纤维素酶活力测试探讨

采用3,5-二硝基水杨酸为显色剂,分别以滤纸和CMC为底物,测定纤维素酶的FPA和CMC酶活,比较了两种底物测定酶活的方法,结果表明酶液稀释倍数与酶活力之间存在一较窄的线性范围,在此范围内酶活力测试相对较稳定;另外,从酶的应用效果看内切酶活力对之影响较大.     

纤维素酶活力测试探讨

采用3,5-二硝基水杨酸为显色剂,分别以滤纸和CMC为底物,测定纤维素酶的FPA和CMC酶活,比较了两种底物测定酶活的方法,结果表明酶液稀释倍数与酶活力之间存在一较窄的线性范围,在此范围内酶活力测试相对较稳定;另外,从酶的应用效果看内切酶活力对之影响较大。     

纤维素酶的CMC酶活测定条件的研究

研究和分析了羧甲基纤维素酶(CMC酶)活性测定法的实验条件.通过单因素实验对酶促反应时间、酶促反应温度、pH、测定波长、底物浓度、粗酶液和底物添加量六个影响因素进行了研究.最后结合正交实验、方差分析和多重比较.确定了纤维素酶活力测定的最佳条件组合.结果表明,在pH6.2、粗酶液和底物添加量各为2mL的情况下,影响纤维素酶活力测定的主次因素依次为酶促反应时间、酶促反应温度、测定波长和底物浓度.纤维素酶活力测定的最佳条件为:在酶促反应温度为40℃,pH6.2,底物浓度为10g/L,粗酶液和底物添加量各为2mL,酶促反应时间30min,测定波长为520nm.     

纤维素酶的滤纸酶活和CMC酶活的测定

采用3，5-二硝基水杨酸（DNS）为显色剂、滤纸或CMC为底物，测定纤维素酶的滤纸酶活（FPA）和CMC酶活（CMCA）。分析确定了酶活测定用波长为530nm，参比溶液应为失活酶、底物和DNS等共热的反应物，比较了两种底物的酶活测定方法，结果表明：纤维素酶的CMC酶活比滤纸酶活高，酶对水溶性底物有较高的活力，吸附对酶的活性部位与纤维素分子链段的结合及催化均有很大影响。     

饲用酶制剂中羧甲基纤维素酶等5种酶活力的测定方法研究

利用3,5-二硝基水杨酸(DNS)比色法,对饲用酶制剂中羧甲基纤维素酶(Cx酶)、木聚糖酶、β-葡聚糖酶、β-葡萄糖苷酶和果胶酶5种酶活力的测定进行了研究。对DNS比色法测定5种酶活力的影响因素:底物水解的pH值、温度及时间等进行了选择试验,优化了分析条件。5种酶活力重复测定的相对标准偏差分别为6.22%~6.50%、7.90%~10.6%、8.70%~13.9%、3.00%~3.76%和7.11%。     

纤维素酶活力测定方法

用DNS为显色剂，分别以滤纸和CMC为底物，以滤纸糖酶活性（FPA）和羧甲基纤维素酶活性（CMCase)表征纤维素酶活力，确定酶活测定用波长为530nm，参比溶液应为失活酶，底物和DNS等共热的反应物；比较了两种底物的酶活力测定方法，结果表明，CMCase比FPA高，说明酶对水溶性底物有较高的活力，也表现吸附对酶的活性部位与纤维素分子链段的结合及催化均有很大影响，对于不同牌号的纤维素酶，织物的酶减量率与CMC酶活力关系密切。     

一株绿色木霉产纤维素酶的性质研究

摇瓶培养绿色木霉得到纤维素酶粗酶液,分别测定C1酶、Cx酶、β-葡萄糖苷酶的活力并测定温度、pH、底物浓度、金属离子对不同酶组分活力的影响。结果表明不同反应条件对不同酶组分的活力影响各异。     

酸性纤维素酶酶活力的测定

用DNS法测定酸性纤维素酶活力。分析了酶促反应时间、pH、酶液稀释度、温度对酶活力测定结果的影响。研究表明，该纤维素酶酶促反应的最适条件为：酶促反应时间为30min，最适、pH为5．0，酶液稀释至130倍，最适温度50℃。最适条件下的酶活力为1685IU／g。     

影响纤维素酶活力测定的几个因素

鉴于当前尚无纤维素酶的酶活力测定的标准方法 ,也没有用以评价纤维素酶活力的统一的测量单位 ,我们研究了各种因素 ,其中包括底物的特性和浓度、纤维素酶的浓度、反应时间和反应温度以及DNS的数量等等对测定纤维素酶酶活的影响。研究表明 ,改变这些因素 ,会得到不同的纤维素酶酶活的测值。因此 ,应根据纤维素酶的特性使上述因素成为最佳条件。这样 ,我们就可能建立起统一的测定纤维素酶活力的方法。     

纤维素酶活力测定研究进展

纤维素酶是一种多酶复合体系,其作用的底物比较复杂,活力测定方法也存在差异.如何准确测定纤维素酶活力的大小,对于研究该酶的特性及应用具有重要的意义.本文对纤维素酶测定的常用方法进行了综述和评价.     

动力学法优化碱性果胶酶比活的测定方法

本文通过优化蛋白浓度测定方法和酶活力测定方法,并以酶解动力学曲线考察方法优化的合理性,以验证终点法测定碱性果胶酶比活的准确性。结果表明,果胶酶蛋白的最佳测定波长为550 nm,其线性和截距明显优于传统方法,可以忽略果胶酶稀释倍数对蛋白测定的影响。钙离子对该酶具有激活作用;聚半乳糖醛酸比果胶更适合作为酶活力测定底物,其最适pH为9.5,最佳浓度为2 mg/mL,果胶酶活力测定的最佳波长为232 nm,所测酶活力在吸光度值0~2范围内均保持零级反应状态,酶蛋白浓度与酶解速率线性相关且回归曲线截距更接近原点,因此,该测定条件不仅可用于终点法,酶解时间也可灵活掌握,而非拘泥于一个固定的时间段。以酶解30 min为例,其检测限(LOD)为0.15 mU/mL。由于DNS法的灵敏度较低,其半乳糖醛酸标准曲线不过原点,从而导致因酶液稀释倍数不同而产生测量误差,因此,紫外法测定碱性果胶酶活力为最佳选择。     

四种纤维素酶酶活测定方法的比较

研究和分析滤纸酶活（FPA）测定方法、羧甲基纤维素钠盐（CMC-Na）酶活性测定方法、染色纤维素测定方法以及CMC粘度降低测定方法,比较了这4种方法测定的线性相关性以及稳定性,经过实验研究表明,FPA测定方法和CMC-Na酶活性测定方法较稳定,线性相关性较高,可以作为研究测定的方法.     

复配纤维素酶制剂的应用

分别以CMC法、滤纸法测定几种助剂对纤维素酶活力的影响 ,验证得到有效的纤维素酶促进剂 ,从而复配最佳性能的纺织用纤维素酶制剂 ,并对其在纺织上的应用进行初步研究     

苎麻纤维的酶水解工艺研究

废弃织物往往只是通过堆积、填埋、焚毁、降级循环等简单的方法进行处理,作为废弃织物中纤维素利用的初步尝试,选用不同种类的纤维素酶对苎麻纤维进行水解,通过反应温度、pH值、酶用量、浴比、反应时间等对苎麻纤维水解的单因素实验优化水解工艺。结果表明,在相同的反应条件下,酶活力为2 200 IU/mL的固体纤维素酶水解率高于酶活力为2 000 IU/mL的液体纤维素酶。固体纤维素酶优化后的水解工艺条件为:温度40℃、pH值5、酶用量20%(owf)、浴比1∶50、时间3 h,此时水解率可达到21.95%。     

纤维素酶活力检测与织物处理若干问题探讨

ＣＭＣ粘度法是纤维素酶活力检测的方法之一，作者用它测定了一批市售纤维素酶的活力，又分别用ＳＢＤＩ－Ａ和Ｃｅｌｌｕｓｏｔｆｌ酶进行多项工艺测试，在此基础上提出。在织物处理过程中，酶对纤维素纤维有较多的吸着，随着处理时间的延长，酶的作用力逐渐减弱直至完全衰竭，并认为ＣＭＣ粘度法是一个简易可靠值得推荐的活力定量检测经可以用来评价酶的力份，测定酶的储存稳定性，用以筛选酶的增效剂和抑制剂，可以用来测定酶处理     

裂褶菌产纤维素酶条件的研究

对一株裂褶菌(Schizorhyllum commune ATCC38548)进行液态发酵生产纤维素酶。通过单因素试验考察发酵时间、碳源、碳源质量浓度和接种量等因素对菌株产酶的影响,用二硝基水杨酸法(DNS法)对羧甲基纤维素酶(CMC)、滤纸酶(FPA)和微晶纤维素酶(AVI)进行酶活测定。结果表明:3种酶的分泌高峰不一致,但在第6天时纤维素酶总酶活达到最高。滤纸是诱导裂褶菌产纤维素酶的良好碳源,且质量浓度为20g/L时产酶效果最佳;接种量为5mL时,总酶活相对最高。不同的培养条件对裂褶菌产CMC、FPA和AVI的影响各异。     

化学助剂对纺织用纤维素酶活力的影响

选用C-1214、苯甲酸钠、山梨醇等化学助剂，分别加入纺织用纤维素酶处理液中，以CMC法测定各试剂不同加入量下的纤维素酶的酶活力，作出酶活力变化曲线，分析这些助剂对酶活力的影响，得出其最佳的工艺用量。     

一株产纤维素酶真菌的筛选及其对秸秆的降解效果研究

为了筛选新的降解玉米秸秆的高产纤维素酶真菌,本研究从全国不同区域采集了大量的半腐秸秆、半腐木材和富含腐殖质的土壤。通过常规分离方法共分离得到120株真菌分离物。利用纤维素刚果红培养基培养、测定滤纸酶活和羧甲基纤维素(CMC)酶活、玉米秸秆粉降解实验对分离到的120株真菌进行了三重筛选,获得了一株高产纤维素酶的真菌MC-1,并对比了MC-1、产纤维素酶木霉菌对照菌株及二者混合发酵液HJ-1对玉米秸秆室内降解效果。结果表明,MC-1在纤维素刚果红培养基上培养72h后水解圈直径达到8.52 cm;培养48h MC-1的CMC酶活为96.31 U/g,滤纸酶活为8.68 U/g,室内秸秆腐解试验表明,秸秆失重率和纤维素分解率均在15 d内迅速升高,之后升高速度放缓。MC-1在处理45 d后秸秆失重率达到了46.84%,HJ-1处理的秸秆失重率和纤维素分解率高于单一菌剂处理。