果糖月桂酸单酯的分离纯化及鉴定

采用硅胶柱层析色谱对叔戊醇中固定化磷脂酶Lecitase Ultra催化合成的果糖月桂酸单酯进行分离纯化。确定了薄层层析(TLC)条件,并通过反相-高效液相色谱-蒸发光散射检测(RP-HPLC-ELSD)测定柱层析纯化产物的纯度。利用液质联用(HPLC-ESI-MS)、红外光谱(FT-IR)和13C核磁共振(13CNMR)对目标产物进行确认,鉴定目标产物为酯化位点在1位和6位的果糖月桂酸单酯,四种异构体如下:1-月桂酸-β-D-吡喃果糖单酯、1-月桂酸-α-D-吡喃果糖单酯、1-月桂酸-β-D-呋喃果糖单酯和6-月桂酸-β-D-呋喃果糖单酯,且1-月桂酸-β-D-吡喃果糖单酯的比例最高。     

超声条件下蔗糖-6-月桂酸单酯及蔗糖-6'-月桂酸单酯的合成、纯化与结构鉴定

采用薄层层析(TLC)和硅胶柱层析分离纯化了超声处理条件下合成的蔗糖月桂酸单酯,并对纯化后的组分采用高效液相色谱(HPLC)、红外光谱(IR)、质谱(MS)、核磁共振(1H-NMR、13C-NMR)进行了结构鉴定和表征TLC分离蔗糖月桂酸酯的理想条件:点样量4μL,以氯仿/甲醇/冰乙酸/水(V/V/V/V,75∶15∶7∶3)展开25min,然后用10％磷钼酸乙醇溶液喷雾,105℃显色10min 硅胶柱层析分离蔗糖月桂酸酯的较佳条件为:3g样品溶于10mL洗脱剂上,35mm×700mm硅胶(200～300目)层析柱,流动相为TLC展开剂配比,流速为40～50mL/h,每30min收集一份洗脱液 两种单酯组分分别为蔗糖-6-月桂酸酯和蔗糖-6’-月桂酸酯.     

超声条件下蔗糖-6-月桂酸单酯及蔗糖-6’-月桂酸单酯的合成、纯化与结构鉴定

采用薄层层析（TLC）和硅胶柱层析分离纯化了超声处理条件下合成的蔗糖月桂酸单酯,并对纯化后的组分采用高效液相色谱（HPLC）、红外光谱（IR）、质谱（MS）、核磁共振（1H-NMR、13C-NMR）进行了结构鉴定和表征。TLC分离蔗糖月桂酸酯的理想条件:点样量4μL,以氯仿/甲醇/冰乙酸/水（V/V/V/V,75:15:7:3）展开25min,然后用10%磷钼酸乙醇溶液喷雾,105℃显色10min。硅胶柱层析分离蔗糖月桂酸酯的较佳条件为:3g样品溶于10mL洗脱剂上,35mm×700mm硅胶（200～300目）层析柱,流动相为TLC展开剂配比,流速为40～50mL/h,每30min收集一份洗脱液。两种单酯组分分别为蔗糖-6-月桂酸酯和蔗糖-6’-月桂酸酯。      

甘露糖酯的分离纯化及分析方法研究

本文对脂肪酶酶催化合成月桂酸甘露糖酯的分离纯化作了研究。确定了甘露糖酯的薄层层析(TLC)条件:反应液3μl点样,在正己烷/乙酸乙酯(1:1,V/V)中展开,用5%硫酸乙醇溶液喷雾,在120℃烘箱显色20min。将TLC条件应用到硅胶柱层析分离甘露糖酯,条件为:反应液5ml上硅胶层析柱(硅胶60～100目,柱12×600mm),流动相为正己烷/乙酸乙酯(1:1,V/V),流速为18ml/h,按1管/10min收集洗出液,并用TLC检测、收集产物。采用质谱(MS)方法鉴定了分离纯化的甘露糖酯产物,发现丙酮溶剂中脂肪酶催化合成产物为月桂酸甘露糖的单酯和两种二酯异构体。而用HPLC-MS分析方法证实乙腈溶剂中合成产物为月桂酸甘露糖的单酯、二酯和三酯。     

竹叶黄酮的酶促酰化、分离与结构鉴定

研究了固定化脂肪酶B（Novozmy 435）在低水分含量的叔戊醇溶剂中催化竹叶黄酮与硬脂酸的酰化反应。反应条件:竹叶黄酮与硬脂酸酸摩尔比1∶5,脂肪酶用量50g/L,机械搅拌转速200r/min,反应温度50℃,反应时间72h。后经液液萃取,薄层层析（TLC,UV 254nm）,硅胶柱层析分离纯化,薄层层析展开剂配比为氯仿/甲醇/冰乙酸（7∶1∶0.05,v/v/v）,柱层析洗脱剂配比为氯仿/甲醇/冰乙酸（10∶1∶0.05,v/v/v）;洗脱液合并相同组分,得到两种黄酮苷酰化物单体。对纯化后的组分采用红外光谱（IR）、质谱（ESI-MS）、核磁共振（1H-NMR、13C-NMR）进行结构鉴定和表征,确定产物分别为异牡荆苷-6″-硬脂酸酯和异荭草苷-6″-硬脂酸酯,说明反应表现出高度选择性。      

棉籽糖月桂酸单酯的分离及性质分析

研究了超声波处理条件下二甲基亚砜中无水碳酸钾催化棉籽糖和月桂酸甲酯的酯交换反应,得到了酯化位置不同的两种棉籽糖月桂酸单酯。薄层层析（TLC）分离棉籽糖月桂酸酯的理想条件为：点样量4 μL,以氯仿/甲醇/冰乙酸(V/V/V, 75:25:4)展开10 min,用10%磷钼酸乙醇溶液均匀喷雾后在105 ℃显色10 min。硅胶柱层析分离棉籽糖酯的理想条件为：1 g样品溶于3 mL的洗脱剂,过15 mm×700 mm硅胶（200~300目）,流动相为TLC展开剂配比,流速为1 mL/min,10 min收集一份洗脱液。对纯化后的组分采用高效液相（HPLC）,红外光谱（IR）,质谱（MS）,及核磁共振（1H-NMR、13C-NMR）进行了结构鉴定和表征,确定两单酯组分分别为1’’-棉籽糖月桂酸酯和6’’-棉籽糖月桂酸酯。同时测定并比较了两种单酯的溶解性和热稳定性,结果表明两种单酯具有相似的溶解性和热稳定性。     

连续式酶反应器中脂肪酶催化合成麦芽糖月桂酸酯的研究

利用连续式酶反应器(CSTR)、固定化脂肪酶催化合成麦芽糖月桂酸酯。确定了连续生产工艺的最佳条件:在丙酮介质中,起始反应器中麦芽糖的浓度为50 mmol/L,月桂酸浓度为200mmol/L,加酶量为10 g,每天添加4 g麦芽糖,200 mmol/L的月桂酸丙酮溶液以0.15 mL/min进入反应器。本反应器的麦芽糖酯产量可以达到12.32 g/(L.d),麦芽糖的转化率为58%,高于间歇式生产,而且在生产中不需要添加分子筛。研究了产物的分离纯化方法,利用正己烷对产物进行3次洗涤、离心处理,得到的产物麦芽糖月桂酸酯纯度达到94.16%。     

柱层析分离提纯麝香草酚的研究

采用薄层层析和硅胶柱层析分离纯化了麝香草酚,并用气相色谱法测定纯化后的样品中麝香草酚的含量。薄层层析分离麝香草酚的适宜条件:点样量约2μL,在环己烷/无水乙醚(4/1,v/v)中展开,然后碘缸中显色15min,得到清晰的黄色斑点。硅胶柱层析分离烷基化产物中的麝香草酚的适宜条件:0·3mL的麝香草酚粗成品上10mm×400mm硅胶(60~100目)层析柱,流动相为环己烷/无水乙醚(4/1,v/v),流速为0·4mL/min,分离出的麝香草酚纯度为99%。      

柱层析分离提纯麝香草酚的研究

采用薄层层析和硅胶柱层析分离纯化了麝香草酚,并用气相色谱法测定纯化后的样品中麝香草酚的含量.薄层层析分离麝香草酚的适宜条件:点样量约2μL,在环己烷/无水乙醚(4/1,v/v)中展开,然后碘缸中显色15min,得到清晰的黄色斑点.硅胶柱层析分离烷基化产物中的麝香草酚的适宜条件:0.3mL的麝香草酚粗成品上10mm×400mm硅胶(60～100目)层析柱,流动相为环己烷/无水乙醚(4/1,v/v),流速为0.4mL/min,分离出的麝香草酚纯度为99%.     

葡萄糖月桂酸脂的酶法合成与分离测定

研究了葡萄糖月桂酸酯的酶法合成与分离测定。以丙酮为溶剂,用Novozym435脂肪酶催化合成了葡萄糖月桂酸酯,经液质联用（LC-MS）分析,反应产物为葡萄糖单酯和二酯,没有三酯或其它多酯生成。实验并优化了薄层色谱（TLC）法分析葡萄糖月桂酸酯的展开剂条件,得到展开剂∶甲苯∶乙酸乙酯∶甲醇∶水=10∶40∶4.5∶1.0（V/V/V/V）,在此展开条件下,葡萄糖、葡萄糖单酯、二酯1和二酯2的Rf值相差均较大,分别为:0.098、0.51、0.85和0.97。用此展开剂作为流动相,采用硅胶柱层析分离葡萄糖月桂酸单酯,经高效液相色谱（HPLC）蒸发光散射检测（ELSD）和液质联用（LC-MS）鉴定,证实分离得到高纯度的葡萄糖月桂酸单酯。      

叶黄素的生物转化及纯化

本实验对叶黄素衍生物的微生物转化进行了研究,主要考察了培养基种类、菌种、震荡培养与静置培养、pH值、菌种接种量等因素对叶黄素转化效果的影响,以双波长薄层色谱法进行定性、定量检测,优化出最佳转化条件:用pH值为3的诱导产酶培养基接种C菌(青霉属)6环,震荡培养15d,使得游离叶黄素的含量由0.25%提高到56.70%。采用硅胶柱层析对微生物转化产品进行分离纯化,得到最佳柱层析分离条件:上样量为0.5g;洗脱剂为石油醚:乙酸乙酯=3:2;流速为3ml/min,所得产品游离叶黄素纯度可达90.20%。     

大豆卵磷脂中脑苷脂类物质的分离纯化研究

脑苷脂(Cerebroside,Cer)是动植物组织内主要的鞘脂类(Sphingolipids,SL)物质,具有一定的生理活性。以大豆卵磷脂(Lecithin)为主要原料,用石油醚萃取大豆卵磷脂中的中性脂质,获得粗脑苷脂类物质。通过单因素试验和正交试验,确定了石油醚萃取分离粗脑苷脂类物质的最佳条件为料液比1∶1、提取温度50℃,提取时间30 min,在此条件下得到6.58%的粗脑苷脂。粗脑苷脂用硅胶柱层析分离纯化,采用氯仿/甲醇溶剂体系梯度洗脱。通过二次柱层析,分离得到了高纯度的脑苷脂类物质。     

二醇基键合硅胶制备色谱分离纯化茶黄素类及其稳定性

以茶黄素混合物为原料,通过二醇基键合硅胶制备色谱分离纯化获得高纯度(纯度＞95%)的茶黄素(95.6%)、茶黄素-3-没食子酸酯(95.2%)、茶黄素-3’-没食子酸酯(99.8%)和茶黄素双没食子酸酯(96.3%)4种单体。通过改变溶液体系条件,考察温度、pH值和溶液组成对茶黄素单体稳定性的影响。结果表明：维持较低pH值(2.5～4.5)、控制低温贮存和增大茶黄素添加量,即可将茶黄素维持在一定的稳定性质量浓度范围内,有利于保证产品质量和延长货架期。     

硅胶和硝酸银硅胶柱层析分离生育酚与生育三烯酚

本文以乙醚正己烷混合溶液为淋洗液，探讨了硅胶柱层析和硝酸银硅胶柱层析分离生育三烯酚和生育酚的效果。结果表明：通过改变淋洗液中乙醚含量可以将生育酚和生育三烯酚大部分分离；硝酸银硅胶柱层析分离生育三烯酚和生育酚的效果明显高于硅胶柱层析，其洗脱液中生育三烯酚可占VE总量的90％以上，最高达98．47％。     

麦麸低聚木糖产品的分离纯化及定性分析

对麦麸低聚木糖粗提液进行了活性炭柱层析,采用脱气去离子水及30%乙醇溶液洗脱,洗脱速度0.5mL/min,洗脱曲线峰形较窄而且很对称,可以得到以木二糖~木六糖为主的低聚木糖产品,分离效果较好,因此,活性炭柱层析可以有效地分离纯化麦麸低聚木糖糖液。并且以聚丙烯酰胺凝胶(Bio-Gel P-2)为介质,选用26 mm×800 mm的层析柱,分离活性炭柱层析洗脱浓缩液,对影响分离效果的进样量进行分析后表明,在采用进样量5 mL,洗脱速度0.4 mL/min,脱气去离子水洗脱时,可以分离得到6个明显的单峰曲线,分离效果较好,通过薄层层析图谱可以看出该法能较好的分离纯化出低聚木糖液的各个单一组分。为麦麸低聚木糖产品的分离纯化提供了参考方法,同时也为利用麦麸低聚木糖中各单一组分标样的制备提供了理论依据。     

利用硅胶柱层析分离纯化平贝总碱的研究

目的：对东北特产平贝母的生物碱进行分离纯化研究。方法：用硅胶柱层析法对平贝总碱进行分离纯化,固定相为薄层层析硅胶G,流动相为乙酸乙酯- 甲醇- 氨水(17:2:1)。用HPLC-ELSD 法对分离出的贝母素甲和贝母素乙的纯度进行测定。结果：分离出贝母素甲和贝母素乙,贝母素甲纯度为93.19%、贝母素乙纯度为92.09%。结论：采用的硅胶柱层析分离纯化可得到纯度较高的分离组分。     

燕麦ACE 抑制肽的分离纯化及其活性研究

通过对3 种大孔吸附树脂的比较,选择DA201-C 树脂对燕麦ACE 抑制肽进行纯化。纯化后的燕麦肽产物的ACE 抑制率达到92.86%,利用HPLC 测得纯化后燕麦ACE 抑制肽的分子质量分布在240.10～1292.11D 之间,这部分物质在整个纯化产物中占99.82%。采用SephadexG-15 凝胶分离燕麦ACE 抑制肽得到D峰,其IC50 为0.103mg/mL,分子质量545D。采用大孔吸附树脂及凝胶层析法能够较好地分离纯化燕麦ACE 抑制肽。