竞争性酶联适配体可视化检测玉米赤霉烯酮

建立一种基于竞争性酶联适配体检测食品中玉米赤霉烯酮的可视化分析方法.将生物素标记的玉米赤霉烯酮适配体通过生物素-亲和素连接固定在微孔板上,玉米赤霉烯酮适配体的互补链(cDNA)与辣根过氧化物酶(HRP)连接形成cDNA-HRP信号探针,cDNA-HRP信号探针和靶标竞争与适配体结合,加入TMB显色液和硫酸终止液后,即可...     

直接竞争酶联免疫法检测大麦中玉米赤霉烯酮

建立一种大麦中玉米赤霉烯酮的快速检测方法.采用酶联免疫吸附法(ELISA)对玉米赤霉烯酮进行测定.该方法的最低检出限(IC15)约为0.01 μg/kg,灵敏度(IC5)约为0.08μg/kg,大麦样品加标回收率在73.3%～96.7%之间,最低检出限为4μg/kg.此方法特异性强,灵敏度高,样品处理过程较为简单,适用于大量样品的快速检测.     

化学发光酶免疫法检测玉米中玉米赤霉烯酮

应用抗玉米赤霉烯酮单克隆抗体,以辣根过氧化物酶催化鲁米诺-过氧化氢化学发光体系,建立了一种简便、快速、高特异性的间接竞争化学发光酶免疫法用于检测玉米中的玉米赤霉烯酮。所建立的方法分析灵敏度为0.09 ng/mL,批内变异系数小于9.1﹪,批间变异系数小于14.7﹪,样品的加标回收率为79.6﹪～97.6﹪,所建立的标准曲线相关系数为0.9884,检测线性范围为0.104～1.69 ng/mL,检测时间为60 min。     

玉米油中玉米赤霉烯酮的ELISA测定

用间接竞争酶联免疫分析法（ELISA法）对3种玉米油中的玉米赤霉烯酮残留进行了测定,以评价试剂盒的性能。结果表明,标准曲线线性方程y=-2.2x+0.66,相关系数r为0.9974,IC50为0.29 μg/kg,线性范围为0.05~4.05 μg/kg,灵敏度为0.05 μg/kg,添加回收率均大于85%。该法测定玉米赤霉烯酮灵敏度高,重复性好,特异性高,适合用于检测各种玉米油中的玉米赤霉烯酮残留。     

表面等离子共振技术快速检测食品中的 玉米赤霉烯酮毒素

目的建立基于表面等离子共振(surface plasmon resonance,SPR)技术快速检测食品中玉米赤霉烯酮毒素(zearalenone,ZEN)的方法。方法采用表面自组装技术(self-assembled monolayer,SAM)在金膜的表面修饰羧基基团,将ZEN抗原与牛血清白蛋白(albumin from bovine serum,BSA)偶联物(ZEN-BSA)通过共价键固定在芯片的表面,采用竞争法检测样品中的玉米赤霉烯酮毒素。结果该方法的检测限为8.2 ng/m L,ZEN单克隆抗体与呕吐毒素、黄曲霉毒素B_1、赭曲霉毒素、伏马毒素等没有交叉反应,与α-玉米赤霉烯醇和β-玉米赤霉烯醇交叉反应率分别为15.3%和11.5%。结论本方法具有简便、快速和高灵敏度等优势,在食品中真菌毒素的快速检测方面具有潜在的应用价值。     

基于单克隆抗体的玉米赤霉烯酮检测方法研究

建立一种检测谷物样品中玉米赤霉烯酮的酶联免疫分析方法。将玉米赤霉烯酮修饰羧基制得半抗原,再与钥孔嘁血蓝蛋白偶联,免疫BALB/c小鼠,经过细胞融合与筛选,得到3株具有高亲和力和特异性的杂交瘤细胞,分别为2E8、2C7、6E11,重链类型均为IgG_1,轻链类型均为Kappa。细胞株2E8分泌的抗体特异性较好,制备腹水得到单克隆抗体用于后续实验。建立检测玉米赤霉烯酮的间接竞争酶联免疫吸附(Enzyme-Linked Immunosorbent Assay,ELISA)方法,方法的灵敏度(IC_(50))为(0.13±0.02)ng/mL,检测限(IC_(15))为(0.02±0.01)ng/m L,在玉米和燕麦中的检出限分别为2.4μg/kg,4.0μg/kg。加标回收率为82.80%~109.20%,变异系数为3.27%~15.38%。经高效液相色谱串联质谱仪验证(R~2=0.996 3)二者具有良好的相关性。     

玉米赤霉烯酮一步ELISA法的建立及应用

为了建立一种快速、准确的检测饲料及其原料中玉米赤霉烯酮的酶联免疫一步法。在制备玉米赤酶烯酮半抗原、免疫原及单克隆抗体的基础上,运用方阵法确定包被抗原、抗体的浓度,筛选稳定的ELISA检测体系,并在此基础上考察了抗体的特异性。建立了检测饲料及其原料中玉米赤霉烯酮的方法,猪饲料、牛饲料、玉米渣和麦麸的检测限分别为96.2、92.7、80.5和86.7μg/kg。在饲料及原料中定量添加玉米赤霉烯酮,酶联免疫的回收率为79.4%~104.9%,开发的酶联免疫试剂盒与德国拜发试剂盒对实际样本进行检测,两种试剂盒对样本阴阳性判定一致。本研究为饲料及其原料中玉米赤酶烯酮的监管提供了技术支撑。      

玉米赤霉烯酮降解酶酶学性质研究

探究了温度和pH值对玉米赤霉烯酮降解酶的活性影响,明确了该酶的最适反应温度为37℃,最适反应pH值为8。Li+及Mg2+对该酶有激活作用,Cu2+、Mn2+、Co2+、Ca2+、Zn2+、Ni2+、Fe3+、EDTA等对该酶有抑制作用。并通过化学修饰的方法初步考察了该酶的功能基团,结果表明该酶的活性中心与丝氨酸和赖氨酸密切相关。     

酶联免疫法检测动物源性产品中玉米赤霉醇残留

运用酶联免疫法(ELISA),建立检测动物源性产品中玉米赤霉醇残留的初筛检测方法.通过对动物源性产品中玉米赤霉醇残留量的检测表明,该方法的最低检测限为1.0μg/kg,最低检测限附近的添加回收率在72.4%～98.6%之间.     

玉米赤霉烯酮检测方法研究进展

玉米赤霉烯酮是一种具有雌激素作用真菌毒素,主要污染玉米、麦类、谷物等,严重影响农业经济及人类健康,因此有必要研究能准确、灵敏检测玉米赤霉烯酮方法。该文对玉米赤霉烯酮检测方法进行综述。     

济南部分地区谷物制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇及玉米赤霉烯酮的污染状况

目的 了解济南部分地区常见的即食谷物加工制品中脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol, DON)和玉米赤霉烯酮(zearalenone, ZEN)的污染情况。方法 在济南市区内4个不同地点随机采集即食谷物加工制品共50份, 酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)检测DON、ZEN的含量, 根据食品安全国家标准GB 2761-2017食品中真菌毒素限量对结果进行分析。结果 50份样品中, DON和ZEN的检出率分别为90.0%、76.0%, 超标率分别为48.0%、16.0%, 中位数分别为975.0、39.2 μg/kg。12份有食品包装批号和38份无食品包装批号的样品中, DON超标率分别为33.3%、52.6%, ZEN超标率分别为8.3%、18.4%, 差别均无统计学意义(DON: X2=1.361, P=0.243>0.05; ZEN: X2=0.144, P=0.704>0.05)。DON、ZEN超标率在不同采样点的差别均无统计学意义(DON: X2=2.985, P=0.225>0.05; ZEN: X2=1.453, P=0.484>0.05)。在零食类谷物制品和主食类谷物制品中, DON超标率的差别无统计学意义(P=0.749>0.05), ZEN超标率的差别有统计学意义(P=0.010<0.05)。结论 济南部分地区即食谷物加工制品中存在一定程度的DON、ZEN污染, 其中DON污染更严重, 这种污染情况同时存在于两种包装形式、零食和主食两大类以及不同售卖地点的谷物制品中。提示济南部分地区谷物加工制品的DON、ZEN污染情况应引起相关监管机构的重视。     

不同培养条件对禾谷镰刀菌产玉米赤霉烯酮的影响

研究不同培养条件对禾谷镰刀菌（Fusarium graminearum）产玉米赤霉烯酮（zearalenone,ZEN）能力的影响。选取不同的培养基配比、培养时间、培养温度、摇床转速及光暗反应对禾谷镰刀菌进行培养。在单因素试验的基础上,分别采用正交试验设计和响应面设计的方法进行统计学分析。结果表明：禾谷镰刀菌的最适培养基为每升超纯水含葡萄糖60 g、KNO3 1.5 g、酵母浸出膏1.0 g、蛋白胨20 g、NaNO3 6.0 g、MgSO4 0.5 g、K2HPO4·3H2O 1.0 g、KCl 0.5 g、Fe2(SO4)3 0.025 g;当摇床转速为92 r/min、照明时间为10 h/d、培养温度为22.9 ℃时,20 d毒素质量浓度可达到249.80 μg/L。     

玉米样品前处理方法和掩蔽剂对ELISA检测玉米赤霉烯酮的影响

探讨粉碎时间、提取剂、掩蔽剂质量分数等因素对酶联免疫吸附分析（enzyme-linked immunosorbentassay,ELISA）法检测玉米赤霉烯酮的影响。结果表明,玉米样品粉碎时间180 s以上、70%甲醇溶液为提取剂、添加0.025%鱼皮胶的磷酸盐缓冲液为掩蔽剂时,检测结果最为稳定。本实验结果对高稳定性玉米赤霉烯酮检测ELISA试剂盒的开发具有参考价值。     

酶联免疫法测定肌肉中氟喹诺酮类药物效果探讨

目的探讨酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)快速测定肌肉中氟喹诺酮类药物的效果。方法样品经过前处理之后,在肌肉中添加10、50、100、200和400 ng/g的氟喹诺酮类药物,利用ELISA法在20~25℃下测定。结果氟喹诺酮类药物酶联免疫试剂盒的相关系数r为0.9976,50%抑制浓度(IC50)介于0.306~0.351 ng/g之间;在0~400 ng/g范围内,肌肉中氟喹诺酮类药物的回收率在81.8%~100.3%之间,精密度在0.4%~12.0%之间,最低检测限为4.0 ng/g。结论酶联免疫吸附法检测肌肉中氟喹诺酮类药物的结果相对稳定、可靠,能够满足初检筛选要求,值得在基层检测部门推广使用。     

Monoclonal-based enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of zearalenone in cereals

A monoclonal antibody against zearalenone (ZEA) was produced and used successfully to develop a direct competitive enzyme-linked immunosorbent assay (DC-ELISA) for the analysis of ZEA in cereals. This DC-ELISA had a limit of detection of 0.15?±?0.02 µg l^?1 and an IC₅₀ value of 1.13?±?0.16 µg l^?1. Matrix interference was minimized by dilution of the sample extract before ELISA assays. Aqueous methanol (80%) gave good extraction efficiencies, and the recovery from spiked rice, barley, and corn samples averaged between 87 and 112%. Although ZEA was detected in seven (9%) of 80 rice samples and in eight (16%) of 50 barley samples, the concentration of ZEA in samples was around or below the limit of detection of DC-ELISA. Among 38 corn samples, ZEA was detected in nine (24%) samples in the range 41.0–909.8 µg kg^?1. Re-analysis of the ELISA-positive corn samples by high-performance liquid chromatography (HPLC) confirmed that seven (18%) corn samples were positive. The ZEA results for corn showed very good agreement between DC-ELISA and a commercial AgraQant® zearalenone kit (r ²?=?0.98). Thus, the monoclonal antibody-based DC-ELISA could be applied to the preliminary screening of ZEA contamination when analysis of a large sample number is needed.     

2015年山东部分地区食用植物油中黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮污染状况调查

摘 要：目的 了解山东省部分地区食用植物油中黄曲霉毒素B1和玉米赤霉烯酮的污染状况,为食品安全监督管理提供科学依据。方法 在山东省部分市/县采集食用植物油,256份8类植物油,散装油206份,定型包装油59份,其中包括花生油105份、大豆油78份、玉米胚芽油9份、香油46份、调和油10份以及其他食用油17份,酶联免疫吸附法检测AFB1和ZEN的含量,并根据食品安全国家标准食品中真菌毒素限量分析植物油中的AFB1和ZEN污染状况。结果 256份样品中,AFB1和ZEN检出率分别为44.5%、72.1%,超标率分别为7.2%、6.0%,中位数分别为0.0、4.9 μg/kg。定型包装和散装油中,AFB1超标率分别为0.0%、9.2%,差异有统计学意义（?2=4.55,P＜0.05）,中位数分别为0.6 μg/kg、0.0 μg/kg;ZEN超标率分别为10.2%、4.9%,中位数分别为5.1 μg/kg、4.8 μg/kg。各城市间AFB1总体来说差异有统计学意义（?2=32.31,P＜0.05）;ZEN在不同地区间差异无统计学意义（?2=16.06,P＞0.05）。花生油和大豆油中AFB1超标率分别为16.2%、2.6%,差异有统计学意义（?2=8.93,P＜0.05）,其他种类植物油中未发现超标;花生油、大豆油、玉米胚芽油、香油、调和油ZEN的超标率分别为1%、1.3%、100.0%、8.7%、20.0%,各类食用油中ZEN超标率差异有统计学意义（P＜0.05）。结论 山东部分地区食用植物油中AFB1和ZEN污染严重,其中以散装油污染最为严重。花生油中AFB1、玉米油中ZEN污染严重,建议相关部门加强市场散装油的监管。     

ELISA检测盐酸克伦特罗残留的方法学评价

以盐酸克伦特罗(clenbuterolhydrochloride)重氮化后分别连接到牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)上制得免疫原BSA-CL和包被抗原OVA-CL。通过免疫兔获得含有多克隆抗体的血清,经硫酸铵沉淀、纯化,得到兔源抗CL的抗体,在此基础上建立了间接酶联免疫检测方法。实验结果表明,抗CL抗体最适稀释度为1:1000,羊抗兔酶联抗体(HRP-IgG)的最适稀释度为1:1500。该检测方法的检测灵敏度为1.452μg/L,线性检测范围为7.26～90.75μg/L。     

ELISA检测盐酸克伦特罗残留的方法学评侈

以盐酸克伦特罗（clenbuterol hydrochloride）重氮化后分别连接到牛血清蛋白（BSA）和卵清蛋白（OVA）上制得免疫原BSA-CL和包被抗原OVA-CL。通过免疫兔获得含有多克隆抗体的血清，经硫酸铵沉淀、纯化，得到兔源抗CL的抗体，在此基础上建立了间接酶联免疫检测方法。实验结果表明，抗CL抗体最适稀释度为1：1000，羊抗兔酶联抗体（HRP—IgG）的最适稀释度为1：1500。该检测方法的检测灵敏度为1．452μg／L，线性检测范围为7．26-90．75μg／L。