乳源酪蛋白糖巨肽对溃疡性结肠炎小鼠MUC2表达的影响

目的： 研究酪蛋白糖巨肽(CGMP)对溃疡性结肠炎 (UC)小鼠结肠黏蛋白MUC2表达的影响,从而进一步探讨CGMP对UC的改善效果。方法：Balb/c 实验小鼠随机分为正常对照组、模型对照组、CGMP组和SASP(柳氮磺胺吡啶)治疗组。对模型对照组、CGMP组和SASP组利用OXZ灌肠方法建立UC模型,诱导建模后同时给予CGMP组灌胃CGMP溶液(剂量为50mg/(kg ·d))以及SASP组灌胃SASP溶液(剂量为40mg/(kg ·d)),连续灌胃5d。期间记录小鼠每天体质量变化,进行疾病活动指数 (DAI),末次灌胃后处死小鼠,分离结肠进行组织损伤评分并制作石蜡切片,分别进行HE染色和MUC2免疫组化染色。结果：CGMP可有效缓解溃疡性结肠炎小鼠的一般状态,同时显著降低小鼠结肠的大体形态损伤指数,HE染色结果表明CGMP可以维持小鼠肠黏膜上皮细胞的完整,免疫组化结果证实了CGMP可以显著促进小鼠肠黏膜MUC2的分泌。结论：CGMP可以显著促进小鼠结肠MUC2的表达,通过维系肠黏膜的屏障作用来减缓炎症。     

乳源酪蛋白糖巨肽抗细胞凋亡干预小鼠溃疡性结肠炎效应研究

研究乳源酪蛋白糖巨肽(CGMP)对溃疡性结肠炎小鼠结肠黏膜细胞凋亡的影响。利用恶唑酮诱导小鼠溃疡性结肠炎(UC)模型,采用低、中、高剂量的CGMP组(剂量分别为5、50、500mg/(kg·d))和药物柳氮磺胺吡啶(剂量为40mg/(kg·d))连续灌胃4d,正常对照组和模型对照组每天灌胃相应剂量的超纯水;用HE染色和TUNEL法检测小鼠结肠大体形态损伤和病理组织学及其细胞凋亡变化。结果表明：低、中、高剂量CGMP组均可在一定程度上改善恶唑酮诱导的结肠炎中结肠病理损伤和细胞凋亡表现,尤其以中剂量CGMP组的作用较为明显,与药物治疗组相比不存在显著性差异。因而,证实CGMP作为一种生物活性物质可以通过抗结肠组织细胞凋亡具有抑制溃疡性结肠炎的功能。     

乳源酪蛋白糖巨肽对溃疡性结肠炎小鼠肠道菌群多样性的影响

研究乳源酪蛋白糖巨肽（casein glycomacropeptide,CGMP）对溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）小鼠肠道菌群多样性的影响,从肠道菌群角度探讨乳源CGMP改善溃疡性结肠炎与肠道菌群变化关系的可能机制。恶唑酮（oxazolone,OXZ）诱导小鼠UC模型,设立正常对照组、模型对照组、乳源CGMP组（50 mg/（kg·d））和柳氮磺胺吡啶（salazosulfapyridine,SASP）治疗组（40 mg/（kg·d））,其中正常对照组和模型对照组灌胃相应剂量的生理盐水,连续灌胃7 d。利用Ion Torrent PGM技术检测实验期间小鼠肠道菌群多样性的变化。UC小鼠肠道菌群结构失调,其肠道菌群多样性降低以及优势菌群比例下降。对测序序列通过主成分分析（principal componentanalysis,PCA）、UniFrac等统计分析发现,UC小鼠肠道中厚壁菌门（Firmicutes）和拟杆菌门（Bacteroidetes）的丰度降低而放线菌门（Actinobacteria）和变形菌门（Proteobacteria）的丰度升高。乳源CGMP干预后UC小鼠肠道菌群多样性增加,厚壁菌门和拟杆菌门的相对比例高于模型组,提示乳源CGMP可通过调节失衡的肠道菌群来改善UC。     

乳源酪蛋白糖巨肽改善炎症性肠病的研究进展

乳源酪蛋白糖巨肽(CGMP)主要是κ-酪蛋白经凝乳酶降解产生的一类含有糖链的多肽,具有许多的生理活性功能和独特的营养特性,可广泛地应用于保健食品和医药品。本文首先概括CGMP的来源、结构特点及其研究开发现状,从炎症性肠病(IBD)的免疫病理机制的角度,对本实验室和国外在CGMP调理、改善和治疗IBD的相关研究进行系统地介绍,提出CGMP在一定程度上为IBD的生物免疫治疗提供了新的途径以及展示其广阔的开发前景。     

酪蛋白糖巨肽分离条件的研究

探讨了利用了(NH4)2SO4分级沉淀、三氯乙(TCA)纯化酪蛋白的胃蛋白酶水解物中 CGMP的工艺.结果表明,经过20%和65%饱和度的硫酸铵沉淀胃蛋白酶水解物,质量分数为12%的TCA纯化得到的样品,其纯度为91.2%.整个工艺路线简便、快捷、成本较低,适合工业化生产.     

乳源酪蛋白糖巨肽超滤分离的工艺优化研究

采用超滤方法分离酶解液中的酪蛋白糖巨肽,通过对料液pH值、操作压力和温度等对膜通量的影响,确定最优工艺参数,以达到最佳超滤通量性能,利用液相色谱法测定纯化后的酪蛋白糖巨肽分子量.试验结果表明:溶液pH9.0、操作压力0.3MPa、温度55℃时膜通量最高,超滤酪蛋白糖巨肽的截留率达到98.23%,产物纯度达到92.62%,酪蛋白糖巨肽的平均分子量为35682u.超滤方法分离酶解液中的酪蛋白糖巨肽是完全可行的.     

酪蛋白糖巨肽的生物学活性

酪蛋白糖巨肽(Caseino Glycomacropeptide,简称CGMP)主要是κ-酪蛋白经凝乳酶降解产生的一类含有糖链的多肽,具有许多的生理活性功能和独特的营养特性,可广泛地应用于保健食品和医药品.综述了CGMP的一些生理功能研究进展以及其生产制备工艺的现状,同时也介绍了它在食品和医药品中的应用前景.     

采用盐析及Q Sepharose FF分离纯化酪蛋白胃蛋白酶水解物中的酪蛋白糖巨肽

本文探讨了利用了（NH4）2SO4分级沉淀、透析脱盐及Q—Sepharose FF层析分离纯化酩蛋白的胃蛋白酶水解物中的CGMP的工艺。结果表明：采用60％饱和度的（NH4）2SO4盐析，可从上清液中直接回收高纯度CGMP，得率为0．71％。低饱和度的（NH4）2SO4可有效脱除杂蛋白。脱盐粗提物CGMP Q—Sepharose FF层析条件为：pH8．5、20mmol／L Tris缓冲液平衡上样，用含0．3mol／L NaCl、20mmol、pH7．1的Tris缓冲液洗脱：浓缩物最大上样量为34．2mg蛋白／ml树脂。利用优化的工艺对水解液层析纯化，纯化产物得率约为2．19％（以酪蛋白汁），总结合态唾液酸回收率为87．4％（以酶解液中的唾液酸汁），糖基化度可提高到0．472以上。整个工艺路线简使、快捷、成本较低，适合工业化生产。     

酪蛋白糖巨肽的分离纯化研究

酪蛋白糖巨肽(CGMP)主要是-酪蛋白经凝乳酶降解产生的一类含有糖链的多肽,具有许多的生理活性功能和独特的营养特性,可广泛地应用于保健食品和医药品。对酪蛋白糖巨肽的适合于工业化生产的分离纯化条件进行更深层次的研究。     

凝乳酶水解酪蛋白生产酪蛋白糖巨肽工艺条件的研究

酪蛋白糖巨肽（casein glycomacropeptide,简称CGMP）是κ-酪蛋白经酶解后生成的一类含有糖链的多肽,具有许多功能特性。本文研究了凝乳酶水解酪蛋白生产CGMP的工艺条件,通过正交实验得到最佳工艺条件是底物浓度10mg/mL、酶的添加量为0.6%、酶解时间为2.5h。唾液酸回收率为80.7%,蛋白质回收率为3.03%,糖基化程度（唾液酸/蛋白质）为77.6μg/mg。      

酪蛋白糖巨肽对小鼠肠道双歧杆菌增殖水平的影响

采用实时荧光定量聚合酶链式反应（real-time polymerase chain reaction,real-time PCR）分析不同剂量酪蛋白糖巨肽（casein glycomacropeptide,CGMP）对小鼠肠道双歧杆菌增殖水平的影响,揭示乳源CGMP是否有增殖肠道关键益生菌的功能。选用50 只健康BALB/c小鼠,随机分为对照组,安慰组（灌胃生理盐水0.2 mL）,乳源CGMP低、中、高剂量组（灌胃等体积不同质量浓度的乳源CGMP）,灌胃周期为2 周。于灌胃后第0、3、5、7、9、11、15天及停止灌胃后1 周（第21天）采集的小鼠新鲜粪便,并进行粪便菌体基因组DNA抽提。依据双歧杆菌的16S rRNA基因序列设计5 对种属特异性引物,以两歧双歧杆菌（Bifidobacterium bifidum）CICC6071的基因组DNA作为标准品,进行梯度稀释制作标准曲线;分析样品PCR扩增产物的熔解曲线,评价反应的特异性。结果表明：Real-time PCR可准确定量小鼠肠道内双歧杆菌数量;且灌胃中剂量乳源CGMP可以促进小鼠肠道内双歧杆菌的增殖,在灌胃第11天时小鼠肠道内双歧杆菌数量达到最高值,即乳源CGMP对小鼠肠道双歧杆菌的增殖作用存在剂量选择性。     

超滤法纯化酪蛋白凝乳酶水解物中的酪蛋白糖巨肽

研究超滤法分离纯化了(CGMP)的条件,得到超滤的最佳条件是在室温下,压差为0.02 MPa,浓缩比为8.通过此方法得到比较纯的CGMP,蛋白回收率为1.77%,糖基化程度(唾液酸/蛋白质)为70.1μg/mg,并且此方法适用于工业化生产.     

阴离子交换树脂分离酪蛋白糖巨肽工艺条件优化

采用离子交换树脂从乳清粉中分离酪蛋白糖巨肽(casein glycomacropeptide,CGMP),筛选适于分离CGMP的离子交换树脂并考察静态吸附过程中吸附pH值、吸附时间、缓冲液浓度等因素对CGMP分离效果的影响。乳清粉溶液在pH5.1时离心除杂后与201×4树脂混合,吸附条件为吸附pH3.9、吸附时间1h、缓冲液浓度0.02mol/L、洗脱液为0.5mol/L pH4.0的氯化钠溶液、洗脱时间4h;100g乳清粉利用此工艺条件可得1.45g唾液酸含量10.4%(以蛋白质计)的CGMP。该工艺方法分离过程简单、纯化效果好、唾液酸含量高,适用于工业化生产。     

酪蛋白糖巨肽对二甲肼干预的大鼠细胞因子网络变化的研究

目的：探讨不同剂量酪蛋白糖巨肽（casein glycomacropeptide,CGMP）干预二甲肼处理的大鼠时,外周血和结肠组织内细胞因子水平的变化情况,从而推断CGMP对二甲肼处理的大鼠细胞因子网络的影响。方法：60 只Wistar雄性大鼠随机分为正常组、模型组、CGMP低剂量组、CGMP中剂量组和CGMP高剂量组。除正常组外,对每只大鼠每周腹腔注射二甲肼,剂量为30 mg/（kg•周）,同时,3 个剂量CGMP组注射二甲肼的同时每天灌胃CGMP,剂量分别为10、50、100 mg/（kg•d）。15 周后,处死大鼠,取其结肠组织和血清,首先检测结肠末端异型隐窝灶个数,然后利用液相芯片法检测结肠组织和血清中的细胞因子的表达水平。结果：乳源CGMP对大鼠体质量影响没有显著性差异,乳源CGMP对大鼠内毒素和活性氧簇的水平具有显著的抑制作用,其抑制作用呈剂量依赖趋势。乳源CGMP可显著抑制异型隐窝灶的形成,且异型隐窝灶个数呈剂量依赖性降低。乳源CGMP可以显著抑制大鼠体内Th1/Th2类细胞因子的失衡,且呈剂量依赖趋势。结论：乳源CGMP具有改善二甲肼处理的大鼠结肠组织损伤的功能,其机制为乳源CGMP可以有效抑制二甲肼处理的大鼠体内异型隐窝灶的形成,并呈剂量依赖性,研究显示乳源CGMP可以下调大鼠体内IL-4等Th2类细胞因子的异常升高,促进IL-2等Th1类细胞因子的分泌,改善大鼠体内处于失衡状态的细胞因子网络。     

利用TGase 结合微滤技术从乳清粉中分离纯化C G M P 的研究

利用谷氨酰胺转氨酶(TGase)结合微滤技术从乳清中分离纯化酪蛋白糖巨肽(CGMP)。结合微滤技术考察底物浓度、TGase浓度、pH值、温度和反应时间对分离纯化的影响。通过实验得出最佳酶反应条件为底物浓度8%、TGase酶浓度7U/g、pH6.5、温度39℃、反应时间80min、微滤浓缩循环6次,最后经微滤可得到纯度为70%左右的CGMP。     

酪蛋白糖巨肽分离纯化方法的研究进展

酪蛋白糖巨肽(CGMP)主要是κ-酪蛋白经凝乳酶降解产生的一类含有糖链的多肽,具有许多的生理活性功能和独特的营养特性,可广泛地应用于保健食品和医药品。本文对酪蛋白糖巨肽的来源及结构作了简要概括,对其分离纯化方法及进展作出了详细论述。