6-姜烯酚诱导 SW480 凋亡及与 APC 表达的影响

本文通过体外细胞实验观察研究 6-姜烯酚诱导结直肠癌细胞凋亡及与 APC 表达的关系,以探讨 6-姜烯酚抑制结直肠肿瘤的可能机制。首先通过体外细胞实验应用不同浓度 6-姜烯酚（0、5、10、15 和 20 μM）分别对 SW480 进行干预诱导 24 h,再利用高倍荧光显微镜观察细胞数目、形态变化,CCK8 法测定细胞抑制率,Annexin V-FITC/PI 流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞凋亡周期,最后用 Western-blot 检测分析 APC 蛋白表达变化。结果显示,与对照组相比,6-姜烯酚可致使 SW480 细胞增殖周期阻断在 G2/M 期,并呈浓度依赖性地促进 SW480 凋亡,进而抑制细胞增殖,而且增强了 APC 表达（plt;0.05）。因此,可以得出 6-姜烯酚可诱导 SW480凋亡从而抑制细胞增殖,并且可能与激活 APC 相关,随着这一研究的不断深入,6-姜烯酚作为临床潜在的抗肿瘤辅助药物,其抑制肿瘤细胞增殖将得到更深层次分子机制的支持。     

6-姜烯酚诱导 SW480 凋亡及与 APC 表达的影响

本文通过体外细胞实验观察研究 6-姜烯酚诱导结直肠癌细胞凋亡及与 APC 表达的关系,以探讨 6-姜烯酚抑制结直肠肿瘤的可能机制。首先通过体外细胞实验应用不同浓度 6-姜烯酚（0、5、10、15 和 20 μM）分别对 SW480 进行干预诱导 24 h,再利用高倍荧光显微镜观察细胞数目、形态变化,CCK8 法测定细胞抑制率,Annexin V-FITC/PI 流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞凋亡周期,最后用 Western-blot 检测分析 APC 蛋白表达变化。结果显示,与对照组相比,6-姜烯酚可致使 SW480 细胞增殖周期阻断在 G2/M 期,并呈浓度依赖性地促进 SW480 凋亡,进而抑制细胞增殖,而且增强了 APC 表达（plt;0.05）。因此,可以得出 6-姜烯酚可诱导 SW480凋亡从而抑制细胞增殖,并且可能与激活 APC 相关,随着这一研究的不断深入,6-姜烯酚作为临床潜在的抗肿瘤辅助药物,其抑制肿瘤细胞增殖将得到更深层次分子机制的支持。     

6-姜烯酚诱导 SW480 凋亡及与 APC 表达的影响

本文通过体外细胞实验观察研究 6-姜烯酚诱导结直肠癌细胞凋亡及与 APC 表达的关系,以探讨 6-姜烯酚抑制结直肠肿瘤的可能机制。首先通过体外细胞实验应用不同浓度 6-姜烯酚（0、5、10、15 和 20 μM）分别对 SW480 进行干预诱导 24 h,再利用高倍荧光显微镜观察细胞数目、形态变化,CCK8 法测定细胞抑制率,Annexin V-FITC/PI 流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞凋亡周期,最后用 Western-blot 检测分析 APC 蛋白表达变化。结果显示,与对照组相比,6-姜烯酚可致使 SW480 细胞增殖周期阻断在 G2/M 期,并呈浓度依赖性地促进 SW480 凋亡,进而抑制细胞增殖,而且增强了 APC 表达（plt;0.05）。因此,可以得出 6-姜烯酚可诱导 SW480凋亡从而抑制细胞增殖,并且可能与激活 APC 相关,随着这一研究的不断深入,6-姜烯酚作为临床潜在的抗肿瘤辅助药物,其抑制肿瘤细胞增殖将得到更深层次分子机制的支持。     

6-姜烯酚诱导SW480凋亡及对APC基因表达的影响

本文通过体外细胞实验观察研究6-姜烯酚诱导结直肠癌细胞凋亡及与APC(肿瘤抑制基因)表达的关系,以探讨6-姜烯酚抑制结直肠肿瘤的可能机制。首先通过体外细胞实验应用不同浓度6-姜烯酚(0、5、10、15和20μM)分别对SW480进行干预诱导24 h,再利用高倍荧光显微镜观察细胞数目、形态变化,CCK8法测定细胞抑制率,Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞凋亡周期,最后用Western-blot检测分析APC蛋白表达变化。结果显示,与对照组相比,6-姜烯酚可致使SW480细胞增殖周期阻断在G2/M期,并呈浓度依赖性地促进SW480凋亡,进而抑制细胞增殖,而且增强了APC表达(p0.05)。因此,可以得出6-姜烯酚可诱导SW480凋亡从而抑制细胞增殖,并且可能与激活APC相关,随着这一研究的不断深入,6-姜烯酚作为临床潜在的抗肿瘤辅助药物,其抑制肿瘤细胞增殖将得到更深层次分子机制的支持。     

不同硫酸软骨素对口腔癌KB细胞的抑制作用

以鲟鱼软骨和鸡软骨为原料,采用碱提-酶解-醇沉的工艺流程提取硫酸软骨素后,利用Sephadex G-50凝胶色谱及Sephacryl S-300 HR凝胶色谱对硫酸软骨素进行纯化,并通过高效凝胶渗透色谱法进行分子质量测定与纯度鉴定。采用MTT法检测硫酸软骨素对口腔癌KB细胞增殖活性的影响,并采用流式细胞术检测口腔癌KB细胞凋亡情况。研究结果表明鲟鱼及鸡软骨硫酸软骨素粗制品得率分别为23.80%和25.23%。经高效液相凝胶渗透色谱分析可得纯化的鲟鱼及鸡软骨硫酸软骨素均为高纯度多糖,且鲟鱼软骨硫酸软骨素的平均分子量比鸡软骨硫酸软骨素的大。以体外抗肿瘤的方法研究硫酸软骨素粗提物和纯化样品对口腔癌KB细胞的抑制作用,结果所得鲟鱼软骨硫酸软骨素粗制品和纯化样品的IC50值分别为80.18μg/m L和58.78μg/m L;鸡软骨硫酸软骨素粗制品和纯化样品的IC50值分别为68.55μg/m L和53.71μg/m L。流式细胞术表明硫酸软骨素能够诱导KB细胞发生凋亡,细胞凋亡率与药物的浓度呈剂量依赖关系,且鸡软骨硫酸软骨素诱导KB细胞凋亡率高于鲟鱼软骨硫酸软骨素。     

6-姜烯酚诱导 SW480 凋亡及与 APC 表达的影响

本文通过体外细胞实验观察研究 6-姜烯酚诱导结直肠癌细胞凋亡及与 APC 表达的关系，以探讨 6-姜烯酚抑制结直肠肿瘤的可能机制。首先通过体外细胞实验应用不同浓度 6-姜烯酚（0、5、10、15 和 20 μM）分别对 SW480 进行干预诱导 24 h，再利用高倍荧光显微镜观察细胞数目、形态变化，CCK8 法测定细胞抑制率，Annexin V-FITC/PI 流式细胞术检测细胞凋亡率及细胞凋亡周期，最后用 Western-blot 检测分析 APC 蛋白表达变化。结果显示，与对照组相比，6-姜烯酚可致使 SW480 细胞增殖周期阻断在 G2/M 期，并呈浓度依赖性地促进 SW480 凋亡，进而抑制细胞增殖，而且增强了 APC 表达（plt;0.05）。因此，可以得出 6-姜烯酚可诱导 SW480凋亡从而抑制细胞增殖，并且可能与激活 APC 相关，随着这一研究的不断深入，6-姜烯酚作为临床潜在的抗肿瘤辅助药物，其抑制肿瘤细胞增殖将得到更深层次分子机制的支持。     

鲟鱼硫酸软骨素对结直肠癌患病小鼠肠道菌群的影响

结直肠癌是癌细胞不受控制,发生异常增殖而形成的一种恶性肿瘤,它的发生、发展与肠道菌群密切相关。硫酸软骨素是动物组织中主要的多糖类物质,具有许多重要生理功能,尤其是相比于药物治疗和手术治疗,硫酸软骨素具有低毒、低副作用的特点。为探究硫酸软骨素对结直肠癌荷瘤小鼠肠道菌群的影响,本实验通过构建结直肠癌患病小鼠模型,经灌胃鲟鱼硫酸软骨素4周后,对各组小鼠肠道内容物进行了16S DNA测定分析,探究鲟鱼硫酸软骨素对结直肠癌小鼠肠道菌群的调节作用。实验结果表明,鲟鱼硫酸软骨素能够一定程度上调节结直肠癌患病模型小鼠的肠道菌群多样性,增加有益菌(如糖化菌门)相对丰度、降低有害菌相对丰度;其中梭杆菌门相对丰度由模型组的0.008 5%降低到高剂量组的0.001 4%,与正常组(0.001 3%)接近;Bacteroidales S24-7 group相对丰度由正常组的30%降至模型组的18%;Ruminiclostridium 5相对丰度由模型组的2.05%降低到高剂量组的0.41%且明显低于正常组(0.92%)。结论:鲟鱼硫酸软骨素能够减轻结直肠癌细胞侵染引起的肠道菌群的改变,调节肠道微生物多样性,减缓结直肠癌的发展,具有可发展为肠道益生元的潜力。     

黑李提取物对结肠癌Caco-2细胞增殖和调亡的影响

采用80%丙酮浸提法制备黑李粗提物。通过MTT法测定黑李提取物对Caco-2细胞增殖的抑制效果,Annexin V-FITC/PI双染色法、PI染色法、酶联免疫分析法分别检测细胞凋亡、细胞周期以及凋亡蛋白相对表达量变化,探究黑李提取物对Caco-2细胞凋亡信号转导通路的影响。与空白对照组相比,不同浓度的黑李提取物(0.2~2.0 mg/m L)对Caco-2细胞增殖均有明显的抑制作用,随浓度的增大,Caco-2细胞凋亡率明显升高,呈现显著的剂量-效应关系。提取物处理细胞72 h后,使细胞周期G1期和G2延长,Cyt C、caspase-9、caspase-3等凋亡蛋白的相对表达量明显上升。提示黑李提取物通过阻滞细胞周期,诱导线粒体通路介导的细胞凋亡。本结果为将黑李开发为抗癌功能性食品提供了科学依据。     

辣木籽异硫氰酸酯衍生物抑制结肠癌HCT-116细胞的生长和迁移

该研究旨在探讨辣木籽异硫氰酸酯衍生物（MITC-21）抑制结肠癌HCT-116细胞生长和迁移的作用。采用MTT实验、克隆形成实验、流式细胞术、细胞划痕实验和蛋白印迹法,检测经不同浓度MITC-21处理的HCT-116细胞增殖、凋亡、迁移和相关蛋白表达水平的变化情况。结果表明,MITC-21呈剂量依赖性和时间依赖性的方式显著降低HCT-116细胞的存活率,半致死剂量分别为6.79 µmol/L（24 h）、3.71 µmol/L（48 h）和1.13 µmol/L（72 h）;克隆形成实验表明,MITC-21（2和4 µmol/L）显著抑制HCT-116细胞克隆形成,处理48 h后克隆形成率从100%降低到68.36%（p<0.05）和49.51%（p<0.01）;当MITC-21浓度为4 µmol/L时HCT-116发生明显的细胞形态变化;流式细胞术分析得出,HCT-116细胞的凋亡率随着MITC-21浓度和处理时间的增加而上升,处理48 h后,细胞凋亡率从14.97%增加到21.60%（p<0.001）和22.78%（p<0.001）;细胞划痕实验表明,MITC-21显著降低细胞迁移率,迁移率从61.53%降低到32.89%（p<0.01）和24.30%（p<0.001）;蛋白表达水平检测表明,MITC-21（4 µmol/L）显著增加凋亡相关蛋白Bax/Bcl-2比率（p<0.01）,降低迁移相关蛋白MMP2表达水平（p<0.05）。MITC-21能够抑制HCT-116细胞增殖、诱导细胞凋亡和抑制细胞迁移。     

熊猫豆提取物抑制肿瘤活性及诱导结肠癌细胞Caco-2凋亡机制研究

为了探究熊猫豆的抑制肿瘤活性及其诱导Caco-2凋亡的机制,采用80%丙酮浸提法制备熊猫豆粗提物,通过MTT法测定其对人结肠癌细胞Caco-2增殖的抑制效果,琼脂糖凝胶电泳、流式细胞术、酶联免疫分析等技术与方法检测细胞周期、DNA及凋亡相关蛋白相对表达量的变化。结果发现,与空白对照组相比,0.1~1.0 mg/m L熊猫豆丙酮提取物对Caco-2细胞增殖有明显的抑制作用,且呈现剂量效应关系,IC50为0.72 mg/m L。0.4、0.6、0.8 mg/m L熊猫豆丙酮提取物处理72 h后的Caco-2细胞,可以观察到典型的凋亡细胞的梯状DNA条带,细胞周期G1期延长,Cyt C、caspase-9、caspase-3蛋白的相对表达量均有显著上升。熊猫豆丙酮能够抑制结肠癌细胞Caco-2增殖,这种抑制作用是通过阻滞细胞周期和诱导线粒体通路介导的细胞凋亡实现的。     

灵芝多糖联合5-FU对人结肠癌HCT-116细胞增殖及凋亡的影响

目的：探讨灵芝多糖(GLP)联合5-氟尿嘧啶(5-FU)对人结肠癌HCT-116细胞增殖抑制及凋亡的影响。方法：采用MTT法测定单独和联用GLP与5-FU对人结肠癌HCT-116细胞的协同抑制作用,应用联合指数法分析两药物之间相互作用,Hoechst33258荧光染色观察细胞的形态学改变,碘化吡啶(PI)标记流式细胞术(FCM)检测GLP联合5-FU对HCT-116细胞周期和凋亡抑制率的变化。结果：MTT法测定结果显示GLP和5-FU单独用药均能显著抑制HCT-116细胞增殖。GLP(＞659μg/mL)联用5-FU(＞1.6μg/mL)联用呈协同效应(CI＜1),与5-FU单独用药组相比有极显著差异(P＜0.01),并呈时间依赖性。给药48h后,Hoechst33258荧光染色可见典型的凋亡形态学特征。FCM检测凋亡显示两药联合作用24h后,5mg/mL GLP联合50μg/mL 5-FU的凋亡率为36.14%,高于5-FU(50μg/mL)单独用药组(26.07%);1.25mg/mL GLP联合12.5μg/mL 5-FU、2.5mg/mL GLP联合25μg/mL 5-FU、5mg/mL GLP联合50μg/mL 5-FU作用48h后,凋亡率分别为20.95%、32.87%、30.01%,均高于5-FU(50μg/mL)单独用药组(14.51%)。联合用药组可使HCT-116细胞阻滞于S期。结论：较高质量浓度的GLP与5-FU联用具有协同抑制人结肠癌细胞株HCT-116细胞增殖,诱导细胞凋亡,阻滞细胞周期作用。     

Induction of apoptosis by tomato using space mutation breeding in human colon cancer SW480 and HT‐29 cells

BACKGROUND: As far as we know, there have been no reports concerning the functional characteristics of tomatoes using space mutation breeding. The aim of this study was to evaluate the anti‐colon cancer effect of tomatoes M1 and M2 using space mutation breeding. RESULTS: In the present study, obvious anti‐cancer activity was shown with tomato juice of M1 and M2 and their parent CK treatment in colon cancer cell lines SW480 and HT‐29 in cell growth inhibition. In addition, SW480 cells were more sensitive to M1 and M2 than HT‐29 cells in cell apoptosis. Furthermore, M1 and M2 induced cell cycle arrest both in G0–G1 and G2/M phases. CONCLUSION: These data suggest that consumption of tomato using space mutation breeding may provide benefits to inhibit growth of colon cancer cells. Therefore, tomato production using space mutation breeding may be a good candidate for development as a dietary supplement in drug therapy for colon cancer. Copyright © 2010 Society of Chemical Industry     

Effects of dried longan seed (Euphoria longana Lam.) extract on VEGF secretion and expression in colon cancer cells and angiogenesis in human umbilical vein endothelial cells

Angiogenesis is a critical event in cancer metastasis, via delivery of needed oxygen and nutrients to tumor cells. Anti-angiogenesis is one strategy for controlling cancer progression. We herein report anti-angiogenesis activity of dried longan seeds using colon adenocarcinoma cells (SW480 cells) and human umbilical vein endothelial cells (HUVECs). Sephadex LH-20 column chromatography was used for separate three dried longan seed fractions. We firstly evaluated vascular endothelial cell growth factor (VEGF) secretion, expression and colony formation of SW480 cells, using enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA), Western blot analysis and soft agar assays. Meanwhile cell proliferation, gelatinase activity and tube formation of HUVECs were determined via proliferation assay, gelatin zymography and in vitro tube formation assay, respectively. The results suggest that dried longan seed fractions could be potential angiogenic inhibitors not only interruption of VEGF secretion and expression in SW480 cells but also abrogation of cell proliferation, the activity of gelatinase and tube formation of HUVECs.     

Maple polyphenols,ginnalins A–C,induce S- and G2/M-cell cycle arrest in colon and breast cancer cells mediated by decreasing cyclins A and D1 levels

Polyphenols are bioactive compounds found in plant foods. Ginnalins A–C are polyphenols present in the sap and other parts of the sugar and red maple species which are used to produce maple syrup. Here we evaluated the antiproliferative effects of ginnalins A–C on colon (HCT-116) and breast (MCF-7) tumourigenic and non-tumourigenic colon (CCD-18Co) cells and investigated whether these effects were mediated through cell cycle arrest and/or apoptosis. Ginnalins A–C were twofold more effective against the tumourigenic than non-tumourigenic cells. Among the polyphenols, ginnalin A (84%, HCT-116; 49%, MCF-7) was more effective than ginnalins B and C (50%, HCT-116; 30%, MCF-7) at 50 μM concentrations. Ginnalin A did not induce apoptosis of the cancer cells but arrested cell cycle (in the S- and G₂/M-phases) and decreased cyclins A and D1 protein levels. These results suggest that maple polyphenols may have potential cancer chemopreventive effects mediated through cell cycle arrest.     

藏灵菇源干酪乳杆菌KL1胞外多糖抑制人结肠癌细胞增殖的研究

分离纯化藏灵菇源干酪乳杆菌KL1胞外多糖(EPS),研究EPS纯品对HCT-8人结肠癌细胞的增殖抑制和诱导细胞凋亡作用。利用Sepharose CL-6B凝胶柱探讨干酪乳杆菌KL1菌株EPS粗品的纯化条件,应用紫外全波长扫描及苯酚-硫酸法鉴定EPS纯度;采用CCK-8法和Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒研究EPS对HCT-8人结肠癌细胞的增殖抑制和凋亡作用。结果表明:在0.02～0.12mol/L磷酸盐缓冲液梯度洗脱、流速3mL/min、样品上样质量浓度15.0mg/mL、样品上样量2.0mL的纯化条件下获得EPSa和EPSb两个单一组分的胞外多糖,其纯度分别为91.67%和82.86%。EPSa处理HCT-8人结肠癌细胞体外实验发现,EPSa对HCT-8细胞的增殖有抑制作用,以及诱导细胞凋亡的发生,且细胞生长抑制率呈时间-剂量依赖性。提示藏灵菇源干酪乳杆菌KL1菌株的EPSa有抑制结肠癌细胞增殖的生物活性。     

6-姜烯酚诱导人结直肠癌细胞凋亡及与Bax、BCL2、Caspase3和PARP1基因表达的影响

本文通过体外细胞实验应用6-姜烯酚对HCT116和HT29进行干预,以探讨6-姜烯酚诱导结直肠癌细胞凋亡及与相关凋亡蛋白(Bax、BCL2、Caspase3和PARP1)表达之间的关系。利用倒置荧光显微镜观察不同浓度的6-姜烯酚干预HCT116及HT29后细胞形态的变化,CCK8法测定不同分组HCT116及HT29抑制率,并绘制细胞增殖曲线,Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测不同分组HCT116及HT29凋亡,Western-blot检测分析凋亡相关蛋白表达情况(Bax、BCL2、Caspase3和PARP1)。结果显示,与对照组相比,6-姜烯酚可不同程度地诱导HCT116及HT29凋亡,促进Bax、Caspase3和PARP1蛋白水平表达(p0.05),抑制BCL2蛋白水平表达(p0.05),并增加Bax/BCL2比值比例(p0.05)。因此,6-姜烯酚诱导HCT116、HT29发生凋亡可能是与激活Bax、Caspase3和PARP1的表达以及增加Bax/BCL2比值比例相关,这一发现可为结直肠癌的临床治疗与预防提供有效参考依据。     

副干酪乳杆菌诱导Caco-2细胞凋亡及其发酵乳贮藏品质的研究

以新疆马奶酒中自行分离得到的副干酪乳杆菌（Lactobacillus paracasei）M5L为对象,研究该菌株对结肠癌Caco-2细胞的抑制作用并分析发酵乳贮藏品质变化。结果表明,副干酪乳杆菌M5L可以在一定的盐浓度、胆盐浓度及酸性环境中较好的生长。当菌体以100∶1的感染系数作用于Caco-2细胞72 h后抑制率最佳;显微镜下观察活菌处理后的细胞发生明显的凋亡现象;流式细胞仪检测到副干酪乳杆菌M5L可以诱导Caco-2细胞内活性氧显著增加,并将细胞周期阻滞在合成期,且通过增大Caspase-3和Bax基因表达量,降低Bcl-2基因表达量来促进肿瘤细胞的凋亡。其发酵酸乳贮藏5 d时品质较佳,长时间的贮存会导致酸乳品质的劣变。     

6-姜烯酚对H_2O_2诱导NCM460和HCT116氧化损伤的作用研究

建立结直肠癌细胞氧化损伤模型,加入H_2O_2刺激,通过体外细胞实验研究6-姜烯酚对H_2O_2诱导人正常肠上皮细胞(NCM460)和原位结肠癌细胞(HCT116)氧化损伤的不同作用及可能的分子机制。利用倒置显微镜观察不同浓度6-姜烯酚对H_2O_2诱导NCM460和HCT116后细胞形态的改变。CCK8法筛选6-姜烯酚的浓度区间,并测定细胞存活率。Annexin V-FITC/PI流式细胞术检测不同分组细胞凋亡。Western-blot检测分析相关凋亡蛋白(Caspase3、PARP1、MCC1、A2F、BCL2)的表达。结果显示,与对照组相比,6-姜烯酚可降低H_2O_2诱导的NCM460中Caspase3、PARP1、MCC1、A2F表达,促进BCL2的表达(p0.05),具有抗氧化作用,并促进H_2O_2诱导的NCM460增殖(p0.05),但是在HCT116中。6-姜烯酚却促进Caspase3、PARP1、MCC1、A2F表达,抑制BCL2表达(p0.05),不同程度加强H_2O_2对HCT116的氧化损伤,抑制细胞增殖(p0.05)。因此可以得出6-姜烯酚对H_2O_2诱导NCM460及HCT116具有明显不同的相反作用,这一发现可为进一步研究6-姜烯酚抗结直肠肿瘤具体相关机制或通路提供指导意义。