亲和柱-液相色谱法快速测定面粉中黄曲霉毒素B_1的方法。样品经甲醇-水(80:20,v/v)提取,经过滤、沉淀(乙酸锌和亚铁氰化钾),通过免疫亲和柱净化,三氟乙酸和正己烷为衍生剂进行衍生,采用C_(18)柱为分离柱,乙腈:水(50:50,v/v)为流动相进行高效液相色谱分离分析。实验结果表明,黄曲霉毒素B_1线性范围(1~10)ng/m L,R2=0.9991,RSD=3.4%,检出限为0.1μg/kg,实际样品的黄曲霉毒素B_1回收率为81%~95%。该方法具有灵敏度高、回收率高、重现性好等优点,可用于面粉中黄曲霉毒素B_1的快速测定。     

高效液相色谱-串联质谱法测定花生中的黄曲霉毒素B1

目的建立高效液相色谱-串联质谱法测定花生中黄曲霉毒素B_1含量的分析方法。方法样品经乙腈水溶液提取,三氯甲烷反提取后,正己烷净化,以水(D)和乙腈(A)作为流动相进行梯度洗脱,质谱采用多离子检测模式对黄曲霉毒素B_1的定量离子和定性离子进行检测。结果在0.5～10 ng/mL范围内线性良好(线性方程:Y=8.57×10~3X+312, r0.999),黄曲霉毒素B_1在1、5、10μg/kg 3个水平上进行加标回收试验,平均回收率为93.2%～100.2%,相对标准偏差为2.8%～6.9%,方法检出限为0.1μg/kg。结论该方法经济、快速、准确,适合测定花生中黄曲霉毒素B_1的含量。     

液相串联质谱法测定核桃中5种黄曲霉毒素

建立核桃中黄曲霉毒素G_1、G_2、B_1、B_2、M_1的测定方法。核桃经70%甲醇溶液提取、免疫亲和柱净化后,用高效液相色谱-串联三重四极杆质谱分析法测定。黄曲霉毒素G_1、G_2、B_1、B_2、M_1在0.5μg/L~50μg/L范围内与峰面积呈良好的线性关系,r0.999。回收率在86.5%~98.0%之间。此方法定量准确、专属性比较强,假阳性率低,有较普遍的实用性,适合核桃中黄曲霉毒素的测定。     

酶联免疫法检测复合调味料中黄曲霉毒素B1含量

目的酶联免疫法(enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA)快速检测复合调味料中黄曲霉毒素B_1的含量。方法用70%甲醇水溶液提取非含油型复合调味料中的黄曲霉毒素B_1待测液,含油型复合调味料则首先加入石油醚将油萃取出来,后加入70%甲醇水溶液抽提。使用酶联免疫法进行定量限、回收率与重复性等实验。结果使用不同前处理的检测结果的定量限为3μg/kg,相对标准偏差分别为2.06%和2.73%;回收率范围在90%～110%之间;重复性平均值分别为10.77μg/kg和10.84μg/kg,相对标准偏差分别为3.89%和2.44%。结论复合调味料通过不同的前处理方法,后使用酶联免疫法检测复合调味料中黄曲霉毒素B_1结果准确,重复性较好。     

超高效液相色谱-串联质谱测定鸡饲料中黄曲霉毒素B_1

建立一种用超高效液相色谱-串联质谱法测定鸡饲料中黄曲霉毒素B_1的检测方法,并对广州市售11种鸡饲料进行了分析。试样经70%甲醇-水溶液超声提取,黄曲霉毒素B_1免疫亲和柱净化;以乙腈-0.1%甲酸水溶液为流动相梯度洗脱,采用Waters Acquity UPLC–BEH C_(18)柱(2.1 mm×50 mm×1.7μm)色谱柱分离,电喷雾正离子模式进行质谱测定。结果表明:该方法的黄曲霉毒素B_1检出限为0.5 ng/m L,线性范围为0.5000~50.00 ng/m L,相关系数为0.993 7,以空白样品为基质3个加标水平下黄曲霉毒素B_1的平均回收率为88.8%~93.5%,RSD5.0%。该方法准确高效,重现性好,可实现鸡饲料中黄曲霉毒素B_1的测定。