微杆菌Z4产几丁质酶的发酵条件研究

为提高微杆菌Z4发酵的几丁质酶得率,利用摇瓶研究了发酵温度、初始pH、装液量等对于发酵产酶的影响.在这些实验的基础上,运用正交试验对Z4产几丁质酶的摇瓶发酵条件进行了进一步优化.结果的极差分析和方差分析表明温度对产酶的影响最大,具有显著性.最佳摇瓶发酵工艺条件为:培养温度28℃,培养基初始pH7,接种量6%,三角瓶装液量60mL培养基/250 mL三角瓶.在该条件下发酵液酶产量达到4.13 U/mL,比优化前提高了79.6%.     

米曲霉降解牛乳中乳糖的研究

以牛乳为原料,通过米曲霉的发酵降解乳糖,实验得出的米曲霉在牛乳中的最适培养条件为：接种量3%,温度28℃±1℃,装液量30mL/250mL,培养箱转速180r/min,发酵60h.在此条件下培养,米曲霉发酵液中乳糖分解率可达31.4%,米曲霉粗酶液乳糖分解率可达41.4%～55.0%.通过对发酵乳中乳糖组成进行薄层层析分析,也证明米曲霉可降解乳糖.     

反应器操作与嫩啤酒双乙酰水平

利用海藻酸钠固定化啤酒酵母细胞和流化床生物反应器进行介质循环式发酵。反应器中固定化胶体最适体积分数(φ)为0.40(V/V)。在给定固定化胶体体积分数(φ=0.40),给定发酵温度(10℃)和循环比(n=5)的条件下,研究了循环流速对主发酵周期和对嫩啤酒双乙酰水平的影响。结果表明,发酵周期随流速的增加而减少,而双乙酰浓度则随流速的增加而提高。当停留时间τ_t=2.8h 时,发酵周期 T=14h,嫩啤酒中双乙酰浓度为0.5ppm.     

一株高产淀粉酶红曲霉菌株的分离鉴定及其培养特性研究

从全国各地收集的自然发酵红曲米中分离纯化获386株红曲霉菌株;经筛选获1株高产淀粉酶的Mp-42优质菌株,根据Mp-42菌株的形态、生理生化和ITS基因序列,鉴定为紫色红曲霉(Monascus purpureus).Mp-42菌株具有高产淀粉酶、生长速度快、产孢量多等优良特性,在发酵培养基初始pH为6.0,培养温度为30℃条件下,Mp-42菌株淀粉酶酶活可达168 178U/mL.     

复合菌株固态发酵豆粕的研究

采用复合菌株进行固态发酵豆粕的研究,通过正交试验及菌种比例搭配试验得到适宜发酵条件:米曲霉与枯草芽孢杆菌组合,接种比为1:3(V/V),总接种量2%,培养温度40℃,培养时间60 h,游离氨基酸含量平均达17.911 μg/mL.同时,通过对照试验对豆粕发酵前后游离氨基酸含量进行了差异显著性分析,结果表明,发酵样品中游离氨基酸含量平均达16.634 μg/mL,较发酵前的0.384 μg/mL有显著提高.     

天然油脂和表面活性剂对发酵性丝孢酵母产油脂及脂肪酶的影响

通过摇瓶发酵,研究了天然油脂(大豆油、猪油)和表面活性剂(Tween80、洗洁精)对发酵性丝孢酵母(Trichosporon fermentans)发酵生产油脂和胞内脂肪酶的影响。结果表明,大豆油对细胞产油和产酶的促进效果好于猪油,最适添加量为体积分数1.0%,发酵60h最大脂肪酶活力为347.5U/mL,发酵72h最大细胞油脂质量分数可达30.7%。低浓度表面活性剂对促进细胞产酶有利;Tween 80对细胞产油和产酶的提高效果好于洗洁精,最适添加量为体积分数0.5%,发酵60h最大脂肪酶活力为297U/mL,发酵72h最大细胞油脂质量分数可达30%。对于发酵性丝孢酵母,细胞内脂肪酶活力增加对油脂积累有促进作用。     

球孢白僵菌几丁质酶基因chitl真核表达

采用PCR方法从球孢白僵菌的DNA中克隆出几丁质酶基因chitl,并将该序列构建到酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)诱导型表达载体pYES2上,转化到酿酒酵母H158菌株中,通过Northern检验确定该基因在酿酒酵母中成功表达.经过酶活检测该转化子在培养48 h达到酶活高峰,达0.47 U/mL.     

球孢白僵菌几丁质酶基因chit1真核表达

采用PCR方法从球孢白僵菌的DNA中克隆出几丁质酶基因chit1,并将该序列构建到酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)诱导型表达载体pYES2上,转化到酿酒酵母H158菌株中,通过Northern检验确定该基因在酿酒酵母中成功表达.经过酶活检测该转化子在培养48 h达到酶活高峰,达0.47 U/mL.     

果胶酶的固态发酵法生产及在肉仔鸡饲养中的应用

以产果胶酶的黑曲霉(Aspergillus niger)为出发菌株,分别在小铝盒、浅盘和曲箱中进行固态发酵的研究,确定最适发酵条件为:以麸皮为培养基,加水比以麸皮∶水为3∶5,每kg原料添加7.5 g硫酸铵,并按7.5%接入42 h种龄的液体种子.经过39～41 h发酵,在浅盘发酵中干曲果胶酶活力达到19 000 U/g,曲箱发酵酶活力达到16 033 U/g.经分析成品曲中同时还含有酸性蛋白酶1 540 U/g,β-葡聚糖酶12 U/g.仔鸡的饲养试验结果表明,果胶酶的添加可显著提高全期增重,降低料肉比,干物质、粗蛋白、有机物和粗纤维的消化率提高了11%～22.5%.     

多菌种复合发酵对灵芝菌产胞外多糖的影响

主要研究了红曲霉、红茶菌以及红茶菌分离菌株(K1,K2,K3)与鹿角灵芝菌复合发酵后对灵芝菌胞外多糖产量的影响.采用苯酚-硫酸法检测发酵液胞外多糖.结果显示,红曲霉与鹿角灵芝菌复合发酵后,灵芝菌胞外多糖产量增加15%;红茶菌分离菌株单菌发酵时自身产胞外多糖的能力按大小排列为K2>K1>K3,其中,红茶菌分离菌株K1表现为促进鹿角灵芝胞外多糖的产生;K2,K3以及红茶菌复合菌株则对灵芝菌发酵中菌丝体总量及胞外多糖的产生有竞争抑制作用.     

米曲霉的定向发酵

用鱼蛋白(鱼粉)为氮源培养米曲霉,取样分析培养物的蛋白酶活力、氨基酸态氮含量、分子量及用培养物为酶源水解酪蛋白后的分子量变化。通过对比,研究了米曲霉在分批和补糖2种发酵条件下分泌蛋白酶及菌体生长的特点。结果表明:在用鱼蛋白为氮源培养米曲霉的过程中,米曲霉产生了多种不同的蛋白酶,蛋白酶的活力与种类随培养时间而变化,分批发酵的总酶活力比补糖发酵时的总酶活力强。     

甘蓝红营养强化型曲奇饼干的制备与消化特性

以油包水(W/O)乳液为载体负载甘蓝红，制备出甘蓝红营养强化型曲奇饼干，并考察不同甘蓝红添加形式对饼干中甘蓝红稳定性与消化特性的影响。结果表明：甘蓝红W/O乳液以质量分数为1%的PGPR作为乳化剂，0.2%的WPI作为抗氧化剂，油水相质量比为8:2,甘蓝红质量分数为2%,甘蓝红W/O乳液在饼干的烘焙和贮藏过程中稳定性明显高于甘蓝红水溶液形式，并在消化过程中表现出更为优异的稳定性和生物可接受率。     

半纤维素酶高产菌株的筛选及产酶条件的研究

以半纤维素为唯一碳源,采用平板透明圈和摇瓶发酵相结合的方法,筛选得到1株半纤维素酶高产菌株Hc-3,经形态学初步鉴定为曲霉属.通过液体发酵对该曲霉菌株发酵生产半纤维素所需碳源、氮源、培养温度、起始pH、培养时间等进行研究,结果表明上述因素对酶产量均有一定的影响.在单因素结果的基础上,设计3因素3水平的正交试验,根据试验结果确定菌株Hc-3发酵产酶的最佳条件:豆粕20 g/L,(NH4)2SO43 g/L,装液量80 mL(250 mL三角瓶),培养温度30℃,起始pH值为5.5,培养时间46 h,发酵液半纤维素酶活性可以达到2 000 U/mL以上,其中,起始pH值为影响最为明显的因素.     

基于响应面法对枯草芽孢杆菌WB600-eg2发酵产内切葡聚糖苷酶条件的优化

出发菌株枯草芽孢杆菌WB600-eg2是通过分子生物学手段构建的重组菌,内切葡聚糖苷酶酶活为1.174IU/mL.本文通过响应面法对装液量、初始pH、接种量、转速、酵母粉添加量等发酵条件进行优化,得到最优发酵条件为装液量55mL/250mL、初始pH7.2、接种量10%、转速170r/min、酵母粉添加量0.4%.在此发酵条件下测得内切葡聚糖苷酶酶活为1.573IU/mL,比未优化条件下提高了33.9%.     

酿酒酵母原生质体菌株的筛选

实验研究酿酒酵母 (Saccharomycescerevisiae) 原生质体的分离再生及再生菌株的构建 ,以蜗牛酶、纤维素酶、溶壁酶的去壁效果最好 ,而新生酶、几丁质酶的去壁效果较差。 2种以上的酶液混合使用能提高去壁效果。酶解液浓度在 0 .1 %～ 2 %内原生质体释放量随酶解液的浓度升高而上升。酶解液 pH值在 5 .0～ 7.0时原生质体的产量较高 ,渗透压稳定剂以柠檬酸 -磷酸缓冲液( pH6.0 ,内含 0 .8mol/L山梨糖醇 )处理原生质体释放量最高。而培养基对原生质体释放量的影响不明显。通过原生质体融合技术 ,获得融合子HG112 ,对HG112 进行以葡萄糖为基质的发酵试验 ,结果显示该融合子乙醇含量达 7.9% (体积比 ) ,比亲本QT提高 4 9.7% ,该技术可用于筛选优良菌株     

氮源对红曲霉菌株HNLI产色素的影响

对诱变的红曲霉菌株HNLI产色素进行培养基氮源优化,研究了几种常见的有机氮源和无机氮源对HNLI产色素的影响.结果表明,不同氮源对HNLI产色素影响有较大的差异,其中,有机氮源以质量分数为5%的蛋白胨,无机氮源以质量分数为5%的硝酸钠的发酵液较有利于HNLI产色素,该条件下总色价分别达到80.84 μ/mL和57.37 μ/mL,生物量分别为31.9 g/L和14.7 g/L.无机氮源中氯化氨有利于HNLI产黄色素,较高浓度的谷氨酸钠则不利于HNLI产色素.本试验还表明,上述条件下红曲霉菌株HNLI的色价与色调并不呈正相比关系,不同氮源发酵产色素色价差异明显,而色调差异不明显.     

米曲霉利用农业废弃物产木聚糖酶的条件优化

主要研究了米曲霉利用农业废弃物产木聚糖酶的情况.对实验室保藏菌株米曲霉M-9生长所必需的碳源、氮源、培养温度和培养基初始pH等条件进行了优化.实验表明,此菌株最适碳源是粒度小于0.08 mm的玉米芯（质量分数为4.0%）,最佳复合氮源是质量分数为1.2%的酵母提取物加质量分数为0.8%的大豆蛋白胨,最适初始pH值为7.5,最适产酶温度为30℃,最佳转速为200 r/m in,添加表面活性剂吐温60对菌株产酶有促进作用.在最适培养条件下,培养5 d,米曲霉沪酿M-9木聚糖酶的产量高达795.93 U/mL,是优化前的2.2倍.     

影响馒头面团发酵性能的因素研究

对馒头面团发酵性能的多种因素进行了较为系统研究,结果表明不同品牌的酵母、不同品质的小麦粉、加水量、加糖量和加酶量均对馒头面团的发酵性能有较大的影响.总体上说,湿面筋含量及揉和性能适中的小麦粉其面团的发酵性能较好;在一定范围内增大加水量、适当的加糖量(3%)和适量添加复合酶(0.5%),均可改善面团的发酵性能,而添加α-淀粉酶对馒头面团的发酵性能没有明显改善.     

病原芽胞杆菌几丁质酶产生菌的筛选与活性鉴定

通过特异引物PCR方法和水解圈活性法对62株苏云金芽胞杆菌菌株、26株蜡状芽胞杆菌菌株及18株球形芽胞杆菌菌株进行了几丁质酶产生菌的筛选。所测苏云金芽胞杆菌中除4株野生型菌株外均为阳性结果,蜡状芽胞杆菌仅1株为阴性结果,球形芽胞杆菌全为阴性结果,且水解圈法观察结果与PCR检测结果一致。在此基础上,通过DNS比色法对几丁质酶产生菌株的几丁质酶比活力也进行了测定。对这些具有致病性的病原芽胞杆菌几丁质酶的研究对于研究其致病机理及对其进行遗传改良具有重要的理论和实际应用价值。