基于分子对接探究紫苏粗提物对代谢综合征相关酶的抑制作用

目的：探讨紫苏粗提物对酶的抑制作用,阐明其对代谢综合征的药效物质基础。方法：测定紫苏粗提物中黄酮及酚酸含量;以抑制率为指标,测定紫苏粗提物对不同酶活性的抑制作用;采用分子对接预测紫苏粗提物对胰脂肪酶和淀粉酶抑制作用靶点。结果：紫苏粗提物中黄酮含量为0.309 8 mg/mg,总酚酸含量为58.59 mg/g。紫苏粗提物对α淀粉酶、黄嘌呤氧化酶、胰脂肪酶及乙酰胆碱酯酶的IC50值分别为0.273,0.244,0.347,0.018 mg/mL。芹菜素5-O-β-D葡萄糖苷、木犀草素7二葡萄糖苷酸、芹菜素7葡萄糖苷、山奈酚3-O芸香苷、迷迭香酸、芦丁等为紫苏粗提物的有效活性成分。结论：紫苏粗提物对4种酶都有一定的抑制活性,且呈剂量—效应关系。     

甜叶菊花和叶中酚类成分分析及含量测定

以高效液相色谱-串联四极杆质谱分析仪,结合质谱分析及比对对照品或文献报道化合物的保留时间和质谱参数,在甜叶菊花和叶中鉴定了16种酚类化合物。建立一种利用高效液相色谱法测定甜叶菊中16种酚类化合物含量的方法,并对甜叶菊一新品种盛花期花和叶中酚类的含量进行测定。结果表明,甜叶菊花和叶中酚酸化合物以新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、异绿原酸B、异绿原酸A、异绿原酸C为主,异绿原酸A含量最高,绿原酸含量次之;花和叶中类黄酮化合物主要为芦丁、槲皮素-7-O-葡萄糖苷、木犀草素-7-O-葡萄糖苷、木犀草素-7-O-芸香糖苷、槲皮素-3-O-木糖苷、槲皮素-3-O-鼠李糖苷、芹菜素-7-O-葡萄糖苷、山奈酚-3-O-阿拉伯糖苷、山奈酚-3-O-鼠李糖苷,槲皮素-3-O-鼠李糖苷含量最高;盛花期甜叶菊花和叶中酚类总量达（22.31±0.51）mg/g和（91.11±2.32）mg/g。     

高效液相色谱法同时定量分析紫苏不同部位的植物代谢物

该研究旨在建立一种同时测定中国紫苏不同部位中代谢物含量的分析方法,明确紫苏不同部位中代谢物的种类与含量,为此类物质的高效利用提供一定科学依据。利用溶剂提取结合高效液相色谱技术,分别对紫苏叶、紫苏壳、紫苏杆中19种植物代谢物进行测定分析。结果表明,19种物质在55 min内完全分离,峰型和分离度良好,检出限在0.05~0.40 mg/L之间,标准曲线R2均在0.997 6以上,回收率和精密度分别在61.65%~111.42%和1.02%~17.20%之间。应用该方法对12种紫苏样品进行了检测,发现19种化合物在不同紫苏部位中的含量差异较大,在0.04~24.05 mg/g之间。12个样品中均检出2种酚酸和5种黄酮及黄酮苷。紫苏壳和杆中均检出木犀草素,含量为0.05~0.18 mg/g;紫苏叶中化合物含量顺序为迷迭香酸>野黄芩苷>芹菜素-7-O-葡萄糖苷。此外,在紫苏壳中首次检出HMF和糠醛两种呋喃环衍生物。该方法简单高效,仪器要求低,适用于紫苏及其他植物型样品中代谢物的定量检测。     

HPLC-DAD同时测定野菊不同部位8种活性成分的含量

目的建立同时测定中药野菊不同部位(花、叶、嫩茎、老茎)中绿原酸、咖啡酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、木犀草素-7-O-β-D-葡糖苷、芹菜素-7-O-β-D-葡糖苷、蒙花苷和木犀草素含量的高效液相色谱-二极管阵列检测(HPLC-DAD)方法。方法采用Thermo Hypersil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈-0.1%磷酸为流动相,梯度洗脱,流速1.0 ml/min,柱温35℃,检测波长327 nm。结果绿原酸、咖啡酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、木犀草素-7-O-β-D-葡糖苷、芹菜素-7-O-β-D-葡糖苷、蒙花苷和木犀草素进样量分别在0.031~0.620μg、0.009~0.180μg、0.016~0.320μg、0.081~1.620μg、0.021~0.420μg、0.011~0.220μg、0.152~3.040μg、0.017~0.340μg范围内与峰面积呈良好的线性关系,相关系数分别为0.9999,0.9998,0.9997,0.9996,0.9995,0.9996,0.9997,0.9998。绿原酸、咖啡酸、1,3-二咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、木犀草素-7-O-β-D-葡糖苷、芹菜素-7-O-β-D-葡糖苷、蒙花苷和木犀草素的平均加样回收率分别为98.29%,99.09%,99.03%,98.88%,99.22%,99.02%,98.38%,99.02%,RSD(n=6)分别为1.40%,1.05%,0.98%,1.18%,0.98%,0.91%,0.89%,1.26%。结论本法操作简便,准确性和重复性好,可用于中药野菊的质量控制,测定结果显示野菊不同部位有机酸和黄酮类活性成分含量差异较大。     

UHPLC-DAD-ESI-MS/MS法分析紫山药块根和茎叶中酚类物质

本文采用微波辅助法,以80%甲醇作为溶剂提取经冻干后紫山药块根和地上茎叶中的多酚类物质,提取物经超高效液相色谱分离、电喷雾串联三重四级杆质谱正和负离子方式检测分析。根据液相保留时间、紫外吸收、相对分子质量和二级碎片离子等信息,结果表明,紫山药块根和茎叶中酚类物质主要为酚酸、花色苷及黄酮类化合物。分析得到的29种酚类化合物中,5-O-咖啡酰奎宁酸、阿魏酰奎宁酸(tR:12.289)、迷迭香酸、芦丁和槲皮素为块根和茎叶共有组分,块根中另含有芥子酸、芥子酸葡萄糖苷、丁香酸衍生物、香豆酸衍生物、阿魏酸衍生物、芥子酸二葡萄糖苷和花色苷等11种酚类物质。茎叶中除5种共有组分,还含有咖啡酸、咖啡酰奎宁酸甲酯、咖啡酰莽草酸、对香豆酰奎宁酸、香豆酰奎宁酸甲酯、山奈酚-3-O-芦丁糖苷与迷迭香酸甲酯等13种酚类化合物。     

LC-ESI-MS/MS结合标准品比对鉴定野菜鼠曲草中的黄酮类化合物

采用微波辅助提取法,以50%乙醇作为提取剂,提取野菜鼠曲草中的黄酮类化合物,提取物经AB-8大孔树脂纯化后,利用高效液相色谱电喷雾离子化串联质谱（high performance liquid chromatography electrospray ionization tandem mass spectrometry,LC-ESI-MS/MS）结合标准品比对法对其组成进行分析,从中鉴定出8种黄酮和3种酚酸类化合物：3,5-二咖啡酰奎宁酸（4.957 μg/mg）、绿原酸（2.144 μg/mg）、奎宁酸（1.073 μg/mg）、毛地黄黄酮（0.884 μg/mg）、紫云英苷（0.777μg/mg）、金丝桃苷（0.486μg/mg）、芹菜素-7-葡萄糖苷（0.327μg/mg）、槲皮素-3-O-槐糖苷（0.144μg/mg）、槲皮素（0.072 μg/mg）、木犀草苷（0.066 μg/mg）和野黄芩苷（0.056 μg/mg）。其中奎宁酸、芹菜素-7-葡萄糖苷、紫云英苷、槲皮素-3-O-槐糖苷在该植物中尚属首次发现。     

木槿花瓣中的总黄酮成分及抗氧化能力分析

为阐明木槿花瓣中总黄酮的成分及其抗氧化性,本研究利用液质联用技术,通过DPPH、ABTS+自由基清除实验,对木槿花瓣中的总黄酮成分及抗氧化能力进行分析。结果表明:木槿花瓣中含有芹菜素-C-二葡萄糖苷、芹菜素-7-O-芸香糖苷、牡荆苷、山奈酚-O-六碳糖-C-六碳糖苷、圣草酚-7-O-葡萄糖苷、山奈酚-3-O-丙二酰葡萄糖苷-7-O-葡萄糖苷、木犀草素-7-O-葡萄糖苷、麦黄酮-O-丙二酰基-己糖苷、木犀草素-7-O-6-丙二酰基半乳糖苷这9种黄酮类化合物;‘红心’、‘紫色法国酒馆’、‘红色法国酒馆’、‘蓝莓冰沙’和‘牡丹’5个品种的木槿花均具有较好的抗氧化性,以DPPH自由基清除率和ABTS+自由基清除率为指标其等效Trolox当量分别为35.51、49.13、50.28、49.99、49.34 mg Trolox/g（干重）和20.23、27.83、44.11、29.79、35.53 mg Trolox/g（干重）;在影响抗氧化能力因素方面,总黄酮含量是影响木槿花抗氧化性的主要因素,在具体成分中牡荆苷、山奈酚-O-六碳糖-C-六碳糖苷、圣草酚-7-O-葡萄糖和麦黄酮-O-丙二酰基-己糖苷是影响木槿花抗氧化性主要的总黄酮成分。本研究表明木槿花中含有多种生物活性成分和抗氧化能力。     

夏桑菊复方化学成分的研究

目的研究夏桑菊复方的化学成分。方法通过各种柱色谱分离成分,依据理化性质和波谱方法鉴定化合物结构。结果从夏桑菊复方中分离鉴定了13个化合物,分别为：β-谷甾醇（1）,肛胡萝卜苷（2）,三十二烷酸（3）,三十四烷醇（4）,熊果酸（5）,β-香树脂醇（6）,山奈酚（7）,槲皮素（8）,木犀草素（9）,紫云英苷（10）,4’-甲氧基-芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（11）,槲皮素-3-O-β-葡萄糖苷（12）,蒙花苷（13）。结论化合物1．13为首次从该复方中分离得到。     

液相色谱-串联质谱定量分析不同花色菊花中黄酮和有机酸的含量

目的：采用液相色谱-串联质谱对不同花色的菊花中绿原酸、3,5-二咖啡酰奎宁酸、木犀草素、芹菜素、蒙花苷、芹菜素-7-葡萄糖苷和木犀草苷7种主要成分进行定量分析。方法：采用Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18色谱柱，以0.3%甲酸水溶液(A)-0.3%甲酸乙腈溶液(B)为流动相进行梯度洗脱，流速0.3 mL/min，进样量3μL。质谱采用电喷雾离子源，多反应监测方式进行检测。结果：8个菊花品种中蒙花苷和芹菜素-7-葡萄糖苷含量最高。其中，黄花品种‘18-C-16’中蒙花苷含量最高。紫花品种‘19-G-35’、白花品种‘17-Y-1’和黄花品种‘18-C-3’中芹菜素和芹菜素-7-葡萄糖苷的积累量较高。紫花品种‘18-G-38’和黄花品种‘18-C-16’中木犀草素含量较高。绿原酸和3,5-二咖啡酰奎宁酸这2种有机酸主要分布在紫花品种‘19-G-35’和黄花品种‘18-C-16’中。结论：黄、白色菊花更适合选作茶、药菊品种，其次为紫色菊花，而红色菊花品种更适合用作观赏。该研究为茶用及药用菊花的质量评价提供了新的视角，对今后的药食品种选育具有重要意义。     

夏桑菊复方化学成分的研究

目的研究夏桑菊复方的化学成分。方法通过各种柱色谱分离成分,依据理化性质和波谱方法鉴定化合物结构。结果从夏桑菊复方中分离鉴定了13个化合物,分别为:β-谷甾醇(1),β-胡萝卜苷(2),三十二烷酸(3),二十四烷醇(4),熊果酸(5),β-香树脂醇(6),山奈酚(7),槲皮素(8),木犀草素(9),紫云英苷(10),4′-甲氧基-芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷(11),槲皮素-3-O-β-葡萄糖苷(12),蒙花苷(13)。结论化合物1-13为首次从该复方中分离得到。     

Isolation and identification of phenolic compounds from the seeds of Perilla frutescens (L.) and their inhibitory activities against α-glucosidase and aldose reductase

Five phenolic compounds were isolated from the seeds of Perilla (Perilla frutescens L.) using gradient solvent fractionation, silica gel column chromatography, and preparative high-performance liquid chromatography (HPLC). Their chemical structures were identified as caffeic acid-3-O-glucoside (1), rosmarinic acid-3-O-glucoside (2), rosmarinic acid (3), luteolin (4), and apigenin (5) using NMR spectroscopy and HPLC-ESI/MS analysis. Among them, luteolin (4) inhibited α-glucosidase (EC 3.2.1.20) with IC(50) value of 45.4μM. The inhibition kinetic analysed by Dixon plot indicate that luteolin is a noncompetitive inhibitor, and the inhibition constant K(I) was calculated at 45.0μM. Moreover, rosmarinic acid (3) and luteolin (4) inhibited recombinant human aldose reductase (EC 1.1.1.21) with IC(50) values of 11.2 and 0.6μM, respectively. Notably, the inhibition kinetic of luteolin (4) follows a hyperbolic dependence on aldose reductase inhibition by Dixon plot. Thus, inhibition kinetic indicates that luteolin (4) is a mixed-type inhibitor.     

白苏叶醇提物的鉴定及其对中式培根脂质氧化的影响

本文通过对白苏叶醇提物进行成分鉴定及其在中式培根生产加工过程的应用研究,为白苏叶资源的进一步开发利用奠定了理论基础。首先利用大孔树脂及制备色谱对微波辅助提取得到的白苏叶醇提物进行了纯化,然后采用液相色谱-飞行时间质谱和液相色谱-三重四级杆质谱对其成分进行了定性定量分析,并研究了不同浓度的白苏叶醇提物的添加对中式培根加工过程中的脂质氧化的影响。结果表明,白苏叶醇提物共鉴定出了13种化合物。其主要成分为迷迭香酸(74.94 μg/mg)、野黄芩苷(50.08 μg/mg)、芹菜素-6,8-二-C-葡萄糖苷(41.08 μg/mg)。经白苏叶醇提物处理的中式培根的丙二醛值(MDA)和过氧化值(POV)在整个实验周期中均不断升高,但显著低于对照组(P<0.05),同时涂抹的提取物浓度越高,对脂质氧化的抑制程度也就越大,这证明了白苏叶醇提物可有效抑制中式培根的过度脂质氧化。     

高效液相色谱法测定紫苏中5 种有机酸和黄酮的含量

目的：建立以甲醇溶液为萃取剂,结合超声辅助萃取,利用高效液相色谱法同时分离测定紫苏中
的咖啡酸、阿魏酸、迷迭香酸、木犀草素和芹菜素5 种有效成分的方法。方法：采用Phenomenex C18色谱柱
（250 mm×4.6 mm,5 μm）;流动相为甲醇-0.1%冰醋酸溶液,采用梯度洗脱程序;流速1 mL/min;紫外检测波
长320 nm;柱温35 ℃。结果：该方法对咖啡酸、阿魏酸、迷迭香酸、木犀草素和芹菜素分别在0.001 22～61.00
（r=0.999 99）、0.001 06～53.00（r=0.999 99）、0.001 28～64.00（r=0.999 91）、0.001 20～60.00（r=0.999 94）、
0.001 12～56.00 μg/mL（r=0.999 95）范围内线性关系良好,相关系数（r）均大于0.999 91,检出限（RSN=3）依次
是：0.101 9、0.392 6、0.355 9、0.286 2、0.202 5 ng/mL;样品回收率为95.79%～101.41%。结论：本法操作简单快
速、定量准确、灵敏度高、成本低、且对环境友好,为紫苏中咖啡酸、阿魏酸、迷迭香酸、木犀草素和芹菜素的分
离检测提供了一个有效的方法。     

Identification,characterisation, and quantification of phenolic compounds in the antioxidant activity-containing fraction from the seeds of Korean perilla (Perilla frutescens) cultivars

The present research was the first to investigate phenolic compound profiles and antioxidant properties in the seeds of various perilla (Perilla frutescens) cultivars. The 80% methanol extract (50 μg/ml) of this species showed potent antioxidant activities against 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) and 2,2′-azino-bis(3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonic acid) (ABTS) radicals. Phenolic compounds were characterised by nuclear magnetic resonance (NMR) spectroscopy, and ultra performance liquid chromatography with photodiode array detector and electrospray ionisation/mass (UPLC-PDA-ESI/MS) analysis. Nine compounds were elucidated as caffeic acid-3-O-glucoside (1), caffeic acid (2), luteolin-7-O-glucoside (3), apigenin-7-O-glucoside (4), rosmarinic acid-3-O-glucoside (5), rosmarinic acid (6), luteolin (7), apigenin (8), and chrysoeriol (9). The individual and total phenolic contents were remarkably different, especially rosmarinic acid-3-O-glucoside (5) and rosmarinic acid (6) which were the predominant compounds (>95%) in all perilla cultivars. Additionally, Yeupsil cultivar exhibited the highest phenolic content (5029.0 μg/g) and antioxidant activity, whereas the lowest was shown by Dasil (2138.7 μg/g). Therefore, these results suggest that antioxidant effects of perilla seeds are correlated with phenolic contents.     

大花罗布麻不同部位酚类物质含量及其抗氧化活性比较研究

目的：比较大花罗布麻根、茎、叶、花4 个部位中游离态和结合态酚类物质的含量和抗氧化活性的差异,并分析含量与抗氧化活性之间的相关性。方法：采用Folin-Ciocalteu法、NaNO2-Al(NO3)3法分析罗布麻的根、茎、叶、花4 个部位的游离态和结合态总多酚、总黄酮含量,采用DPPH自由基清除能力、ABTS+·清除能力和铁离子还原能力3 种方法评价其体外抗氧化能力差异。结果：大花罗布麻总酚含量次序为：叶＞根＞花＞茎,各样品间存在显著性差异（P＜0.05）。各部位游离酚、结合酚和总多酚含量分别介于3 560.19～6 273.23、13.45～22.01和3 582.2～6 286.68 mg GAE/100 g干质量,其游离态多酚占总酚含量百分比平均为99.60%;游离态黄酮、结合态黄酮和总黄酮含量分别介于1 080.30～2 488.21、9.69～28.59、1 106.81～2 516.80 mg RE/100 g 干质量,其游离态黄酮占总黄酮含量的百分比平均为98.64%。大花罗布麻叶提取物清除DPPH 自由基、ABTS+·能力和总还原力最强,抗氧化活性与总酚含量之间具有良好的线性关系（r＞0.950 0）。结论：大花罗布麻各部位中含有较丰富的酚类物质,具有较强的抗氧化活性。     

Isolation of 3 flavonoids from Mentha longifolia (L.) Hudson subsp. longifolia and determination of their genotoxic potentials by using the E. coli WP2 test system

Flavonoids, abundant in most of plant species, are widely used in medicine and development studies on phytotherapeutic drugs due to their various biological activities. In the present study, 3 flavonoids, apigenin-7-O-glucoside, apigenin-7-O-rutinoside, and apigenin-7-O-glucuronide, were isolated from Mentha longifolia (L.) Hudson subsp. longifolia by using E. coli WP2 genotoxicity assay guided fractionation procedures. Later, the mutagenic and antimutagenic properties of each flavonoid were evaluated by using the same genotoxicity assay. The results showed that all the test compounds have significant antimutagenic activity at tested concentrations with or without S9 activation. The inhibition rates were between 25.3% (apigenin-7-O-glucoside with S9-2.0 μM/plate) and 59.0% (apigenin-7-O-rutinoside without S9-2.0 μM/plate). In conclusion, the results revealed that the 3 flavonoids from Mentha longifolia (L.) Hudson subsp. longifolia have significant antimutagenic activity, and the findings of the present study are valuable for further investigations, focus on the phytotherapeutic drug discovery. PRACTICAL APPLICATION: Apigenin derivatives can be thought as genetically safe at tested concentrations because they did not show mutagenic activity. Furthermore, they have also significant antimutagenic activity. These are valuable for further research focus on phytotherapeutic drug discovery and development.     

紫苏细胞悬浮培养生产迷迭香酸条件研究

通过诱导紫苏下胚轴和子叶外植体产生愈伤组织,建立细胞悬浮培养体系,以提高细胞产量及细胞中迷迭香酸含量。结果表明,在MS液体培养上添加3.0mg/L 6-芐氨基嘌呤(6-BA)＋0.3mg/L萘乙酸(NAA)培养基上,下胚轴愈伤组织呈嫩黄色松散状态,出愈时间短,出愈率可达100%。紫苏细胞悬浮培养产生迷迭香酸的最佳条件为培养时间7d、接种量鲜质量浓度20g/L、摇床转速110r/min、蔗糖30g/L、L-苯丙氨酸0.15g/L,此条件下可获得高达2.283mg/g的迷迭香酸。     

不同采收期虫草参多酚对羟基自由基介导的DNA氧化损伤保护作用的研究

采用Folin-酚法测定两个采收地（S1和S2）三个采收期（T1、T2和T3）虫草参游离酚和结合酚提取物的多酚含量。采用HPLC法检测多酚提取物中没食子酸、绿原酸、咖啡酸和迷迭香酸的含量。同时,评价了虫草参多酚提取物对羟基自由基（·OH）介导的DNA氧化损伤的保护作用。结果显示,虫草参游离酚和结合酚提取物的多酚含量范围分别为86.53~181.40和89.70~193.58 μg GAE/mg;咖啡酸在结合酚中含量较高,且S2采收地高于S1;而迷迭香酸在游离酚中含量较高,且在T1和T3采收期,S2采收地的高于S1,相反在T2采收期,S2采收地的低于S1;虫草参游离酚（25~300 μg/mL）和结合酚（3.125~50 μg/mL）提取物对DNA氧化损伤保护作用的双螺旋百分比范围分别为1.81%~55.04%和1.67%~70.83%。相较于游离酚,结合酚提取物表现出更好的保护效果。     

红薯叶不同溶剂提取物抗氧化性及活性成分鉴定

研究不同极性溶剂对红薯叶中酚类化合物的提取以及提取物抗氧化性的影响,并鉴定提取物中的主要抗氧化成分组成。分别采用极性不同的7 种溶剂（蒸馏水、甲醇、无水乙醇、丙酮、正丁醇、乙酸乙酯和氯仿）从红薯叶中提取多酚,并评价提取物中总酚、总黄酮和花青素的含量,以及对1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除能力和还原能力,最后运用高效液相色谱-串联质谱（high performance liquidchromatography tandem mass spectroscopy,HPLC-MS/MS）技术分析抗氧化活性最好的提取物中多酚的主要组成成分。结果表明：提取溶剂的极性对红薯叶中多酚类化合物的提取效率和提取物抗氧化活性有很大的影响,水提物具有最高的粗提物得率（（37.13±1.60）%）,而甲醇提取物中总酚含量（13.80 mg GAE/g）和总黄酮含量（（5.68±0.35）mg QE/g）最高,且具有最好的DPPH自由基清除能力（IC50为0.32 mg/mL）与还原能力（ρ0.5为0.95 mg/mL）。采用HPLC-MS/MS从红薯叶甲醇提取物中鉴定9 种、初步鉴定3 种酚类化合物,鉴定的化合物为咖啡酸、对羟基苯甲酸、1-咖啡酸奎宁酸、3-咖啡酸奎宁酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C、3,4,5-三咖啡酰奎尼酸和金丝桃苷。