人成纤维细胞株辐射诱导凋亡与辐射敏感性相关性研究

为探讨不同放射敏感性人成纤维细胞株经辐射诱导后的凋亡情况,应用Ｔｕｎｅｌ法及流式细胞术（ＦＣＭ）检测细胞凋亡,以＾６０Ｃｏγ射线处理细胞。结果表明（１）＾６０Ｃｏγ射线照射后,集落形成实验表明,６号细胞株辐射敏感性高于８号细胞株。（２）Ｔｕｎｅｌ法和流式细胞术检测结果表明,凋亡率与辐射敏感性成正比,同样反映出６号细胞株辐射敏感性高于８号细胞株。（３）检测还发现,凋亡率与辐射剂量和辐射后时间成正比。     

α2M对辐射引起细胞自由基变化的影响

采用６０Ｃｏγ射线照射人皮肤成纤维细胞，并在照射前、后给予不同剂量的甲２巨球蛋白（α２Ｍ），用细胞色素Ｃ法、ＴＢＡ法及邻苯二酚自氧化法分别测定细胞超氧阴离子自由基（Ｏ２）释放、脂质过氧化（ＬＰＯ）水平及超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活力。发现细胞受照后Ｏ２释放和ＬＰＯ水平显著增高（ｐ＜０，０１）；Ｏ２释放与照射剂量呈正相关（ｒ＝０．９６６，Ｐ＜０．０１），ＳＯＤ活力显著下降（Ｐ＜０．０１），且与照射剂量呈负相关（γ＝０．９６６，Ｐ＜０．０１）。照射后给予α２Ｍ能显著抑制Ｏ２释放（Ｐ＜０．０１）、降低ＬＰＯ水平。     

混输脾基质细胞与骨髓细胞悬液在小鼠大剂量辐射损伤修…

Ｃ５７ＢＬ／６小鼠经＾６０Ｃｏγ射线一次整体照射８Ｇｙ后，分成三组：（１）单纯照射８Ｇｙ组，（２）照射后单纯骨髓移植组，（３）照射后混输脾基质细胞（ＳＳＣ）与骨髓细胞（ＢＭＣ）组，以观察骨髓移植和回输脾基质细胞对大剂量照射后受体存活率及造血干细胞（ＣＦＵ－Ｓ）的影响，并初步探讨其可能的机理。结果表明：单纯骨髓移植组受体存活率比单纯照射组高出２７％；而照射后混输ＳＳＣ组之存活率比单照射组高４７％，比     

外源RNA促进小鼠肠腺辐射损伤恢复的研究

ＢＡＬＢ／ ｃ小鼠１０４０ｃＧｙ＾６０Ｃｏγ射线腹部照射后，采用不同一源的ＲＮＡ、不同的注入剂量、途径、时间和次数等因素，研究外源ＲＮＡ对空肠肠腺存活率的影响。结果表明（１）不同来源的ＲＮＡ均可明显提高受照小鼠的腺存活率。（２）酵母ＲＮＡ的洲入剂量与肠腺存尖率之间呈一钟形曲线，局部肠腔注入的最适剂量为４０－６０μｇ／小鼠，腹腔和肌肉注入时为８０μｇ／小鼠。     

辐射诱发细胞HPRT基因位点突变频率的研究

本文采用多核细胞检测法（ＣＢ法）,研究了＾６０Ｃｏγ射线照射离体人血所诱发的体细胞ＨＰＲＴ基因位点的突变频率。实验结果表明,０－５．０Ｇｙγ射线可诱发ＨＰＲＴ基因位点突变,ＨＰＲＴ基因位点突变的频率随照射剂量增加而升高,突变频率Ｙ（１０＾－３）与照射剂量Ｄ（Ｇｙ）间可拟合为Ｙ＝０．９０３＋０．８６９Ｄ。     

电离辐射对小鼠小肠和结肠细胞凋亡的影响

观察不同剂量ｒ射线照射对小鼠小肠和结肠细胞凋亡水平的影响。６０Ｃｏｒ射线全 身照射 ＢＡＬＢ／ｃ 小鼠;剂量分别为 １、 ６、 １２Ｇｙ,于照射后 ２４ｈ内分批取材,常规石蜡包埋, ＨＥ染色, Ｏｌｙｍｐｕｓ显微镜下观察辐射诱导小肠和结肠细胞凋亡的情况。结果表明：正常小鼠小 肠细胞有自发的凋亡现象,平均每个隐窝的凋亡细胞数为０．０３８±０．０５９个,结肠在正常情况下没 有细胞凋亡发生;不同剂量ｒ射线照射后小肠隐窝细胞凋亡数目明显增加（ｐ ＜０．０５）,其中 １Ｇｙ 照射组凋亡峰在照射后 １２ｈ明显, ６Ｇｙ和 １２Ｇｙ组分别在照射后 ２４ｈ和 ６ｈ凋亡细胞最多。结 肠未见或偶见凋亡细胞;各照射剂量组及照射后不同时间（照射后 ６、 １２、 ２４ｈ）组小肠隐窝细 胞凋亡数较相应结肠组显著增加（ｐ＜０．０５）。说明在电离辐射的情况下,小肠较结肠能更有效的 清除辐射损伤的细胞,而后者在体内的蓄积可能与以后的肿瘤发生有关。     

小鼠脾淋巴细胞辐射死亡与凋记之间的关系

探讨细胞凋亡在小鼠脾脏辐射损伤与重建中的作用及其机制,为急性放射病的防治提供依据。用原位末端标记、ＤＮＡ电泳和免疫组化技术观察经２￣８Ｇｙ不同剂量γ射线整体照射后,小鼠脾脏淋巴细胞凋亡的动态变化过程和Ｂａｘ、Ｂｃｌ－２蛋白在其中的作用。结果表明,（１）照射后早期淋巴细胞凋亡率迅速增加,如６Ｇｙ照射后４ｈ和１ｄ凋亡率分别为对照值的４．９和９．７倍;凋亡率还随照射剂量的增加而迅速升高;照射后８ｈ当照射     

p53和Bcl—2／Bax在辐射诱导胸腺细胞凋亡中的作用

采用流式细胞术对昆明小鼠接受７５ｍＧｙ和２ＧｙＸ射线全身照射后，胸腺细胞内细胞凋亡相关基因ｐ５３，Ｂｃｌ－２和Ｂａｘ蛋白的表达进行了比较研究。结果表明，７５ｍＧｙＸ射线全身照射后２４ｈ，ｐ５３基因蛋白产物的表达显著降低，而２ＧｙＸ射线全身照射后２４ｈ，ｐ５３基因蛋白表达则显著增高。     

混输脾基质细胞与骨髓细胞悬液在小鼠大剂量辐射损伤修复中的作用

Ｃ５７ＢＬ／６／小鼠经６０Ｃｏγ射线一次整体照射８Ｇｙ后，分成三组：（１）单纯照射８Ｇｙ组。（２）照射后单纯骨髓移植组，（３）照射后混输脾基质细胞（ＳＳＣ）与骨髓细胞（ＢＭＣ）组，以观察骨髓移植和回输脾基质细胞对大剂量照射后受体存活率及造血干细胞（ＣＦＵ－Ｓ）的影响，并初步探讨其可能的机理。结果表明：单纯骨髓移植组受体存活率比单纯照射组高出２７％；而照射后混输ＳＳＣ组之存活率比单照射组高４７％，比单纯骨髓移植组高２２％（Ｐ＜０．０５）。混输ＳＳＣ可明显提高脾ＣＦＵ－Ｓ、ＣＦＵ－Ｆ及ＡＮＡＥ染色（＋）（－）细胞数。在体外混合培养中脾基质细胞对实质细胞增殖起支持与调节作用。     

低剂量γ射线对小鼠血清特异性溶血素产生的刺激作用

选择昆明种雄性小白鼠以＾６０Ｃｏγ射线单次整体照射２．５－１０ｃＧｙ后９ｈ，用绵羊红细胞（ＳＲＢＣ）免疫，免疫后４ｄ小鼠血清特异性溶血素水平显著高于对照，其中１０ｃＧｙ为最适宜刺激剂量。小鼠照射１０ｃＧｙ后９ｈ免疫，在免疫后不同时间测定血清特异性溶血素水平，其结果表明照射组溶血素水平峰值显著高于对照组峰值，而且峰值出现的时间提前，小鼠照射１０ｃＧｙ后不同时间用ＳＲＢＣ免疫。结果受照射后１ｄ、３ｄ、     

CD28和Fas在辐射所致T细胞凋亡中作用的研究

采用双标记直接免疫荧光－流式细胞仪分析技术,测定了不同剂量γ射线照射后T细胞CD28分子和Fas受体（CD95）表达的变化。用乙醇抽提法－流式细胞仪分析技术和JAM检测技术,研究了不同剂量γ射线照射、CD28单抗和IL－18处理后T细胞凋亡的情况。结果显示,正常人淋巴细胞用不同剂量γ射线照射后,CD3^ T细胞中CD28的表达随着剂量的增加而下降,T细胞凋亡的增加并与Fas表达上升有关。照射前用CD28单抗和IL－18处理细胞后,Fas表达下调,细胞DNA断裂明显减小。表明γ射线可影响T细胞CD28受体分子的表达及其信号转导,加速T细胞凋亡的进程,而CD28单抗和IL－18对辐射所致T细胞凋亡有一定的拮抗作用。     

小剂量两次电离辐射诱导细胞遗传学适应性反应的累加效应

人外周血淋巴细胞在离体培养后６ｈ时，预先受到小剂量１、２、５、１０或２０ｃＧｙ＾６０Ｃｏγ射线单次照射，能降低随后１００ｃＧｙ照射所引起的染色单体畸变，而０．５或３０ｃＧｙ则不明显。１．０ｃＧｙ诱导的适应性反应最明显，是诱导适应性反应的最适剂量（饱和剂量）。淋巴细胞分别在培养后６ｈ和１２ｈ、６ｈ和４２ｈ或３６ｈ和４２ｈ时，预先受到０．５ｃＧｙ＾６０Ｃｏγ射线两次照射，均能显著降低在培养后４８ｈ受到     

^60Coγ射线所致HeLaMR细胞hprt基因突变谱研究

将正常ＨｅＬａＭＲ细胞用＾６０Ｃｏγ射线分别进行０－８．０Ｇｙ照射后，在含６－巯基鸟嘌呤（６－ＴＧ）的培养基中克隆和筛选ｈｐｒｔ基因突变细胞。细胞的突变民γ射线的照射剂量有关，共获得３个自然突变的细胞克隆和１８个γ射线诱导的突变细胞克隆，用８对ｈｐｒｔ寡核苷酸引物进行多聚酶链式反应（ＰＣＲ），从培养细胞提取ＤＮＡ中分别扩增ｈｐｒｔ基因的９个外显子片段，分析突变细胞的ｈｐｒｔ基因外显子突变情况。结果     

以PCC技术分析染色体辐射损伤的修复

采用ＰＣＣ技术，观察ＣＨＬ（Ｃｈｉｎｅｓｅｈａｍｓｔｅｒｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｃｅｌｌｉｎｅ）细胞受＾６０Ｃｏγ射线照射后，染色体的损伤及修复动力学，结果表明，染色体损伤的修复分为两个时期，快修复在照射后的３０ｍｉｎ左右开始，半修复时间约为６ｈ，与ＦＡＤＵ（ＦｌｕｏｒｏｍｅｔｒｉｃａｎａｌｙｓｉｓｏｆＤＮＡｎｕｗｉｎｄｉｎｇ）技术观察ＤＮＡ损伤修复动力学比较，ＤＮＡ损伤修复在照射后５ｍｉｎ内即已开始     

荧光原位杂交检测早先受照者的染色体畸变

应用２号染色体特异性探针进行荧光原位杂交,研究＾６０Ｃｏγ射线照射诱发人外周血淋巴细胞浸色体的易位畸变,结果表明,离体照射诱发的畸变率与剂量呈现良好的相关,＾６０Ｃｏ辐射事故受照者在照后第６,７年的易位畸变率保持相对稳定,约占照后立即检测双＋环畸变率的４０％～５０％,并且易位畸变率与最初照射剂量相关良好。     

60Co γ射线照射对K562细胞凋亡的影响及其作用机制的研究

采用不同剂量的^60CoY射线照射人红细胞系白血病细胞（K562细胞）,于照射后不同时间用流式细胞仪检测细胞凋亡率、蛋白免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bel-2和Bax、流式细胞仪检测细胞周期的变化,以探讨^60CoY射线照射对K562细胞凋亡的影响及其作用机制。结果表明,与正常对照组相比,3和7Gy剂量组在照后48和72h,10、15和20Gy剂量组在照后72h细胞凋亡率显著升高。2Cy照射后24h,照射组的Q／M期阻滞明显（P〈0．05）,S期细胞比例明显减少（P〈0．05）,照射组Bel-2／Bax比例明显比正常对照组降低。以上结果说明,随着照射剂量的增加和时间的延长,细胞凋亡率有随之上升的趋势;y射线对细胞周期的影响主要是显著的G2／M期阻滞和S期细胞减少;y射线可能是通过线粒体途径诱导K562细胞凋亡。     

电离辐射作用后粒－巨噬细胞修复的特性

运用粒－巨噬细胞集落（ＣＦＵ－ＧＭ）体外培养技术，观察了受次致死剂量６０Ｃｏγ射线照射的小鼠骨髓ＣＦＵ－ＧＭ的修复能力。实验测得正常小鼠每根股骨中ＣＦＵ－ＧＭ的总数和骨髓有核细胞总数分别为４．８９×１０４和２．４×１０７，经６Ｇｙ剂量照射后第３ｄ，两计数值分别下降到正常值的０．８％和４％，照射后第５ｄ出现回升。骨髓有核细胞计数和外周血白细胞数与ＣＦＵ－ＧＭ的变化规律相一致。     

大射野,大深度^60Coγ射线照射条件下组织—空气比的公式计算

本文利用＾６０Ｃｏγ放射源和７２ｃｍ×７２ｃｍ×９０ｃｍ（长×宽×高）体模，在大射野（１０．０ｃｍ×１０．０ｃｍ～５０．ｃｍ×５０．０ｃｍ）和大深度ｄ（１０．０～７０．０ｃｍ）照射条件下实测的组织－空气比数据，按Ｍｅｌｓｋｉ计算＾６０Ｃｏγ射线组织－空气比深度函数公式，Ａｅ＾Ｂｄ＋Ｃｅ＾Ｄｄ，利用高斯－牛顿逐次逼近的计算方法，拟合出该公式参数Ａ，Ｂ，Ｃ和Ｄ的最佳估计值，５组数据的残差平方和小于１．     

鼻咽癌放射治疗时野外组织器官剂量的研究

本文借助非均匀组织等效似人体模型,模拟鼻咽癌放射治疗,研究了＾６０Ｃｏγ射线和电子直线加速器产生的６ＭＶＸ射线对野外组织器官的受照剂量。结果表明,离照射野越近组织器官受照剂量越高,加眼晶体、垂体、甲状腺等,但睾丸的受照剂量明显高于腹部;＾６０Ｃｏγ射线照射时野外组织器官的剂量明显高于６ＭＶＸ射线;＾６０Ｃｏγ射线照射时,在耳前野野外挡铅可使眼晶体、视网膜受照剂量下降２０％,睾丸表面挡铅可使睾丸受照     

用于细胞放射生物学研究的α照射模型

本文主要介绍我们建立的用于细胞放射生物学研究的α照射装置，包括：细胞培养室、照射室和控制装置等３部分。细胞照射用的放射源为６个活度在（３．３３－２００）ＭＢｑ范围内的２３８Ｐｕ电镀源，通过旋转放射源装置和非同轴转动准直器提供了一个均匀性优于５％的辐射场。培养室内可通５％ＣＯ２的空气混合气体及保持室内温度为３７．３±０．４℃。用金硅面垒探测器测得α粒子到达细胞表面的能量为３．９４ＭｅＶ，细胞核所受最大和最小剂量率分别为２０和０．３３ｃＧｙ／ｍｉｎ。用此装置研究了小鼠Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２细胞的存活曲线和以６０Ｃｏγ射线为参比的相对生物效能（ＲＢＥ）。得到细胞的平均致死剂量为０．５７Ｇｙ，在存活份额为８０％、３７％、５％时，相应的相对生物效能分别为１１．３、６．６和４．２。