黄精多糖肽的单糖组成和抗氧化活性

利用水提醇沉法提取黄精多糖肽,三氯乙酸法、透析法和阴离子交换柱层析法分离纯化黄精多糖肽;GC-MS分析了黄精多糖肽的单糖组成;Fenton法、邻苯三酚自氧化法和磷钼络合物法分别研究了黄精多糖肽对羟基自由基、超氧阴离子清除和总抗氧化能力。结果表明:黄精中多糖肽的含量为0.34%,多糖肽中多糖和蛋白质的比率为5.4∶1;黄精多糖肽的单糖组成主要是鼠李糖、阿拉伯糖、D-木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖等,其相对百分含量分别为:2.12%、1.81%、2.51%、65.4%、14.3%、13.8%。黄精多糖肽在一定范围内随着浓度的增高对羟基自由基的清除率、对超氧阴离子的清除率逐渐增高,总抗氧化活性也随黄精多糖肽浓度的增高而增高;其对羟基自由基和超氧阴离子的清除率高于Vc,但总抗氧化活性远低于VC的总抗氧化活性。     

条斑紫菜活性肽的抗氧化作用

以条斑紫菜为原料,使用木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、胃蛋白酶水解紫菜蛋白制备活性肽,采用还原能力、清除羟自由基和二苯代苦味酰基自由基作为抗氧化性评价指标,研究紫菜活性肽的体外抗氧化活性,并测定其分子质量分布。结果表明：3种蛋白酶对紫菜蛋白具有较好的酶解效果,酶解产物具有一定的还原能力;自由基清除率和底物浓度之间具有正相关关系,木瓜蛋白酶酶解活性肽清除羟自由基活性最强,半数清除率质量浓度为0.397mg/mL;胃蛋白酶酶解活性肽清除二苯代苦味酰基自由基活性最强,半数清除率质量浓度为0.261mg/mL;经测定,具有抗氧化活性的小分子肽分子质量分布在148～1963u之间。     

葛根抗氧化肽的分离及清除自由基活性研究

目的：分离纯化葛根抗氧化肽并对其进行体外清除自由基活性的研究。方法：以野生葛根为实验材料,经30%的乙醇浸提、透析、冷冻干燥,进一步采用DEAE阴离子交换层析,反相高效液相色谱的方法,对葛根抗氧化肽进行纯化,对不同组分进行还原能力的测定,还原能力最强的命名为PE1。对PE1进行茚三酮反应和分子质量测定。采用邻苯三酚自氧化法、DPPH法、Fenton反应法检测PE1体外对超氧阴离子自由基、DPPH自由基、羟自由基的清除作用。结果：反相高效液相色谱检测PE1纯度,显示为单一峰,PE1与茚三酮反应呈阳性,分子质量约为746D,PE1在体外可以有效清除以上3种自由基。在质量浓度为0.652mg/mL时,羟自由基清除率可达到80.01%;在5mg/mL质量浓度条件下,对超氧阴离子自由基的清除率高达97.35%;在3.5mg/mL质量浓度条件下,对DPPH自由基的清除率达到75.02%,其IC50为2.83mg/mL。结论：PE1具有较强的清除自由基活性。     

植物乳杆菌发酵核桃粕制备多肽及其抗氧化活性分析

以核桃粕为原料,植物乳杆菌为发酵菌种,通过液态发酵制备核桃多肽,采用超滤法将核桃多肽分为分子量<3 kDa、3～10 kDa和>10 kDa的多肽并对其抗氧化活性和氨基酸组成进行测定分析。以多肽得率为指标,对发酵时间、接种量和底物浓度进行单因素试验和正交试验以确定植物乳杆菌发酵核桃粕制备多肽的最佳工艺条件。结果表明：在发酵时间48 h、接种量11%和底物浓度7%的条件下,多肽得率最高,为0.263 0 g/g。体外抗氧化结果显示,随着分子量的逐渐降低,多肽的抗氧化活性逐渐增强,当多肽浓度为3.0 mg/mL时,<3 kDa多肽的DPPH自由基、ABTS+自由基、超氧阴离子自由基清除能力和总还原能力均达到最大,分别为94.79%、97.42%、20.74%和23.45%。氨基酸分析结果表明,4种分子量多肽的氨基酸种类齐全,分子量<3 kDa多肽的抗氧化氨基酸含量相对较高,有助于增强其抗氧化活性。     

玉米低聚肽的体外抗氧化作用

在对玉米低聚肽的蛋白质含量、氨基酸组成和分子质量分布进行分析的基础上,从DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基清除能力以及还原能力4个方面对玉米低聚肽的体外抗氧化活性进行考察。组成分析显示：总蛋白质含量为89.28%,酸溶蛋白质占总蛋白质含量的94.31%;氨基酸组成独特,富含抗氧化性氨基酸,其中亮氨酸、脯氨酸、丙氨酸含量较高;相对分子质量小于1000的组分高达93.05%,主要分布在132～576范围内。体外抗氧化实验结果显示：玉米低聚肽对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基的半抑制浓度(IC50值)分别为：1.9、5.4mg/mL和14.9mg/mL,质量浓度为5.0mg/mL时的还原能力与0.02mg/mL的抗坏血酸相当,并且抗氧化能力与其质量浓度呈现剂量关系。     

大蒜及黑蒜多糖含量测定和抗氧化活性研究

为测定大蒜及黑蒜中多糖含量及抗氧化活性,采用苯酚硫酸法测定多糖含量,根据改进的Nagai法测定1,1-二苯基-2-苦基肼(1,1-diphenyl-2-picryl-hydrazyl,DPPH)自由基清除率,水杨酸法测定羟自由基清除率,邻苯三酚法测定超氧阴离子清除率。结果表明黑蒜和大蒜多糖含量分别为98.67mg/g和50.33mg/g;大蒜和黑蒜均具有较强的抗氧化活性,其抗氧化活性与浓度有一定的量效关系;黑蒜多糖的DPPH自由基清除率、羟自由基清除率、超氧阴离子自由基清除率均强于大蒜,并且差异有统计学意义(P<0.01)。以上结果表明黑蒜多糖含量大于大蒜并其且体外抗氧化能力强于大蒜。     

酶解麦胚制备风味活性肽的研究

为提高小麦副产物综合利用附加值,研究采用风味蛋白酶酶解麦胚制备风味活性肽,以感官评分和麦胚肽得率为衡量指标优化酶解工艺,测定酶解物中风味物质含量、肽分子量分布及其体外抗氧化活性。结果表明,麦胚最佳酶解条件为pH7,底物浓度2%,酶解温度50℃,酶添加量4%。此时,麦胚肽得率为（8.17±0.70）%,酶解物具有一定咸鲜滋味并伴有清淡香气。麦胚酶解物中挥发性物质以烃类、酸类和醇类物质为主;呈鲜物质主要为天冬氨酸、5''-鸟嘌呤核苷酸和琥珀酸;肽分子量主要分布小于3 000 Da,其DPPH自由基清除率、ABTS＋自由基清除率和羟自由基清除率的IC50值分别为10.327、0.448、0.574 mg/mL,具有较好的体外抗氧化活性。     

不同分子量鹿茸多肽抗氧化活性的研究

本文利用膜分离技术获得不同分子量段的鹿茸多肽,采用五种抗氧化检测方法对其进行全面的抗氧化活性分析,获得抗氧化活性较好的多肽Ⅲ片段,分子量在6214u以下。实验结果表明,当浓度在0.1~10.0mg/m L范围之间,多肽Ⅲ对超氧阴离子自由基清除能力和对还原能力低于VC;当浓度为10.0mg/m L时,多肽Ⅲ对DPPH自由基的清除能力与VC基本相当;当浓度在8.0~10.0mg/m L时,对羟自由基的清除率和对脂质体氧化抑制能力高于VC。     

东北林蛙皮精制多糖的体外抗氧化活性研究

以抗坏血酸(VC)为对照,采用邻苯三酚自氧化法、邻二氮菲-Fe氧化法、DPPH法和总抗氧化能力测定林蛙皮精制多糖的体外抗氧化活性。结果表明:林蛙皮精制多糖对超氧阴离子自由基(O2-.)、羟基自由基(.OH)、DPPH自由基均有不同程度的清除能力,当多糖浓度为0.1mg/mL时,多糖的总抗氧化能力为1.48mmol/g。随着林蛙皮多糖浓度的增加,抗氧化能力均进一步提高,说明林蛙皮精制多糖具有良好的抗氧化活性。     

蛋清多肽体内外抗氧化活性的研究

本试验通过体外试验和动物试验两方面研究蛋清多肽(egg white polypeptide,EWP)的抗氧化能力,测定了1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picylhydrazyl,DPPH)自由基、羟自由基的清除能力和总还原能力以及小鼠血清、肝脏和心脏组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力、还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。结果表明,蛋清多肽浓度为5 mg/mL时,其对DPPH自由基清除率为69.2%,羟自由基清除率为68.5%,蛋清多肽对DPPH自由基和羟自由基均有较好的清除作用,并且清除率与浓度呈正相关。蛋清多肽可显著提高小鼠血清、肝脏和心脏组织中SOD活力和GSH含量(P<0.05),显著降低机体内MDA含量(P<0.05),且蛋清多肽灌胃剂量为150~900 mg/kg时,抗氧化能力与蛋清多肽浓度有一定量效关系,且高剂量组效果最佳。本研究为开发新型生物活性肽,提高农产品附加值提供理论基础与数据支持。     

清酱肉多肽的抗氧化活性和氨基酸分析

以清酱肉为研究对象,提取并通过超滤分离得到清酱肉多肽（分子质量＜10 kDa）,测定不同质量浓度多肽液对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基、羟自由基（·OH）的清除效果、Fe2＋螯合能力和还原能力,分析清酱肉多肽的氨基酸组成。结果表明：当清酱肉多肽液的质量浓度为5 mg/mL时,其对·OH和DPPH自由基的清除率分别可达51.49%和57.50%,与相同质量浓度的谷胱甘肽（glutathione,GSH）相比差异显著（P＜0.05）;清酱肉多肽的Fe2＋螯合能力随其质量浓度的增加而显著提高,当质量浓度为5 mg/mL时,其对Fe2＋的螯合率可达50.97%;清酱肉多肽还具有一定的还原性。此外,清酱肉多肽液的氨基酸组成较为丰富,其中必需氨基酸含量为29.14%;与抗氧化活性相关的碱性、酸性及疏水性氨基酸的总量达到87.75%。综上所述,清酱肉多肽液具有一定的抗氧化能力及营养价值。     

大豆生物活性肽的分离及其抗氧化活性研究

为制各具有抗氧化活性的大豆生物活性肽,本实验采用酶解处理大豆蛋白粉,对酶解产物进行葡聚糖Sephadex G-25凝胶柱层析分离,并对其各组分分子量分布及其抗氧化性进行了研究,对抗氧化活性最佳的肽段进行氨基酸组成分析。结果显示,大豆蛋白酶解物经Sephadex G-25分离后得到了六个肽片段,其中平均链长为4,即含有2～6个氨基酸残基的大豆功能短肽SPP4,对羟自由基具有最佳的清除作用,清除率达到80．13%,氨基酸组成分析发现该组分中缬氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸含量较高。结果表明,含2～6个氨基酸残基的大豆生理活性短肽具有较好的抗氧化活性。     

食源性低聚肽体外抗氧化活性研究

对工业化生产的食源性低聚肽进行了清除DPPH自由基、抑制亚油酸自氧化2种体系下的体外抗氧化活性的研究。结果表明:在清除DPPH自由基体系中,卵白肽和大豆肽的抗氧化活性最高,其IC50分别为5.767,6.268mg/mL。在抑制亚油酸自氧化体系中,大豆肽和海洋胶原肽对于亚油酸自氧化的抑制率分别达到了75.16%和58.69%。几种食源性低聚肽均有不同程度的抗氧化活性。     

发酵法制备鱼鳔多肽及其抗氧化活性研究

将米曲霉接种于鱼鳔匀浆液中对其进行直接发酵,利用菌产蛋白酶的作用水解鱼鳔蛋白。随着发酵时间的延长,发酵液水解度不断上升,发酵液中的多肽含量不断增加。对发酵所得鱼鳔多肽进行超滤,采用产O2·和·OH 化学模型研究其清除自由基的活性,采用亚油酸自氧化体系研究其抗氧化活性。结果显示,经发酵40h,水解度(22 ± 0.8)% 所得鱼鳔多肽体外抗氧化能力较强;超滤片段中,平均肽链长度为12 个氨基酸残基的多肽超滤液体外抗氧化能力较强;分子量分布在1000D 左右。发酵法所得鱼鳔多肽不仅对自由基具有强烈的清除作用,还能明显抑制脂质的氧化。     

体外消化对金瓜籽抗氧化肽抗氧化活性的影响

本实验以金瓜籽为原料,以还原力、羟自由基清除率、DPPH自由基清除率为考察指标,采用响应面试验探讨了制备金瓜籽抗氧化肽的工艺参数,并研究了其经体外模拟人体胃肠道消化后的游离氨基酸组成、分子质量分布及抗氧化活性变化。结果表明：制备金瓜籽抗氧化肽的最优工艺条件为底物（金瓜籽粕）质量分数为6%、添加碱性蛋白酶3%、在pH?8.5的体系中55?℃酶解90?min,此条件下所得羟自由基清除率、DPPH自由基清除率、还原力分别为（58.19±0.80）%、（60.27±1.73）%和0.49±0.01;分子质量小于3?kDa、3～5?kDa及大于5?kDa的抗氧化肽经体外模拟胃肠道消化后分别含游离氨基酸41.72%、36.94%和33.93%,其主要为分子质量小于500?Da的肽段,占比分别为73.50%、60.15%和53.30%;与消化前相比,消化产物对羟自由基的清除能力分别提高了26.04%、29.06%和34.43%,还原力分别提高了50.98%、64.53%、67.35%。该研究可为金瓜籽抗氧化肽作为功能性抗氧化剂的生产和应用提供参考。     

鱼精多肽在抗氧化和抗疲劳方面的作用研究

鱼精多肽(Protamine hydrolysate)是由鱼精蛋白(Protamine)酶解作用后形成的多肽片段,含有较大比例的寡肽和氨基酸,具有很高的营养价值和多种生理功能。研究了其体外清除自由基的能力和体内抗疲劳及抗氧化方面的作用,结果发现鱼精多肽粗粉具有较强的羟自由基清除活性,也能明显提高Wistar大鼠的抗疲劳和抗氧化能力。     

黄粉虫抗氧化活性肽的分离纯化研究

为制备具有抗氧化活性的黄粉虫生物活性肽,采用双酶水解黄粉虫蛋白粉,对酶解产物进行葡聚糖SephadexG-25 凝胶柱层析和阳阴离子交换柱层析分离纯化,并对其各组分分子量分布及其抗氧化性进行研究,对抗氧化活性最佳的肽段进行氨基酸组成分析。结果显示,纯化得到的抗氧化多肽对羟自由基和超氧阴离子自由基具有很强的清除作用,清除率可分别达到74.20% 和87.32%。     

蟹抗氧化肽的分离纯化及活性研究

酶解梭子蟹下脚料获得抗氧化肽粗品。采用葡聚糖凝胶G-50 与G-25 进行分离纯化,对纯化样品的相对分子质量分布、抗氧化特性和氨基酸组成进行测定。结果表明：经分离得到的组分3 抗氧化性较强,其相对分子质量在1096.5 左右,经HPLC 分析其已基本达到纯化;经氨基酸分析其由11 种氨基酸组成,其中具有抗氧化能力的酪氨酸、半胱氨酸和组氨酸所占比例很高。