同位素内标高效液相色谱-串联质谱法测定粮食及其制品中赭曲霉毒素A、B和C

建立一种同位素内标高效液相色谱—串联质谱法同时测定粮食及其制品中赭曲霉毒素A、B和C的方法。样品用乙腈-水(84:16,V/V)提取,振荡离心后取上清液过赭曲霉毒素免疫亲和柱富集净化,经Waters ACQUITY BEH C₁₈(50 mm×2.1 mm,1.7 μm)进行液相色谱-串联质谱分析,采用多反应监测(MRM)、正离子模式和内标法定量,同时对线性范围、准确度、精密度和加标回收率等进行方法学验证。结果表明,在优化的条件下,赭曲霉毒素A、B和C在0.25~2.5 ng/mL线性范围内线性良好,决定系数均在0.999以上,本方法对赭曲霉毒素的检出限(LODs,S/N=3)和定量限(LOQs,S/N=10)分别为0.003~0.018、0.011~0.059 μg/kg;在2.0~10.0 μg/kg 三个加标水平下,方法的平均回收率为80.50%~107.08%,相对偏差(RSDs)介于0.14%~4.94%(n=6)。利用此方法对10个批次的粮食及其制品进行检测,发现1个批次的样品检出赭曲霉毒素A,含量为(0.35±0.01) μg/kg。此方法操作简便、灵敏度高,适用于粮食及其制品中赭曲霉毒素A、B和C的检测。     

全自动免疫亲和在线净化—高效液相色谱法快速测定粮食中赭曲霉毒素A

建立了全自动免疫亲和在线净化-高效液相色谱法快速测定粮食中赭曲霉毒素A(Ochtatoxin A,OTA)的方法。玉米、小麦样品经乙腈-水(60:40,V:V)提取,3%Tween-20(m/V)水溶液10倍稀释后,用自动进样器注入RIDA~? REST在线固相萃取系统,经赭曲霉毒素A免疫亲和小柱净化后,以乙腈-2%乙酸水(50:50,V:V)为流动相,流速为1.0 mL/min,C18色谱柱(150 mm×3.5 mm,3.5μm)分离,荧光检测器测定。根据3倍信噪比的峰响应值,确定赭曲霉毒素A的检出限为0.24μg/kg,在0.012 5～0.5μg/L范围内呈线性相关,R~2值为0.999 8;在玉米、小麦样品中加标回收率为80.1%～106.9%,变异系数为2.4%～8.2%。本方法一次装柱可检测60个样品,24 h可检测100个样品,满足谷物中赭曲霉毒素A快速准确定量检测的需要。     

HPLC-MS/MS测定豆类及其制品中的赭曲霉毒素A含量

建立了基于高效液相色谱-串联质谱法检测豆类及其制品中赭曲霉毒素A含量的方法。该方法以有机溶剂提取结合免疫亲和柱净化作为前处理技术,以1%甲酸-乙腈为流动相,在正离子多反应监测模式下,采用高效液相色谱-三重四级杆串联质谱联用仪进行样品检测。结果表明:赭曲霉毒素A的质量浓度在0.5～20 μg/L范围内时,浓度与色谱峰面积的线性关系良好(R~20.99),方法检出限为0.3 μg/kg。样品的加标回收率为85.6%～106.2%,相对标准偏差介于0.96%～3.5%(n=6)。该方法具有分析时间短、操作简单、灵敏度高等优点,能够较好地满足豆类及其制品中赭曲霉毒素A含量检测的需要。     

ELISA法检测赭曲霉毒素A的改进研究

针对ELISA法检测赭曲霉毒素A(OTA),使用微振荡酶标板可以缩短免疫反应检测时间约30min。采用ELISA方法检测小麦样品中的OTA时,使用空白样品提取液来配制OTA标准溶液可以消除样品基质造成的干扰。同时对提取溶剂加以改进,采用NaCl-水-甲醇(10%:70:30)作为提取溶剂的提取效率最高。0.1、1、10μg/kg三个浓度水平的加标回收率为95%～110%,方法的重现性很好,变异系数小于10%。     

免疫亲和柱——高效液相色谱法测定肾脏中的赭曲霉毒素A

目的针对动物肾脏中可能污染的赭曲霉毒素A(OTA),建立了肾脏中赭曲霉毒素A的高效液相色谱方法。方法试样用磷酸酸化后经乙酸乙酯提取,免疫亲和柱净化,以乙腈-水-冰醋酸(450+525+25)为流动相,C18柱分离并通过荧光检测器定量。结果赭曲霉毒素A标准溶液浓度在0.10～20μg/L范围内呈线性相关(r=1.000 0),不同浓度水平的添加回收率为72.5%～87.4%,检出限为0.012μg/kg。结论使用免疫亲和柱净化能够达到良好的净化效果,是一种准确、方便的测定猪肾中赭曲霉毒素A的分析方法。     

粮食中赭曲霉毒素A的快速定量检测-超高效 液相色谱法

建立了免疫亲和柱净化-超高效液相色谱法快速定量测定粮食中赭曲霉毒素A(Ochratoxin A, OTA)的检测方法。样品经提取后,用免疫亲和柱净化、浓缩, Waters Acquity UPLC BEH C₁₈(50 mm?2.1 mm, 1.7 μm)色谱柱分离,以乙腈∶水∶冰醋酸(体积比 100∶98∶2)为流动相,流速为0.2 mL/min,进样量为1μL,用Acquity荧光检测器激发波长为310nm,发射波长为465 nm处进行检测,赭曲霉毒素A的保留体积小于1.15mL,从样品前处理到分析整个过程小于45 min。根据3倍信噪比的峰响应值,确定赭曲霉毒素A的检出限为0.25pg,在1～50.0 pg范围内呈线性相关,相关系数R₂值为0.998;在小麦、玉米、稻谷样品中加标回收率分别为81.5%～101.2%,81.3%～85.5%,87.8%～97.5%,精密度为3.3%～6.4%。本方法简便快速、灵敏度高、重现性好、溶剂用量少,适用于粮食中赭曲霉毒素A的快速测定。     

粮食中赭曲霉毒素A的快速定量检测-超高效液相色谱法

目的建立了免疫亲和柱净化-超高效液相色谱法快速定量测定粮食中赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)的检测方法。方法样品经甲醇:水(80:20,v:v)提取后,用免疫亲和柱净化、浓缩,Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱(50 mm×2.1 mm,1.7μm)分离,以乙腈:水:冰醋酸(100:98:2,v:v:v)为流动相,流速为0.2 mL/min,进样量为1μL,荧光检测器检测,激发波长为310 nm发射波长为465 nm,赭曲霉毒素A的保留体积小于1.15mL,从样品前处理到分析整个过程小于45 min。结果根据3倍信噪比的峰响应值,确定赭曲霉毒素A的检出限为0.25 pg,在1~50 pg范围内呈线性相关,相关系数R2为0.998。在小麦、玉米、稻谷样品中加标回收率分别为81.5%~101.2%,81.3%~85.5%,和87.8%~97.5%,精密度为3.3%~6.4%。结论本方法简便快速,灵敏度高,重现性好,溶剂用量少,适用于粮食中赭曲霉毒素A的快速测定。     

高效液相法同时检测谷物中玉米赤霉烯酮和赭曲霉毒素A

该研究开发一种快速、灵敏同时检测玉米、小麦和稻米中玉米赤霉烯酮(zearalenone,ZEN)和赭曲霉毒素A(ochratoxin A,OTA)的高效液相色谱检测方法。将样品采用乙腈/水(80/20,体积比),200 r/min,30℃振荡提取30 min后,经Oasis PRiME HLB固相萃取柱净化后,上样检测。该方法ZEN和OTA检测限(limit of detection,LOD)为3.7μg/kg和0.11μg/kg,定量限(quantification Limit,LOQ)为12.25μg/kg和0.38μg/kg,线性范围分别为10μg/kg^2000μg/kg和0.2μg/kg^200μg/kg,加标样品中不同浓度的ZEN和OTA回收率为83.0%~101.3%,日内精密度和日间精密度分别为3.12%~7.03%和3.57%~9.3%。该方法适用于玉米、小麦和稻米中ZEN和OTA的同时检测。     

高效液相色谱-串联质谱法检测茶叶中的 赭曲霉毒素A

目的建立高效液相色谱-串联质谱联用技术检测茶叶中赭曲霉毒素A(OTA)的方法。方法用甲醇-2%Na HCO3溶液(60:40,V:V)提取样品中的赭曲霉毒素A,采用免疫亲和柱对茶叶中的赭曲霉毒素A净化,使用甲醇-5 mmol/L乙酸铵(含0.1%乙酸)为流动相,检测赭曲霉毒素A,采用正离子模式。结果本方法中赭曲霉毒素A在0.5~10 ng/m L质量浓度范围内具有良好的线性关系(r=0.996),回收率在83.6%~92.5%之间,相对标准偏差在6.5%~9.1%之间,检出限为0.1μg/kg。结论该方法准确性好、灵敏度高,适用于茶叶样品的检测。     

免疫亲和层析-液相色谱-串联质谱法测定玉米和小麦中的赭曲霉毒素A

目的建立免疫亲和层析净化-液相色谱-串联质谱法测定食品中的赭曲霉毒素A的方法。方法玉米和小麦样品经50%甲醇水溶液(V:V)提取,免疫亲和柱净化后,采用液相色谱-串联质谱法进行测定,外标法定量。结果玉米、小麦添加浓度在1.0~10.0μg/kg时,回收率在70%~100%之间,变异系数小于10%,在2017年度法帕斯国际能力验证中(Food Analysis Performance Assessment Scheme),此方法测定样品中赭曲霉毒素A含量为2.8μg/kg,Z值为-0.4,统计结论为满意。结论该方法简单快速,灵敏度高,定量准确,适合于玉米和小麦中赭曲霉毒素A的检测。     

酸热法提取酵母油脂条件的研究

以一株隐球酵母为材料,考查了酸热法中盐酸浓度、盐酸用量、酸热时间、无水乙醇用量、有机溶剂单因素对油脂提取收率的影响,并通过正交试验确定了0.5g干菌体用10mL 4mol/L盐酸沸水浴处理8min,加入无水乙醇用量10mL,用乙醚12mL和石油醚12mL萃取时,油脂得率最高;并对提取的油脂进行了气相色谱分析,结果表明:棕榈酸为20.78%,硬脂酸为4.57%,油酸为59.9%,亚油酸为11.36%,亚麻酸为0.23%,其他3.16%.     

亚麻籽胶微波辅助提取与热水浸提方法比较研究

本研究通过单因素和正交优化试验分别确定了热水浸提与微波辅助提取两种方法提取亚麻籽胶的最佳工艺条件。结果表明,热水浸提法提取亚麻籽胶的最佳工艺为:温度80℃、时间6 h、料液比1:10、提取次数1次;该条件下亚麻籽胶得率为7.28%,所得的亚麻籽胶中,多糖质量分数为68.13%,蛋白质质量分数为10.21%。微波辅助提取的最佳工艺为:温度80℃、时间1 h、料液比1:10、输出功率600 W、搅拌速度900r/min、提取次数1次;该条件下亚麻籽胶得率为6.46%,其中多糖质量分数为63.13%,蛋白质质量分数为13.75%。通过扫描电镜对提胶前后亚麻籽表面微观形态分析表明,胶液的溶出会破坏亚麻籽表面,微波处理对亚麻籽表层结构破坏大于热水浸提。红外吸收光谱分析表明,所得提取物在1 410 cm~(-1)的C-H变角振动和2 930 cm~(-1)的C-H伸缩振动以及1 039 cm~(-1)的O-H变角振动,构成了糖环的特征吸收峰,证明获得的亚麻籽提取物为亚麻籽胶。     

逆流提取设备在茶叶浸提中的应用

介绍了一种茶叶浸提的新方法,并对逆流提取的过程进行了分析。     

超声波辅助提取散生问荆有机硅的工艺优化

以散生问荆为原料,通过单因素实验和正交实验分析法对超声波辅助提取散生问荆有机硅的工艺进行优化。实验确定散生问荆有机硅提取的最佳工艺条件为:超声波功率为104W,料液比1:50,超声波提取时间和温度分别为40min、80℃,散生问荆有机硅得率可达1.63%。     

酵母RNA超声辅助提取工艺研究

为提高酵母RNA提取效果,采用超声辅助提取工艺,在单因素实验的基础上,采用超声处理时间、超声功率和提取时间进行三因素三水平响应面分析实验以优化此工艺条件.结果表明,酵母RNA超声辅助提取的最佳工艺条件为超声处理时间10min,超声功率300W,提取时间20min,在此工艺条件下,酵母RNA实际得率为9.56%,与模型预测值之间具有较好的拟合性.在3个因素中,超声处理时间、超声功率对酵母RNA得率的影响极显著,提取时间影响不显著,且相互之间无交互效应.     

热回流法与微波辅助法提取栀子黄色素的比较

探讨了栀子黄色素提取工艺中的热回流提取法和微波辅助提取法,并通过正交实验确定其相应的最佳工艺条件,并得出结论:微波辅助法与热回流法相比具有能耗低、操作方便、产品品质更高的优点。其最佳工艺条件为:提取功率为600W;乙醇浓度为30%;提取时间为3min;料液比为1∶8,在此条件下产品的色价为79.09,OD值为1.21。     

Improvement of bixin extraction yield and extraction quality from annatto seed by modification and combination of different extraction methods

Bixin from annatto seed was extracted by submerging the seeds in acetone and by combined extractions using sodium hydroxide and soybean oil in the dark to improve extraction yield and reduce content of volatile compounds in annatto extracts. The exclusion of light from acetone extraction did not significantly improve bixin extraction yield (68.5%) compared to the process carried out under daylight (67.3%), but it remarkably reduced contents of toluene and m‐xylene in annatto extracts. Combined extraction using sodium hydroxide solution at 50 °C for 40 min and soybean oil at 100 °C for 20 min resulted in very low level of volatile compounds. Significantly higher extraction yield (53.7%) could be achieved by such a process as compared to a single extraction sodium hydroxide (31.8%) or soybean oil (42.9%) alone. In conclusion, the exclusion of light from acetone extraction and combined extraction significantly reduced concentration of undesirable volatile compounds. The combined extraction significantly improved bixin yield compared to the original extraction methods.     

响应面法优化辣椒红色素超声波－微波协同提取工艺

辣椒红色素是一种天然色素,因其具有色泽鲜艳、无毒副作用等优点被广泛应用到食品加工、化妆品和医药等行业。本文以95％乙醇为提取剂,利用超声协同微波的方法提取辣椒红色素。研究提取温度、提取时间、料液比、乙醇浓度、超声提取时间、微波时间等因素对辣椒红色素提取率的影响。在单因素实验的基础上,利用中心组合实验设计对辣椒红色素提取工艺进行优化,采用3因素3水平实验设计,依据回归分析确定工艺影响因子,以辣椒红色素提取率为响应值作响应面和等高线,在分析各个因素的显著性和交互作用后,得出最佳提取工艺条件：料液比1:23,超声波时间21min,微波时间11min,提取2次。在此条件下,吸光度（得率）最高可达0.626。