猴头菇多糖的乙酰化修饰及其抗氧化活性研究

以猴头菇为原料,采用传统水提法提取猴头菇多糖,并制备乙酰化猴头菇多糖。以乙酰基取代度为实验指标,研究料液比(即多糖与乙酸酐的比例(g/mL))、反应时间和反应温度对HEP乙酰化修饰取代度的影响。在单因素实验的基础上,通过响应面实验设计对乙酰化实验的工艺参数进行优化,并比较修饰前后HEP的抗氧化活性。结果表明,HEP乙酰化的最佳工艺条件为:料液比为1:34 g/mL,反应时间3 h,反应温度30 ℃,在此条件下测得猴头菇多糖乙酰化的取代度为0.609,与修饰前的HEP相比,A-HEP的抗氧化性均有显著提高。乙酰化修饰是一种能够有效提高猴头菇多糖抗氧化活性的一种方法。     

银耳多糖乙酰化修饰及其抗氧化活性

以银耳多糖为原料,采用乙酸酐法制备乙酰化银耳多糖,以乙酰化取代度为指标,探讨反应的时间、温度和乙酸酐用量对取代度的影响,在单因素的基础上,采用响应面法对银耳多糖乙酰化工艺进行优化,并研究乙酰化修饰前后银耳多糖的抗氧化活性。结果表明:银耳多糖乙酰化修饰最佳工艺条件为反应时间2.37h,反应温度61.04℃,乙酸酐用量为2.89mL,在该最佳修饰工艺条件下,乙酰化银耳多糖取代度为0.39。抗氧化研究表明:与未修饰银耳多糖相比,乙酰化银耳多糖对DPPH自由基的清除能力有所增强,对·OH和O2-·的清除能力减弱。     

马齿苋多糖的乙酰化修饰及其抗氧化活性

以马齿苋为原料,采用热水浸提法提取马齿苋多糖（Polysaccharides from Portulaca oleracea L.,POP）,采用乙酸酐法制备乙酰化马齿苋多糖（actylated polysaccharides from Portulaca oleracea L.,Ac-POP）。以取代度为指标,通过单因素实验方法考察了反应时间、反应温度和料液比对马齿苋多糖乙酰化修饰取代度的影响,进一步优化了乙酰化修饰马齿苋多糖的工艺条件,并研究了POP和Ac-POP的抗氧化活性。实验结果表明：马齿苋多糖乙酰化修饰的最佳反应时间为2.78 h、反应温度为51.90 ℃、料液比为1:28.15（g/mL）,在该优化条件下,POP乙酰化取代度达到0.60。通过对原多糖和乙酰化多糖的红外光谱检测,显示乙酰化马齿苋多糖制备成功。马齿苋多糖修饰前后对自由基均有一定的清除作用,且呈现一定的剂量关系。在0.05~5.0 mg/mL范围内,修饰前后的马齿苋多糖对DPPH自由基的最大清除率分别为69.73%和64.54%;对?OH的最大清除率分别为43.48%和25.04%;对O2-?的最大清除率分别为78.86%和79.16%。随着浓度的增加,乙酰化马齿苋多糖的抗氧化活性逐渐增大。抗氧化研究表明,与未修饰多糖相比,乙酰化马齿苋多糖对DPPH自由基和?OH的清除能力减弱,但对O2-?的清除能力有较大的增强。     

松树蕈多糖乙酰化修饰工艺及其抗氧化活性

以松树蕈多糖为原料,采用乙酸酐法制备乙酰化松树蕈多糖,以乙酰化取代度为指标,通过单因素实验考察料液比、反应温度和反应时间对取代度的影响,在单因素的基础上,采用响应面Box-Benhnken试验设计乙酰化工艺进行优化,并通过乙酰化松树蕈多糖对·OH、DPPH自由基和O_2~-·的清除作用探讨其抗氧化活性。结果表明:松树蕈多糖乙酰化最佳工艺为,料液比1∶34.07(g∶mL),反应时间为2.8 h,反应温度为42.42℃。在该优化条件下,乙酰化松树蕈多糖取代度达0.587。抗氧化研究表明,与未修饰多糖相比,乙酰化松树蕈多糖对·OH和DPPH自由基的清除能力减弱,但对O_2~-·的清除能力有较大的增强。     

辽东楤木芽多糖乙酰化修饰工艺及其抗氧化活性研究

以辽东楤木芽为原料,采用超声波辅助提取法提取辽东楤木芽多糖,制备辽东楤木芽乙酰化多糖(Ac-AEBP)。以乙酰基取代度为指标,研究反应温度、反应时间和液料比(mL/g)对AEBP乙酰化修饰取代的影响。在单因素实验的基础上,运用Box-Behnken设计响应面实验对乙酰化工艺参数进行优化,并比较乙酰化修饰前后的辽东楤木芽多糖对·OH、·O^2-、DPPH·、ABTS⁺·的清除作用以及还原能力,探讨其抗氧化活性。结果表明辽东楤木芽多糖乙酰化最佳工艺条件为：反应温度52℃,反应时间4 h,液料比43∶1(mL/g),在此条件下,乙酰化辽东楤木芽多糖的取代度为0.4596。抗氧化研究表明,与未经修饰的AEBP相比,Ac-AEBP的抗氧化活性有较大的增强。该研究可为进一步开发利用辽东楤木芽提供科学依据。     

桦褐孔菌多糖IOP3a乙酰化修饰及其抗氧化活性

以桦褐孔菌多糖IOP3a为原料,采用乙酸酐法制备乙酰化桦褐孔菌多糖(Ac-IOP3a),以乙酰化取代度为指标,考察乙酸酐用量、反应温度和反应时间对取代度的影响。在单因素试验的基础上,采用响应面法对IOP3a乙酰化工艺进行优化,并通过Ac-IOP3a对·OH、DPPH·和O_2~-·的清除作用探讨其抗氧化活性。结果表明,桦褐孔菌多糖IOP3a乙酰化最佳工艺为:乙酸酐用量3.3 mL(固定IOP3a多糖量100 mg),反应时间3.1 h,反应温度64℃,在此条件下,Ac-IOP3a的取代度为0.416。抗氧化研究表明:与IOP3a多糖相比,Ac-IOP3a多糖的抗氧化活性明显增强。     

香菇柄多糖乙酰化修饰及其抗氧化活性

以香菇柄为原料,采用乙酸酐法制备乙酰化香菇柄多糖,考察不同乙酸酐用量在NaOH体系和甲酰胺体系中对多糖乙酰化修饰取代度以及多糖结构特性的影响,并对多糖及其乙酰化多糖的抗氧化活性进行评价。结果表明,在NaOH体系和甲酰胺体系中,香菇柄多糖乙酰化修饰取代度与乙酸酐用量均呈正相关,在乙酸酐用量为5 mL时,取代度分别为0.31和0.14。红外光谱表明,乙酰化修饰香菇柄多糖除具有多糖特征峰外,还出现了乙酰基的特征吸收峰,说明香菇柄多糖的乙酰化修饰成功。NaOH体系乙酰化修饰后多糖仍然具有三螺旋结构,而甲酰胺体系乙酰化修饰后多糖的三螺旋结构被破坏。抗氧化结果表明,香菇柄多糖乙酰化修饰前后均具有一定的抗氧化能力,并呈现一定的量效关系,且NaOH体系乙酰化多糖的抗氧化活性强于香菇柄多糖和甲酰胺体系乙酰化多糖,宜采用NaOH体系对香菇柄多糖进行乙酰化修饰。     

油茶籽粕多糖羧甲基化、乙酰化修饰及其对透明质酸酶的抑制作用

目的：研究羧甲基化油茶籽粕多糖（CM-COP）和乙酰化油茶籽粕多糖（Ac-COP）的修饰工艺,并研究其对透明质酸酶的抑制作用。方法：以取代度为指标,采用氢氧化钠—氯乙酸法和乙酸酐法分别对油茶籽粕多糖（COP）进行羧甲基化和乙酰化修饰。结果：CM-COP最佳修饰工艺为氢氧化钠浓度1.5 mol/L,反应时间3 h,反应温度60 ℃;Ac-COP最佳修饰工艺为乙酸酐用量3.0 mL,反应时间3 h,反应温度60 ℃;COP、CM-COP、Ac-COP对透明质酸酶的抑制率分别为78.0%,90.3%,92.2%。结论：COP、CM-COP、Ac-COP对透明质酸酶均具抑制作用,且CM-COP和Ac-COP的抑制活性高于COP,说明改性修饰能增加COP的生物活性。     

青钱柳多糖的乙酰化修饰及抗氧化活性

以青钱柳多糖为原料,使用乙酸酐法制备得到乙酰化青钱柳多糖样品。以乙酰化多糖取代度为评价指标,采用正交试验考察乙酸酐-多糖比例、反应时间、反应温度对乙酰化修饰的影响。在此基础上,选择取代度为0.681的乙酰化多糖样品进行1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基清除实验。结果表明,青钱柳多糖乙酰化最优反应条件为：m（多糖）∶V（乙酸酐）＝1∶60、反应时间2 h、反应温度40 ℃,同时,乙酰化修饰可以显著提高青钱柳多糖的DPPH自由基清除活性,乙酰化修饰可作为青钱柳多糖改性的方法之一,为青钱柳资源的进一步开发利用提供新的方向。     

绿茶多糖的乙酰化修饰及其清除自由基、NO_2~-活性的研究

探讨乙酰化修饰对绿茶多糖清除自由基、NO-2活性的影响,设计正交实验研究乙酰化修饰的最佳反应条件,在此条件下制取乙酰化绿茶多糖,对其修饰前后超氧阴离子(O-2·)自由基、羟自由基(·OH)和NO-2体外清除活性进行比较,并进行不同取代度的乙酰化茶多糖进行自由基及NO-2的清除作用实验,考察清除活性与取代度之间的关系。实验所得到乙酰化修饰最优条件为:茶多糖质量(g)与乙酸酐体积(m L)比为1∶40,保温时间4h,反应温度为30℃,乙酰化绿茶多糖最大取代度为0.337,乙酰化绿茶多糖对O-2·、·OH和NO-2体外清除活性最大提高率分别为32.06%、36.96%,55.99%,随着取代度的增大,O-2·、·OH及NO-2的清除活性均增大。研究证明乙酰化修饰能够提高绿茶多糖自由基、NO-2清除活性,且取代度与清除活性有关。     

响应面法优化二色补血草多糖的乙酰化工艺

采用响应面试验研究合成乙酰化二色补血草多糖的最优工艺条件,以乙酰化多糖取代度为评价指标,考察反应时间、乙酸酐与多糖的物质的量比和反应温度对乙酰化多糖取代度的影响。结果表明,通过响应面试验得到的最优工艺条件为：反应时间2.6 h、乙酸酐与多糖的物质的量比3.3∶1、反应温度65 ℃。在此条件下,二色补血草乙酰化多糖取代度为0.409。初步的抗氧化性实验表明,乙酰化后的二色补血草多糖的抗氧化性能有了明显提高。     

响应面试验优化新疆阿魏根多糖微波辅助提取工艺及其体外抗氧化活性

为了获得微波提取新疆阿魏根多糖的最佳工艺,以及新疆阿魏粗多糖的体外抗氧化活性,采用响应面法优化新疆阿魏水溶性多糖的微波提取工艺,在单因素试验的基础上选取液料比、提取温度、提取时间、微波功率进行试验设计,以所得多糖质量与苯酚硫酸法测得的多糖含量百分数的乘积作为优化指标,并检测新疆阿魏根多糖体外清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基的活性。结果：最优工艺条件为液料比120∶1（mL/g）、提取时间13 min、提取温度80 ℃、微波功率600 W,多糖实际得率为6.93%,接近于理论值。新疆阿魏根多糖对DPPH自由基有很好的清除作用,当质量浓度为1 000 μg/mL时,新疆阿魏根多糖对DPPH自由基的清除率为91.67%,作用接近于VC的清除作用。     

贵长猕猴桃多糖提取工艺及体外抗氧化功能

研究贵长猕猴桃果肉多糖、果皮多糖的提取工艺及体外抗氧化能力。采用正交试验优化贵长猕猴桃果肉、果皮多糖提取工艺参数,蒽酮-硫酸法测定多糖含量;用邻苯三酚自氧化及Fenton反应法测定贵长猕猴桃多糖抗氧化活性。结果表明：果肉多糖最优提取工艺参数为提取温度80 ℃、提取时间2 h、料液比1∶35（g/mL）,重复提取3 次,多糖提取率可达1.74%;果皮多糖最优提取工艺参数为提取温度70 ℃、提取时间2 h、料液比1∶25（g/mL）,重复提取3 次,多糖提取率可达1.16%。贵长猕猴桃果肉粗多糖、果皮粗多糖对O2 － •和•OH均具有很好的清除作用,果肉多糖清除O2 － •和•OH的IC50分别是12.4、41.3 μg/mL,果皮多糖清除2 种自由基的IC50分别是84.1、50.8 μg/mL。     

厚朴多糖提取工艺及其体外抗氧化活性

通过Box-Behnken试验优化提取厚朴多糖的工艺;以超氧阴离子自由基、1,1-二苯基-二苦基肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基和2,2’-连氮基-双-（3-乙基苯并噻唑-6-磺酸）（ABTS＋•）清除能力,Fe2＋螯合力、铁离子还原抗氧化力（ferric reducing antioxidant power,FRAP）为指标,探究厚朴多糖的体外抗氧化活性。结果表明,提取厚朴多糖的最佳工艺条件为pH 7.3、液固比32∶1（mL/g）、提取温度78 ℃、提取时间139 min,此条件下多糖提取率达3.35%～3.52%。体外抗氧化活性结果表明,厚朴多糖超氧阴离子自由基清除力为（18.72±2.12） μmol VC/mg,DPPH自由基清除能力达（0.59±0.05） μmol Trolox/mg,ABTS＋•清除能力为（0.57±0.04） μmol Trolox/mg,Fe2＋螯合力为（0.38±0.02） μmol EDTA/mg,FRAP值为（2.19±0.31） μmol Trolox/mg。     

响应面法优化松茸多糖酶法提取工艺及其体外抗氧化性分析

为确定复合酶（纤维素酶、果胶酶、中性蛋白酶）提取松茸多糖的最佳工艺,并对其体外抗氧化活性进行初步研究,在单因素试验的基础上,以料液比、pH值、酶解时间和酶解温度为影响因素,利用Box-Behnken方法进行四因素三水平试验设计,以多糖提取率为响应值,进行响应面分析;分别用邻苯三酚自氧化法和对DPPH自由基的清除作用测定松茸多糖的体外抗氧化性。结果表明：多糖提取的最佳工艺为料液比1∶40（g/mL）、pH 5、酶解温度35 ℃、酶解时间71 min,松茸多糖的提取率预测值为7.06%,验证值为6.95%,与预测值相对误差为1.56%;松茸多糖对超氧阴离子自由基和DPPH自由基具有较强的清除作用,其IC50值分别为0.565 mg/mL和0.454 mg/mL。因此,复合酶法提取松茸多糖高效、简单,可用作松茸多糖的提取工艺;松茸多糖具有明显的体外抗氧化活性。     

响应面试验优化超声辅助提取连钱草多糖工艺及其体外抗氧化活性

通过中心复合试验优化超声辅助提取连钱草多糖的工艺,以1,1-二苯基-2-苦肼基（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基和2,2’-连氮基-双-（3-乙基苯并噻唑-6-磺酸）自由基（2,2’--azino-bis-(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) radical,ABTS＋•）清除能力、Fe2＋螯合力、铁离子还原抗氧化力（ferric reducingantioxidant power,FRAP）和N,N-二甲基-对苯二胺（N,N-dimethyl-p-phenylenediamine,DMPD）自由基清除能力为指标,研究连钱草多糖的体外抗氧化活性。结果表明,超声辅助提取连钱草多糖的最优工艺为pH 7.2、液固比32∶1（mL/g）、超声功率270 W、超声时间8 min,此条件下多糖提取率在4.95%～5.12%范围内。体外抗氧化活性结果显示,连钱草多糖DPPH自由基清除能力为（0.51±0.04）μmol Trolox/mg,ABTS＋•清除能力为（0.69±0.04）μmolTrolox/mg,Fe2＋螯合力为（0.51±0.29）μmol EDTA/mg,FRAP值为（3.45±0.03）μmol Trolox/mg,DMPD自由基清除能力为（0.17±0.01）μmol Trolox/mg。     

酶解缫丝蚕蛹蛋白抗氧化肽的分离与稳定性研究

目的：研究酶解缫丝蚕蛹蛋白抗氧化肽的分离和稳定性,为其开发应用提供基础数据。方法：超滤分离酶解缫丝蚕蛹蛋白抗氧化肽,比色法测定其抗氧化能力。结果：超滤分级后得到分子质量为200～3 000 D的酶解缫丝蚕蛹蛋白抗氧化肽对O2－•、•OH、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基的IC50分别为18.85 mg/mL、3.13 mg/mL、35.23 μg/mL。该抗氧化肽经过4 h胃蛋白酶+胰蛋白酶处理前后对DPPH自由基清除率分别为81.05%、82.26%;在pH 4、8条件下处理1 h,对DPPH自由基清除率分别为98.02%、11.80%（100 μg/mL）;在温度95 ℃条件下处理1 h,对DPPH自由基清除率为87.11%（100 μg/mL）;用浓度为1.0 mol/L的NaCl处理6 h,相比对照组,对DPPH自由基清除率由51.58%下降到22.68%（60 μg/mL）。结论：超滤后得到的分子质量为200～3 000 D的酶解缫丝蚕蛹蛋白抗氧化肽的抗氧化能力比酶解原液有一定提高;且在酸性、高温、脱盐处理后对DPPH自由基的清除能力保持较好;胃肠道消化酶对其DPPH自由基清除能力的影响不显著（P＞0.05）。     

微波辅助提取澳洲坚果壳多糖的工艺优化及抗氧化性评价

优化微波辅助提取澳洲坚果壳多糖的提取工艺,并测定其多糖的抗氧化性。在单因素试验的基础上,以多糖提取率为指标,通过L9（33）正交试验优化其多糖的提取工艺参数,并通过澳洲坚果壳多糖对•OH、1,1-苯基-2-苦肼基（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基和O2－•的清除来评价其抗氧化能力。结果表明,最佳提取工艺参数为微波功率200 W、微波时间2.5 min、料液比1∶50 （g/mL）,在该条件下多糖的平均提取率为0.70%;多糖质量浓度为0.027 5 mg/mL时,对• OH、DPPH自由基和O2－•的清除率可分别达到63.11%、61.90%和80.09%,说明提取的澳洲坚果壳多糖对• OH、DPPH自由基和O2－•有较好的清除能力。     

龙眼核多酚提取工艺的正交试验优化及其分离纯化与结构表征

采用正交试验设计优化龙眼核多酚的提取条件。在单因素试验的基础上,以乙醇体积分数、料液比、提取时间、提取温度为自变量,以龙眼核多酚提取量为考察指标,经过四因素三水平正交试验得出龙眼核多酚提取的最佳工艺条件：乙醇体积分数40%、料液比1∶20（g/mL）、提取温度70 ℃、提取时间90 min。在该条件下龙眼核多酚提取量为36.15 mg/g。通过对4 种树脂静态吸附及解吸性能的比较,确定D3520型树脂为龙眼核多酚分离纯化的理想树脂,洗脱剂乙醇体积分数为40%时,树脂对多酚的解吸率最高。采用傅里叶变换离子回旋共振质谱（Fouriertransform ion cyclotron resonance mass spectrometry,FT-ICR-MS）对龙眼核多酚结构进行初步分析,结果表明,龙眼核多酚主要成分为以鞣花酸及其衍生物为主的小分子质量水解单宁。通过核磁共振、紫外光谱和红外光谱对FT-ICR-MS中2 种丰度很高的物质进行分析,确定其分别为鞣花酸和(S)-flavogallonic acid,后者为鞣花酸的衍生物。