白毛藤多糖诱导胰腺癌细胞凋亡的研究

白毛藤多糖以不同浓度作用于胰腺癌细胞,采用Hoechst33258染色测定凋亡情况,RT-PCR检测caspase-3蛋白的表达。结果表明,白毛藤多糖的抗肿瘤作用可能与细胞凋亡有关。     

木枣多糖的理化特性研究

木枣经超声波辅助酸性缓冲液浸提、醇沉、脱蛋白和脱色工艺制得木枣多糖,测定其溶解性与单糖组成,采用Q2000型差示扫描量热仪和ZX7M-AR1000型流变仪研究木枣多糖的稳定性和流变性,为其在食品工业中的应用提供理论数据支持。实验结果表明,木枣多糖溶于热水,难溶于冷水,不溶于有机试剂;是由鼠李糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成的杂多糖。热学特征分析表明木枣多糖具有较好的热稳定性;木枣多糖溶液为非牛顿假塑性流体,表现出剪切变稀的特性;因此木枣多糖适用于在食品生产工业中做稳定剂。     

软骨多糖通过线粒体途径诱导L1210细胞凋亡

研究了软骨多糖诱导L1210细胞发生凋亡的具体机制。采用TUNEL检测细胞凋亡,化学发光法及免疫印迹法检测Caspase-8、Caspase-9及Caspase-3/7酶活性变化,细胞免疫荧光检测Bax/Bcl-2蛋白变化。结果表明软骨多糖可促进L1210细胞发生凋亡,提高Bax/Bcl-2的比率,活化了Caspase-9和Caspase-3蛋白酶,而Caspase-8蛋白酶活性无变化。这些结果表明软骨多糖诱导L1210细胞通过线粒体途径发生了凋亡。     

木枣多糖抗小鼠运动疲劳的实验研究

建立递增强度游泳训练模型,对小鼠灌服木枣多糖溶液,4w后测定血糖、肌糖原、肝糖原、血乳酸、血清肌酸激酶（CK）、乳酸脱氢酶（LDH）、血清抗氧化酶活性等生化指标。结果表明：服用一定剂量木枣多糖能提高肌糖原和肝糖原含量,减少力竭运动后血乳酸的堆积,维持血糖恒定,使上述血清酶呈现不同程度的良性变化,延长小鼠力竭时间。说明木枣多糖能够延缓机体运动性疲劳的产生。     

酶法提取木枣多糖对游泳小鼠血清酶的影响

目的:从木枣多糖中寻找和筛选抗疲劳组分,探讨其对运动机体的作用机制。方法:用不同方法从木枣中提取得到两种粗多糖,以雄性小鼠为实验对象,采用一次性力竭试验,筛选效果最强组分;又建立递增强度游泳训练模型,对小鼠灌服木枣多糖溶液,四周后测定小鼠血清肌酸激酶(CK)、谷草转氨酶(GOT)、谷丙转氨酶(GPT)、乳酸脱氢酶(LDH)、血清抗氧化酶活性等指标,结果显示:服用一定剂量酶提木枣多糖能使上述血清酶呈现不同程度的变化。结论:说明木枣多糖可能具有提高运动能力的作用。     

木枣多糖ZJP2的初步结构特征及抗氧化活性研究

本文经水提、醇沉、脱蛋白和脱色等工艺提取木枣粗多糖(CP),经DEAE-52离子交换层析和Sephadex G-100柱层析纯化得到单一木枣多糖组分(ZJP2),并对CP和ZJP2进行初级结构分析及抗氧化活性测定。结果表明:CP和ZJP2的酯化度分别为38.40%和47.10%,糖含量分别为71.95和91.29%,糖醛酸含量分别为51.05%和58.27%,分子量分别为59.1 ku和13.7 ku;化学衍生化结合GC分析表明ZJP2由鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、半乳糖和半乳糖醛酸5种单糖组成,其相对摩尔比为4.5:26.1:1.4:11.9:18.1;碘-碘化钾试验和红外光谱分析证明ZJP2具有典型的多糖类结构特征,并且可能有较多的侧链和分支;体外抗氧化分析表明ZJP2的DPPH自由基和羟自由基清除力均强于CP,在样品浓度为6.0 mg/m L时,ZJP2的DPPH自由基清除率为71.34%,羟自由基清除率为75.45%,清除力与样品浓度呈明显的量效关系。     

石参提取物诱导MKN45细胞凋亡的初步研究

通过石参提取物作用于人胃癌MKN-45细胞,检测其对细胞活性的影响并探讨其作用机制。利用MTT法检测石参提取物对细胞活性的影响;采用AO/EB双荧光染色检测石参提取物对细胞形态的影响;使用JC-1荧光探针检测线粒体膜电位变化;利用Western blot检测石参提取物对细胞凋亡内源性通路的信号蛋白表达。结果表明浓度为20、30mg/mL的石参提取物能够抑制MKN-45细胞的活性,使细胞形态发生改变;10、20、30mg/mL的石参提取物可引起细胞线粒体膜电位下降,并引起Bcl-2的表达量下降,Bax、细胞色素c和caspase-3的表达量增加,PARP被剪切。提示石参提取物可通过线粒体途径诱导MKN-45细胞凋亡。      

苦荞茶多糖诱导人肺腺癌A549细胞凋亡的线粒体机制

目的：从线粒体调控机制的角度探讨苦荞茶多糖（tartary buckwheat tea polysaccharide,TBTP）对人肺腺癌A549细胞凋亡的影响。方法：应用水提醇沉法结合超声辅助技术提取的TBTP处理A549细胞,分为空白对照组和不同质量浓度TBTP处理组。采用3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐法和流式细胞术检测细胞增殖和凋亡水平,采用DHE和Mito SOX染色检测细胞和线粒体活性氧簇水平,采用JC-1染色检测线粒体膜电位变化,采用Western blot法检测凋亡相关蛋白Bcl-2相关X蛋白（Bcl-2 associated X protein,Bax）、Bcl-2、剪切型半胱氨酸蛋白酶（Caspase）-3、细胞色素c的水平。结果：TBTP呈剂量和时间依赖性抑制A549细胞增殖。TBTP处理A549细胞24 h可呈剂量依赖性地促进细胞凋亡。TBTP处理能够显著增加A549细胞和线粒体内活性氧水平,降低线粒体膜电位;同时,TBTP能够增加促凋亡蛋白Bax和剪切型Caspase-3的表达、抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的表达,促进A549细胞线粒体细胞色素c外流。结论：TBTP能够促进活性氧簇生成、降低线粒体膜电位,进而抑制A549细胞增殖,促进细胞凋亡。     

熊猫豆提取物抑制肿瘤活性及诱导结肠癌细胞Caco-2凋亡机制研究

为了探究熊猫豆的抑制肿瘤活性及其诱导Caco-2凋亡的机制,采用80%丙酮浸提法制备熊猫豆粗提物,通过MTT法测定其对人结肠癌细胞Caco-2增殖的抑制效果,琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术、酶联免疫分析等技术与方法检测细胞周期、DNA及凋亡相关蛋白相对表达量的变化。结果发现,与空白对照组相比,0.1~1.0 mg/m L熊猫豆丙酮提取物对Caco-2细胞增殖有明显的抑制作用,且呈现剂量效应关系,IC50为0.72 mg/m L。0.4、0.6、0.8 mg/m L熊猫豆丙酮提取物处理72 h后的Caco-2细胞,可以观察到典型的凋亡细胞的梯状DNA条带,细胞周期G1期延长,Cyt C、caspase-9、caspase-3蛋白的相对表达量均有显著上升。熊猫豆丙酮能够抑制结肠癌细胞Caco-2增殖,这种抑制作用是通过阻滞细胞周期和诱导线粒体通路介导的细胞凋亡实现的。     

金莲花总黄酮诱导人HT-29结肠癌细胞凋亡机制的研究

本文研究了金莲花总黄酮乙醇提取物(TFETC)诱导人HT-29结肠癌细胞凋亡的作用机制。MTT法测定TFETC对HT-29细胞增殖的影响,200μg/mL浓度TFETC对癌细胞的抑制率达到81%。通过4,6-diamidino-2-phenylindole(DAPI)法和流式细胞术检测到金莲花总黄酮乙醇提取物可以诱导癌细胞凋亡,200μg/mL浓度TFETC处理的癌细胞通过显微镜观察出现凋亡,亚G1期DNA含量达到28.9%。逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)法测定TFETC对HT-29细胞内Bcl-2,Bcl-xL,Bax,caspase-9,caspase-3和COX-2等基因表达的影响。TFETC在mRNA水准上下调抗凋亡基因Bcl-2和Bcl-xL,上调促凋亡基因Bax,caspase-9和caspase-3的表达。此外,TFETC还可抑制HT-29细胞内COX-2基因的表达,并呈剂量效应关系。本研究结果显示金莲花总黄酮乙醇提取物可以通过内源性线粒体途径诱导人HT-29结肠癌细胞的凋亡,同时金莲花总黄酮乙醇提取物还可通过下调COX-2基因的表达抑制HT-29细胞的增殖。     

苦参多糖促人肺癌A549细胞的凋亡作用

探究苦参多糖对人肺癌细胞株增殖、凋亡、侵袭、迁移能力的影响。选取人肺癌A549细胞株,经过培养后分为空白组、药物对照组以及低、中、高浓度组,检测各组细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移能力,并对凋亡相关蛋白Bcl-2、PI3K、Akt表达进行测定。研究结果显示,72 h时高浓度组细胞增殖率为18.65%,凋亡率为79.55%,均优于其他各对照组。高浓度组细胞侵袭数、迁移数均低于其他各组（p<0.05）。高浓度组细胞Bcl-2、PI3K、Akt相对表达量分别为0.32、0.40、0.34,均低于其他各组（p<0.05）。在苦参多糖干预下,肺癌细胞增殖率下降,凋亡率上升,侵袭、迁移能力受到明显的抑制,凋亡相关蛋白Bcl-2、PI3K、Akt表达受到明显的调控,且其能力呈现明显的浓度依赖性,说明苦参多糖能够抑制肺癌细胞增殖、侵袭、迁移,促进肺癌细胞凋亡,为肺癌的临床治疗提供一定的理论依据。     

枸杞多糖诱导人宫颈癌Hela细胞凋亡的形态学研究

采用热水法提取药材枸杞子中的枸杞多糖。本研究通过MTT 实验发现3.125～200mg/L 质量浓度范围内的枸杞多糖能显著抑制宫颈癌Hela 细胞的增殖;采用荧光显微镜、透射电镜和激光共聚焦扫描显微镜观察发现经枸杞多糖处理过的Hela 细胞呈现出典型的凋亡特征;原位末端脱氧核苷酸转移酶标记法进一步证实经枸杞多糖处理过的Hela 细胞呈现凋亡特征。结果提示枸杞多糖是一种潜在的抗癌复合物,其关键作用机制是诱导癌细胞凋亡。     

生物活性肽调控细胞凋亡作用机制的研究进展

生物活性肽相较于传统药物具有副作用小、安全性高的特点,逐渐在被人们接受,在治疗疾病和开发功能性食品的过程中极为重要。氧化应激对机体造成严重损害,如何清除氧化应激产生的活性氧是我们目前面临的重大难题,而生物活性肽能够抑制氧化应激诱导的细胞凋亡。本文对生物活性肽通过线粒体途径和死亡受体途径抑制正常细胞凋亡和促进癌细胞凋亡以及通过促进线粒体自噬来调控细胞凋亡的作用机制进行综述,以期充分了解生物活性肽的生理功能及其作用机制,为生物活性肽作用机制的深入研究及其开发利用提供参考依据。     

灵芝多糖抗肿瘤的细胞机制及作用通路研究

灵芝多糖是灵芝的主要活性物质,对荷瘤机体有免疫调节作用,包括提高抗原提旱细胞、单核吞噬细胞功能,增强细胞和体液免疫功能,在体内引起一系列信号级联反应.但灵芝多糖的免疫调节及抗肿瘤作用机制尚未十分明确,仍有许多问题尚待解决.     

白扁豆多糖对神经细胞缺氧性凋亡的保护机制

目的：模拟体内环境,研究白扁豆多糖（dolichos bean seed polysaccharide,DBSP）对胎鼠大脑 皮层神经细胞缺氧性凋亡的保护机制。方法：原代培养胎鼠大脑皮层神经细胞;建立缺氧/复氧（anoxia/ reoxygenation,A/R）损伤模型;实验分4 组：对照组、A/R组、白扁豆多糖预处理组（DBSP＋A/R组）、阻断剂组 （LY294002＋DBSP＋A/R组）;用比色法检测细胞活性与乳酸脱氢酶的释放水平;流式细胞仪分析测定Ca2＋ 相对浓度、活性氧、线粒体膜电位和细胞凋亡的变化;Western blot法检测总蛋白激酶B（total protein kinase B, T-Akt）和磷酸化蛋白激酶B（phosphorylated protein kinase B,p-Akt）蛋白表达。结果：从细胞活性来看,A/R组比 对照组明显降低（P＜0.01）,表明A/R对神经细胞产生了损伤。同时,与A/R组相比,DBSP＋A/R组细胞活性显著 上升、细胞凋亡明显减少（P＜0.01）,乳酸脱氢酶的释放水平下降,表明DBSP对受A/R损伤的神经细胞产生保护 作用,进一步结果显示,与A/R组相比,DBSP＋A/R组中Ca2＋相对浓度和活性氧生成显著降低、显著增加线粒体膜 电位和p-Akt蛋白表达（P＜0.01）。而与DBSP＋A/R组相比,LY294002＋DBSP＋A/R组中p-Akt蛋白表达显著减少 （P＜0.01）,同时细胞活性与线粒体膜电位下降,且LDH的释放水平、Ca2＋相对浓度、活性氧、细胞凋亡明显增加 （P＜0.05）,表明DBSP对神经细胞的保护作用受到PI3K-Akt信号通路抑制剂LY294002的抑制作用而被削弱。结 论：DBSP可通过PI3K-Akt信号转导通路抑制神经细胞的缺氧性凋亡。     

白桦脂酸对HepG2细胞的诱导凋亡作用及其机制

为研究白桦脂酸对人的HepG2细胞的凋亡作用及其机制。采用不同质量浓度的白桦脂酸处理HepG2细胞,MTT法测定白桦脂酸对HepG2细胞增殖影响;流式细胞术Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡,PI单染法检测细胞周期,罗丹明123检测线粒体膜电位。MTT分析表明,白桦脂酸可抑制HepG2细胞增殖并呈剂量依赖关系。白桦脂酸对HepG2细胞24,48,72 h的半抑制质量浓度IC_(50)分别为52,26,17.5μg/mL。流式细胞仪检测结果表明,用20,30,40μg/mL的白桦脂酸分别处理48 h,总凋亡率分别为49.82%,55.575%,57.46%。细胞周期结果表明,随着白桦脂酸质量浓度的增加,G1期的细胞比例下降,S期的细胞比例增加,说明出现S期的阻滞。用质量浓度分别为20,40,80μg/mL的白桦脂酸处理的各组线粒体膜电位分别为83.63,73.63,64.3,与对照组89.25相比,均明显降低,这表明白桦脂酸诱导细胞凋亡可能与线粒体途径有关。白桦脂酸可抑制肝癌HepG2细胞的增值,诱导HepG2细胞凋亡,这一机制可能与线粒体途径有关,通过将细胞阻滞在S期来实现。     

沙棘多糖对肝癌细胞Hep-G2生长、凋亡、迁移和侵袭的影响

目的:研究纯化沙棘多糖(SBP-3)通过p38通路对肝癌细胞Hep-G2增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响。方法:将不同浓度SBP-3作用于Hep-G2细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡、划痕试验,细胞迁移侵袭试验(Transwell)检测细胞迁移及侵袭情况,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测p-p38、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平。结果:经SBP-3作用48 h,125,250,500,1 000μg/mL剂量组细胞抑制率均显著升高(P<0.05);125,250,500μg/mL各剂量组均能诱导Hep-G2细胞产生凋亡作用(P<0.01),且细胞凋亡率随SBP-3浓度的增加而逐渐升高;SBP-3能降低Hep-G2细胞侵袭和迁移能力(P<0.01),抑制p-p38、MMP-2和MMP-9蛋白表达(P<0.01)。结论:沙棘纯化多糖SBP-3能够抑制肝癌细胞Hep-G2的增殖、迁移和侵袭,促进凋亡,这些作用可能是通过调节p38信号通路抑制MMP-2和MMP-9蛋白表达来实现。     

吕梁木枣多糖与交城骏枣多糖的抗疲劳作用比较研究

产木枣的吕梁和产骏枣的交城是我国最大的枣类生产基地,枣类在我国已被广泛种植,其药食两用的效果在我国也被广泛地应用。现今,红枣类产品大部分以干品销售,而木枣主要销售新鲜的产品。随着储藏时间的增长,两种枣类中的成分均会出现损失,导致产品品质下降。研究通过对两地枣类中的多糖成分抗疲劳功效研究,一方面为木枣和红枣的销售提供更多的加工途径,另一方面为抗疲劳药物的研发也提供一些新的思路。     

益气复生方对脂多糖诱导胃癌细胞SGC-7901炎症的改善作用

目的考察益气复生方对脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的胃癌细胞SGC-7901SGC-7901增值作用的影响及对其产生的炎症因子的改善作用。方法培养人胃癌细胞SGC-7901,用LPS诱导SGC-7901细胞,用MTS法检测不同浓度的LPS对SGC-7901细胞活力的影响,用浓度为250、50、10 mg/m L益气复生方作用于细胞,采用ELISA法检测其细胞上清液中炎症因子的释放量。结果益气复生方能够显著降低SGC-7901SGC-7901细胞的存活率,对胃癌细胞起到很好的抑制作用,能够显著改善LPS诱导的胃癌细胞肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素6(IL-6)、白介素8(IL-8)炎症因子的释放,能够促进干扰素(IFN-γ)的释放量。结论益气复生方可以抑制LPS刺激的SGC-7901SGC-7901细胞炎症因子的释放,对胃癌细胞具有一定的改善作用。     

泥鳅体表粘液多糖诱导SGC—7901细胞凋亡机理研究

探讨泥鳅体表粘液多糖（PML）对人胃癌SGC-7901细胞凋亡作用和机制。采用Sevege法对PML进行分离、纯化,用紫外分光光度法、凝胶色谱法和高效液相色谱法对其鉴定后作用于SGC-7901细胞中。采用MTT法鉴定PML对该细胞的抑制作用,光显下观察细胞形态结构变化,流式细胞术检测细胞周期及凋亡,Western Blot检测Bax、Bcl-2蛋白表达变化。结果表明,用Sevege法提取PML纯度高、成分单一。MTT法,10～270μg/mL PML处理SGC-7901细胞24、48、72h,抑制作用随PML浓度和时间增加而逐渐增强。流式细胞术检测细胞凋亡,凋亡率随PML浓度和作用时间增加而逐渐增高。Western Blot检测,细胞经10～270μg/mL PML处理24、48h后Bcl-2和Bax蛋白表达随浓度和时间增加分别增强和减少,说明PML对SGC-7901细胞凋亡有促进作用,其机理与对Bcl-2与Bax基因的调控有关。