固相萃取-高效液相色谱-二极管阵列/荧光检测器串联法快速检测汁用甜橙中9种多甲氧基黄酮成分

建立固相萃取(solid phase extraction,SPE)前处理-高效液相色谱串联二极管阵列和荧光检测器(high performance liquid chromatography with diode array detector/fluorescence detector,HPLC-DAD/FLD)快速检测甜橙汁中9种多甲氧基黄酮(polymethoxyflavones,PMFs)的方法。橙汁经粗滤后过C18固相萃取柱,依次以超纯水、体积分数30%乙腈清洗除杂,乙酸乙酯洗脱,氮气吹干后用甲醇溶解,制得橙汁PMFs样品。以体积分数0.05%H3PO4、甲醇、体积分数50%四氢呋喃为HPLC流动相进行反相梯度洗脱,利用DAD、FLD同时获得各物质的紫外和荧光光谱及峰面积,从而对样品PMFs做定性和定量检测。该条件下,9种PMFs在10 min内实现快速分离。采用外标法定量,紫外检测波长330 nm,荧光激发和发射波长分别为340 nm和450/500 nm,各物质线性关系良好(R20.999),紫外和荧光定量限分别为4.00~61.2μg/L和0.024~0.61 mg/L(对原果汁),橙汁PMFs加标回收率为96.4%~104.2%(紫外)和94.2%~102.1%(荧光),2种检测器定量结果具有良好的一致性。该方法前处理简便、耗时短、成本低,适合橙汁中多甲氧基黄酮成分的快速检测。按本方法对11个汁用甜橙品系鲜榨汁进行了分析,结果显示"渝早橙"PMFs含量最高,具备进一步开发的优良潜力。     

超高效液相色谱法同时测定柑橘中11种类黄酮物质

通过正交试验优化样品前处理条件,建立超高效液相色谱快速检测柑橘中11种类黄酮物质的方法。以甲醇-乙酸溶液为流动相,梯度洗脱,8种黄烷酮和3种多甲氧基黄酮11min内完全基线分离(检测波长283nm和330nm)。方法检出限为0.005～0.02mg/kg(RSN=3),线性方程的相关系数均达到0.9993以上。果皮和果汁的回收率分别为94.6%～100.2%,94.5%～101.8%;相对标准偏差(n=6)分别为1.1%～3.7%,0.9%～3.9%。该方法快速、高效、低成本、环境友好、结果准确可靠,能满足柑橘中类黄酮化合物的检测要求。     

免疫亲和柱-高效液相色谱紫外法检测牛奶及奶粉中黄曲霉毒素M_1

建立免疫亲和柱富集净化、高效液相色谱-紫外法检测牛奶及奶粉中黄曲霉毒素M1的分析方法。该方法样品经离心处理、免疫亲和柱净化,即可应用液相色谱-紫外法检测。结果表明,不同加标水平下牛奶和奶粉添加黄曲霉毒素M1回收率分别为87.4%~108%、89.5%~103%,RSD分别为2.61%~7.83%和2.07%~4.15%。方法检测灵敏度为0.1 ng/mL牛奶、2.0 ng/g奶粉。该方法能够特异性的检测样品中的黄曲霉毒素M1,不需荧光检测器就能达到较高的灵敏度,前处理简便,实用性强。     

液相色谱法测定柑橘果实中类黄酮的方法研究

文中以柑橘中常见的、含量丰富的柚皮素-7-β-芸香糖苷等10种类黄酮为研究对象,建立了同时测定柑橘中黄烷酮和多甲氧基黄酮含量的高效液相色谱分析方法。采用Waters Symmetry C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为0.2%乙酸水溶液和乙腈,梯度洗脱,二极管阵列检测器,检测波长为287 nm和330 nm,柱温25℃,流速1.0 mL/min。外标法定量,柚皮素-7-β-芸香糖苷、柚皮苷、橙皮苷、新橙皮苷、香风草苷、柚皮素、橙皮素、甜橙黄酮、川皮苷和桔黄酮等10种类黄酮的线性范围为0.01～27.00 mg/L(r≥0.99),检出限为0.01～0.02 mg/L。果汁的平均加标回收率为在94.20%～106.58%之间,相对标准偏差为1.15%～5.41%;果皮的平均加标回收率为95.15%～101.19%,相对标准偏差为1.47%～3.78%。     

浓缩还原橙汁饮料中果汁含量快速检测方法探究

果汁含量是浓缩还原橙汁的主要质量指标,也是判定其是否掺假的重要依据。本研究发现:不同产地、不同果汁含量的浓缩还原橙汁饮料中,可溶性物质在325nm紫外波长处有特征吸收,并且与22种常用添加剂溶液的紫外吸收有明显区分;采用自主研制的快速检测设备,将橙汁中可溶性物质按分子量大小分离,325nm下连续检测,得到橙汁可溶性物质按分子量大小分布的紫外特征吸收峰,其峰面积与橙汁含量呈现正相关;以100%巴西浓缩还原橙汁为标准参照,用外标法计算果汁含量。该方法样品前处理简单,只需过滤、超声,即可经凝胶色谱柱分离、检测;色谱柱分离和325nm的检测波长,有效避免了22种常用添加剂对果汁含量检测的干扰;该方法精密度高(RSD6.0%)、线性关系好(R2=0.9988)、抗干扰性强,可用于果汁含量大(等)于10%的橙汁饮料中原果汁含量的快速、大批量检测。     

HPLC法检测乳制品中左旋咪唑

建立了乳制品中左旋咪唑的高效液相色谱分析方法。样品经前处理后,以磷酸二氢钠水溶液—甲醇溶液为流动相,C18反相色谱柱分离,紫外检测器214nm检测。结果表明,在0.2~100mg/kg范围内,该方法呈良好的线性关系,且回收率为84%~107%。本方法用于乳制品中左旋咪唑的测定,操作简单,定量准确,重复性好。     

果酱和罐头中诱惑红的高效液相色谱测定法

建立果酱和罐头中诱惑红的高效液相色谱测定方法。样品中的诱惑红色素经提取后在酸性条件下被聚酰胺粉吸附,在碱性条件下解吸附,以甲醇和乙酸铵溶液为流动相,等度洗脱,紫外检测器检测,波长254nm,以相对保留时间定性,色谱峰面积定量。浓度与峰面积线性关系良好(r=0.9995),回收率83.0%~105.0%,相对标准偏差小于20%,最低检出浓度为2.5mg/kg;该方法操作简便、灵敏、准确,适用于果酱和罐头中诱惑红的检测。     

HPLC-UV-FL串联法测定染色废水中的苯胺

利用固相萃取-高效液相色谱紫外荧光串联建立了染色废水中苯胺的检测方法。样品经MCX固相萃取小柱提取、净化后,采用Kromasil C18柱(250 mm×4.6 mm,内径5μm)分离,水/乙腈(20/80,体积比)为流动相,紫外检测波长为235 nm,荧光检测波长:λex为225 nm,λem为335 nm,外标法定量。试验结果显示,荧光检测条件下,苯胺在0.001~0.500 mg/L范围内呈良好的线性关系,最低检出限LOD为0.001 mg/L,定量检出限LOQ为0.003 mg/L。紫外检测条件下,苯胺在0.02~5.00 mg/L范围内呈良好的线性关系,最低检出限LOD为0.02 mg/L,定量检出限LOQ为0.06 mg/L,方法回收率在95.6%~101.8%,RSD为2.2%~5.2%,能满足测定要求。     

高效液相色谱法检测乳品中3种甜味剂

建立了乳制品中安赛蜜、阿斯巴甜和纽甜的高效液相色谱分析方法。样品用沉淀剂沉淀过滤后,以乙腈-磷酸二氢钠溶液为流动相,C18反相色谱柱分离,紫外检测器210nm检测。结果表明:3种甜味剂可在25min之内实现完全分离。安赛蜜和阿斯巴甜在1~100mg/kg,纽甜在0.5~100mg/kg范围内呈良好的线性关系,回收率为84.3%~102.6%。该方法用于乳制品中3种甜味剂的测定,灵敏度高,定量准确,节省时间和成本。     

高效液相色谱法测定米糠油中谷维素

建立固相萃取柱—液相色谱法测定米糠油中谷维素六种谷维素组分及总量的检测方法。采用二醇基固相萃取小柱提取净化样品,以谷维素混合标准品(γ-Oryzanol)进行定量,色谱柱为Agilent ZORBAX Eclipse Plus C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相为含1%乙酸的乙腈∶异丙醇=95∶5,紫外检测器检测(波长321 nm)。六种谷维素组分及总量的平均回收率分别为95.6%~105.7%、97.8%~100.2%,精密度分别为0.1%~4.6%、0.7%~3.4%。该方法可用来测定米糠油中谷维素组分及总量,为深入研究谷维素提供技术支持。     

HPLC–PDA/ESI–MS/MS detection of polymethoxylated flavones in highly degraded citrus juice: a quality control case study

Highly degraded citrus fruit juices collected during a quality control investigation of the Italian Ministry of Agricultural Alimentary and Forestry Policies (MIPAAF) were analyzed for verifying their technological history. The analyzed samples were fermented black fluids stated as degraded first strength juices, in order to justify communitarian aids. Polymethoxylated flavones (PMFs) detection of solid phase extracted (SPE) purified samples provided clean chromatograms and good separation of compounds of interest using high performance liquid chromatography coupled with diode array and mass spectrometry HPLC–PDA/ESI–MS/MS. Since the PMFs concentration is elevate in peel flavedo, it is directly correlated with juice extraction strength. Results showed that all analyzed samples presented a PMFs concentration ranging from two to eight times first strength juices, not respecting the minimum quality requirements of the European regulatory framework.     

氧化胭脂虫红酸用于蘑菇中的铁离子检测

为进一步开发胭脂虫红酸的荧光检测应用，以胭脂虫红酸为原料，高碘酸钾为氧化剂，通过乙醇/水热法一步合成水溶性可发射蓝色荧光的氧化胭脂虫红酸（oxidized carminic acid，OCA）。通过傅里叶变换红外光谱法和X射线光电子能谱分析表明OCA结构中含有共轭芳香环结构和丰富的含氧官能团，透射电子显微镜和动态散射光测试表明其平均粒径约为7.5 nm。光学测试表明，OCA的荧光发射位于380～620 nm区间，最大激发波长为336 nm，最大发射波长为445 nm；其荧光在pH 1～9的溶液和含有不同阴离子的盐溶液中稳定性良好；紫外-可见光测试显示其在波长225 nm处有最大吸收峰。OCA对铁离子（Fe3＋）有良好的选择性，加入Fe3＋会导致其荧光强度明显降低，荧光发射峰积分面积减小率与Fe3＋质量浓度在11.2～56.0 mg/L范围内具有良好的线性关系，检出限为2.5 mg/L。应用结果表明，基于OCA作为荧光传感器的荧光检测方法用于实际样品中Fe3＋的检测，样品回收率在95.3%～110.4%之间，相对标准偏差在2.3%～4.6%之间，表明该方法可用于香菇、白菇和杏鲍菇等蘑菇中Fe3＋的含量检测，方法可靠。     

橙汁饮料中橙与橘成分双重实时荧光定量PCR检测技术

目的：建立双重实时荧光定量PCR检测橙汁饮料中橙与橘成分的方法。方法：通过设计和筛选橙、橘成分的引物和探针,检测水果寻找橙和橘的荧光扩增规律,利用橙和橘在FAM/VIC两个荧光通道上的比值差异来判定橙、橘成分。采用模拟橙汁掺杂柑橘汁试验验证方法检测的最低掺杂比例,对市售橙汁饮料进行检验来验证方法可行性。结果：纯橙水果在FAM和VIC两通道均有荧光扩增曲线,FAM/VIC通道荧光比值在0.5±0.2的范围内,而纯橘水果仅在FAM通道有很强的荧光扩增曲线。模拟掺杂试验中,可以检测出橙汁中掺有10%及以上的柑橘汁。结论：该方法能够检测橙汁饮料中的橙和橘成分,可用于市售橙汁饮料的鉴伪。     

柑橘中多甲氧基黄酮生物活性及应用研究进展

芸香科柑橘属中的多甲氧基黄酮(PMFs),由于具有抗炎、抗氧化、抗诱变、抗癌等生物活性而备受青睐。而且PMFs的提取使得柑橘果汁加工中的果皮得到充分利用,对其深入研究具有重大的经济效益和社会效益。本文对PMFs的结构及其生物活性,在柑橘分类学研究、柑橘果汁掺假和保健食品中的应用进行了综述。     

高效液相色谱光化学在线衍生荧光法检测鸡肉中16 种磺胺类药物残留

采用高效液相色谱-光化学柱后在线衍生-荧光检测法检测鸡肉中16 种磺胺类药物残留量。鸡肉样品经过乙腈提取并脱脂净化,色谱柱分离,光化学在线衍生并直接用荧光检测器检测。流动相为0.3%的冰乙酸和甲醇溶液梯度洗脱,流速0.7 mL/min、柱温36 ℃,激发波长320 nm、发射波长450 nm,16 种磺胺类药物得到良好分离。16 种磺胺药物在0.13～67.89 μg/mL质量度范围内,线性良好（R≥0.994 0）,回收率在61.2%～106.6%之间,相对标准偏差为0.3%～13.9%,检出限为1.0～67.4 μg/kg。该方法灵敏、准确、快速,可满足鸡肉中磺胺类残留的检测。     

不同晚熟柑橘中酚类物质的含量检测及分析

采用超高效液相色谱(ultra-performance liquid chromatography,UPLC)对9种晚熟柑橘(沃柑、春见、大雅柑、不知火、默科特、红肉脐橙、伦晚脐橙、红翠2号和塔罗科血橙)中的主要酚类物质(13种类黄酮和7种酚酸)进行测定,分析比较不同品种柑橘果皮、果肉和果汁(柑橘原汁)中酚类物质种类和含量的差异。结果表明:9个柑橘品种的果皮、果肉、果汁中,类黄酮均以橙皮苷为主,酚酸以阿魏酸为主,且果皮中多甲氧基黄酮含量丰富。在9个柑橘品种果汁中,春见的橙皮苷、咖啡酸含量最高。果肉中,沃柑中阿魏酸、咖啡酸、芥子酸含量最高,塔罗科血橙的橙皮苷、对香豆酸含量最高。果皮中,默科特的芸香柚皮苷、川皮苷、阿魏酸含量最高。杂柑果皮中咖啡酸、阿魏酸及川皮苷含量高于橙类。晚熟柑橘含有丰富的酚类物质,并呈现显著的多样性。     

Important flavonoids and limonin in selected Thai citrus residues

The distributions of important flavonoids and limonin in selected Thai citrus residues were investigated in this study. The residues of interest were peels of pomelo (Citrus grandis (L.) Osbeck cv. Kao Yai and cv. Kao Nampheung), residues after juice extraction of tangerine (Citrus reticulata Blanco cv. Sainamphueng and cv. Bangmod) and peels and residues after juice extraction of kaffir lime (Citrus hystrix DC). Flavonoids were characterized and quantified in terms of flavanones, i.e., naringin and hesperidin, and polymethoxyflavones (PMFs), i.e., nobiletin, sinensetin and tangeretin. Naringin was a dominant flavanone in polmelo peels. Three PMFs were found in all samples with varying contents. Comparing the samples, residues from tangerine cv. Bangmod exhibited the highest value of each PMFs. Limonin was present in small amounts in pomelo peels and residues after juice extraction of tangerine and kaffir lime. All samples were good sources of dietary fibre, with a total dietary fibre content of more than 60 g/100 g on a dry weight basis with high proportion of soluble dietary fibre.     

14种柑橘皮中多甲氧基黄酮成分分析

建立柑橘皮中9 种多甲氧基黄酮（polymethoxyflavonoids,PMFs）快速定量检测方法,比较不同品种来源柑橘皮中PMFs的含量差异,为寻找高含量PMFs高生物活性柑橘皮的药食两用素材提供参考。采用超声乙醇提取、高效液相色谱方法快速准确检测PMFs,并对14 种柑橘皮、陈皮中9 种特征物质PMFs含量进行比较。结果显示9种PMFs在对照品溶液质量浓度范围内具有良好的线性关系,且准确度和精确度良好。分析发现,不同品种来源柑橘皮中PMFs种类和含量差异很大。江西陈皮、重庆柑橘、广西皇帝柑、广西砂糖橘果皮中PMFs总含量很高,均在7495.19 μg/g以上,其中广西沙糖橘果皮PMFs总含量高达10 412.18 μg/g。该方法简便,稳定性好,可为柑橘皮中PMFs生物活性研究的深入、柑橘皮产品开发和中药原料选材及其质量控制提供科学依据。     

Photochemical behaviour of hydrolysed keratin

An investigation into the influence of UV irradiation on keratin hydrolysates was carried out using UV-Vis spectroscopy, Fourier transform infrared spectroscopy (FTIR) and fluorescence spectroscopy. It was found that the absorption of keratin hydrolysates in solution increased during irradiation of the sample, most notably between 250-280 and 320-410 nm. The increase in absorbance in the region 320-410 was because of the new photoproducts formed during UV irradiation of keratin hydrolysates. The fluorescence of keratin hydrolysates was observed at 328 nm after excitation at 270 nm. UV irradiation caused fluorescence fading at 328 nm, and after 60 min of irradiation, a new broad weak band of fluorescence, attributable to new photoproducts, emerged in the UV wavelength region with emission maximum between 400 and 500 nm. FTIR spectroscopy results showed degradation of keratin under UV irradiation. A slight increase in oxidized sulphur species was also observed. The results obtained suggest that UV irradiation can be used as modifying agent for preparation of keratin hydrolysates for cosmetic applications.