补料策略优化促进乳酸乳球菌HB03发酵合成Nisin

为提高乳酸乳球菌HB03发酵合成Nisin的效率，本研究基于乳酸乳球菌发酵生长期间存在的氧化胁迫效应和胞外氨基酸消长规律，分析了肽水解酶系、UMP从头合成和肽聚糖合成代谢在转录组水平的表达差异，确定对数中后期Nisin合成限制因素为半胱氨酸（cysteine,Cys）和精氨酸（arginine,Arg）供应不足，并通过氨基酸单因素和碳氮源补加优化，确定10 L发酵罐水平优化的补料策略为：11、13.5、17、19.5 h分别加入0.15 mmol/L的Cys,12 h补入蛋白胨（15 g/L）,10～24 h补入蔗糖（1.5 g/（L·h））,12～21 h流加Arg(0.25 g/（L·h）)。在此条件下Nisin效价达到了8 963 IU/m L，比只补加Cys发酵效价（6 993 IU/m L）提高了28.2%，研究结果可为Nisin工业发酵提供重要参考。     

乳酸乳球菌乳酸亚种产丁二酮的优化研究

分别研究了10种不同因素对乳酸乳球菌乳酸亚种产生丁二酮含量的影响。实验结果表明,各因素产生丁二酮最高量的条件分别为:培养温度为37℃,凝乳后0h,后熟12h,培养基pH调节为5.6,培养基中添加柠檬酸的量为0.15%;培养基中添加Vc的量为0.01%,培养基中添加金属离子的量分别为Mg2+0.03%、Cu2+0.02%、Mn2+0%,培养基中添加甘氨酸的量为0.2%,培养基中添加碳水化合物的量分别为葡萄糖为0%、蔗糖为0%;随着基质浓度增加丁二酮产量也随之增加。     

乳酸乳球菌乳酸亚种高产胆盐水解酶发酵条件的优化研究

本文利用从藏灵菇中筛选的产胆盐水解酶的乳酸乳球菌乳酸亚种(Lactococcuslactissubsp.lactis)研究提高酶活力的环境因素。针对主要影响胆盐水解酶合成的四个因素,采用四因素三水平L9(34)正交试验确定了高产胆盐水解酶优化发酵条件:葡萄糖添加量为3%、大豆蛋白胨添加量为2%、发酵温度为37℃、接种量为2%。在优化条件下,胆盐水解酶活力是优化前的11.84倍。     

乳酸乳球菌乳脂亚种BTQY-112增殖培养基的优化

对乳酸乳球菌乳脂亚种BTQY-112增殖培养基进行优化研究。经试验确定乳酸乳球菌乳脂亚种BTQY-112最适培养基为:葡萄糖为5 g/L,乳糖为5 g/L,酪蛋白胨3.3 g/L,大豆蛋白胨3.3 g/L,鱼蛋白胨3.3 g/L,β-甘油磷酸二钠28.5 g/L,Tween-80 0.5 g/L,七水硫酸镁0.25 g/L,乙酸钠1.55 g/L,K2HPO40.83 g/L,柠檬酸钠0.62 g/L,抗坏血酸钠1.5 g/L。在此增殖培养基中经30℃,14 h培养活菌数提高了4.3倍。     

乳酸乳球菌发酵生产γ-氨基丁酸的条件优化

通过对乳酸乳球菌的发酵培养基及发酵条件进行优化,得到有利十GABA产量的培养基组分为葡萄糖10g/L、混合氮15g/L、混合氮源(柠檬酸二三铵:硫酸铵)成分比例2:1、谷氨酸20g/L:有利于GABA产量的发酵条件为培养基仞始pH6.5、培养温度30℃、培养时间26h.在最佳培养基组合和发酵条件下,发酵液中GABA的产量达9.01g/L.     

乳酸乳球菌胞外多糖磷酸化的工艺优化

采用单因素和正交试验,对乳酸乳球菌胞外多糖的磷酸化工艺进行研究,探讨磷酸盐用量、反应温度、反应时间、反应pH值对乳酸乳球菌胞外多糖最终PO43-接枝量的影响。所得的乳酸乳菌球菌胞外多糖磷酸化的工艺优化条件为：胞外多糖与磷酸盐质量比为6:1、温度90℃、时间4h、pH6.0,此条件下所得PO43-的接枝量为1.639mg/g。     

乳酸乳球菌乳亚种丁二酮变种发酵乳风味成分分析

使用同时蒸馏萃取-气谱-质谱(SDE-CC-MS)技术对乳酸乳球菌乳亚种丁二酮变种发酵乳中风味物质进行了定性及定量分析,经分析有19种成分属于其代谢产生的风味物质,其中酯类4种,醇类1种,杂环化合物1种,短链挥发性脂肪酸5种,羰基化合物8种,其中乙醇、2,3-丁二酮、2,3-戊二酮可及乙酸的含量明显高于其他菌种发酵乳中的相应含量.     

一株仅产L-乳酸的乳酸乳球菌发酵培养基的优化

为了研究一株分离自新疆牧民家庭自制酸马奶中的乳酸乳球菌KLDS 4.0325产L-乳酸的能力,以L-/D-乳酸试剂盒验证该菌种在发酵过程中所产L-乳酸的光学纯度为100%。利用Plackett-Burman设计法对影响该菌株发酵的培养基主要组分进行筛选,确定影响L-乳酸产量的主要因素为蔗糖、酵母粉、K2HPO4。在此基础上,采用响应面法优化发酵培养基的组成,结果表明：当蔗糖添加量为102.9 g/L、酵母粉添加量为2.5 g/L、K2HPO4添加量为7.9 g/L时,L-乳酸产量最大,可达86.6 g/L,在最优发酵条件下获得的实测值与模型预测值（86.3 g/L）吻合,说明所建立的模型是切实可行的。     

缓冲策略在乳酸乳球菌发酵生产乳链菌肽中的应用研究

通过对乳链菌肽生产菌株Lactococcus lactis Z801发酵特性的研究,并使用缓冲策略改善发酵条件,使乳链菌肽单批发酵效价得到大幅度提高。发现用Tris缓冲液配制CM发酵培养基,并添加1.5%的CaCO3,初始pH7.5,30℃,振荡培养可以使乳链菌肽的发酵效价提高近2700IU/mL,而且发现添加CaCO3可以大大延缓发酵后期发酵液效价的快速下降。      

乳酸乳球菌有氧呼吸能力的优化研究

为了提高乳酸乳球菌KLDS4.0316在血红素存在状态下的有氧呼吸能力,实现高密度培养,分析比较了阶段性和持续有氧呼吸的培养方法。结合不同碳源及浓度、血红素添加量和摇床转速等单因素实验结果,设计正交实验优化获得的最佳有氧呼吸培养条件为:培养物以1/1000接菌量接种于添加20g/L葡萄糖和2μg/mL血红素的M17培养基中,摇床转速250r/min,30℃培养。增菌培养终止时间为8h。研究发现,优化培养的KLDS4.0316菌株消耗更多的葡萄糖,这可能与显著增加的生物量有关。      

乳酸乳球菌有氧呼吸能力的优化研究

为了提高乳酸乳球菌KLDS4.0316在血红素存在状态下的有氧呼吸能力,实现高密度培养,分析比较了阶段性和持续有氧呼吸的培养方法。结合不同碳源及浓度、血红素添加量和摇床转速等单因素实验结果,设计正交实验优化获得的最佳有氧呼吸培养条件为:培养物以1/1000接菌量接种于添加20g/L葡萄糖和2μg/mL血红素的M17培养基中,摇床转速250r/min,30℃培养。增菌培养终止时间为8h。研究发现,优化培养的KLDS4.0316菌株消耗更多的葡萄糖,这可能与显著增加的生物量有关。     

乳酸乳球菌高效电转化的方法

以质粒pMG36e和pNZ8148为材料,对乳酸乳球ATCC19435的电转化条件进行了优化研究.实验结果表明,乳酸乳球菌的最佳电转化条件为对数生长中后期的细胞,电场强度12 kV/cm,质粒浓度0.1～1 mg/L,复苏时间2 h,此时质粒pMG36e和pNZ8148时供试菌株的电转化效率分别为1.95x105μg-1和2.18x105μg-1,比优化前电转化效率均提高10倍以上.本研究为外源基因电转化乳酸乳球菌提供了可靠的试验参数依据.     

乳酸乳球菌乳脂亚种高产丁二酮的条件优化

分别研究了10种不同因素对乳酸乳球菌乳脂亚种产生丁二酮质量分数的影响.结果表明,各因素产生丁二酮最高量的条件:培养温度为37℃;凝乳后3 h;后熟12 h;培养基pH值调至为5.6;培养基中添加柠檬酸氢二铵的质量浓度为0.15%:培养基中添加Vc的质量浓度为0.3%.培养基中添加金属离子的质量浓度分别为:Mg2+为O.05%,Cu2+为O.04%,Mn2+为O.001%;培养基中添加甘氨酸的质量浓度为1.7%(均为质量分数);培养基中添加碳水化舍物的质量浓度分别为:葡萄糖为1%,蔗糖为1.5%(均为质量分数);随着基质浓度增加丁二酮产量也随之增加.     

丁二酮乳酸乳球菌发酵对羊奶脂肪酸组成影响分析

为研究乳酸乳球菌乳酸亚种丁二酮变种(Lactococcus lactis ssp.Lactis biovar diacetylactis)在单菌发酵,或与嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)和保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)混合发酵条件下对羊奶中脂肪酸含量影响情况,利用气相色谱法进行脂肪酸分析,结果表明:L.diacetylactis发酵显著提高了羊奶中、短链脂肪酸百分含量,降低了长链脂肪酸百分含量(p<0.05);L.diacetylactis接种量对发酵羊奶成品中脂肪酸组成影响不显著;L.diacetylactis与S.thermophilus、L.bulgaricus混合发酵羊奶中脂肪酸组成不受S.thermophilus、L.bulgaricus影响。因此,L.diacetylactis发酵适用于开发风味良好、营养合理的酮香型羊奶保健品。     

丁二酮乳酸乳球菌发酵对羊奶脂肪酸组成影响分析

为研究乳酸乳球菌乳酸亚种丁二酮变种(Lactococcus lactis ssp.Lactis biovar diacetylactis)在单菌发酵,或与嗜热链球菌(Streptococcus thermophilus)和保加利亚乳杆菌(Lactobacillus bulgaricus)混合发酵条件下对羊奶中脂肪酸含量影响情况,利用气相色谱法进行脂肪酸分析,结果表明:L.diacetylactis发酵显著提高了羊奶中、短链脂肪酸百分含量,降低了长链脂肪酸百分含量(p<0.05);L.diacetylactis接种量对发酵羊奶成品中脂肪酸组成影响不显著;L.diacetylactis与S.thermophilus、L.bulgaricus混合发酵羊奶中脂肪酸组成不受S.thermophilus、L.bulgaricus影响。因此,L.diacetylactis发酵适用于开发风味良好、营养合理的酮香型羊奶保健品。      

腐乳源乳酸乳球菌17M1高密度培养条件研究

为了获得乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)17M1的高密度培养方法,以菌体密度和活菌数为评价指标,以豆腐乳清为基础培养基,采用响应面法对该菌株的培养基组成进行优化,并研究其培养条件。结果表明,菌株17M1的最佳培养基组成为：在豆腐乳清中加入2.00%大豆蛋白胨、胰酪蛋白胨1.70%、柠檬酸铵2.30%。在此优化培养基中初始pH值6.15,于37℃培养15 h,乳酸乳球菌17M1的活菌数达到了1.17×10¹⁰CFU/mL,高于M17肉汤培养基活菌数(1.04×10⁹CFU/mL)。该研究结果为乳酸乳球菌17M1的工业化应用提供了技术支持。     

基于电子鼻和电子舌技术评价乳酸乳球菌对发酵乳风味品质的影响

目的:探究不同发酵特性的乳酸乳球菌对发酵乳品质的影响.方法:通过电子鼻与电子舌技术,结合多元统计分析对191株乳酸乳球菌所制备的发酵乳进行风味与滋味品质评价.结果:主成分分析表明,具有不同产酸和蛋白水解特性的乳酸乳球菌所制备的发酵乳风味特征呈分离趋势.Mann-Whitney分析结果表明,慢速产酸组的发酵乳芳香成分显著...     

乳酸乳球菌KLDS4.0325产细菌素最佳培养条件的研究

以分离自新疆牧民家庭自制酸马奶中的乳酸乳球菌KLDS4.0325为研究对象,以大肠杆菌为指示菌,以抑菌圈直径为考察指标,考察了不同温度、p H、转速及培养时间等培养条件对该菌株细菌素产量的影响,经单因素实验优化得出乳酸乳球菌KLDS4.0325在培养温度33℃,培养基初始p H7.0,120 r/min摇床培养20 h的条件下,无细胞发酵上清液对大肠杆菌的抑菌圈直径最大,抑菌活性最强,细菌素产量最高。在此条件下,抑菌圈直径为25.26 mm,细菌素效价可达5383.07 IU/m L。      

固定化乳酸乳球菌DL-203发酵生产Nisin的研究

对用固定化乳酸乳球菌DL-203发酵生产Nisin进行了研究。确定采用k-卡拉胶作为固定化载体,并添加磷酸三钙,包埋固定化乳酸乳球菌DL-203发酵生产Nisin。固定化最适条件为3.5%（W/V）k-卡拉胶+0.1%（W/V）磷酸三钙,细胞浓度5%～10%（V/V）。发酵培养基添加0.2%（V/V）吐温-20,30℃摇床培养进行分批重复发酵,可连续使用五批以上,而发酵液Nisin效价未有下降,达游离细胞发酵液的50%～60%。采用柱式填充床反应器进行固定化乳酸乳球菌DL-203连续发酵生产Nisin,停留时间以4～6h比较适宜,可连续稳定生产150h以上,而且固定化小球未有明显的细胞外漏,发酵液Nisin效价可达游离细胞发酵液的30%～40%。      

乳酸乳球菌发酵液中乳链菌肽的分离纯化

对乳酸乳球菌乳酸亚种SQ80随pH的改变吸附乳链菌肽的规律进行了研究，pH6．5时吸附率达91．5％，pH3以下吸附率为0。通过调整pH，使乳酸乳球菌选择性地吸附、释放乳链菌肽，达到了较好的分离纯化效果，HPLC检测显示单一尖峰，乳链菌肽回收率58．2％，纯化倍数75。