花生过敏原蛋白分离纯化方法研究进展

花生中已确定的过敏原蛋白包括Ara h 1～Ara h 11 11种。本文详细介绍花生中主要过敏原蛋白(Ara h 1、Ara h 2、Ara h 3/4、Ara h 6)以及非主要过敏原蛋白(Ara h 7～Ara h 11)的分离纯化方法研究进展。花生过敏原蛋白的分离纯化方法包括硫酸铵沉淀法、柱层析法、电泳法。其中硫酸铵沉淀法主要用于粗提纯化过程,而柱层析法则主要用于花生过敏原蛋白的精制,它包括离子交换层析、凝胶过滤层析、亲和层析、疏水相互作用层析、高效液相色谱。目前离子交换层析和凝胶过滤层析在花生过敏原蛋白分离纯化中应用最为广泛,而电泳法则仅见应用于Ara h 7及油质蛋白(Ara h 10、Ara h 11)的分离纯化。     

水牛乳中主要过敏原的分离纯化

牛乳和水牛乳存在免疫交叉反应,牛乳过敏患者可能对水牛乳过敏。因此,分离纯化出水牛乳中各种过敏原将为进一步的工作奠定物质基础。实验中以摩拉水牛乳为原料,通过等电点沉淀、凝胶柱层析法和阴离子交换法分离纯化水牛乳的酪蛋白、β-乳球蛋白α-乳白蛋白,得到了SDS-PAGE纯(纯度≥90%)的β-乳球蛋白α-乳白蛋白。离子交换层析分离β-乳球蛋白、α-乳白蛋白的得率分别为50.26%、52.86%;凝胶层析分离β-乳球蛋白、α-乳白蛋白的得率分别为49.39%、84.19%。实验结果表明,等电点沉淀、凝胶柱层析法和阴离子交换法适合于分离水牛乳中主要过敏原成分。     

牛乳过敏原β-乳球蛋白检测方法的研究进展

目的食物过敏已成为全球性的食品安全问题,欧美等发达国家均要求对食品中的过敏原成分进行标识,其中就包括作为八大过敏性食物之一的牛乳及其乳制品。β-乳球蛋白是牛乳中的主要过敏原,约占乳清蛋白的50%,牛乳总蛋白的10%,并且约有82%的牛乳过敏患者对β-乳球蛋白过敏,因此其可以作为检测食品中是否含牛乳蛋白的一个有效的标志物。建立灵敏、可靠的β-乳球蛋白检测方法,对牛乳过敏原标识及保障牛乳过敏人群的安全消费具有重要意义。本文主要综述了牛乳β-乳球蛋白的高效液相色谱法、超高效液相色谱法、液相色谱-质谱联用法、酶联免疫吸附法、免疫层析法、电化学免疫法、蛋白微阵列法、等离子体共振法等色谱学和免疫学检测方法的研究进展,并对未来发展方向作出展望,以期促进牛乳β-乳球蛋白等过敏原检测方法的研究与开发。     

过敏原分离纯化技术的研究进展

过敏原是引起过敏反应的抗原性物质,对它的检测是预防发生过敏反应的重要方法,而过敏原分离纯化是过敏原检测技术的基础。主要叙述了过敏原的致敏机理,同时详细叙述了沉淀法、疏水性相互作用色谱、离子交换色谱、亲和色谱、凝胶过滤色谱、膜分离、蛋白质组学和人工合成过敏原技术在过敏原分离纯化中的研究进展,重点介绍蛋白质组学和人工合成过敏原技术这两种分离纯化的新方法。     

驴乳中蛋白质组分的分离纯化与鉴定

目的：分离纯化并鉴定驴乳乳清中蛋白质组分,为进一步研究驴乳用于辅助治疗疾病,以及为作为人乳替代品提供参考。方法：采用DEAE-52 离子交换层析和Sephadex G-100 凝胶层析分离纯化驴乳乳清中蛋白质组分,并通过十二烷基硫酸钠--聚丙烯酰胺凝胶电泳法和高效凝胶渗透色谱法对所纯化蛋白质进行鉴定。结果：与牛乳乳清中蛋白组分相对比,发现驴乳乳清中存在3 种未知蛋白质,分子质量分别为32、70.1、72.2kD。结论：驴乳中除了含有与牛乳相似的营养成分外,还具有其他生物活性成分,它们可能是一些保护性蛋白,在机体的抗病机制方面起着重要作用。     

牛乳中α-乳白蛋白的分离纯化工艺研究

本文以牛乳为原料,离心脱脂后采用酸沉法分离酪蛋白,微滤除菌后得到乳清蛋白溶液,结合膜分离法和离子交换色谱法分离纯化乳清蛋白溶液中的α-乳白蛋白,并利用高效液相色谱法检测其纯度.结果表明,分离酪蛋白沉淀得到的上清溶液,经0.45μm的陶瓷膜微滤除菌后,除菌率可达99％以上,微滤得到的乳清蛋白溶液蛋白质含量可以达到6.53...     

牛奶过敏原的分离、鉴定与纯化

对牛奶过敏原进行分离、鉴定与纯化。通过SDS-PAGE电泳分离牛奶的蛋白质组份,采用免疫印迹(Western-blotting)方法鉴定过敏原,通过离子交换层析对牛奶过敏原进行初步纯化。结果表明,鲜牛奶粗提液SDS-PAGE显示蛋白条带有12条,奶粉粗提液SDS-PAGE显示出的蛋白条带与鲜牛奶的蛋白条带基本一致。鲜牛奶Western-Blotting显示14ku的阳性条带。离子交换层析可初步纯化出14ku的过敏原蛋白。本研究对牛奶过敏原进行了分离和鉴定,并初步纯化出牛奶的主要过敏原。     

藻蓝蛋白分离纯化技术及其影响因素分析

文中概述了藻蓝蛋白近年来分离纯化技术的研究方法及其应用情况,包括多步盐析法、双水相萃取法、盐析结合双水相萃取法、反胶团萃取法、壳聚糖亲和沉淀-活性炭吸附-DEAE Sephadex A-25柱层析法、离子交换色谱与疏水间相互作用色谱结合法,总结了影响藻蓝蛋白分离纯化的因素,分析了藻蓝蛋白分离提纯技术的现有问题并提出了相应对策,还对藻蓝蛋白的应用前景进行了展望。     

天然黄酮类化合物分离纯化研究进展

为了进一步分离纯化天然黄酮类化合物,综述了黄酮类化合物的分离纯化常用的方法有柱层析法、重结晶法、铅盐沉淀法及高效液相色谱法等方法,旨在为黄酮类化合物的研究、开发和应用提供借鉴.     

螺旋藻多糖的分离、纯化与检验

螺旋藻干粉经热水抽提、醇析、脱蛋白得粗多糖，经凝胶柱层析纯化得到白色粉末状多糖纯品。再分别经纸层析、凝胶柱层析、高效液相色谱分析表明为均一组分，并可测得单糖组成；用凝胶柱层析法测分子量。     

Winged bean lipoxygenase—Part 1: Isolation and purification

Lipoxygenase was isolated and purified from dried winged bean seeds by ammonium sulphate fractionation, gel filtration, DEAE-Sephadex ion exchange chromatography and hydroxyapatite chromatography. Two major isoenzymes, FI and FII, were separated by ion exchange chromatography and were further purified by elution through a hydroxyapatite column. These resulted in a 105- and 171-fold purification and 7% and 9% recovery for FI and FII, respectively. FI and FII had similar Rf values of 0.25 on polyacrylamide gel electrophoresis. A minor band of Rf 0.01 was detected in ammonium sulphate fractions but was not further enriched and purified in succeeding steps.     

肝素提取纯化技术研究进展

肝素是一类结构异常复杂的糖胺聚糖混合物,因具有多种生物学功能,其提取纯化方法一直是各国学者研究的热点。文章概述了肝素的结构特点及理化性质,对肝素提取纯化技术进行了综述,重点阐述了分离纯化技术的最新研究进展,包括凝胶过滤层析、离子交换层析、亲和层析及毛细血管电泳等,展望了肝素未来的研究趋势。     

Fractionation and Characterization of Glycomacropeptide from Caseinate and Skim Milk Hydrolysates

Glycomacropeptide (GMP) was isolated from crystalline rennin and microbial rennet hydrolyzed caseinate and skim milk by Sephadex gel filtration, DEAE Sephadex ion exchange chromatography, Con A-Sepharose affinity chromatography and exhaustive dialysis and characterized by size exclusion and reversed phase high performance liquid chromatography (HPLC) and sodium dodecyl sulfate gel electrophoresis (SDS PAGE). Size exclusion HPLC revealed one major GMP peak with a molecular weight of 33,000 daltons. SDS PAGE revealed a group of size-heterogeneous peptides with molecular weights of < 18,000 daltons. Reversed phase HPLC revealed one major GMP peak with several minor peptides, indicating heterogeneity with respect to hydrophobicity/polarity.     

苹果多酚提取和纯化关键技术研究进展

综述了苹果多酚提取和纯化技术研究的最新进展,概述了溶剂提取法、超声波辅助提取法、微波辅助提取法、超临界CO 2流体萃取法、生物酶解提取法、高压辅助萃取法等苹果多酚提取技术,介绍了大孔吸附树脂法、固相萃取法、高效液相色谱法、高速逆流色谱法、离子交换色谱法、凝胶色谱法等苹果多酚分离纯化技术,提出了绿色无污染、低成本、高产量、高纯度、高质量苹果多酚提取和纯化一体化技术研究方向。     

TELEME PRODUCTION BY PURIFIED FICIN

Fig tree latex (ficin) was stepwise purified by ion exchange chromatography on carboxymethyl (CM)-cellulose and gel filtration chromatography on Sephadex G-100, and then utilized in the production of teleme. Following ion exchange chromatography, the milk clotting to proteolytic activity ratio (MCA/PA) increased from 1.97 to 3.1 and following gel filtration, to 7.4. The purified fraction gave better chemical and sensory properties than teleme made by fig tree latex. The protein content of teleme made by fig tree latex and the purified fraction were 3.90 and 6.50%, respectively. Syneresis in teleme decreased from 95% to 85% upon purification of the proteolytic enzymes. Exclusion of proteolytic activity appears to be essential to improve the quality of teleme.     

蛹虫草多糖的纯化及其分子量的测定

以蛹虫草子实体为材料,对水提醇沉、硫酸锌盐去蛋白后获得蛹虫草粗多糖（CP）进行分离纯化。采用膜分离技术、DEAE．52柱层析及SephadexG-100柱层析对CP进行分离纯化,并使用高效凝胶渗透色谱法（HPGPC）测定各组分多糖分子量,以表征不同路径所得多糖的分子量分布。结果表明：CP经膜过滤、DEAE-52柱层析及SephadexG-100进一步柱层析得到多糖组分CP2-c2-s2,经HPGPC法鉴定,CP2-c2-s2为均一多糖组分,其平均分子量为20200Da。     

罗汉果蛋白酶的分离纯化和部分性质研究

对罗汉果蛋白酶的分离纯化和部分性质进行研究.利用硫酸铵盐析、离子交换和凝胶过滤柱层析对罗汉果蛋白酶进行了分离纯化,对纯化所得的酶进行了分子量和等电点测定.结果表明,纯化酶为电泳纯,回收率为4.2％,纯化倍数为31.1,凝胶过滤层析和SDS-PAGE电泳测得酶的分子量分别为40.3 ku和39.0 ku,等电聚焦电泳测得其等电点为8.55.