一株具有纤维蛋白原水解酶活性菌株的分离鉴定

为探讨七鳃鳗性腺组织中是否含有具有纤溶活性的菌株,以日本七鳃鳗(Lampetra japonica)的性腺组织为材料,筛选分离出1株高效的具有纤维蛋白原水解酶活性的菌株,并通过形态学观察和16SrDNA序列对其进行鉴定及系统发育分析。采用纤维平板法检测了其上清液的纤维蛋白水解酶活性。分离菌株的上清液能够于0.5h内迅速降解纤维蛋白原的Aα链和Bβ链。此外,纤维蛋白平板实验结果显示该上清液不具有纤维蛋白水解酶和纤溶酶原激活剂的活性。形态学观察及16SrDNA序列分析结果表明该活性菌株为革兰氏阴性直杆菌,与中间气单胞菌(Aeromonas media,登录号为AF418217)的同源性最高,其相似度可高达99.7%。该活性菌株被鉴定为气单胞菌,并命名为气单胞菌L1(Aeromonas L1,Genebank登录号为KP255445)。     

单环刺螠纤溶酶ufeII基因的原核表达及活性研究

血栓类疾病的治疗已成为当今医学界研究的重点、难点问题之一。单环刺螠纤溶酶UFEII是从海洋生物单环刺螠体内分离纯化出的具有纤溶活性的丝氨酸蛋白酶。通过基因工程技术对ufeII基因构建了单环刺螠纤溶酶UFEII的体外重组表达系统,通过包涵体复性获得了具有纤溶活性的重组UFEII,并对其体外活性进行了研究。通过纤维平板法说明重组UFEII具有水解血纤维蛋白的能力,并且血纤维蛋白原降解实验显示其对血纤维蛋白原的降解顺序是优先降解α链,其次是β链、γ链。研究结果表明,重组UFEII是1种有潜力的新型溶栓剂。     

梅毒螺旋体金属蛋白酶水解纤维蛋白原的活性研究

目的研究梅毒螺旋体金属蛋白酶Tp0751对细胞外基质纤维蛋白原的水解能力,为深入研究TP的致病机制提供实验依据。方法采用两点法构建H198A突变型及H202A突变型Tp0751基因,分别构建野生型和突变型Tp0751原核载体进行诱导表达;体外实验检测Tp0751野生型Tp0751蛋白、H198A Tp0751突变型蛋白、H202ATp0751突变型蛋白对纤维蛋白原的降解活性。结果成功表达并纯化了野生型Tp0751蛋白、H198A Tp0751突变体蛋白、H202A Tp0751突变体蛋白,各蛋白相对分子量大小约为26k D;纤维蛋白原在与野生型Tp0751蛋白作用约24h后被完全水解;与H198A Tp0751突变体蛋白作用约24 h后部分水解,尚有部分未被降解;与H202A Tp0751突变体蛋白作用约24h后几乎不被水解。结论野生型Tp0751蛋白具有水解纤维蛋白原的作用;Tp0751蛋白水解纤维蛋白原的活性可能与金属蛋白酶HEXXH域相关,影响Tp0751蛋白对纤维蛋白原的降解的活性位点可能是202位的H而不是198位的H。     

南海鸢乌贼肌原纤维蛋白加热过程中理化性质的变化

为研究南海鸢乌贼Symplectoteuthis oualaniensis肌原纤维蛋白在加热过程中理化性质的变化,以南海鸢乌贼胴体肌肉为原料,对其肌原纤维蛋白在加热过程中浊度、溶解度、Ca~(2+)-ATPase活性和总巯基(-SH)含量进行了测定,并对该蛋白质在整个加热过程中SDS-PAGE电泳图的变化进行了研究。结果表明:在25~35℃时,鸢乌贼肌原纤维蛋白的浊度、溶解度、Ca~(2+)-ATPase活性、总巯基含量的变化均比较缓慢;在35℃后继续升温,浊度、Ca~(2+)-ATPase活性、总巯基含量均发生明显变化;总巯基含量在40~50℃时出现短暂升高现象后又急剧降低,溶解度在50℃时开始明显降低;在25~35℃时,随着温度的逐渐升高,鸢乌贼肌原纤维蛋白的肌球蛋白重链(MHC)略有减少,副肌球蛋白(PM)和肌动球蛋白(Actin)基本上未发生变化,但在35℃后,鸢乌贼肌原纤维蛋白开始产生大分子物质,逐渐发生变性。     

南海鸢乌贼肌原纤维蛋白加热过程中理化性质的变化

为研究南海鸢乌贼Symplectoteuthis oualaniensis肌原纤维蛋白在加热过程中理化性质的变化,以南海鸢乌贼胴体肌肉为原料,对其肌原纤维蛋白在加热过程中浊度、溶解度、Ca⁽²⁺⁾-ATPase活性和总巯基(-SH)含量进行了测定,并对该蛋白质在整个加热过程中SDS-PAGE电泳图的变化进行了研究。结果表明:在25(2+)-ATPase活性和总巯基(-SH)含量进行了测定,并对该蛋白质在整个加热过程中SDS-PAGE电泳图的变化进行了研究。结果表明:在25³5℃时,鸢乌贼肌原纤维蛋白的浊度、溶解度、Ca35℃时,鸢乌贼肌原纤维蛋白的浊度、溶解度、Ca⁽²⁺⁾-ATPase活性、总巯基含量的变化均比较缓慢;在35℃后继续升温,浊度、Ca(2+)-ATPase活性、总巯基含量的变化均比较缓慢;在35℃后继续升温,浊度、Ca⁽²⁺⁾-ATPase活性、总巯基含量均发生明显变化;总巯基含量在40(2+)-ATPase活性、总巯基含量均发生明显变化;总巯基含量在40⁵0℃时出现短暂升高现象后又急剧降低,溶解度在50℃时开始明显降低;在2550℃时出现短暂升高现象后又急剧降低,溶解度在50℃时开始明显降低;在25³5℃时,随着温度的逐渐升高,鸢乌贼肌原纤维蛋白的肌球蛋白重链(MHC)略有减少,副肌球蛋白(PM)和肌动球蛋白(Actin)基本上未发生变化,但在35℃后,鸢乌贼肌原纤维蛋白开始产生大分子物质,逐渐发生变性。     

加热方式对罗非鱼片质构特性和蛋白质理化特性的影响

为比较汽蒸、水煮、空气炸3种不同加热方式对罗非鱼Oreochromis niloticus鱼片质构特性和蛋白质理化特性的影响,对加热后罗非鱼片质构指标(硬度、弹性、咀嚼性、内聚性、胶着性)、肌原纤维蛋白含量及二级结构、羰基含量、巯基含量、SDS-PAGE图谱进行了比较分析。结果表明:加热对罗非鱼肉质构特性和蛋白理化性质有显著性影响;汽蒸(100℃下蒸5 min)、水煮(100℃沸水中煮5 min)、空气炸(200℃下炸制10 min)处理后鱼片硬度、咀嚼性、胶着性显著降低(P<0.05),内聚性显著提高(P<0.05),空气炸处理后样品弹性显著增加(P<0.05),汽蒸和水煮处理后弹性显著降低(P<0.05);热加工引起蛋白质发生氧化与热变性,肌原纤维蛋白和巯基含量显著降低(P<0.05),二级结构由有序转变为无序,α螺旋结构含量显著降低(P<0.05),无规则卷曲结构含量显著升高(P<0.05),羰基含量显著升高(P<0.05);SDS-PAGE图谱显示,鱼肉肌肉蛋白相对分子质量为16 000～220 000,主要条带为肌球蛋白重链、肌动蛋白、原肌球蛋白、肌球蛋白轻链,热加工处理后罗非鱼肉肌球蛋白重链条带变浅上移,肌原纤维蛋白SDS-PAGE图谱出现相对分子质量为37 000～52 000的小分子蛋白聚集。研究表明,不同加热方式对罗非鱼肉质构特性和蛋白理化性质影响程度不同,空气炸处理后鱼片弹性和咀嚼性相对较优,汽蒸处理对蛋白氧化变性影响程度相对较小,本研究结果可为制定合理的罗非鱼片热加工方式提供理论依据。     

日本蟳消化酶的初步研究

采用酶学分析方法研究了温度、pH对日本蟳Charybdis japonica中肠腺4种主要消化酶(蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶和脂肪酶)活性的影响及4种消化酶在中肠腺、胃、肠中的活性分布。结果表明:蛋白酶、淀粉酶、纤维素酶、脂肪酶的最适温度分别为55、35、65、45℃,最适pH分别为6.2、5.5、4.4、7.5;在最适温度及最适pH试验条件下,中肠腺中的蛋白酶、纤维素酶和脂肪酶活性均为最高;蛋白酶活性的大小依次为中肠腺>胃>肠,纤维素酶和脂肪酶活性的大小依次为中肠腺>肠>胃,而淀粉酶活性在中肠腺、胃、肠中差别不大。     

裙带菜岩藻聚糖硫酸酯酸解工艺优化及降解产物对巨噬细胞的抗炎活性

为了有效降解裙带菜Undaria pinnatifida Suringar岩藻聚糖硫酸酯，并探究其降解产物的抗炎活性，以复合酶解法提取的裙带菜岩藻聚糖硫酸酯(fucoidan)为原料，利用酸解法制备裙带菜岩藻聚糖硫酸酯降解产物，采用薄层色谱法(TLC)检测降解产物聚合度，优化酸解工艺条件，利用膜分离技术获得不同分子量段的降解产物，并检测了各段降解产物对小鼠巨噬细胞的抗炎活性。结果表明：通过薄层色谱检测，确定酸解温度95℃、pH 2、水解4 h为酸解裙带菜岩藻聚糖硫酸酯的优化条件；膜分离处理后可得到F1(相对分子质量400～1 000)、F2(1 000～3 500)、F3(3 500～5 000)、F4(5 000～10 000)、F5(10 000以上) 5种不同分子量段的岩藻聚糖硫酸酯降解产物，5种降解产物均能减少RAW264.7细胞NO、1L-1β、1L-6、1L-10和TNF-α的释放量；低分子量段组分(F1、F2)抗炎效果最为显著，其中组分F1抗炎效果最好。研究表明，经优化酸解工艺制备的裙带菜岩藻聚糖硫酸酯降解产物具有一定的抗炎效果，且分子量越低的降解产物抗炎效果越好，裙带菜岩藻聚糖硫酸酯寡糖比多糖具有更好的抗炎活性。     

不同水温和饲料蛋白质水平对镜鲤血清生化指标的影响

研究了不同水温和饲料蛋白质水平对镜鲤Cyprinus specularis血清生化指标的影响。试验中设3个温度梯度(18、22、26℃),每个温度下投喂5种含不同蛋白质水平(质量分数为29%、31%、34%、38%、40%)的饲料,共15组,每组设3个重复,每个重复放14尾鱼,共饲喂60 d。结果表明:镜鲤血清中的肌酐(CREA)浓度随饲养水温的升高而降低,在22、26℃下CREA浓度显著低于18℃下(P<0.05);血清中总胆固醇(CHOL)浓度随水温的升高而升高,在22℃和26℃下CHOL浓度显著高于18℃下(P<0.05);血清中甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDH)、谷草转氨酶(AST)浓度和AST/ALT在22℃下比18℃和26℃下有所降低,但无显著差异(P>0.05)。各水温环境下,血糖(GLU)、总蛋白(TP)、球蛋白(GLB)、白蛋白(ALB)浓度随饲料中蛋白质水平的增加而升高;在18℃下,LDH浓度随蛋白质水平的增加而逐渐降低,其中38%蛋白质组显著高于29%蛋白质组(P<0.05);在22℃下,CHOL浓度随蛋白质水平的增加而降低,其中40%蛋白质组显著低于其它蛋白质组(P<0.05);在26℃下,40%蛋白质组的谷丙转氨酶(ALT)活性显著高于31%和34%蛋白质组(P<0.05)。这表明22℃下比18、26℃下更有利于镜鲤的营养代谢,18、22、26℃下,饲料中蛋白质的质量分数分别为38%、40%、40%时,有利于改善镜鲤血清生化指标。     

超声及碱处理促进剩余污泥水解的试验研究

剩余污泥水解是解决污水处理厂生物脱氮除磷的碳源不足和实现污泥资源化的重要途径。采用3个平行反应器,在35℃、厌氧条件下研究了剩余污泥以及经过超声预处理和碱处理(pH=10±0.1)的剩余污泥的水解过程。结果表明:超声预处理以及碱处理均能促进剩余污泥的水解,它们对污泥的平均比降解速率较原污泥可分别提高39.4%和93.9%,SCOD的平均溶出速率可分别提高92.9%和150.4%。另外,碱处理后水解对剩余污泥的降解比超声预处理的更快、更彻底。根据污泥比降解速率、SCOD溶出速率以及营养物释放速率大小,可认为水解过程分多阶段进行,其中污泥比降解和SCOD溶出速率在第Ⅰ阶段(0～2d)最大,磷释放速率在第Ⅱ阶段(4～6d)最大。透射电镜扫描结果表明:剩余污泥水解的次序为EPS、胞内物质、细胞壁。     

住宅楼安装中央空调的加固案例分析

文章通过两处住宅用房安装中央空调的事例,现场查勘、验算与鉴定,证实了在住宅用房的混凝土梁上钻孔洞安装中央空调管线的做法,影响了房屋结构的安全,同时给出了加固处理意见,提出了个人的几点看法.     

Regularities of development of settling of models of deep footings

Conclusions 1. The effect of relative penetration on the change in magnitude of settlement is substantial. With the same specific pressure on the base the settlement of the model decreases as the relative penetration increases.2. Published data on values of unit friction forces along lateral surfaces of deep foundations were confirmed. The maximum value of resistance along the side surface was 2 tons/m².3. It was established that the realtionship between the settlement of the model and its diameter is nonlinear. This is of great importance in working out a method for calculating foundations of deep footings from deformations especially if one considers that in this case the foundation carries substantial pressures and deforms under conditions of strongly developed shear regions.Translated from Osnovaniya, Fundamenty i Mekhanika Gruntov, No. 6, pp. 11–12, November–December, 1971.     

测量标志普查资料汇集技术处理

为了适应新的形势发展需要,安徽省国土资源厅已启动新一轮测量标志普查工作。与过去不同,此次普查在资料汇集、调查人员组织、调查资料归档与调用等方面做了较大变革,文章简明阐述了变革后的测量标志普查资料汇集技术处理的过程。     

自动扶梯逆行故障成因与分析

对自动扶梯突然反转而导致逆行故障的类别和成因进行了分析,讨论了逆行速度及症状,分析了逆行概率及风险,并针对逆行提出了一些对策。     

浅析步行街的建筑工效学——上海市吴江路步行街建筑工效学调研

从建筑工效学的角度对上海市吴江路休闲步行街进行了调查研究，根据调查结果，分析了其在建筑工效学上的一些特点与不足之处并进行了探讨，以期对步行街的建筑工效学设计提供准确的参考。     

环境的共鸣--大连水产学院图书馆的设计

本文通过对大连水产学院图书馆的介绍,向人们展示了建筑与环境之间相辅相成,共同作用,引起环境共鸣的原则方法.     

住宅的多样性——日本集合住宅的借鉴

以西安目前住宅市场发展的现状及其存在的弊端为例 ,说明我国目前住宅需求的多样化和设计手法的单一化之间的矛盾 ,论述了与我国有着相似文化背景的日本在解决不同住宅需求时采用形式多样、功能各异的集合住宅的理念 .试图以此借鉴 ,使我国建筑设计界了解日本集合住宅的发展演变过程 ,吸取他们的经验 ,为我们在住宅多样化研究和设计时提供一种不同的思路和方法 .     

混凝土碳化深度的灰色预测

混凝土碳化是导致钢筋混凝土结构耐久性损伤的主要原因之一。为了预测混凝土碳化深度,本文建议采用一种基于灰色系统理论的预测模型,该模型可以根据已知的混凝土碳化序列,较精确地预测未来时刻的碳化深度。文章最后以实例说明了该模型的应用。