发芽糙米中多糖提取工艺优化及抗氧化研究

以发芽糙米为原料,用超声波辅助复合酶的方法提取发芽糙米中的多糖类物质,以发芽糙米多糖得率为指标进行单因素试验,并通过响应曲面试验确定超声波辅助复合酶法提取发芽糙米多糖的最佳工艺条件,通过测定DPPH自由基、超氧阴离子和羟基自由基的清除能力,检测提取的多糖抗氧化活性。结果表明:复合酶(木瓜蛋白酶∶纤维素酶:果胶酶的添加质量比例为4∶3∶2)的酶解pH值为6,酶解时间2.5 h,酶解温度为50℃,酶添加量为1.5%,此条件下多糖得率为37.58%。抗氧化性研究发现发芽糙米多糖对DPPH自由基和超氧阴离子,羟基自由基都具有较强的抗氧化作用。     

藕节多糖的复合酶提取工艺优化及其抗氧化活性

目的：优化复合酶法提取藕节多糖的工艺，并研究其体外抗氧化活性。方法：在单因素试验结果基础上，以酶添加量、酶解温度、酶解时间及液料比为自变量，多糖得率为响应值，利用Box-Behnken响应面法进行工艺优化。以DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基清除率为指标考察藕节多糖的体外抗氧化活性。结果：复合酶由纤维素酶、果胶酶和木瓜蛋白酶按质量比1:1:1组成。复合酶提取藕节多糖最佳工艺为酶添加量1.6%、酶解温度53℃、酶解时间89min、液料比13:1 mL/g、酶解p H5.5，此条件下藕节多糖得率为6.57%，与回归模型的理论预测值6.54%误差小于5%。藕节多糖对DPPH自由基、羟自由基和超氧阴离子自由基均具有较强的清除作用，半数抑制浓度分别为1.079、1.281、0.984 mg/mL。结论：复合酶法可显著提高藕节多糖得率，工艺简便可行，获得的藕节多糖具有体外抗氧化活性。     

莪术挥发油酶法提取工艺及抗氧化活性研究

试验旨在研究纤维素酶辅助水蒸气蒸馏法提取莪术挥发油的工艺,并探究其抗氧化活性。在单因素试验结果基础上,以酶添加量、酶解pH及酶解时间为自变量,挥发油得率为响应值,利用Box-Behnken响应面法进行工艺优化。以DPPH和羟自由基清除率为指标考察莪术挥发油的体外抗氧化活性。纤维素酶酶解提取莪术挥发油的最佳工艺为酶添加量1.6%、酶解pH 4.6、酶解时间2.1 h、酶解温度50℃、料液比1∶10 g/mL,此条件下挥发油得率为5.24%,显著高于水蒸气蒸馏法得率2.17%。莪术挥发油对DPPH和羟自由基具有较强的清除作用,半数抑制浓度分别为0.783 mg/mL和0.814 mg/mL。纤维素酶辅助提取法可显著提高莪术挥发油得率,工艺简便可行,获得的莪术挥发油具有抗氧化活性。     

桑葚籽黄酮超声酶解提取工艺优化及其抗菌、抗氧化活性

采用复合酶超声辅助提取法提取葚籽黄酮,并分析其抗氧化活性和抑菌活性。通过单因素实验和Box-Behnken响应面分析法考察不同生物酶比例、复合酶酶添加量、酶解温度、酶解时间和超声时间对黄酮得率的影响,检测提取物对DPPH自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基的清除作用,并通过牛津杯法检测其抑菌活性。结果表明:最佳酶为2:1的果胶酶和纤维素酶组合的复合酶,最佳提取工艺条件为:复合酶添加量0.3 mg/mL、酶解温度55 ℃、酶解时间80 min、超声时间20 min。此条件下桑葚籽黄酮的提取得率为5.32 mg/g。提取所得黄酮具有较高的抗氧化活性,且抗氧化活性与黄酮质量浓度呈一定效量关系。桑葚籽黄酮对羟自由基的清除效果最强,当黄酮质量浓度为1.00 mg/mL时,其对DPPH自由基和羟自由基的清除率分别为 83.90%和87.27%,抗超氧阴离子自由基活力为165.51 U/L。桑葚籽黄酮对沙门氏菌、大肠杆菌、金黄色葡萄球菌和酵母菌均具有抑制作用,且最低抑制浓度分别为0.75、1.50、1.00和2.00 mg/mL。     

山银花多糖提取工艺优化及其抗氧化活性研究

目的:研究纤维素酶提取山银花多糖的最佳工艺条件,并探讨其体外抗氧化活性。方法:以山银花多糖得率为响应值,在单因素试验基础上,以酶解时间、液料比、酶解p H、酶添加量为试验因素,采用响应面法建立数学模型,筛选最佳提取工艺条件。山银花多糖抗氧化活性检测使用DPPH、·OH和O_2~-·自由基清除能力体系。结果:纤维素酶酶解提取山银花多糖最佳条件为:酶解时间80 min,液料比14.6 mL/g,酶解pH 5.2,酶添加量8.0 mg/mL,酶解温度50℃,在此条件下山银花多糖实际得率为15.76%,与理论预测值16.05%相对误差小于5%。液料比对多糖得率影响最显著,酶添加量、酶解pH次之,酶解时间影响最小。山银花多糖具有较强的抗氧化活性,对DPPH、·OH和O_2~-·自由基清除的半数抑制浓度IC_(50)分别为0.941、1.238、1.786 mg/mL。结论:获得山银花多糖纤维素酶酶法提取的最佳条件,该工艺条件方便可行,获得的多糖具有较强的自由基体外清除能力。     

盐析辅助酶提取龙牙楤木皂苷及其抗氧化活性研究

以龙牙楤木为试验原料,采用盐析辅助酶法提取龙牙楤木皂苷,在单因素试验的基础上,采用响应面优化提取工艺并对比研究盐析辅助酶法、溶剂提取法制备的龙牙楤木皂苷抗氧化活性的区别。结果表明盐析辅助酶法最佳工艺为:酶解pH 5.405、酶解温度61.3℃、磷酸氢二钠添加量7.74%、酶解时间90 min、纤维素酶添加量1.5%,在此条件下龙牙楤木皂苷得率3.97%,该方法与溶剂提取法相比,可显著提高皂苷得率。抗氧化活性试验表明,盐析辅助酶法和溶剂提取法制备的龙牙楤木皂苷对DPPH自由基的IC50值依次为0.342 mg/mL、0.365 mg/mL,对超氧阴离子自由基的IC50值依次为1.220 mg/mL、1.432 mg/mL,总还原能力由强到弱为:Vc盐析辅助酶法溶剂提取法。本试验研究为龙牙楤木皂苷高效提取以及初步明确其抗氧化功能提供科学数据参考。     

纤维素酶法提取百里香黄酮的工艺优化研究

利用纤维素酶对百里香中黄酮进行了提取工艺研究。考察了酶解温度、酶量、pH和酶解时间对黄酮得率的影响。百里香黄酮最佳提取工艺:酶解温度45℃,酶量0.2%,pH 5.0,酶解时间1.5h,黄酮得率可达1.528%。抗氧化实验表明百里香黄酮具有较强的抗氧化活性,黄酮提取物浓度为1.0mg/mL时,对DPPH自由基的清除率达73.84%,对羟基自由基的清除率为51.73%。     

酶法提取地桃花多糖的工艺优化及其抗氧化活性

目的:研究纤维素酶提取地桃花多糖的最佳条件,并探讨其体外抗氧化活性。方法:以地桃花多糖得率为响应值,在单因素试验基础上,以液料比、酶解温度、酶解时间、酶添加量为试验因素,采用响应面法建立数学模型,筛选最佳提取工艺条件;并使用DPPH和·OH自由基清除能力体系检测地桃花多糖的抗氧化活性。结果:纤维素酶酶解提取地桃花多糖最佳条件为:酶添加量10.8 mg/mL、酶解时间72 min、液料比7:1 mL/g、酶解温度43℃、pH为5.0,在此条件下地桃花多糖得率为13.32%,与理论值13.37%相对误差小于5%。地桃花多糖具有较强的抗氧活性,对DPPH和·OH自由基清除的半数抑制浓度IC₅₀分别为1.082、3.202 mg/mL,但与维生素C比较,抗氧化活性较弱。结论:通过响应面法获得地桃花多糖纤维素酶酶法提取的最佳条件,该工艺条件方便可行,提取到的多糖具有较强的自由基清除能力。     

芒果果皮多糖酶法提取及其体外抗氧化活性

研究纤维素酶提取芒果果皮有效成分多糖的最佳条件,并探讨其体外抗氧化活性。以芒果果皮多糖得率为响应值,在单因素试验基础上,以酶解pH值、酶解时间、酶添加量、液料比为试验因素,采用响应面法建立数学模型,筛选最佳提取工艺条件;芒果果皮多糖体外抗氧化活性检测使用DPPH·和·OH清除能力体系。纤维素酶酶解提取芒果果皮多糖最佳条件为:酶解pH值5.0,酶解时间100.0 min,酶添加量10.5 mg/mL,液料比7.6∶1(mL/g)、酶解温度45℃,在此条件下芒果果皮多糖得率为5.17%,与理论值5.28%相对误差小于5%。酶解时间对多糖得率影响最显著,液料比、酶添加量次之,酶解pH值影响最小。芒果果皮多糖具有较强的体外抗氧活性,对DPPH·和·OH清除的半数抑制浓度IC50分别为1.385、3.612 mg/mL,但与维生素C比较,抗氧化活性较弱。     

超声波辅助酶法提取玉米皮阿魏酸的工艺优化及抗氧化研究

采用响应面法优化超声波辅助木聚糖酶联合提取玉米皮中阿魏酸工艺,建立阿魏酸得率与超声温度、超声时间、酶添加量、酶解时间四因素的数学模型,确定玉米皮阿魏酸的最适提取工艺参数;以清除自由基能力评价玉米皮阿魏酸的抗氧化活性。结果表明:玉米皮阿魏酸提取的最佳工艺条件为超声温度33℃、超声时间80 min、酶添加量0.83%、酶解时间65 min、酶解温度50℃,阿魏酸得率为3.47 mg/g。在此优化条件下,玉米皮阿魏酸对DPPH自由基、羟自由基及超氧阴离子自由基均具有较强清除作用,半数抑制浓度分别为0.552、0.282和0.111 mg/m L。     

厚朴多糖提取工艺及其体外抗氧化活性

通过Box-Behnken试验优化提取厚朴多糖的工艺;以超氧阴离子自由基、1,1-二苯基-二苦基肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基和2,2’-连氮基-双-（3-乙基苯并噻唑-6-磺酸）（ABTS＋•）清除能力,Fe2＋螯合力、铁离子还原抗氧化力（ferric reducing antioxidant power,FRAP）为指标,探究厚朴多糖的体外抗氧化活性。结果表明,提取厚朴多糖的最佳工艺条件为pH 7.3、液固比32∶1（mL/g）、提取温度78 ℃、提取时间139 min,此条件下多糖提取率达3.35%～3.52%。体外抗氧化活性结果表明,厚朴多糖超氧阴离子自由基清除力为（18.72±2.12） μmol VC/mg,DPPH自由基清除能力达（0.59±0.05） μmol Trolox/mg,ABTS＋•清除能力为（0.57±0.04） μmol Trolox/mg,Fe2＋螯合力为（0.38±0.02） μmol EDTA/mg,FRAP值为（2.19±0.31） μmol Trolox/mg。     

响应面法优化复合酶提取芦荟多糖工艺及其抗氧化活性分析

研究复合酶提取芦荟多糖的工艺,并测定其抗氧化性。在单因素试验的基础上,利用响应面法对复合酶提取芦荟多糖的条件进行了优化,通过测定芦荟多糖的总抗氧化能力、DPPH自由基和羟自由基清除能力研究其抗氧化性。结果显示,当料液比1∶30（g/mL）、果胶酶与纤维素酶配比1∶3、pH 4.5时,优化最佳提取条件为加酶量0.3%、酶解温度48 ℃、酶解时间40 min,此条件下芦荟多糖的提取率为5.65%,和超声波辅助法相比提取率提高了4.2%。芦荟多糖具有较好的抗氧化性,随着质量浓度的增加,其总抗氧化能力、DPPH自由基和羟自由基清除能力逐渐增强,在25 mg/mL时其DPPH自由基和羟自由基清除率分别达到75%和90%。复合酶法是一种新的、有效的芦荟多糖提取方法;芦荟多糖具有较好的抗氧化性。     

益智仁总黄酮超声辅助提取工艺优化及其抗氧化活性

为优化益智仁总黄酮的超声辅助提取工艺,通过单因素试验考察乙醇体积分数、液料比、超声时间和超声功率对总黄酮得率的影响,在单因素试验的基础上,通过Box-Behnken试验设计,获得益智仁总黄酮超声辅助提取的最佳工艺;以总抗氧化能力、清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl radical,DPPH）自由基能力、清除超氧阴离子自由基能力、螯合铁离子能力为指标,评价了益智仁总黄酮的抗氧化活性。结果表明：超声辅助提取益智仁总黄酮的最佳工艺条件为乙醇体积分数65%、液料比40∶1（mL/g）、超声时间35 min、超声功率360 W,在此条件下益智仁总黄酮得率为0.50%;益智仁总黄酮具有较好的抗氧化活性,总抗氧化能力、清除DPPH自由基能力、清除超氧阴离子自由基能力和螯合铁离子能力均与黄酮质量浓度表现出一定的量效关系;益智仁总黄酮清除DPPH自由基、清除超氧阴离子自由基和螯合铁离子能力的半数有效浓度（EC50）分别为（2.85±0.20）、（0.87±0.05）g/L和（2.45±0.30）g/L。     

酶解缫丝蚕蛹蛋白抗氧化肽的分离与稳定性研究

目的：研究酶解缫丝蚕蛹蛋白抗氧化肽的分离和稳定性,为其开发应用提供基础数据。方法：超滤分离酶解缫丝蚕蛹蛋白抗氧化肽,比色法测定其抗氧化能力。结果：超滤分级后得到分子质量为200～3 000 D的酶解缫丝蚕蛹蛋白抗氧化肽对O2－•、•OH、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基的IC50分别为18.85 mg/mL、3.13 mg/mL、35.23 μg/mL。该抗氧化肽经过4 h胃蛋白酶+胰蛋白酶处理前后对DPPH自由基清除率分别为81.05%、82.26%;在pH 4、8条件下处理1 h,对DPPH自由基清除率分别为98.02%、11.80%（100 μg/mL）;在温度95 ℃条件下处理1 h,对DPPH自由基清除率为87.11%（100 μg/mL）;用浓度为1.0 mol/L的NaCl处理6 h,相比对照组,对DPPH自由基清除率由51.58%下降到22.68%（60 μg/mL）。结论：超滤后得到的分子质量为200～3 000 D的酶解缫丝蚕蛹蛋白抗氧化肽的抗氧化能力比酶解原液有一定提高;且在酸性、高温、脱盐处理后对DPPH自由基的清除能力保持较好;胃肠道消化酶对其DPPH自由基清除能力的影响不显著（P＞0.05）。     

鸭肉蛋白源抗氧化肽的酶法制备工艺

以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除率为指标,采用响应曲面法（response surface methodology,RSM）优化胃蛋白酶制备鸭肉抗氧化肽的最佳酶解工艺条件。结果表明：以底物质量浓度、酶与底物质量比和酶解时间为自变量,以DPPH自由基清除率为响应值,得到的回归方程拟合度高（R2=0.995 7,R2Adj=0.992 7）。其中酶与底物质量比对DPPH自由基清除率的影响最大,其次是酶解时间,底物质量浓度的影响最小。胃蛋白酶的最优酶解工艺条件为底物质量浓度10.89 g/100 mL、酶与底物质量比0.013%、酶解时间3.54 h,此时DPPH自由基清除率的理论值可达84.23%,通过优化验证实验测得,在最优酶解条件下,DPPH自由基清除率的实际值为（83.57±0.20）%。     

小麦秸秆酶法制备低聚木糖及其抗氧化活性

研究小麦秸秆酶法制备低聚木糖的最佳工艺及其抗氧化作用。确定低聚木糖的最佳制备条件为：酶解pH 6.0、木聚糖酶用量3 g/L、底物质量浓度70 g/L、酶解温度50 ℃、酶解时间4 h。在此条件下,酶解产生的还原糖含量为9.5 g/L,可溶性总糖含量为26.3 g/L,平均聚合度为2.77。考察低聚木糖的抗氧化活性,发现其对•OH、O2－•和DPPH自由基的清除能力呈量效关系。     

响应面试验优化基于胶原特性酶解猪皮工艺及其抗氧化特性

以新鲜猪皮为原料,基于凝胶特性以羟脯氨酸含量为指标,对影响胃蛋白酶酶解过程的各个因素进行研究,通过Box-Behnken设计优化酶解工艺;以清除O2－•、•OH、H2O2能力和DNA损伤保护作用为指标研究酶解产物的抗氧化功能。结果表明：最佳酶解条件为加酶量0.25%、料液比1∶2（g/mL）、酶解时间1.65 h、酶解温度41.15 ℃,在此酶解条件下其产物清除O2－•的IC50值为20.19 mg/mL;清除•OH的IC50值为6.36 mg/mL;清除H2O2的IC50值为0.65 mg/mL;对DNA损伤保护作用的IC50值为1.86 mg/mL。     

复合酶协同水解法制备绿豆抗氧化多肽

研究复合酶协同水解法制备绿豆抗氧化活性多肽的最佳条件,并探究其体外抗氧化活性。以水解度为指标,在单因素实验的基础上,以pH、温度、底物浓度、酶用量为实验因素,通过L₉(34)正交实验设计筛选出制备绿豆多肽的最佳水解条件,使用DPPH自由基、超氧阴离子自由基及羟自由基的清除能力评价其抗氧化活性。结果表明:复合酶协同水解绿豆蛋白的最适反应条件为pH8.5,温度56 ℃,底物浓度8%,酶用量4%,水解度可达到33.95%。所得绿豆抗氧化多肽对DPPH自由基、超氧阴离子自由基及羟自由基清除率分别为82.8%、76.82%和56.85%,具有较强的抗氧化活性,在天然抗氧化剂和保健食品领域有一定的开发利用价值。     

响应面试验优化裙带菜蛋白酶解工艺及酶解液抗氧化活性

运用响应面分析方法对裙带菜蛋白酶解工艺条件进行优化。经单酶筛选,在单因素试验基础上,以亚铁离子螯合率和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)自由基清除率为主要指标,水解度为辅助指标,研究酶解时间、酶解温度、p H值、底物质量浓度、加酶量对裙带菜蛋白酶解产物抗氧化活性和水解度的影响,并比较优化条件下的酶解液与常用天然抗氧化剂抗坏血酸、合成抗氧化剂丁基羟基茴香醚(butyl hydroxyanisole,BHA)的抗氧化活性。结果表明:复合蛋白酶是裙带菜蛋白酶解的最适用酶,酶解液螯合亚铁离子能力和清除DPPH自由基的最优条件为酶解时间8.1 h、酶解温度50℃、p H 7.0、底物质量浓度15 g/L、加酶量0.2%(0.3 AU/g裙带菜粉末)。在此条件下,酶解液的亚铁离子螯合率为88.58%,DPPH自由基清除率为59.22%,水解度为29.72%。对比常用抗氧化剂,在亚铁离子螯合能力方面,酶解液显著高于0.01%抗坏血酸和0.01%BHA(P0.05),而在DPPH自由基清除能力和还原能力方面,酶解液低于0.01%抗坏血酸和0.01%BHA(P0.05)。     

亚麻籽粕抗氧化肽制备工艺的响应面法优化

以亚麻籽粕蛋白为原料,酶解制备抗氧化肽。以DPPH自由基清除率为实验指标,通过单因素实验,筛选最佳蛋白酶并考察底物浓度、酶添加量、温度、pH及时间等对酶解物抗氧化能力的影响。在单因素实验基础上,采用响应曲面法进行酶解工艺条件的优化。结果表明:采用胰蛋白酶作为最适酶,酶解的最佳工艺条件为:底物浓度2%,温度37 ℃,酶解时间3.00 h,加酶量为4000 U/g,pH8.5,在该条件下,1 mg/mL酶解产物的DPPH自由基清除率及超氧阴离子自由基清除率分别为(63.64%±0.023%)和(19.98%±0.098%),0.5 mg/mL酶解产物的ABTS自由请清除率为(88.11%±0.059%)。说明亚麻籽粕抗氧化肽具有良好的抗氧化活性。