高生物量富硒酵母菌的选育

以酿酒酵母PT为出发菌株,采用梯度浓度筛选的方法对其进行驯化,得到1株生物量较高和对亚硒酸钠抗性较高的菌株GB-1.对其进行紫外诱变处理,当致死率达91.85%时,获得多株突变株.通过多次平板初筛和摇瓶复筛,得到1株高生物量富硒酵母UV-PT.采用响应面法对富硒酵母UV-PT发酵条件进行了优化.借助于SAS软件,首先利用Plaekett-Burman试验设计筛选出影响富硒的3个主要因素,即转速、温度、初始pH值.在此基础上,再利用Box-Behnken试验设计及响应面分析法对发酵条件进行优化,确定最佳发酵条件:转速为203r/min,发酵温度为30.3℃,初始PH值为4.52.结果表明,优化后富硒酵母的生物量和含硒量分别为10.62g/L、1003.26ug/g,硒总含量为10654.62ug/L,为出发菌株的1.62倍.     

高生物量富硒酵母菌的选育

以酿酒酵母PT为出发菌株,采用梯度浓度筛选的方法对其进行驯化,得到1株生物量较高和对亚硒酸钠抗性较高的菌株GB-1。对其进行紫外诱变处理,当致死率达91.85%时,获得多株突变株。通过多次平板初筛和摇瓶复筛,得到1株高生物量富硒酵母UV-PT。采用响应面法对富硒酵母UV-PT发酵条件进行了优化。借助于SAS软件,首先利用Plackett-Burman试验设计筛选出影响富硒的3个主要因素,即转速、温度、初始pH值。在此基础上,再利用Box-Behnken试验设计及响应面分析法对发酵条件进行优化,确定最佳发酵条件:转速为203r/min,发酵温度为30.3℃,初始pH值为4.52。结果表明,优化后富硒酵母的生物量和含硒量分别为10.62g/L、1003.26μg/g,硒总含量为10654.62μg/L,为出发菌株的1.62倍。     

硒浓度梯度驯化结合紫外诱变法选育富硒酵母菌研究

为获得高产富硒酵母,通过硒浓度梯度驯化啤酒酵母Sac.cerevisiae Fec205、戴氏酵母Sac.delbrueckii Fec209、热带假丝酵母Candida tropicalis Fec2011等3株酵母菌,结果显示啤酒酵母Sac.cerevisiae Fec205比其他2株酵母的耐硒性能更强。因此以啤酒酵母Sac.cerevisiae Fec205为原始菌株进行紫外诱变以提高其富硒能力。通过硒抗性筛选,挑取出6株生长快、菌落大的突变菌株单菌落。取发酵培养基中生物量大的3株酵母菌Sac.cerevisiae Y-3,Y-4,Y-1,接种于硒浓度为40μg/ml发酵培养基,结果显示选育出的3株诱变后的啤酒酵母Sac.cerevisiae Y-3,Y-4,Y-1的硒含量分别为932、832、915μg/g,其中最高的Y-3比原始菌株啤酒酵母Sac.cerevisiae Fec205的硒含量增长50.08%、生物量提高了50.97%。     

宜春明月山富硒土壤中耐硒酵母菌株的筛选与鉴定

从宜春明月山毛竹林采集的富硒土壤中,筛选出耐硒酵母菌株并进行鉴定。采用PDA培养基、营养琼脂培养基、马丁氏培养基筛选出耐亚硒酸钠浓度较高的酵母菌株,根据菌株形态学特征和26S rDNA基因序列分析,对其进行分类鉴定。从土壤中分离得到7株耐硒菌株,其中2株具有典型酵母菌特征的菌株,经鉴定结果表明:菌株A₁为Saitozymapodzolica,菌株P为Cyberlindnerasaturnus。得到2株耐硒酵母菌株,丰富了耐硒酵母资源。     

高富硒酵母菌株的筛选及其富硒特性分析

以酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）为出发菌株,NaN3为诱变剂、H2O2为选择压力进行菌株诱变筛选,以总硒及有机硒的含量与产率、硒磷酸合成酶（SPS）活性和蛋白硒含量为评价指标进行菌株富硒特性研究。结果表明,经10 mol/L NaN3处理40 min和2.50%H2O2筛分,从出发菌株中得到两株富硒水平高、富硒能力稳定的菌株HXS-01和HXS-02,经48 h摇瓶富硒培养后,菌株HXS-01和HXS-02总硒和有机硒含量及产率、SPS活性和蛋白硒含量分别比出发菌株高3.4～4.0倍、2.9～3.5倍、0.7～1.1倍和0.9～1.1倍,且以菌株HXS-02的富硒能力更高,其总硒含量和产率分别为2 303.97 μg/g和7 945.19 μg/L,有机硒占总硒的百分比超过97%。利用H2O2作为一种新的选择压力可以有效筛选出具有高SPS活性的富硒酵母菌株。     

高生物量富硒酵母的选育和培养条件的初步研究

对富硒酵母进行了选育并进行了条件优化，得到了摇瓶培养时富硒酵母的最适发酵条件：温度30℃，10％接种量，转速200r／min，发酵培养基最适初始硒浓度为25μg／ml，初始pH为4．0，发酵培养时间48h，经测定成品硒酵母生物量达到10g／L，硒含量超过1500μg／g，硒总含量超过15000μg／L，其中有机硒含量超过90％。     

超高压诱变选育富锌啤酒酵母菌株的研究

以啤酒酵母为出发菌株,采用超高压诱变方法诱变选育高富集锌的酵母菌株。优化了超高压处理的工艺条件,并基于菌株对锌离子的耐受性和富集性,对菌株进行筛选。结果表明,培养10 h的啤酒酵母菌处于对数生长期,适宜于诱变;超高压处理压力250 MPa、保压时间20 min为诱变的最佳工艺条件;成功选育出一株高富集锌的突变菌株,其细胞锌含量达2.75 mg/g,是出发菌的6.55倍。     

富硒酵母的选育及其发酵条件的优化试验

通过对一株耐硒酵母进行UV和60Co逐级诱变,获得一株产量高的突变株Y7,发酵液的硒总含量达19mg/L,是出发菌株的1.58倍,经多次传代试验,证明其稳定性良好。通过单因素、L16(37)正交试验对其发酵培养基和培养条件进行优化,试验表明富硒酵母发酵培养基的最佳配方是:蔗糖6%,牛肉膏1%,蛋白胨1%,K2HPO4 0.15%,亚硒酸钠35μg/L;最佳培养条件:初始pH为4.0,温度32℃,装液量60mL/250mL摇瓶,转速200r/min,10%(v/v)接种量,培养48h。富硒酵母的硒总含量达23mg/L以上,是出发菌株的1.92倍。     

高生物量富硒产朊假丝酵母菌株的选育

从5株优良的发酵酵母菌中筛选出耐硒和富硒能力较好的产朊假丝酵母,采用耐酸驯化和梯度浓度的耐硒驯化增加菌株的抗性。研究表明,产朊假丝酵母Ⅰ的富硒能力更好。在此基础上,经复合诱变、亚硒酸钠抗性平板初筛和摇瓶复筛,筛选出生物量和含硒量都较高的菌株D-5,再将突变株D-5进行紫外诱变,筛选出1株高生物量和高含硒量的菌株U-16,其菌株生物量为5.86 g/L,总硒量为1 575.40 μg/g,有机硒量为1 500.90 μg/g,其有机硒占胞内总硒比重的95.26%。与出发菌株相比,筛选菌株的生物量提高了67.90%,有机硒量增加了95.95%。     

产地葡萄酒优良酵母菌株的筛选及鉴定

从山东、甘肃、宁夏、陕西、新疆酿酒葡萄产区采集的99份葡萄果粒中分离到酵母258株,通过抗性和发酵特性评价,筛选出3株发酵性能优良的菌株.经菌落特征、细胞形态、生理生化特性鉴定,结合26S rDNA D1/D2序列,菌株ZYFJQ和QLMLZ2被鉴定为酿酒酵母,菌株ZYY73-2被鉴定为葡萄酒有孢汉逊氏酵母.     

冬枣果酒酵母的紫外诱变选育研究

以冬枣发酵液中筛选的酿酒酵母菌TN9#为出发菌株,进行紫外诱变选育。采用TTC筛选培养基对诱变产生菌株进行初筛,杜氏管产气测试,CO2失重法考察发酵速率,对糖与酒精的耐受性进行复筛,得到一株优良的冬枣果酒专用酵母TN91#菌株。TN91#菌株在发酵周期内酒精度为12．8％vol,比出发菌株提高了14．3％,且该菌株在起酵速度及增加果酒品质方面都有提高。     

低双乙酰啤酒酵母的选育

将APV啤酒酵母菌株在不同的双乙酰含量梯度培养基内培养，挑出抗双乙酰的变异菌株，经菌种分离、筛选、发酵及双乙酰驯养等步骤选育出一株7^#菌，11℃低温发酵，双乙酰峰值0．36mg／L，成品啤酒双乙酰含量0．06mg／L，真正发酵度66．1％。     

酒糟中超高温耐高酒精度酵母菌株的选育

从酒糟中选育耐高温及高酒精度的乙醇酵母,对于提高发酵效率、降低生产成本、提升酵母产乙醇的潜力具有重大的工业实用价值.经富集、分离纯化后得到6株具有典型特征的酵母菌,再经紫外诱变及耐高温和耐高浓度乙醇选育得到2株优良酵母P1,5min和P2,10min,两菌株最大耐受酒精度为16%vol,在52℃高温下24h内均出现较好的生长特性,72h内菌落直径达2.3mm,产乙醇能力分别为5.95%和5.83%.较之诱变前和常温发酵相比,两菌株乙醇生产能力均有不同程度的下降,说明酵母酒精耐受能力与乙醇生产能力之间没有严格的相关性.     

脐橙干酒酵母菌株的选育研究

从自然发酵的赣南脐橙汁中分离出1株适合酿造脐橙干酒的酵母菌株Y1980，以赣南脐橙为原料生产脐橙干酒。发酵性能测定表明，从第2天开始，糖度大幅度下降，酒精度快速上升，在主发酵进入第8天后，糖度和酒精度基本不再变化，残糖量降至5g/L；发酵过程酸度变化趋势比较平缓。发酵性能测定结合产品的感官评定，证明酵母菌株Y1980适合酿造脐橙干酒。(孙悟)     

高产酒精絮凝酵母SY-130菌株的选育

以絮凝性强的葡萄汁酵母SN—154和高产酒精酵母菌种NHY4—36做亲本，通过原生质体融合技术，获得1株发酵速度快、高产酒精且絮凝性强的酵母菌株SY—130，以玉米淀粉为原料，32Y发酵60—68h，可产酒精17．5％—18．5％(v／v)，耐酒精度可达20％以上，酵母絮凝性能良好。     

酿酒酵母菌单倍体分离及其呼吸缺陷型的选育

采用不同培养基对MT09酿酒酵母进行不同条件下的生孢培养实验,通过菌体前培养和诱导生孢子、单倍体细胞的分离、单倍体生孢能力的确认、菌体生长曲线的绘制、单倍体菌株的诱变和营养缺陷型的筛选,得出单倍体菌株D3作为最好的诱变出发菌株。最后筛选出菌株D3-02为遗传稳定性的呼吸缺陷型突变株。(孙悟)     

高效液相色谱法检测富硒酵母中的硒代蛋氨酸

建立了高效液相色谱法测定富硒酵母中硒代蛋氨酸的分析方法。采用酶解提取法提取富硒酵母样品中的硒代蛋氨酸,丹磺酰氯柱前衍生,C18色谱柱(4.6 mm×250 mm i.d.,5μm)分离,以10 mmol/L磷酸二氢钠缓冲液(含4%N,N-二甲基甲酰胺,pH=6.55)和乙腈为流动相进行梯度洗脱,荧光检测(激发波长:320 nm;发射波长:523nm)。硒代蛋氨酸的检出限为(S/N=3)1μg/L,定量限为(S/N=10)5μg/L。在1 mg/L~50 mg/L范围内的线性关系良好(R≥0.999 6)。加标回收率在91.12%~107.83%,方法相对标准偏差<1.2%。本方法具有专属性好,灵敏度高,适用于富硒酵母原料及相关产品中的硒代蛋氨酸的定量测定。     

桑椹果酒专用酵母的诱变选育研究

将筛选到的一株桑椹果酒专用酵母Y11进行单倍体细胞的制取,分别先后进行紫外辐照和微波处理诱变,利用三级筛选模式,从大量的平板中筛选出一株具有酿造桑椹果酒的优良酵母ME44菌株。筛选结果表明,紫外辐照20-40s内可获得较好的诱变结果（正变率31．1％～41．2％）,微波处理15s可获得理想的诱变结果（正变率22．1％）,增大剂量可增加正变率。ME44菌株在7d的发酵周期内酒精体积分数为11．7％Vol,比出发菌株提高了7％以上,且菌株起酵快,可提高果酒品质。     

耐酸酒精酵母的选育

以酒精酵母S8为出发菌株,通过物理和化学诱变,获得一株耐酸菌株A1,在pH=3的条件下,可以正常发酵生产酒精。