昆明地区成人非细菌性腹泻病原——轮状病毒的电镜观察

婴幼儿急性胃肠炎的主要病原是轮状病毒已经非常明确。近年来,成人急性非细菌性腹泻在我国南北各地均有流行。昆明地区自81年以来每年都在一定范围内发生该病流行。洪涛等报告在成人无菌性腹泻中发现了新轮状病毒。现将我们在昆明地区进行的成人流行性腹泻病原学初步研究结果报告如下: 取肠道致病菌培养结果为阴性的成人急性腹泻患者粪便标本,经4,000rpm离心30分钟,取上清液直接滴膜负染,少量粪沉渣作超薄切片制样,电镜观察。同时从上清液中提取病毒核酸进行聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)。     

人类腹泻粪便中小圆形病毒的电子显微镜研究

我们在研究婴幼儿急性胃肠炎和腹泻及成人流行性腹泻的病原学时,用直接电镜和免疫电镜技术,从患者粪便标本中检出了4种小圆形病毒颗粒。粪便标本用生理盐水制成20～50％的悬液(水样便可不稀释),经超声波粉碎处理(振幅4μ,每次30秒钟,共3～5次),3000rpm离心30分钟,上清为被检样品。被检样品制备直接电镜或免疫电镜标本,用3％磷钨酸(pH6.4)做负染色。     

轮状病毒腹泻电镜检查判断指标的研究

轮状病毒所致的婴儿腹泻和流行性成人腹泻是一组流行最广泛的病毒性腹泻。在实际防治工作中常需要得到最快的病原学诊断,以便及时采取有效的防治措施。电镜检查仍是一项最快、最准确的简易检测方法,特别是到目前,国内绝大多数省份均设有电子显微镜,开展电镜诊断技术具有广泛的应用前景。我们总结本室十余年利用电镜对婴儿腹泻、流行性成人腹泻的粪便标本的检查结果,确定了轮状病毒腹泻的判断指标:     

湖北省成人轮状病毒性腹泻爆发流行的病原学研究

1986年5月4日—5月19日,湖北省襄阳县发生一起以成人为主的流行性腹泻,发病共98例。经细菌培养未发现致病菌。取18例症状典型患者的粪便标本进行ELISA试验和PAGE核酸电泳,阳性反应分别为14和13例。PAGE核酸电泳获得的核酸图型与普通轮状病毒的图型不同,11条核酸带的分布特征为:第一区3、4带相接近,第二区5、6带紧邻,第三区7、8、9带均匀分布,相距较远(图1)。用病人双份血清作补体结合试验,抗体阳转率为57.1％。取10例PAGE阳性粪便提取液作负染直接电镜观察,仅有3例发现部分已降解,形态与普通轮状病毒相似的病毒颗粒(图2)。用同上10例粪渣作超薄切片电镜     

小双壳腹泻病毒的发现及初步研究

1983年作者用多价抗体—免疫电镜法从23例秋季婴幼儿胃肠炎病人粪中检出3例小双壳腹泻病毒(SmallDouble Capsids Diarrhea Virus SDCDV)。测算205个SDCDV颗粒的直径为32.1～36.7平均34.1±1.1nm。外观呈球形,由核心和核壳组成,无包膜。核心大而明显,有的如蜂窝样。核壳内层厚、外层薄。壳粒为点状和杆状,似辐条,与外核壳相连成“T”形,有10～16个。与有关病毒的形态作比较表明:(1)与小呼肠孤病毒、小轮状病毒和“Fuzzy—Wuzzys”相似但不尽相同,从核心、核壳和壳粒形状可加以区别;(2)与轮状病毒和呼肠孤病毒虽都有双层核壳,但其大小仅大     

婴幼儿病毒性腹泻的电镜诊断

病毒性腹泻是由病毒引起的急性胃肠炎 ,二十世纪 30年代就有临床报道[1] ,但其病原学直至 70年代初Ｋａｐｉｋｉａｎ和Ｂｉｓｈｏｐ等相继发现了诺瓦克病毒(Ｎｏｒｗａｌｋｖｉｒｕｓ)和轮状病毒 (Ｒｏｔａｖｉｒｕｓ)之后才获得突破。此后 ,从腹泻病人粪便中陆续发现了星状病毒(Ａｓｔｒｏｖｉｒｕｓ)、杯状病毒 (Ｃａｌｉｃｉｖｉｒｕｓ)、肠道腺病毒(ＥｎｔｅｒｉｃＡｄｅｎｏｖｉｒｕｓ)、冠状病毒 (Ｃｏｒｏｎａｖｉｒｕｓ)和小圆病毒 (Ｓｍａｌｌｒｏｕｎｄｖｉｒｕｓ)等[2 ] 。本文应用电镜对婴幼儿腹泻的病毒感染进行快速检测 ,为临…     

电镜在病毒感染诊断中的应用

本文系统温习了动物病毒分类与命名以及人类重要致病病毒电镜诊断的形态学指征。自１９６９年以来，我们应用超薄切片，负染和免疫电镜技术对６００余份病毒感染的培养细胞，实验动物组织以及少数临床样品（血清和粪便病毒提取液以及皮肤活检组织等）进行了电镜检查和诊断。检出的病毒有：触染性软疣病毒、鼠痘病毒、疱疹病毒、原病毒、人乳头瘤病毒、马脑炎病毒、乙型脑炎病毒、登戈病毒、流感病毒、鼠副流感病毒、合胞病毒、狂犬病     

葡萄球菌A蛋白在电子显微镜观察病毒中的应用研究

本文报导了国内首次使用葡萄球菌A蛋白(Stophylococca Protein A,简称SPA)在电镜观察病毒中的应用。并使用SPA所建立的固相免疫电镜方法(简称SPA-SPIEM)对轮状病毒、脊髓灰质炎病毒、类SV_(40)猴病毒分别进行了实验和检查。对比了各种浓度SPA、各种稀释度抗血清对检测病毒结果的影响。同时对直接电镜(简称DEM-PTA)、SPA-SPIEM和直接抗原抗体免疫电镜(简称IEM)三种制样方法所观察到的病毒形态结构进行了比较。结果表明:SPA-SPIEM法在镜下检出的病毒颗粒数比DEM-PTA法提高100—300倍左右,在显示病毒形态结构方面接近DEM-PTA法,比IEM法好。整个SPA-SPIEM制样过程,在1小时内可以全部完成。作者认为:SPA-SPIEM制样方法,在电镜检测病毒中是一种用材量微、灵敏度高、分辨率好、特异性强、快速准确的检测方法。在病毒分型、混合病毒分别检测、低滴度未知病毒检测等方面,具有独特的优点。是一种有发展前途,可应用于各种病毒检测的新方法。     

引起婴幼儿病毒性肺炎的腺病毒和巨细胞病毒的电镜观察

腺病毒和巨细胞病毒常常引起婴幼儿病毒性肺炎。关于腺病毒肺炎和巨细胞病毒肺炎的临床研究和病理组织学变化的观察,国内外已有不少报导。而肺组织中巨细胞病毒形态的电镜观察,尚未见报导。我们结合病理组织学观察,对两例腺病毒肺炎婴儿尸检肺组织和一例全身性巨细胞包涵体病婴儿尸检肺组织材料,作了肺内病变的透射电镜观察,以阐明腺病毒在肺组织中的增殖状态、巨细胞包涵体及巨细胞病毒的特征,以及病毒性肺炎肺组     

心肌线粒体细胞色素氧化酶的图象分析

成年大鼠10只,随机分为实验组(6只)和正常对照组(4只)。实验组大鼠置入密封玻璃容器内,同时放人适量钠石灰。90分钟后,取出动物,麻醉后灌流固定,取左心室前外侧壁组织标本作超微细胞色素氧化酶反应,同时取正常对照组大鼠左心室前外侧壁相同部位标本作对照。细胞色素氧化酶孵育采用DAB结合铈基法,用亚铁氰化钾半还原的锇酸后固定取代电子染色。实验组和对照组标本处理、孵育反应,电镜观察和照相条件等均相同。结果分析随机取样,对两组动物的电镜照片的各50个线粒体结构和细胞色素氧化酶反应进行图象分析。分析参数包括每个线粒体的面积、周长,形状因子(圆形度),     

恒河猴SV_(40)的电子显微镜研究——恒河猴SV_(40)的隐性感染及其原代肾组织培养细胞SV_(40)的电镜观察

SV_(40)即猴乳多空病毒,是猴的一种潜在病毒。SV_(40)对恒河猴的隐性感染,可致原代恒河猴肾组织培养细胞(PRMK)的严重污染,从而影响用PRMK制备的疫苗质量及安全性。目前,国内许多实验室还难以检查PRMK中的SV_(40),故使用电镜检查SV_(40)具有实际价值。本文报告国内使用电镜首次检查到SV_(40)。对所分离到的4株病毒进行阴性染色制样,同时用国际标准SV_(40)及     

产肠毒素大肠杆菌的电子显微镜观察

近十年来,在对霍乱弧菌深入研究的同时,对大肠杆菌致泻问题的认识也有了进展。现在已分离到能产生肠毒素的大肠杆菌,它能引起轻度或中度婴幼儿腹泻、旅游者腹泻或霍乱样病状,可因水、食物被粪便污染而引起流行。由于形态结构和功能有一定关系,为此我们用电子显微镜作了观察。结果和讨论在负染标本中,不产毒株(N19)的菌体表面可见电子致密与透明的条纹交替存在,产肠毒素大肠杆菌的菌体表面可见园形或四角形、六角形亚单位及纤毛,在超薄切片中不产毒株的胞浆中可见许多和动物细胞的微丝相似的细纤维,而产肠毒素大肠杆菌未见到产肠毒素大肠杆菌的胞浆中可见细颗粒组成的“团块”(和鼠伤寒沙门     

小细胞恶性间皮瘤的超微结构观察

应用电镜观察小细胞恶性间皮瘤的超微结构特点,对5例福尔马林固定后、经光镜及免疫组化检查过的胸膜及腹膜肿瘤标本进行常规电镜标本制备及电镜观察。超微观察显示肿瘤细胞呈小圆形及小梭形。5例均见腺腔样结构、细长微绒毛、紧密连接及发育良好的桥粒。较长的微绒毛长度与直径之比为13：1。见不连续基板（2例）、胞质内张力丝（2例）及微丝（4例）,2例同时见核旁分布的球形微丝小体。结论：细长微绒毛是包括低分化小细胞恶性问皮瘤在内的恶性间皮瘤的特征性超微结构。电镜观察对确定小细胞恶性问皮瘤的病理诊断及鉴别诊断有帮助。     

肾综合症出血热(HFRS)病毒的形态学研究

应用铁蛋白和辣根过氧化物酶标记抗体间接法染色免疫电镜超薄切片技术对经Vero E—6细胞从HFRS患者血清中直接分离到的二株病毒(H—8205及H—8278株)的形态作了观察。结果在细胞基质内、胞浆空泡内及细胞外查见为免疫复合物和铁蛋白颗粒或酶反应沉淀物包绕的病毒颗粒,园形或卵园形,平均直径108nm,变化范围50—156nm。颗粒有双层膜结构及表面突起,有的囊膜不连续,有小孔通过,颗粒内部为疏松的细颗粒状及微管状结构。两株病毒在形态上无差别。对照组(包括用正常人血清取代恢复期病人血清的对照)未见到类似     

低硒低磷脂豚鼠肝细胞的电镜观察

本研究以人工半合成低硒低磷脂饲料,饲养豚鼠两个月,对照组为人工半合成饲料。两组豚鼠均作血清酶学检查和肝脏的电镜观察。结果及讨论血清酶学检查,低硒低磷脂组和对照组比,GOT(谷草转氨酶)明显上升,ALP(碱性磷酸酶)明显下降,LDH(乳酸脱氢酶)轻度下降,而GPT(谷丙转氨酶)差异不显著。当肝细胞有损伤时,转氨酶释放于血中,故血中转氨酶升高。但GPT对肝功能测定较敏感,GOT在心肌损伤或心肌梗死时更敏感。GOT和GPT上升的程度和肝细胞障碍的程度不一定平行。低硒低磷脂豚鼠肝细胞之电镜观察,尚未查到有关报导。电镜下,和对照组比,肝细胞核无明显改变。     

鸭乙型肝炎病毒的形态学及形态发生的超微结构研究

本文报告对上海市清浦县的35只麻鸭的血清及13只麻鸭肝组织的电镜观察结果。所有鸭均为雌性,约1年令。翅静脉取血,分离血清,超离心浓缩病毒,悬液作负染色标本。肝穿组织按常规制备超薄切片标本,透射电镜观察。负染色标本观察表明,鸭血清中的鸭乙型肝炎病毒(DHBV)基本有两种形态,I型病毒呈园球形,直径40—50nm,某些病毒核壳呈20面体排列的亚单位结构,部分色膜破裂的病毒核壳可显示放射状排列亚单位,可能属20面体对称型病毒;Ⅱ型病毒形态不规则。未显示明确的表面结构,大小35—65nm不同个体和不同年令鸭血清中的病毒形态常有差异,     

支原体感染的不育症精子超微结构研究

生殖器官支原体感染可能是男性不育症的病因之一,为探讨不育的可能机理,本组对支原体感染的不育症患者精子的超微结构进行研究报告如下: 材料和方法:4例经支原体检查阳性的不育患者精液,1例支原体检查阴性的正常育者精液以及人型标准株支原体和解脲支原体培养物作对照。固定于成二醛的精子及支原体培养物一部分用悬滴法磷钨酸染色制备负染标本。另一部份离心成团按常规方法制备超薄切片JEM1200EX电镜观察。     

一株来自脑炎患者的类C型逆转录病毒形态学研究

在探讨神经系统疾病病毒病因的研究中,蓝祥英等从一例脑炎患者血细胞培养中获得一株可检出逆转录病毒样颗粒,称为CM_1的细胞株后,又将CM_1细胞株的无细胞滤液转化另一多发性硬化患者外周血淋巴细胞,而成CM_2细胞株。本文报告CM_2细胞株及其病毒的超微形态。材料和方法:培养传代的CM_2细胞以及加PHA和TPA激活的CM_2细胞分别离心成团,4％戊二醛固定,常规方法包埋,制备超薄切片,铀一铅双染色,JEM1200EX电镜观察。结果和讨论:培养传代的CM_2细胞以及经加PHA和TPA激活的细胞,大小约9—15微米,个别巨大细胞可达20微米以上。细胞核明显多形性,核内以常染色质为主,胞浆以丰富核蛋白体     

胰岛素瘤的光镜和电镜观察

胰岛肿瘤以胰岛素瘤为主,非胰岛素瘤较少见。到1973年,胰岛素瘤已报告了1000多例。胰岛素瘤的超微结构,国内罕见报道。本文对临床确诊的一例胰岛素瘤患者的外科手术标本,以光镜电镜观察其形态结构,并对肿瘤细胞的分型及淀粉样物质进行了讨论。此例患者为单发性肿瘤,位于胰体与胰尾交界部,直径2.5×2.5cm,圆形,黄褐色,与周围界线清楚。材料和方法自肿瘤的不同部位切取标本。常规光镜标本采用常规HoE染色和Bensley改良的Mallory胰岛染色法。电镜标本采用常规超薄切片染色,透射电镜观察。     

一株正常人外周血带EB病毒的B淋巴细胞(H—18)的超微结构研究

H—18细胞系由我国一例正常人外周血分离出的B淋巴细胞培养成株。经免疫荧光及免疫酶标光镜检查发现该细胞EB病毒壳抗原(VCA)阳性,如用正丁酸钠及巴豆油等病毒激活剂处理后,大量细胞(30—40％)显示VCA阳性。分离出的病毒可使体外培养细胞转化。用正常H—18细胞为对照,经正丁酸钠(4mM/ml)及巴豆油(500ng/ml)处理H—18后12,24,36,48,72小时的标本用国产DXB 2—12电镜观察。发现正常H—18细胞超微结构与正常人B淋巴细胞有很大差别。大小不一,核很不规则,核比例大,且几全部由常染色质组成。为分化很差或为转化的淋巴细胞。个别细胞内可见EB病毒之核壳体及其形态发生过程,证明该细胞带有EB病毒并进行病毒的复制。经正丁酸钠及巴豆油处理后12小时,部分细胞可见病毒大量复制。随时间的延长逐步增多,至72小