高效液相色谱法测定大豆发酵制品中的生物胺

目的从生物胺角度初步探讨大豆发酵制品的食用安全性,为确定大豆发酵制品的推荐安全摄入水平提供初步参考。方法采用柱前衍生高效液相色谱法检测大豆发酵制品中生物胺的含量,以0.4 mol/L高氯酸为提取液,以丹酰氯为衍生试剂,紫外检测波长254 nm。结果样品组分分离及测定结果重现性较好,豆豉、豆酱、酱油3种大豆发酵制品均有部分品牌组胺含量超过危害作用水平(即500 mg/kg),8个样品中有7种超过100 mg/kg,同类不同品牌大豆发酵制品间组胺含量没有明显差别;色胺均未检出;除组胺外,3种大豆发酵制品中尚可能存在2-苯乙胺、腐胺及尸胺。结论大豆发酵制品的色胺未检出,组胺含量较高,大量食用可能影响人体健康。     

高效液相色谱法测定葡萄酒中生物胺的含量

葡萄酒是经过发酵而制成的,很容易存在生物胺,对人体可能存在危害,因此本文检测了几种葡萄酒中甲胺、乙胺、色胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺和亚精胺的含量。实验选用高效液相色谱仪,紫外检测器,0.1mol/L盐酸溶液提取,丹磺酰氯衍生化的方法进行检测。实验结果表明,此法相关系数大于99.8%,最低检测限在0.55～1.03μg/L,回收率大于95%,相对标准偏差在6.33%以下。实验结果检测出葡萄酒中甲胺含量为5.53±0.028～6.67±0.04mg/L,乙胺含量为5.41±0.07～6.99±0.19mg/L,色胺含量为10.35±0.068～14.18±0.42mg/L,腐胺含量为9.10±0.28～11.75±0.49mg/L,均在安全标准范围内,可安全食用。     

高效液相色谱法同时测定酱油中的8种生物胺

本文建立了高效液相色谱法同时检测酱油中色胺、苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺、亚精胺和精胺的方法。采用5%三氯乙酸溶液为样品提取溶剂,提取液经丹璜酰氯柱前衍生30 min,最终HPLC进行定性和定量分析。本方法中8种生物胺的线性范围为1.0~50μg/mL,相关系数R2大于0.99,检出限(S/N=3)为0.075~0.3μg/mL。在添加水平为1.00和5.00μg/mL时,样品的平均回收率在83%~111%之间,相对标准偏差为0.43%~19.0%。本方法具有线性范围广,灵敏度和准确度高等优点,适用于酱油中生物胺的检测。采用本方法对市售10种酱油进行检测,总生物胺含量的范围为50.82~1898.17μg/mL,其中酪胺、腐胺和苯乙胺是酱油样品中含量最多的生物胺。     

高效液相色谱法测定黄酒中生物胺的含量

本文建立了测定酿造酒(黄酒)中生物胺含量的高效液相色谱法,优化的测定条件为:样品经0.4mol/L高氯酸提取后用丹磺酰氯柱前衍生,流动相为乙腈和水,采用梯度洗脱,流速为0.8ml/min,二极管阵列检测器,检测波长为254nm。该方法检测限为:尸胺、组胺和亚精胺为0.05μg/ml,酪胺为0.1μg/ml,精胺为0.25μg/ml。线性范围为2.0～40.0μg/ml(R>0.99),回收率分别为尸胺96.6%、组胺101.94%、酪胺101.90%、亚精胺98.65%、精胺107.4%。首次采用该法测定了黄酒中的生物胺,结果表明黄酒中生物胺的种类及含量因酒的品种而异,5种生物胺平均总量为114.45μg/ml,变异范围为39.27～241.07μg/ml。     

高效液相色谱法测定市售泡凤爪中的生物胺

采用丹磺酰氯为柱前衍生,建立高效液相色谱法同时测定市售泡凤爪中色胺、β-苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺、亚精胺、精胺8种生物胺含量的方法。色谱条件:C18色谱柱分离,以水和乙腈为流动相梯度洗脱,流速0.8mL/min,紫外检测器,检测波长:254nm。在此条件下,8种生物胺在23min内实现了良好的分离,该方法标准曲线相关系数均在0.998以上,精密度在可接收范围内（RSD<5%）,8种生物胺的平均回收率在90.41%⁹9.66%之间。结果表明该方法灵敏度高,精密度和重复性好,可快捷、准确地对市售泡凤爪中的生物胺进行检测。检测出生物胺总量范围在72.42⁴09.67mg/kg,其中,色胺、组胺、腐胺、尸胺、亚精胺的检出率为100%,其平均含量分别为47.53、26.20、35.65、12.94、8.15mg/kg。      

高效液相色谱法同时测定香肠中6种生物胺

采用丹磺酰氯为衍生试剂,建立反相高效液相色谱法同时测定香肠中腐胺、尸胺、酪胺、组胺、亚精胺和精胺6种生物胺的方法.色谱条件:C18色谱柱分离,以甲醇和0.1%乙酸溶液为流动相梯度洗脱,流速0.8mL/min,二极管阵列检测器,检测波长254 nm.以1,7-二氨基庚烷为内标,在设定的试验条件下,6种生物胺实现了良好的分离,并呈良好的线性相关性(r>0.999).方法的检测限:腐胺、亚精胺、尸胺和酪胺均为0.8μg/mL,组胺和精胺均为4 μg/mL.本检测方法具有良好的重现性和回收率.对发酵香肠样品中的生物胺含量进行了分析,其中部分香肠中含有一定量的生物胺,最高可达1.09mg/g.     

反相高效液相色谱法测定食品中生物胺

氨基酸是食品中的正常成分,食品发酵或腐败过程中氨基酸脱去羧基便生成相应的生物胺。消费者通过食品摄入过量的生物胺会引起过敏反应,严重的还会危及生命。本文主要综述了RP-HPLC法测定食品中生物胺的研究进展;对样品生物胺的提取、净化、衍生方法、流动相的选择以及不同食品中的生物胺种类及含量做了深入的探讨。      

反相高效液相色谱法测定食品中生物胺

氨基酸是食品中的正常成分,食品发酵或腐败过程中氨基酸脱去羧基便生成相应的生物胺。消费者通过食品摄入过量的生物胺会引起过敏反应,严重的还会危及生命。本文主要综述了RP-HPLC法测定食品中生物胺的研究进展;对样品生物胺的提取、净化、衍生方法、流动相的选择以及不同食品中的生物胺种类及含量做了深入的探讨。     

高效液相色谱法分析发酵肉制品中生物胺

建立了高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)检测发酵肉制品中常见8种生物胺(色胺、β-苯乙胺、腐胺、尸胺、盐酸吡哆胺、组胺、酪胺和精精胺)的柱前衍生-HPLC分析方法,并对其在实际检测中的适用性进行验证。采用5%三氯乙酸作为提取溶剂,提取发酵肉制品中的生物胺,以丹磺酰氯作为衍生试剂,采用Waters Symmetry C_(18)色谱柱(250 mm×4. 6 mm,5μm),乙腈和水(含0. 1%甲酸的0. 01 mol/L乙酸铵溶液)作为流动相进行梯度进样洗脱,流速为0. 8 mL/min,紫外检测器波长为254 nm。结果表明,发酵肉制品中的8种生物胺在37 min内能够进行分离,在0. 05～50μg/mL,8种生物胺均呈现良好的线性相关性(R20. 998)。各生物胺3个水平(1. 0、5. 0、10μg/g)加标回收率为83. 34%～111. 4%,相对标准偏差(RSD)均小于4. 85%,8种生物胺检出限为0. 03～0. 21μg/g,定量限为0. 10～0. 69μg/g。     

高效液相色谱法测定酱油中组胺的含量

目的 建立丹磺酰氯柱前衍生-高效液相色谱法测定酱油中组胺含量的方法.方法 样品酱油以1,7-二氨基庚烷作为内标,用正丁醇:三氯甲烷(1:1,V:V)萃取净化,经丹磺酰氯衍生,乙醚萃取后氮气吹干,用乙腈定容,高效液相色谱仪测定,内标法定量.结果 组胺含量在1～100 mg/L线性关系良好,线性相关系数r=0.9999,检...     

高效液相法测定市售腌制蔬菜商品中8种生物胺的含量

采用丹磺酰氯为衍生试剂,建立反相高效液相色谱法同时测定腌制蔬菜中色胺,β-苯乙胺,腐胺,尸胺,组胺,酪胺,亚精胺和精胺含量的方法。色谱条件:C18色谱柱分离,以水和乙腈为流动相梯度洗脱,流速0.8 mL/min,紫外检测器,检测波长:254 nm。在设定的试验条件下,8种生物胺在30 min内实现了良好的分离,待测生物胺峰面积同其相应浓度呈良好的线性相关性(R2>0.998)。仪器重复性良好(RSD<0.63%),方法重复性在可接收范围内(RSD<10%),8种生物胺的平均回收率在89.19%～103.02%之间。结果表明生物胺的HPLC检测方法,灵敏度高,精密度和重复性好,可快捷、准确地对腌制蔬菜中的生物胺进行检测。对市售腌制蔬菜样品中的生物胺含量进行了分析,检测出生物胺总量范围在39.38～628.82 mg/kg,属于目前我国安全标准范围之内。     

超高效液相色谱法测定不同品种桃果酒中8种生物胺含量

摘要：目的 建立一种检测桃果酒中生物胺的超高效液相色谱分析方法, 并对不同品种桃果酒的生物胺组成与含量进行测定。方法 样品采用丹磺酰氯衍生, 乙酸乙酯液-液萃取, Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm, 1.7 μm)分离, 柱温35℃, 乙腈-0.1%乙酸水溶液作流动相, 流速0.2 mL/min, 梯度洗脱, 紫外检测波长254 nm,外标法定量。 结果 柱前丹磺酰氯衍生超高效液相色谱-紫外法可在16 min内完成色胺、β-苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺、亚精胺、精胺等8种生物胺的测定, 检出限在15.76~21.43μg/L之间, 定量限在53.58~71.07μg/L之间; 日内精密度在0.170.85%~1.883.31%之间, 日间精密度在0.601.02%~2.824.36%之间; 加标回收率在87.8389.71%~108.22104.85%之间, 相对标准偏差RSD≤3.36%。10个品种桃果酒中均可检测到8种生物胺, 其中以色胺、腐胺含量较高, 而酪胺、精胺含量较低。白凤、武汉2号桃果酒中生物胺总胺含量较高, 而春蜜、中桃绯玉桃果酒中总胺含量较低。结论 该方法快速简便、灵敏高效、准确度高、重现性好, 可用于桃果酒中生物胺的分析检测。不同品种桃果酒的生物胺组成与含量差异较大, 选择适宜的原料品种有助于控制桃果酒中生物胺含量。     

超高效液相色谱紫外-柱前衍生法测定肉制品中的9种生物胺

摘 要：目的 建立超高效液相色谱紫外-柱前衍生法测定肉制品中的9种生物胺。方法 实验选取西式火腿肠为样品,以三氯乙酸/高氯酸混合溶液对样品中生物胺进行提取,调节提取液于pH 10碱性环境下,使用1 mL的10 mg/mL丹磺酰氯溶液进行衍生化处理,60℃水浴衍生15 min,100 μL氢氧化钠中止衍生,乙酸乙酯进行最终萃取。使用超高效液相色谱仪紫外配二极管阵列检测器进行测定,采用流动相：1%乙酸乙腈-10 mmol/L乙酸铵溶液;波长：254 nm;柱温：35℃;进样量：3 μL;流速：0.3 mL/min;ACQUITY BEH C18(2.1 mm*100 mm, 1.7 μm)色谱柱进行分析。结果 在线性范围5~250mg/kg内9种生物胺的相关性均＞0.999,检出限范围为0.2~0.5 mg/kg,定量限范围为0.5~1.5 mg/kg,9种生物胺的日内精密度相对标准偏差RSD (relative standard deviation)范围为1.58%~ 5.21%,回收率均≥85%。结论 本研究所建方法具有良好的准确性、精密度、灵敏度,可为我国肉制品中生物胺的检测提供参考依据。     

反相高效液相色谱法同时检测海产品中8种生物胺

目的建立一种可同时快速测定海产品中8种生物胺的丹磺酰氯柱前衍生反相高效液相色谱法。方法样品经5%三氯乙酸提取,丹磺酰氯柱前衍生后,采用Agilent zorbax SB-C_(18)色谱柱(4.6 mm×150 mm,5μm),以甲醇和水作为流动相,进行梯度洗脱。柱温30℃,流速为1.5 m L/min,采用UV紫外检测器,检测波长254 nm,对8种生物胺进行分离分析。结果结果显示,色胺、2-苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺、亚精胺和精胺在15 min内得到有效分离,在1~100 mg/L范围内线性系数r~2﹥0.999,8种生物胺测定方法的检出限范围为0.02~0.17 mg/L,定量限范围为0.067~0.57 mg/L,且重复性良好,向秋刀鱼中分别添加生物胺标准品20.0、50.0、100.0 mg/L 3个含量水平,8种生物胺平均回收率介于79%~117%之间,相对标准偏差为0.84%~12.57%。采用该方法测定了秋刀鱼等5类海产品中8种生物胺的含量,结果显示生物胺总含量在23~208 mg/kg之间。结论该方法简单、快速,灵敏度和准确度符合要求,适用于海产品中多种生物胺的同时检测。     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定蜂蜜中8种生物胺

建立了同时测定蜂蜜中色胺(TR)、2-苯乙胺(PHE)、腐胺(PUT)、尸胺(CAD)、组胺(HIS)、酪胺(TYR)、亚精胺(SPD)和精胺(SP)8种生物胺的超高效液相色谱串联质谱柱前衍生的分析方法。样品经5%三氯乙酸溶液提取后用丹磺酰氯柱前衍生,采用Agilent Poroshell 120 SB-C₁₈(50 mm×2.1 mm,2.7 μm)柱,以0.1%甲酸水溶液-0.1%甲酸乙腈溶液为流动相进行定性和定量分析。采用本方法对22种市售蜂蜜进行检测,结果显示8种生物胺在不同的蜂蜜中检出,所有蜂蜜样品中均检测到2-苯乙胺和腐胺,其中2-苯乙胺也是蜂蜜样品中平均含量最多的生物胺。本方法中8种生物胺的线性相关系数均大于0.99,检出限为0.01~0.51 μg/L。在添加水平为100、500、1000 μg/kg时,样品的平均回收率在76%~112%之间,日内精密度小于等于9.8%,日间精密度小于等于13.1%。该方法快速简单,灵敏准确,且回收率稳定,适用于蜂蜜中生物胺的检测。     

高效液相色谱法检测食品中生物胺的不同离线衍生策略的比较分析

摘 要： 目的 分析和比较高效液相色谱法检测食品生物胺过程中最常用的4种离线柱前衍生策略,为研究者合理选择能够准确测定食品中生物胺的方法提供参考技术指导。方法 分别采用丹磺酰氯、9-芴甲基氯甲酸酯、苯甲酰氯、4-二甲胺基苯基偶氮苯磺酰氯对混合酱油样品和混合葡萄酒样品中的生物胺进行衍生,于衍生后的0、24和48 h分别采用紫外检测器-反相高效液相色谱法使用反相C18色谱柱和紫外检测器定量分析反应混合物中的生物胺衍生物的水平。 结果 4种衍生剂均能与腐胺、尸胺、精胺、亚精胺、酪胺、β-苯乙胺、组胺、色胺的胺基反应,但反应产物的稳定性不同,不同衍生策略在制备的8种生物胺衍生物在C18色谱柱上的洗脱顺序上存在差异。采用丹磺酰氯制备的生物胺衍生物显示了高稳定性最稳定,在其在室温下放置48 h未发现显著降解,而采用其他衍生剂制备的某些特定生物胺衍生物则在该条件下则发生了显著降解。此外,采用不同衍生策略剂制备的8种生物胺衍生物在C18色谱柱上的洗脱顺序也存在差异。结论 采用丹磺酰氯衍生制备的生物胺衍生物具有高稳定性,适合在高效液相色谱仪上采用批处理程序进行分析,而采用其他3种衍生剂制备的某些特定生物胺的衍生物稳定性不佳,不适合在高效液相色谱仪上采用批处理程序进行分析。     

柱前衍生超高效液相色谱-串联质谱法测定三文鱼中9种生物胺

目的 建立液相色谱-串联质谱法检测三文鱼中9种生物胺(β-苯乙胺、组胺、腐胺、尸胺、酪胺、色胺、精胺、亚精胺、去甲基肾上腺素)的分析方法。方法 样品经过5%三氯乙酸提取、正己烷除脂、丹磺酰氯丙酮溶液衍生化后,经BEH Shield RP18柱(2.1 mm×150 mm, 1.7 μm)分离,含0.1%甲酸的50%乙腈水溶液和乙腈为流动相,采用电喷雾正离子(electrosprary ionization,ESI+)扫描、多反应监测模式分析。结果 9种生物胺分别在0~200 mg/L范围内线性良好,相关系数r＞0.996;β-苯乙胺、色胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺、亚精胺、精胺、去甲基肾上腺素的平均回收率依次分别为88.23%、84.17%、92.52%、89.45%、88.80%、89.43%、88.45%、87.24%、85.48%,检出限依次分别为0.0605、0.0822、0.0915、0.0244、0.0871、0.151、0.0744、0.0348、0.0750 μg/g。结论 本方法结合衍生化反应和超高效液相色谱-串联质谱法(ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry,UPLC-MS/MS)的优势,在实际样品检测中,前处理程序简化,克服基质效应对目标物的影响,目标物分离性、稳定性和峰型良好,可对三文鱼复杂基质中生物胺进行快速、准确、稳定的定量、定性分析。     

超高效液相色谱法同时快速测定多种动物源食品中9种生物胺的含量

目的建立超高效液相色谱(ultra performance liquid chromatography,UPLC)同时测定动物源性食品中色胺、苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺、章鱼胺、酪胺、亚精胺、精胺等9种生物胺的含量。方法样品经高氯酸溶液提取,丹磺酰氯柱前衍生化,加入氨水终止反应,乙腈定容。采用Acquity UPLC BEH C_(18)(2.1mm×100 mm,1.7μm)色谱柱,以5 mmol/L乙酸铵和乙腈作为流动相进行梯度洗脱,流速为0.4 mL/min,采用二极管阵列检测器在波长254 nm下检测。结果 9种生物胺在0.1~20μg/mL的范围内呈现良好的线性关系(r0.999)。样品在20、50和100 mg/kg 3个浓度水平的加标回收率为75.6%~97.2%,相对标准偏差为0.12%~5.32%(n=6);9种生物胺的方法定量限均为10 mg/kg。结论该方法简便、快捷、准确,可以用于动物源性食品中9种生物胺的同时测定。