万寿菊提取物中游离叶黄素的制备及纯化

以万寿菊正己烷提取物为原料,系统地考察了由万寿菊提取物制备游离叶黄素的条件,并对粗产品进行纯化。在单因素试验的基础上,用L16(45)正交试验对游离叶黄素的制备工艺进行优化,以皂化液浓度、液料比、皂化温度以及皂化时间为因素,以游离叶黄素的含量为指标进行试验,得到最佳的制备条件;并对硅胶柱层析纯化的梯度洗脱条件进行摸索;采用薄层色谱扫描法进行测定。确定最佳皂化制备条件是:皂化液为35%的KOH-甲醇,液料比20:1(ml/g),皂化温度55℃,皂化时间4h;在此条件下,可使游离叶黄素的含量由原料中的0.25%上升到45.59%,通过硅胶柱层析纯化后,游离叶黄素的含量可提高到93.55%。     

茶皂素的提取及纯化研究

采用超声波法提取茶皂素的工艺,确定最佳的工艺参数为:乙醇浓度80%、料液比1:4、提取温度40℃、超声波功率320W、超声波作用时间60min。最佳工艺条件下的茶皂素粗品得率为18.54%,茶皂素含量60.3%。用硅胶层析法对粗品进行分离纯化。能将茶皂素粗品中的杂质有效地分离,适用于茶皂素的分离纯化。     

硅胶柱层析法分离纯化甘露低聚糖

采用硅胶柱层析法分离纯化甘露低聚糖,由实验得到最佳分离条件为:进样量为10mL,柱高为600mm,流速为1mL/min,温度为60℃,在此条件下甘露低聚糖的纯度为71.34%。      

硅胶柱层析法分离纯化甘露低聚糖

采用硅胶柱层析法分离纯化甘露低聚糖,由实验得到最佳分离条件为:进样量为10mL,柱高为600mm,流速为1mL/min,温度为60℃,在此条件下甘露低聚糖的纯度为71.34%.     

柱层析法分离万寿菊叶黄素

本试验研究了万寿菊叶黄素的分离方法及分离条件。采用高效液相色谱法(HPLC)测定叶黄素的含量,色谱柱为岛津VP-ODSC18柱(150mm×4.6mm,5μm),检测波长454nm;以甲醇-0.1%磷酸溶液为流动相进行梯度洗脱,流速1.0mL/m in;柱温30℃;进样量10μL;校准曲线法定量,在0.6~2.0μg范围内具有良好的线性关系,回归方程为Y=1.16×107C+4.99×104,相关系数r=0.9984。采用柱层析法分离万寿菊叶黄素的皂化液,实验结果表明:固定相采用硅胶G(100~200目);胡萝卜素洗脱剂为V(石油醚)∶V(乙酸乙酯)=5∶1;叶黄素洗脱剂为V(石油醚)∶V(乙酸乙酯)=1∶1;层析柱规格为Φ26×510mm;使用皂化液直接湿法上样;吸附时间为30m in;上样量为0.4mL皂化液/g硅胶;柱温为常温;皂化液可直接上样;在以上条件下,经分离回收溶剂后得到含量为83.3%的叶黄素产品。该方法有良好的分离能力,便于操作,产品纯度稳定。硅胶在重复使用5次以内,对分离效果的影响不明显。     

化学合成香叶醇-β-D吡喃葡萄糖苷的分离纯化

为实现化学合成的香叶醇-β-D-吡喃葡萄糖苷的高效、系统分离纯化,采用改进的Koenigs-Knorr法,以硅胶担持碳酸银催化剂提高合成收率,利用硅胶柱层析及高效液相(HPLC)对粗样品进行分离纯化,硅胶柱层析通过薄层层析选择较佳的流动相配比,即乙酸乙酯和乙醇按照50:1,40:1,30:1依次进行梯度洗脱,利用HPLC技术的高精密性,其流动相乙腈:水为55:45,分别纯化合成的粗品。结果表明:采用新型的催化剂使产物收率由56.1%提高到75%,收率得以较为显著的提高;且硅胶柱层析得到产物纯度为90.12%,HPLC纯化得到的产物纯度为98.66%,两种层析方法均可得到纯度较佳的香叶醇糖苷;为香叶醇吡喃葡萄糖苷合成及纯化提供一定的借鉴。     

利用硅胶柱层析分离纯化平贝总碱的研究

目的：对东北特产平贝母的生物碱进行分离纯化研究。方法：用硅胶柱层析法对平贝总碱进行分离纯化,固定相为薄层层析硅胶G,流动相为乙酸乙酯- 甲醇- 氨水(17:2:1)。用HPLC-ELSD 法对分离出的贝母素甲和贝母素乙的纯度进行测定。结果：分离出贝母素甲和贝母素乙,贝母素甲纯度为93.19%、贝母素乙纯度为92.09%。结论：采用的硅胶柱层析分离纯化可得到纯度较高的分离组分。     

红曲黄色素的分离纯化与表征

采用硅胶柱层析法对菌体内醇溶性红曲黄色素进行分离、纯化,并对纯化后的红曲黄色素结构及纯度进行液相质谱鉴定表征,得到柱层析最佳洗脱条件:洗脱剂配比正己烷∶乙酸乙酯(v/v)=1∶8,上样量1.5 m L,洗脱流速50 m L/h。分离纯化所得的红曲色素经液相质谱检测含红斑胺素、红曲素、红斑素三种色素组分,采用相对定量法对分离所得的红曲黄色素组分进行纯度表征,结果显示其纯化保存率达85%。      

叶黄素的分离纯化及其清除羟自由基活性

运用KOH-甲醇溶液皂化法将叶黄素酯转化为游离叶黄素,进一步采用硅胶柱层析进行分离纯化,并对不同纯度产品中叶黄素的含量进行HPLC法测定;以没食子酸丙酯为参照,采用流动注射化学发光法测定不同纯度叶黄素产品清除.OH的效果。结果表明:叶黄素浸膏通过皂化,游离叶黄素的含量由1.35%提高到30.25%,进一步柱层析处理得到80.32%的叶黄素产品;不同纯度叶黄素产品均具有较强的清除.OH活性,且其抗氧化活性与叶黄素的含量正相关。     

羽衣甘蓝叶黄素提取纯化研究

以羽衣甘蓝冻干粉末为原料,采用THF浸提(10:1)、10%KOH-C2H5OH溶液皂化(6.5:1)的方法,研究提取羽衣甘蓝叶黄素的最佳条件;采用重结晶法纯化叶黄素粗品,通过HPLC测定纯度。结果表明,在40Hz超声波作用下,提取温度30℃、提取时间20min,叶黄素的提取量最高,达到3289.42μg/100g;游离态叶黄素纯度达到88.13%。     

溶血磷脂酰乙醇胺硅胶柱色谱纯化技术研究

探讨了溶血磷脂酰乙醇胺(LPE)硅胶柱色谱纯化的可行性。通过选择,确定以硅胶为固定相、氯仿-甲醇(体积比2∶1)为洗脱液,进行LPE纯化工艺优化。得到的最优工艺条件为:上样量1∶40(样品质量与固定相质量比),上样液质量浓度30 mg/m L,洗脱流速2.5 m L/min;在最佳工艺条件下,最终LPE产品纯度为99.05%,回收率为88.69%。研究为进一步探讨工业化制备LPE提供了基础数据和理论支撑。     

硅胶柱层析法分离纯化杜仲粕中桃叶珊瑚苷

探讨使用硅胶柱层析法从杜仲粕中分离纯化桃叶珊瑚苷(Au),优化柱层析吸脱附条件,用薄层色谱法(TLC)和高效液相色谱法(HPLC)对产品进行定性定量分析。结果表明：优化的硅胶用量为生药质量的2 倍,使用V(甲醇):V(氯仿):V(石油醚):V(乙酸乙酯)为7:1:0.5:1.5 的混合溶剂在1.0mL/min 流速下进行洗脱,通过收集含Au高的组分,经减压浓缩、结晶、过滤、重结晶等过程,可获纯度为96.56% 的桃叶珊瑚苷产品。     

麦芽糖月桂酸酯的分离纯化与结构鉴定

采用薄层层析(TLC)和硅胶柱层析分离纯化了脂肪酶催化合成的麦芽糖月桂酸酯,然后用高效液相色谱(HPLC)、质谱(MS)、红外光谱(IR)和核磁共振(NMR)法鉴定了纯化组分的分子结构。TLC分离麦芽糖月桂酸酯的合理条件:点样量5μl,以氯仿/甲醇(4:1,V/V)展开15min,然后用5%硫酸乙醇溶液喷雾、120℃显色20min。硅胶柱层析分离麦芽糖月桂酸酯的适宜条件:10ml反应液上12mm×1000mm硅胶(100～200目)层析柱,流动相为氯仿/甲醇(4:1,V/V),流速18ml/h,按1管/10min收集洗出液。两种分离组分分别为6’-O-麦芽糖月桂酸酯和6,6’-O-麦芽糖月桂酸二酯。     

果糖月桂酸单酯的分离纯化及鉴定

采用硅胶柱层析色谱对叔戊醇中固定化磷脂酶Lecitase Ultra催化合成的果糖月桂酸单酯进行分离纯化。确定了薄层层析(TLC)条件,并通过反相-高效液相色谱-蒸发光散射检测(RP-HPLC-ELSD)测定柱层析纯化产物的纯度。利用液质联用(HPLC-ESI-MS)、红外光谱(FT-IR)和13C核磁共振(13CNMR)对目标产物进行确认,鉴定目标产物为酯化位点在1位和6位的果糖月桂酸单酯,四种异构体如下:1-月桂酸-β-D-吡喃果糖单酯、1-月桂酸-α-D-吡喃果糖单酯、1-月桂酸-β-D-呋喃果糖单酯和6-月桂酸-β-D-呋喃果糖单酯,且1-月桂酸-β-D-吡喃果糖单酯的比例最高。     

硅胶柱层析精制中长链结构甘油三酯

为探究硅胶柱层析在中长链结构甘油三酯（MLCT）精制方面的应用,以亚麻籽油和中链脂肪酸甘油三酯为原料合成MLCT粗产品,采用硅胶柱层析进行精制,优化精制工艺条件并对硅胶柱层析精制前后MLCT的质量指标进行了测定。通过硅胶薄层层析确定硅胶柱层析的洗脱剂,通过洗脱曲线确定洗脱液收集体积,以甘二酯脱除率和产品回收率为评价指标,确定洗脱流速和上样量。结果表明：以正己烷-无水乙醚（体积比5∶ 1）为洗脱剂,等梯度洗脱,洗脱流速2.0 mL/min,上样量4 g,硅胶40 g,收集洗脱液500 mL条件下对MLCT粗产品进行精制,所得产品甘二酯脱除率达到99.40%,MLCT回收率为95.07%。精制后产品酸值（KOH）和过氧化值显著降低,分别为0.04 mg/g和0.00 g/100 g,色泽变浅,色值为R0.0,Y0.1。硅胶柱层析具有同时脱除副产物,降低酸值、过氧化值、脱色等综合效果,在MLCT精制方面有良好的应用前景。     

硅胶柱色谱法提纯天然生育酚的初步研究

采用粗孔硅胶做吸附剂,对生育酚浓缩液进行提纯,初步研究了色谱条件.实验结果表明,采用正己烷-异丙醇混合溶剂做洗脱剂,两者配比正己烷:异丙醇为9:1(V/V)时进行柱洗脱,生育酚含量能达到86%,回收率达80%.     

甘露糖酯的分离纯化及分析方法研究

本文对脂肪酶酶催化合成月桂酸甘露糖酯的分离纯化作了研究。确定了甘露糖酯的薄层层析(TLC)条件:反应液3μl点样,在正己烷/乙酸乙酯(1:1,V/V)中展开,用5%硫酸乙醇溶液喷雾,在120℃烘箱显色20min。将TLC条件应用到硅胶柱层析分离甘露糖酯,条件为:反应液5ml上硅胶层析柱(硅胶60～100目,柱12×600mm),流动相为正己烷/乙酸乙酯(1:1,V/V),流速为18ml/h,按1管/10min收集洗出液,并用TLC检测、收集产物。采用质谱(MS)方法鉴定了分离纯化的甘露糖酯产物,发现丙酮溶剂中脂肪酶催化合成产物为月桂酸甘露糖的单酯和两种二酯异构体。而用HPLC-MS分析方法证实乙腈溶剂中合成产物为月桂酸甘露糖的单酯、二酯和三酯。     

皂化-硅胶柱层析法纯化辣椒红色素

探讨了辣椒红色素的纯化工艺,首先采用碱性乙醇皂化法去除辣椒油树脂中的脂肪酸,然后经过硅胶柱层析脱除辣椒红色素中的辣椒碱。实验结果表明,最佳的皂化条件为:NaOH溶液浓度0.8mol/L,固液比1∶15(g/mL),皂化温度50℃,皂化时间2h,乙醇浓度70%(V/V),最佳的硅胶柱层析条件为:上样量1∶40(m样品∶m硅胶),径高比1∶10,洗脱流速1BV/h,得到的辣椒红色素的色价为672。