绿原酸对苹果采后灰霉病抗性的影响

绿原酸是苹果中含量最高的酚类物质,为探究外源绿原酸对苹果灰霉病的影响,本研究首先通过体外抑菌实验证实绿原酸可抑制灰葡萄孢（Botrytis cinerea）生长,并确定了最佳抑菌质量浓度（300 μg/mL）。以此质量浓度的绿原酸浸泡富士苹果30 min,24 h后损伤接种灰葡萄孢,以清水浸泡30 min的富士苹果作为对照,同时测定相关代谢酶活力及总酚、类黄酮和木质素含量。结果表明：与对照组相比,300 μg/mL绿原酸处理能显著降低苹果灰霉病发病率且减缓病斑扩展（P＜0.05）;提高几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶活力,诱导酚类代谢途径中多种酶类的响应,具体表现为显著提高苯丙氨酸解氨酶、肉桂酸-4-羟化酶以及4-香豆酰辅酶A连接酶活力（P＜0.05）,促进苹果果实总酚、类黄酮和木质素等抗性物质的积累,从而减缓灰霉病的发展。研究可为绿原酸在苹果采后灰霉病防治中的应用提供理论依据。     

根皮苷对苹果采后灰霉病的影响

为探究苹果特有酚类物质根皮苷对灰霉病的影响,以培养基体外接种灰霉菌确定抑菌效果,预实验筛选得 到活体实验的最佳质量浓度。以此质量浓度根皮苷溶液浸泡处理‘粉红女士’苹果20 min,诱导12 h,损伤接种灰 霉孢,定期统计发病情况并取样测定抗性相关指标,以清水浸泡为对照。结果表明：根皮苷可直接抑制灰霉菌的体 外生长,1.0 g/L的根皮苷处理可显著降低采后果实的发病率和抑制病斑直径的扩展（P＜0.05）,并诱导果肉苯丙 氨酸解氨酶、过氧化物酶和多酚氧化酶活力的升高,促进总酚、类黄酮和木质素的积累,同时降低了H2O2的含量, 果实抗性提高。结果可为根皮苷对采后病害抗性的机理研究提供理论依据。     

2,4-表油菜素内酯对葡萄果实采后灰霉病的抑制作用机理

为研究2,4-表油菜素内酯（2,4-epibrassionolide,EBR）处理对‘巨峰’葡萄果实采后灰霉病的抑制效果及作用机制,将葡萄果实经5 μmol/L EBR溶液处理12 h后刺伤接种灰葡萄孢（Botrytis cinerea）病原菌,然后置于25 ℃下贮藏60 h。结果显示：EBR处理有效抑制了葡萄采后灰霉病的发生和病斑直径的扩展,与单一接种病原菌和EBR处理相比,先用EBR处理后接种B. cinerea葡萄果实展现出更强、更快的抗病反应,表现为几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶和苯丙氨酸解氨酶等抗病相关酶活力及总酚含量显著提高（P＜0.05）,H2O2积累及超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、抗坏血酸过氧化物酶活力提高,同时VvCHI、VvGNS和VvPAL-like抗病基因表达显著增加（P＜0.05）;体外实验发现,EBR处理可显著抑制B. cinerea孢子的萌发,但对芽管伸长长度没有显著影响。结论：EBR处理主要是通过敏化反应机制诱导提高葡萄果实的抗病性,从而减轻灰霉病的发生。     

1-MCP诱导苹果采后灰霉病抗性的作用机理

为了探讨1-MCP对苹果采后灰霉病的影响及其抗性诱导机理,该文以“红富士”苹果为试材,采后用1μL/L 1-甲基环丙烯(1-MCP)熏蒸处理,以不经1-MCP处理的作为对照,常温(20±1)℃下放置24 h后,分别接种灰葡萄孢菌。结果显示:采后1-MCP处理较对照可显著降低苹果灰霉病的发病率,抑制病斑的扩张(p0.05)。经过5 d贮藏,1-MCP处理的苹果发病率仅为58.24%,显著低于对照(90.73%);贮藏结束时,处理组发病率不足70%,病斑直径为37.19 mm,而对照组几乎全部发病且病斑扩展至50.80 mm,1-MCP明显抑制了苹果灰霉病的发展。1-MCP处理能够诱导果实中苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)、过氧化物酶(POD)、β-1,3-葡聚糖酶(GLU)、几丁质酶(CHI)活性的提高,增加总酚、类黄酮和木质素的合成与积累,进而增强果实的抗病性。研究结果为1-MCP应用于苹果采后病害的防治研究提供理论依据和技术参考。     

外源绿原酸对苹果自身绿原酸合成及灰霉病抗性的影响

为了探讨外源绿原酸对苹果灰霉病抗性及自身绿原酸合成的影响，用300 μg/mL绿原酸溶液处理富士苹果30 min，1 d后接种灰霉菌，以清水处理作为对照组(CK)，统计病斑直径和发病率，测定绿原酸合成相关酶基因表达量及酶活性变化。结果表明:用300 μg/mL绿原酸处理后，苯丙烷代谢途径上游关键酶PAL、C4H、4CL活性显著增加，相应的基因表达量在接种灰霉菌6 h后均达到高峰，分别为CK组的10，5，2.5倍。同时，下游合成基因羟基肉桂酸-CoA酸酯/奎宁酸羟肉桂酸转移酶(HCT/HQT)48 h时处理组基因表达量达到峰值，约是CK组的3倍；对香豆酸3''-羟化酶(C3H)处理组在6 h和12 h时有两个较高的基因表达量，分别约为CK组基因表达量的3倍和5倍，刺激绿原酸合成量增加，从而诱导果实抗性增强，有效降低苹果灰霉病的发病率，减缓病斑扩张。结论:外源绿原酸处理能够诱导苯丙烷代谢途径酶类的响应，提高苹果体内自身的绿原酸水平，有效抑制苹果灰霉病。     

Trichothecium roseum的酸碱属性及pH值对其胞外酶活性和致病性的影响

目的：明确粉红单端孢（Trichothecium roseum）侵染果实的酸碱性质,测定3 种pH值孢子悬浮液接种对苹果果实病斑直径及胞外酶活性的影响。方法：用T. roseum接种“富士”苹果,测定果实病斑处的pH值变化。用pH值分别为3、5和7的孢子悬浮液接种果实,观察接种对果实病斑直径及病斑处果胶酶和纤维素酶活性的影响。结果：T. roseum接种后果实病斑处的pH值显著升高,由第0天的3.54升高至第12天的4.84,提高了36.7%。3 种pH值孢子悬浮液接种果实后,以pH 7接种的果实病斑直径最大,第9天时分别高出pH 5与pH 3接种的35.2%与68.0%。pH 7接种的果实病斑处具有最高的果胶酶及纤维素酶活性,第9天时的果胶甲酯酶、果胶甲基多聚半乳糖醛酸酶、多聚半乳糖醛酸酶活性分别为pH 3接种的2.95、1.61 倍和1.68 倍,为pH 5接种的2、1.25 倍和1.39 倍。此外,pH 7接种的果实病斑处纤维素酶和β-葡萄糖苷酶第9天的活性分别为pH 3接种的1.97 倍和1.64 倍,为pH 5接种的1.33 倍和1.3 倍。结论：T. roseum属碱化菌,中性或偏碱环境可提高该菌损伤接种苹果果实病斑处的胞外酶活性,增强其致病性。     

厚皮甜瓜果实对链格孢侵染抵抗能力的差异

以伽师瓜和86-1甜瓜为实验材料,研究贮藏期间甜瓜对病原菌抵抗能力的差异。用打孔器在果实赤道部位等距离打孔6个,每孔接种20 μL链格孢,于7 ℃冷库贮藏,研究果皮与果肉病斑直径、几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶、苯丙氨酸解氨酶、肉桂酸羟化酶和4-香豆酸-辅酶A连接酶活性的变化。结果表明:贮藏期间,86-1甜瓜果实病斑直径大于伽师瓜,且果肉病斑直径大于果皮;甜瓜接种链格孢后,果实病程相关蛋白及苯丙烷代谢酶活性均高于对照,在贮藏期间整体呈现先升高后下降的变化趋势。研究表明,伽师瓜果实抗病相关酶活性高于86-1甜瓜,果皮酶活性高于果肉,伽师瓜的抗病能力强于86-1甜瓜,果皮的抗病能力强于果肉。     

β-氨基丁酸抑制草莓低温贮藏过程中灰霉病的效果及其机理

以‘红颜’草莓为实验材料,研究β-氨基丁酸(β-aminobutyric acid,BABA)对草莓果实采后贮藏在低温((5±1)℃)条件下灰霉病的抑制效果及相关机理。草莓果实经过20 mmol/L的BABA处理后接种灰葡萄孢霉(Botrytis cinerea)孢子,然后在(5±1)℃的条件下贮藏12 d,结果发现BABA显著抑制了灰霉病的发生和病斑直径的扩展,与对照组相比,处理组几丁质酶(chitinase,CHI)和β-1,3-葡聚糖酶(β-1,3-glucanase,GLU)的活力分别提高了9.2%和54.9%,多聚半乳糖醛酸酶(polygalacturonase,PG)和纤维素酶(cellulose,Cel)的活力分别降低了29.3%和24.4%,同时,BABA提高了FaCHI和FaGLU基因的表达,抑制了FaPG和FaCel基因的表达;此外,体外实验的结果发现,BABA能够破坏灰葡萄孢霉孢子的质膜完整性,导致了孢子内部可溶性蛋白质和可溶性糖的泄漏。结果表明,BABA通过诱导抗病相关酶活力来提高抗病性、延缓果实软化并通过对病原菌的直接抑制作用减轻草莓果实采后灰霉病的发生。     

采前水杨酸处理对红地球葡萄潜伏侵染及采后灰霉病的防控效果

为明确采前水杨酸处理对葡萄潜伏侵染及采后灰霉病的影响,本研究首先分离并鉴定红地球葡萄生长过程中的主要潜伏侵染真菌,并研究水杨酸（salicylic acid,SA）对灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea）的抑菌效果及对果实抗性基因的诱导作用。本文以新疆红地球葡萄为试材,选取0（对照）、0.5、1.0、2.0 mmol/L水杨酸（SA）在膨大期、转色期和采收前2 d （预收期）喷施处理葡萄果穗,采用组织分离法分离不同时期潜伏侵染果实的病原真菌,通过形态学和分子生物学方法,对病原菌进行分类鉴定,明确主要潜伏侵染真菌的种类,统计果实采后损伤接种Botrytis cinerea后病斑直径和发病率的变化,并分析果实相关抗性基因的表达情况。结果表明:采前SA处理可以显著降低果实生长期间潜伏真菌率,对葡萄果实不同部位的潜伏侵染控制效果显著,1.0 mmol/L SA处理组优于其它组,其中对果实底部和果蒂潜伏侵染的控制效果优于顶部和果梗。此外,生长期果实共鉴定出4种主要潜伏病原真菌,分别为灰葡萄孢菌（Botrytis cinerea）、互隔交链孢霉（Alternaria alternate）、变色青霉（Penicillium discolor）和黑曲霉（Aspergillus niger）。1.0 mmol/L SA处理能显著抑制B.cinerea侵染造成灰霉病发病率上升和病斑直径的扩大,SA处理可在贮藏前期诱导采后葡萄果实VvPAL1、VvChi4D和VvGlu1基因的表达,中期后期诱导VvPAL2、VvPAL7和VvPAL15的基因表达,起到提高果实抗病性。因此,SA采前处理能提高红地球葡萄对潜伏侵染病害的抗性,对采后灰霉病也有较显著的抑制效果。     

温度对鲜食葡萄采后灰霉病发生规律的影响

本试验以‘玫瑰香’‘巨峰’‘红地球’3个鲜食葡萄品种为试材,利用有伤和无伤两种接种方式,研究不同温度条件(25℃、10℃、0℃)对葡萄采后灰霉病菌的抑制作用,从果实自身抗病生理角度分析温度对采后灰霉病的调控作用。结果表明,无论是无伤接种还是有伤接种,随着贮藏温度降低,各品种果实上的灰霉菌生长均会受到不同程度的抑制,当贮藏温度降至0℃时,7 d内3个品种果实上接种的灰霉菌均停止生长。10℃条件下,‘玫瑰香’果实上接种的灰霉菌菌落直径增加最快,无伤接种发病率最高,说明其在低温下对采后灰霉病的抗性较差。综上所述,可通过调控贮藏温度来降低葡萄灰霉病的发生。     

‘金冠’和‘富士’苹果采后活性氧相关代谢差异比较

以‘金冠’苹果和‘富士’苹果果实为试材,研究常温（23±2）℃后熟衰老期间活性氧（reactive oxygen species,ROS）相关代谢的变化。结果表明：‘金冠’硬度的下降快于‘富士’,呼吸强度高峰和乙烯释放高峰均比‘富士’早49 d出现。‘金冠’中的超氧阴离子自由基的产生速率、过氧化氢和丙二醛的含量在贮藏期间均高于‘富士’。‘富士’中的过氧化物酶、过氧化氢酶及超氧化物歧化酶活力在整个贮藏期间均显著或极显著低于‘金冠’（P＜0.05、P＜0.01）,且活力高峰出现时间比‘金冠’分别晚63、56、49 d。‘富士’中谷胱甘肽还原酶活力高峰出现时间虽比‘金冠’晚49 d,但其峰值却为金冠的2.11 倍。此外,与‘金冠’相比,‘富士’在常温后熟期间保持了较高的抗坏血酸含量和较低的抗坏血酸过氧化物酶活性。结论：‘金冠’采后ROS水平与ROS代谢有关的酶活性高于‘富士’,成熟衰老速度快,贮藏期短。不同品种苹果果实间的耐贮藏性差异可能与ROS水平密切相关,但考虑到ROS产生和清除体系复杂性,苹果果实的耐贮藏性与ROS代谢能力的联系还需要进一步研究阐明。     

Biocontrol of postharvest gray and blue mold decay of apples with Rhodotorula mucilaginosa and possible mechanisms of action

The efficacy of Rhodotorula mucilaginosa against postharvest gray mold, blue mold and natural decay development of apples and the possible mechanisms involved were investigated. The decay incidence and lesion diameter of gray mold and blue mold of apples treated by R. mucilaginosa were significantly reduced compared with the control fruits, and the higher concentration of R. mucilaginosa, the better the efficacy of the biocontrol. R. mucilaginosa also significantly reduced the natural decay development of apples following storage at 20 °C for 35 days or at 4 °C for 45 days followed by 20 °C for 15 days. Germination and survival of spores of Penicillium expansum and Botrytis cinerea were markedly inhibited by R. mucilaginosa in an in vitro test. Rapid colonization of the yeast in apple wounds was observed whether stored at 20 °C or 4 °C. In apples, the activities of peroxidase (POD) and polyphenoloxidase (PPO) were significantly induced and lipid peroxidation (malondialdehyde (MDA) content) was highly inhibited by R. mucilaginosa treatment compared with those of the control fruits. All these results indicated that R. mucilaginosa has great potential for development of commercial formulations to control postharvest pathogens on fruits. Its modes of action were based on competition for space and nutrients with pathogens, inducement of activities of defense-related enzymes such as POD, PPO and inhibition of lipid peroxidation (MDA content) of apples, so as to enhance the resistance and delay the ripening and senescence of apples.     

基于主成分分析和聚类分析的苹果香气成分比较及品种分类研究

为了探明选用的14种苹果间主要香气成分的差异,采用顶空固相微萃取(HS-SPME)结合气相色谱与质谱联用(GC-MS)对14种苹果的香气成分进行检测分析,并对检测结果进行主成分分析与聚类分析。结果表明,本实验共检测出73种香气成分,其中8种成分为所有品种苹果所共有,分别是乙酸己酯、己酸己酯、2-甲基-1-丁醇、1-己醇、1-辛醇、己醛、反式-2-己烯醛、α-法呢稀。主成分分析表明,寒富和昌红苹果综合得分较高,秦冠和秋锦苹果综合得分最低,该排名可以直观的反映出苹果间差异。聚类分析表明,14种苹果可分为四类:第一类聚集了11个品种,即山东富士、王林、新疆冰糖心富士、寒富、小国光、华富、秦冠、甘肃富士、乔纳金、河北富士。第二类聚集了2个品种,即新红星和国光。秋锦和昌红自成一类。将两种分析方法结合,筛选得到的不同产地富士、王林、昌红和寒富四种苹果香型特点更为突出,为育种者和消费者优选苹果提供理论基础和参考。     

一氧化氮合酶途径在精氨酸诱导番茄果实采后抗病性中的作用

以绿熟期‘中蔬4号’番茄果实为实验材料,研究了精氨酸（arginine,Arg）对番茄果实灰霉病发生的影 响及一氧化氮合酶（nitric oxide synthase,NOS）途径在其中的作用及机制。结果表明：0.0～10.0 mmol/L范围内, 5.0 mmol/L的Arg对番茄果实灰霉病的发生率及病斑面积的扩展控制效果最佳。同时5.0 mmol/L Arg处理明显提高 了番茄果实NOS活力及NO含量,促进了酚类物质的积累,提高了番茄果实体内苯丙氨酸解氨酶、多酚氧化酶、 β-1,3-葡聚糖酶和几丁质酶等抗病相关酶的活力,诱导了病程相关蛋白（pathogenesis-related proteins,PRs）PR2a、 PR2b、PR3a和PR3b的表达。而NOS抑制剂N-硝基-L-精氨酸通过抑制NOS的活力和NO的水平,明显削弱了Arg对番 茄果实的这种诱导作用,因此Arg可能是通过调控NOS途径诱导了番茄果实抵抗灰霉病的抗性。     

1-MCP对低温贮藏苹果灰霉病抗性的诱导作用

以红富士苹果为试材,研究1-甲基环丙烯（1-methylcyclopropene,1-MCP）对低温贮藏（0±1）℃苹果灰霉病的控制效果及其诱导抗病机理。结果表明：采后1 μL/L 1-MCP处理较对照可显著降低损伤接种苹果灰霉病的发病率,抑制病斑的扩展（P＜0.05）。同时1-MCP处理能够诱导果实中苯丙氨酸解氨酶、多酚氧化酶、过氧化物酶、β-1,3-葡聚糖酶、几丁质酶活性的提高,促进总酚、类黄酮和木质素的积累,降低膜脂过氧化程度,减少丙二醛的产生,从而提高果实的抗病性。研究结果可为1-MCP防治苹果采后病害提供理论依据。     

不同品种苹果冷藏期间品质与生理变化

研究贮藏期间果实品质生理变化,探讨不同优质苹果品种的贮藏特性。以‘岳帅’、‘望山红’、‘岳阳红’、‘秋富红’苹果为试验试材,在温度（0±0.5）℃、相对湿度90%～95%冷库内贮藏,定期测定果实呼吸强度、硬度、可溶性固形物含量、可滴定酸含量、VC含量、果实质量损失率、多酚氧化酶活性、过氧化物酶活性,分析果实生理品质指标变化与贮藏特性的关系。结果表明,‘岳帅’苹果呼吸强度及酶活性较低,但呼吸高峰出现早,贮藏84 d后果实品质劣变迅速;‘岳阳红’苹果呼吸强度和酶活性较低,贮藏期间果实品质、风味保持最好;‘望山红’和‘秋富红’苹果呼吸高峰出现最晚,果实品质保持较好。通过理化指标和感官评价比较得出：‘岳帅’贮藏期较短,不宜超过84 d;‘岳阳红’、‘望山红’和‘秋富红’苹果适宜长期贮藏,其中‘岳阳红’苹果在贮藏过程中品质及营养成分损失最少,贮藏期可达180 d以上。     

短波紫外线照射对苹果采后灰霉病抗性诱导作用

为探究短波紫外线（ultraviolet C,UV-C）照射对苹果采后灰霉病的防治效果与抗性诱导机理,以红富士苹果为材料,采用剂量分别为3.5、7.0、10.5 kJ/m2 的UV-C（280 nm）进行照射,常温条件下放置2 d 后接种灰葡萄孢菌,以不经UV-C照射直接接种灰葡萄孢菌的果实作为对照。结果表明：照射剂量为3.5 kJ/m2 和7.0 kJ/m2的UV-C照射可显著降低果实灰霉病的发生率,抑制病斑直径的扩展（P＜0.01）,其中照射剂量为7.0 kJ/m2 UV-C处理的效果更好;而照射剂量为10.5 kJ/m2 的UV-C照射处理在接种后贮藏前期对病害有抑制作用,后期却加快病害发展。3.5 kJ/m2 和7.0 kJ/m2 UV-C处理能诱导苹果果实几丁质酶、β-1,3-葡聚糖酶、过氧化物酶（POD）、多酚氧化酶（PPO）和苯丙氨酸解氨酶（PAL）等抵御酶活性的提高,诱导酚类物质的合成,进而增强果实的抗病性,其中7.0 kJ/m2 UV-C处理诱导效果更明显,与对照差异显著（P＜0.01）。10.5 kJ/m2 UV-C照射仅在接种后前期诱导POD、PPO、PAL和几丁质酶的活性迅速上升,提高总酚和类黄酮含量,但对β-1,3-葡聚糖酶活性没有诱导作用。