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中国花生致敏蛋白的识别 总被引:2,自引:0,他引:2
我国对花生过敏方面的研究很少。本实验利用中国常用花生品种识别鉴定了中国主要的致敏蛋白,比较了国内外花生品种致敏蛋白相对含量的差异,期望找到中国花生过敏发病率较低的原因,为临床食物过敏患者的治疗和低过敏花生品种的培育提供理论依据。研究结果表明:Ara h1和三条Ara h3多肽是中国主要的致敏蛋白,并发现了Ara h1的亚基,分子量为58kD的多肽。Ara h1和Ara h3的相对含量各品种之间差异显著,并且低于国外花生品种。因此中国花生主要致敏蛋白相对含量低可能是导致中国花生过敏发病率较低的主要原因。 相似文献
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食物过敏已成为世界关注的重大公共卫生和食品安全问题。文章综述近年来国内外有关加工处理(热加工和非热加工)对食物过敏蛋白致敏性的影响:加工方式、处理强度等均会影响过敏蛋白的分子特性,从而导致其或增敏、或脱敏、或不变;加工虽不能完全消除过敏原的致敏潜力,但可通过加工方式和加工参数的选择使其致敏潜力最小化。通过选择合适的食品加工方式控制食物过敏原,在不改变食物营养价值的条件下,获得脱敏性食物,满足食物易敏人群的正常饮食需求,为消费者提供安全食品,是现代食品工业的重要任务之一。 相似文献
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通过免疫学方法研究了高温高压处理后花生主要致敏蛋白Ara h1溶解性和免疫反应性的变化。结果表明:高温高压处理可使Ara h1及花生蛋白粗提物均发生显著变性和分解,以135 ℃处理最为显著;但Ara h1在121和135 ℃处理20 min后均表现出良好的热稳定性,可溶性蛋白含量不再随处理时间延长而发生明显减小;135 ℃处理20 min或更长时间后样品中15 kDa左右或更小分子量的蛋白片段成为分解物的主要组成部分。高温高压处理可使Ara h1的免疫反应性显著下降,且在蛋白粗提物的混合体系中更为显著:135 ℃处理20和60 min后,Ara h1的IgG结合能力分别仅为对照的1/3和1/6;而在混合体系中,相同条件下Ara h1的IgG结合能力分别仅为对照的2/9和1/9。 相似文献
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Beneficial Influence of Short‐Term Germination on Decreasing Allergenicity of Peanut Proteins 下载免费PDF全文
Yingchao Li Xiulan Sun Zhezhe Ma Yan Cui Chao Du Xiuhua Xia He Qian 《Journal of food science》2016,81(1):T255-T261
Most allergenic storage proteins in peanuts are degraded during seed germination. By altering this natural physiological process, it might be possible to reduce peanut protein allergenicity. However, little is known about the change in allergenic proteins and their corresponding immunocreactivity, and the effects of major environmental conditions on their allergenicity during germination. In this study, the influence of different germination conditions (temperature and light) on the degradation of Ara h1 and allergenicity changes of peanut seeds was evaluated by ELISA and Western blotting. The results showed that the 40‐ and 65‐kDa proteins in peanut seeds degraded rapidly during the time course, beginning at 60 (at 25 °C) and 108 h (at 20 °C), and the corresponding immunocreactivity of Ara h1 decreased approximately one‐third after 5 to 7 d of germination. Compared with the cotyledons, the embryonic axes had a higher proportion of Ara h1, which was then degraded relatively faster during germination, resulting in a significant reduction in its allergenicity. Although a higher temperature improved the seed germination rate, it affected sprout quality (as did light); therefore, 25 °C and dark surroundings were suitable conditions under which peanut sprouts were processed; neither factor significantly affected the allergenicity of Ara h1. These results provided a theoretical basis for studies using biological methods to reduce peanut allergenicity. 相似文献
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从花生中提取总RNA,用反转录聚合酶链式反应得到花生过敏原Ara h 1基因,构建pET-28a-Ara h 1表达载体,转入Rosetta(DE3)宿主表达菌中诱导产物表达,用镍离子亲和层析法纯化得到目的蛋白。十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示目的蛋白分子质量约为75 kDa,与预计相符;经质谱鉴定为Ara h 1蛋白。用BALB/c小鼠模型评价重组Ara h 1蛋白的致敏性结果显示,重组Ara h 1蛋白致敏小鼠血清中特异性抗体、Th2型细胞因子、组胺含量升高,空肠和肺组织发生病变,表明重组Ara h 1蛋白可以导致小鼠发生Th2型过敏反应,且有与天然Ara h 1蛋白相似的致敏性。同时RBL细胞模型结果显示重组Ara h 1蛋白还可导致RBL细胞脱颗粒,释放β-己糖苷酶,进一步表明重组Ara h 1蛋白具有致敏性。 相似文献
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为获得重组花生过敏原Ara h 2。通过RT-PCR 合成cDNA,并以此为模板进行PCR 扩增目的基因Ara h 2,扩增产物经纯化后克隆至pMD19-T Simple 载体中,构建重组质粒pMD19-T-Ara h 2。上述重组质粒经酶切纯化后定向克隆到pGEX-4T-1 表达载体中,构建原核表达载体pGEX-4T-1-Ara h 2,并转化表达宿主菌BL21-codonPlus(DE3)-RIPL 中,经IPTG 诱导表达。SDS-PAGE 电泳结果表明,该表达蛋白大小约为46kD,与理论值相符。通过Glutathione Sepharose 4B 凝胶亲和层析方法纯化融合蛋白GST-Ara h 2,获得融合蛋白纯度约为90%。Western blotting 分析表明,经纯化的融合蛋白能与抗Ara h 2 兔血清发生特异性反应,说明该蛋白具有良好的免疫原性。 相似文献
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晒干处理对花生过敏原蛋白潜在致敏性的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
花生是八大食物过敏原之一,花生过敏通常是终身的。晒干是花生加工的重要环节,本研究通过对新鲜花 生进行去壳晒干和带壳晒干2 种不同的晒干处理,探索不同晒干方式对花生过敏原蛋白潜在致敏性的影响。采用凯 氏定氮法、二喹啉甲酸法和聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定花生及蛋白提取液中的蛋白浓度和过敏原蛋白的组成,用圆 二色谱、紫外扫描光谱检测花生蛋白的结构变化,用血清免疫球蛋白E(immunoglobulin E,IgE)结合能力表征花 生蛋白潜在致敏性的变化。结果显示,晒干处理后,花生蛋白与血清IgE的结合能力显著增强(P<0.05),去壳晒 干的花生蛋白质二级结构比带壳晒干的花生更有序,三级结构更加紧凑,带壳晒干的花生蛋白可能因为其结构较为 松散,故与IgE结合能力更强。 相似文献