成骨细胞Toll样受体4信号通路研究进展

Toll样受体4(TLR4)为天然免疫的关键模式识别受体,在骨丢失发病机制中发挥重要作用。TLR4通路与影响成骨细胞的其他通路如Wnt/β-catenin、TGF-β/BMP、Notch通路间存在密切联系。TLR4通路通过抑制NF-κB配体受体活化剂(RANKL)、骨保护素(OPG)、碱性磷酸酶(ALP)等成骨相关标志物表达抑制成骨细胞的分化、增殖、矿化等。TLR4通路还能促进成骨细胞凋亡、降低骨密度。本文就TLR4结构、功能及其对成骨细胞的作用进行综述。     

骨钙素调节糖代谢的研究进展

骨钙素(OC)是由成骨细胞合成并分泌的骨特异性蛋白,是临床中常用的骨转换血清学指标。近期研究表明,OC,尤其是羧化不全骨钙素(ucOC)可通过促进B细胞增殖、胰岛素分泌及改善周围组织对胰岛素敏感性等途径调节糖代谢。GPRC6A是骨钙素在胰腺的受体,ESP基因与胰岛素信号可调节骨钙素的活性,进而调节血糖水平。临床研究也证实了OC调节糖代谢的作用。OC有望成为糖尿病和肥胖治疗的新靶点。     

miR-30a抑制BMP9诱导间充质干细胞C3H10T1/2的成骨分化

目的:确认miR-30a在BMP9诱导间充质干细胞C3H10T1/2成骨分化中的作用。方法:首先用Ad-BMP9处理间充质干细胞C3H10T1/2,通过碱性磷酸酶(ALP)检测试剂盒检测早期成骨指标ALP、Western blot和PCR检测晚期成骨指标OPN,茜素红S染色检测钙盐沉积了解BMP9对C3H10T1/2细胞的成骨分化作用,同时用Real-time PCR检测miR-30a在该成骨分化中的变化。然后用BMP9条件培养基分别作用Ad-mmu-miR-30a和Ad-RFP预处理10h的C3H10T1/2细胞,检测早期成骨指标ALP、晚期成骨指标钙盐沉积和骨钙素OPN的表达。最后探讨miR-30a在BMP9诱导C3H10T1/2细胞成骨分化中的可能作用机制。结果:Ad-BMP9处理C3H10T1/2细胞5d,7d后,ALP的活性的表达增高;第9d后,OPN的表达增加;第14d后,钙盐的沉积明显增多。而miR-30a过表达后,抑制了这一现象。同时发现过表达miR-30a后,Runx2蛋白水平较对照组下降而mRNA水平基本没有变化。结论:miR-30a可以抑制BMP9诱导C3H10T1/2细胞的成骨分化,其作用机理可能和Runx2相关。     

骨钙素对糖代谢的调控作用

骨钙素是由成骨细胞合成分泌的骨基质含量丰富的非胶原蛋白,主要以羧化骨钙素及非羧化骨钙素2种形式存在于血循环中。近年动物实验结果显示,非羧化骨钙素可作为激素对能量代谢发挥重要调节作用,作用于胰腺促进胰岛β细胞增殖及胰岛素分泌,作用于脂肪细胞促进脂联素分泌并改善胰岛素敏感性,以及通过提高胰高血糖素肽-1表达间接促进胰岛素分泌等作用。骨钙素的合成及活性受胰岛素正反馈调节,而瘦素通过交感神经对骨钙素活性负性调节。对人群横断面的研究显示血糖水平随血清骨钙素浓度升高而降低,而队列研究及病例对照研究结果并不足以支持低血清骨钙素与糖尿病发生相关的结论。本文阐述了骨钙素对糖代谢的调节作用。     

PI3K/Akt信号通路在骨髓间充质干细胞增殖及成骨分化调控中的作用

目的研究PI3K/Akt信号通路抑制剂LY294002对骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)增殖及分化的影响。方法采用贴壁法体外分离人骨髓间充质干细胞(hMSCs),加入PI3K抑制剂LY294002(1、10μmol/L),应用MTT法测定细胞增殖,常规成骨诱导分化培养3或7 d,采用碱性磷酸酶(ALP)染色观察成骨分化水平,化学比色法测定ALP活性,茜素红染色后观察矿化钙结节数量并定量分析,Western blot检测磷酸化Akt蛋白表达,应用Realtime-PCR检测各组细胞BMP2、Runx2、OPN及Osterix等成骨分化标记物的基因表达水平。结果从24至72 h,LY294002对hMSCs增殖均产生显著抑制,随时间推延,可见抑制增殖效果增强(P<0.05)。ALP染色和定量测定提示10μmol/L的ALP活性最强,在不同时间显著高于对照组和1μmol/L组(P<0.05)。成骨诱导培养3和7 d,1、10μmol/L组矿化量都显著高于对照组(P<0.05)。10μmol/L组矿化量在成骨诱导7 d也显著高于1μmol/L组(P<0.05)。Western blot检测结果证实成骨诱导可激活Akt磷酸化蛋白表达,但LY294002可抑制该蛋白磷酸化。成骨诱导分化7 d,1、10μmol/L均明显促进BMP2、Runx2、OPN、Osterix 4种基因mRNA表达(均P<0.05)。结论 PI3K/Akt信号通路参与hMSCs增殖和分化过程。成骨分化伴随下游Akt蛋白表达。PI3K抑制剂可抑制hMSCs增殖,但同时促进其向成骨分化和矿化。     

慢性氟中毒大鼠骨组织形态计量学改变及血清骨代谢标志物表达

目的探讨慢性氟中毒大鼠骨组织病理形态学改变及与氟性骨损伤相关的骨代谢标志物的改变。方法 48只健康SD大鼠随机分为4组,对照组饮用自来水,低氟组、中氟组、高氟组分别饮用含50 mg/L、150 mg/L和250 mg/L氟化钠的自来水。饲养6个月后,检测氟斑牙发生率,氟离子选择电极法检测各组大鼠尿氟、骨氟、血氟含量;取大鼠股骨干骺端进行苏木精—伊红染色,光镜观察骨组织形态学改变;酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清骨代谢标志物含量。结果大鼠体重、氟斑牙发生情况与氟负荷量的变化:低中氟组雌鼠体重增幅较对照组小,高氟组雌鼠体重增幅较对照组大;高氟组雄鼠体重增幅小于对照组、低、中氟组雄鼠。各染氟组大鼠氟斑牙检出率、尿氟、骨氟和血清氟含量均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),而且随染氟剂量增高,氟斑牙严重程度、尿氟、骨氟和血清氟呈上升趋势。大鼠股骨组织形态计量学结果:中、高氟组雌雄大鼠的骨皮质厚度均高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),中、高氟组雄鼠骨小梁面积大于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);低氟组雌雄鼠骨小梁平均面积均小于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);低、中、高氟组雌雄成骨细胞数均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。BGP、BALP、PⅠNP检测结果:低、中、高氟组雌雄鼠BGP、BALP、PⅠNP均小于对照组,差异多有统计学意义(P<0.05)。CTX-Ⅰ、TRACP-5b检测结果:低、中、高氟组雌雄鼠CTX-Ⅰ、TRACP-5b均小于对照组,差异多有统计学意义(P<0.05)。结论经饮水染氟6个月后,反映成骨活性和破骨活性的骨代谢指标在不同剂量组中表现为不同程度下调,骨组织形态计量显示中高氟组大鼠骨量增加;低氟组大鼠则出现骨量减少的指征。提示氟对成骨活性与破骨活性均有影响,且与染氟剂量有关。     

雌二醇下调铁对成骨细胞活性的抑制作用

目的了解雌二醇与铁对小鼠原代成骨细胞活性的影响及活性氧(ROS)的作用。方法提取新生小鼠颅骨原代成骨细胞,经差速贴壁法纯化后传代,选取3~4代进行实验,随机分为对照组,枸橼酸铁铵(FAC)组和FAC+17β-雌二醇(FAC+E2)组,分别用2.5μmol/L FAC和10 nmol/L E2干预7 d后收集细胞,用CCK-8法检测各组细胞增殖情况;用碱性磷酸酶(ALP)活性试剂盒检测各组细胞碱性磷酸酶活性;荧光定量PCR(Q-PCR)检测成骨相关基因(Runx2、osterix、Bglap、IBSP)表达;荧光酶标仪检测各组ROS水平并在荧光显微镜下观察。结果细胞活性氧水平检测结果显示,FAC组活性氧水平明显高于其余各组,FAC+E2组与FAC组相比ROS水平降低(P<0.05);FAC干预后细胞增殖能力及ALP活性明显下降(P<0.05),FAC+E2组细胞增殖能力较FAC组上升(P<0.05),ALP活性上升,但差异无统计学意义(P>0.05);Q-PCR结果显示,与对照组相比,FAC组Runx2、osteorix表达水平明显下降(P<0.05),FAC+E2组与FAC组相比,各基因表达水平均显著升高(均P<0.05)。结论 FAC可能通过升高ROS水平抑制成骨细胞生物活性;雌二醇可能通过清除FAC诱导生成的ROS下调该抑制作用。     

BMP9经Smad信号通路调控iSCAP成骨/成牙本质分化

目的:研究BMP9是否能够激活i SCAP细胞中的Smad信号通路,以及Smad信号通路在BMP9诱导i SCAP细胞成骨/成牙本质向分化过程中的作用。方法:首先,采用Western印迹实验检测Ad-BMP9转染i SCAP后Smad1/5/8蛋白的磷酸化水平。随后,利用dn ALK1重组腺病毒和BMP9条件培养基作用于i SCAP,Western印迹实验检测Smad1/5/8蛋白磷酸化水平;采用碱性磷酸酶(ALP)活性检测和染色方法分析早期成骨/成牙本质指标变化,茜素红染色法检测钙盐沉积程度;RT-PCR成骨/成牙本质相关基因Runx2、OCN、OPN和DMP1表达的影响。结果:BMP9可上调i SCAP中Smad1/5/8的磷酸化水平;dn ALK1抑制BMP9条件培养基作用后,可抑制Smad1/5/8的磷酸化,i SCAP细胞中早期成骨/成牙本质标志物ALP活性和晚期成骨/成牙本质标志钙盐结节减少,重要成骨转录因子Runx2基因表达减少,成骨/成牙本质相关基因OCN、OPN、DMP1的表达也受到了抑制。结论:Smad信号通路在BMP9诱导i SCAP成骨/成牙本质过程中存在并起着重要作用。     

住宅楼安装中央空调的加固案例分析

文章通过两处住宅用房安装中央空调的事例,现场查勘、验算与鉴定,证实了在住宅用房的混凝土梁上钻孔洞安装中央空调管线的做法,影响了房屋结构的安全,同时给出了加固处理意见,提出了个人的几点看法.     

Regularities of development of settling of models of deep footings

Conclusions 1. The effect of relative penetration on the change in magnitude of settlement is substantial. With the same specific pressure on the base the settlement of the model decreases as the relative penetration increases.2. Published data on values of unit friction forces along lateral surfaces of deep foundations were confirmed. The maximum value of resistance along the side surface was 2 tons/m².3. It was established that the realtionship between the settlement of the model and its diameter is nonlinear. This is of great importance in working out a method for calculating foundations of deep footings from deformations especially if one considers that in this case the foundation carries substantial pressures and deforms under conditions of strongly developed shear regions.Translated from Osnovaniya, Fundamenty i Mekhanika Gruntov, No. 6, pp. 11–12, November–December, 1971.     

测量标志普查资料汇集技术处理

为了适应新的形势发展需要,安徽省国土资源厅已启动新一轮测量标志普查工作。与过去不同,此次普查在资料汇集、调查人员组织、调查资料归档与调用等方面做了较大变革,文章简明阐述了变革后的测量标志普查资料汇集技术处理的过程。     

自动扶梯逆行故障成因与分析

对自动扶梯突然反转而导致逆行故障的类别和成因进行了分析,讨论了逆行速度及症状,分析了逆行概率及风险,并针对逆行提出了一些对策。     

浅析步行街的建筑工效学——上海市吴江路步行街建筑工效学调研

从建筑工效学的角度对上海市吴江路休闲步行街进行了调查研究，根据调查结果，分析了其在建筑工效学上的一些特点与不足之处并进行了探讨，以期对步行街的建筑工效学设计提供准确的参考。     

环境的共鸣--大连水产学院图书馆的设计

本文通过对大连水产学院图书馆的介绍,向人们展示了建筑与环境之间相辅相成,共同作用,引起环境共鸣的原则方法.     

住宅的多样性——日本集合住宅的借鉴

以西安目前住宅市场发展的现状及其存在的弊端为例 ,说明我国目前住宅需求的多样化和设计手法的单一化之间的矛盾 ,论述了与我国有着相似文化背景的日本在解决不同住宅需求时采用形式多样、功能各异的集合住宅的理念 .试图以此借鉴 ,使我国建筑设计界了解日本集合住宅的发展演变过程 ,吸取他们的经验 ,为我们在住宅多样化研究和设计时提供一种不同的思路和方法 .     

混凝土碳化深度的灰色预测

混凝土碳化是导致钢筋混凝土结构耐久性损伤的主要原因之一。为了预测混凝土碳化深度,本文建议采用一种基于灰色系统理论的预测模型,该模型可以根据已知的混凝土碳化序列,较精确地预测未来时刻的碳化深度。文章最后以实例说明了该模型的应用。