毛霉蛋白酶特性研究及在大豆肽生产中的应用

通过对毛霉蛋白酶活力的测定研究了毛霉蛋白酶的特性。研究表明,毛霉在培养的第5d～6d为旺盛期,毛霉蛋白酶的最适反应pH值为4.0～6.0,且在pH4.0～6.0时稳定性较好;毛霉蛋白酶的最适反应温度为45℃～55℃,50℃时酶活力最大,且在40℃以下热稳定性较好。1.0%NaCl、1.0%CaCl2、1.0%MnSO4和1.0%MgSO4对蛋白酶有激活作用,1.0%KCl、1.0%ZnSO4和1.0%CuSO4则对蛋白酶有不同程度的抑制作用。用毛霉所产的蛋白酶对大豆分离蛋白进行水解所得的大豆肽具有较好的质量品质。     

毛霉蛋白酶特性研究及在大豆肽生产中的应用

通过对毛霉蛋白酶活力的测定研究了毛霉蛋白酶的特性.研究表明,毛霉在培养的第5d～6d为旺盛期,毛霉蛋白酶的最适反应DH值为4.0～6.0,且在pH4.0～6.0时稳定性较好;毛霉蛋白酶的最适反应温度为45%～55℃,50%时酶活力最大,且在40%以下热稳定性较好.1.0%NaC1、1.0%CaCl<,2>、1.0%MnSO<,4>～和1.0%MgSO<,4>对蛋白酶有激活作用,1.0%KC1、1.0%ZnSO<,4>和1.0%CuSO<,4>则对蛋白酶有不同程度的抑制作用.用毛霉所产的蛋白酶对大豆分离蛋白进行水解所得的大豆肽具有较好的质量品质.     

Actinomucor elegans、Aspegillus oryzae和Rhizopus oligosporus产蛋白酶条件及蛋白酶性质的比较

比较了腐乳生产菌株Actinomucor elegans、豆酱和酱油生产菌株Aspegillus oryzae以及天培生产菌株Rhizopus oligosporus产生蛋白酶的条件和所产蛋白酶的性质。结果表明,不同的菌株产酶条件及蛋白酶的性质有较大的差异:少孢根霉主要产生酸性蛋白酶,在pH2.5-4.0的酸性介质中、32℃条件下培养时产酶能力较强,所分泌的蛋白酶系在pH5.0时酶活力最高,在pH5.0附近最稳定;米曲霉可以产生酸性、中性及碱性蛋白酶,所产生的蛋白酶活力显著高于少孢根霉和毛霉,米曲霉在酸性条件下产酸性蛋白酶能力强,在中性条件下产中性蛋白酶能力强,在碱性条件下产碱性蛋白酶能力强,在28-32℃时产酶能力强,所分泌的蛋白酶系在pH5.0-9.0的广泛范围内有很强的活力,在pH6.0-8.0的范围内稳定性强;毛霉可以产生酸性、中性及碱性蛋白酶,但酶活力明显低于米曲霉,毛霉在中性偏酸性(pH5.5)的介质中产酸性蛋白酶的能力较强,但介质的酸碱度对毛霉产中性及碱性蛋白酶没有影响,在28℃时产酸性、中性和碱性蛋白酶的能力都比较强,毛霉所分泌的蛋白酶系在pH5.0-9.0的广泛pH范围内有活力,在pH5.0-6.0时酶活力最高,在pH5.0-7.0时稳定强。     

毛霉3039产蛋白酶特性研究

通过对毛霉蛋白酶活力的测定初步研究了毛霉蛋白酶的特性.研究表明,毛霉分泌蛋白酶的旺盛期在培养的第5至6天.毛霉蛋白酶的最适反应pH在4.0～6.0之间,且在pH4.0～6.0之间稳定性较好;毛霉蛋白酶的最适反应温度为45℃～55℃,50℃时酶活力最大,且在40℃以下热稳定性较好.1.0%NaCl、1.0%CaCl2、1.0%MnSO4和1.0%Mg2SO4对蛋白酶有激活作用,1.0%KCl、1.0%ZnSO4扣1.0%CuSO4则对蛋白有不同程度的抑制作用.     

酸性条件下毛霉和根霉蛋白酶的催化特性

研究比较了Actinomucor elegans蛋白酶和Rhizopus oligosporus蛋白酶在pH 3.0～6.0的条件下催化大豆分离蛋白(SPI)降解的特性,结果表明:在pH3.0和pH3.5的条件下,SDS-PAGE显示毛霉和根霉蛋白酶都能迅速地催化大豆7S和11S蛋白的降解,但此时水溶性蛋白的得率不高,均在35%以下;在pH5.0、5.5和6.0时,毛霉和根霉蛋白酶催化大豆分离蛋白降解的能力增强,水解度升高,水溶性蛋白的得率增加,但毛霉蛋白酶的水解产物水溶性蛋白得率始终高出约10%,SDS-PAGE显示毛霉蛋白酶催化下的大豆分离蛋白各个亚基降解消失的速度下降,同时伴随有新的条带产生,特别是碱性亚基几乎不能在4h内降解,根霉蛋白酶催化下的大豆分离蛋白各个亚基降解消失的速度在pH5.0和5.5时还比较强,但在pH6.0时明显下降,酸性亚基和碱性亚基均不能在4h内消失,表明在酸性条件下2个霉菌的蛋白酶其催化特性有明显的差异。     

草鱼消化道粗蛋白酶的部分性质

用丙酮脱脂然后用磷酸盐缓冲溶液从草鱼肠道中提取一种主要含有酸性蛋白酶和碱性蛋白酶的粗蛋白酶。该粗酶水解血红蛋白的最适pH=3～4，水解酪蛋白的最适pH值有2个，分别为pH4．4和PH10．3。水解牛血红蛋白的最适作用温度为37℃，水解酪蛋白的最适作用温度为45℃。酸性蛋白酶在50℃保温30min后只有大约20％的最初活性被保留，而要使碱性蛋白酶丧失80％的最初活力需要在60℃保温30min。     

毛霉AS3.2778脯氨酸氨肽酶的部分纯化及性质研究

毛霉蛋白酶对大豆蛋白有较高的水解效率并对蛋白水解物有良好的脱苦效果,因此在大豆多肽的制备方面显示出很好的应用前景。为了开发这一蛋白酶系,实验中P采用硫酸铵盐析、离子交换层析、疏水层析及凝胶层析等方法对其进行了分离纯化,从雅致放射毛霉AS3.2778的发酵麸曲中部分纯化得到一氨肽酶组分,并对其性质进行了探讨。纯化的毛霉氨肽酶是一典型的脯氨酸氨肽酶,它对小肽N端的脯氨酸有非常强的水解能力;该氨肽酶在40～45℃、pH6.5有最大催化活性,在30℃以内,pH5.0～8.0有很好的稳定性;在所试验的几种蛋白酶抑制剂中,仅1 mmol/L的苯甲基磺酰氟(PMSF)对毛霉氨肽酶有抑制作用,由此说明纯化的毛霉氨肽酶可能是一种丝氨酸蛋白酶;常见金属离子对该氨肽酶活性的影响不明显;脱苦实验结果表明,纯化的毛霉氨肽酶对于大豆蛋白水解物的苦味有明显的去除效果。     

腐乳毛霉SH12生长性能及产酶特性研究

研究了腐乳毛霉SH12的生长性能及产酶特性。结果表明:在温度26℃、pH为7.5时,生长速率最大。Ca~(2+),Mg~(2+)浓度低于0.2%时,对毛霉的生长几乎没有影响。在36h时,毛霉菌丝体干重达到较大值。产酸性蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、糖化酶、脂肪酶活力分别为67.3,339.4,372.3,293.1U/g,0.67U/mL,以蛋白酶为主。在豆腐培养基上中性蛋白酶和碱性蛋白酶活力在48h达到最大,而酸性蛋白酶活力在60h达到最大。研究结果可为毛霉SH12用于腐乳生产提供理论依据。     

毛霉蛋白酶的特性研究

从毛豆腐中分离出1株毛霉,研究了毛霉分泌产生的蛋白酶的基本性质.结果表明:蛋白酶在pH为4、55℃时,相对酶活力最高;在4℃、pH为5～6时,蛋白酶有着较好的稳定性.一些常见的金属离子对毛霉蛋白酶活性有一定的影响,在5.0mmoL/L的浓度下,Mn2 、Ca2 、Mg2 对蛋白酶有较强的活化作用,而Zn2 、Fe2 、Fe3 对蛋白酶有一定的抑制作用,低浓度的NaCl有激活作用,但在高浓度下产生抑制作用.     

中性蛋白酶有限水解小麦蛋白动力学模型的研究

采用中性蛋白酶在pH6.5和温度40℃条件下对小麦面筋蛋白的水解动力学机制进行了研究。结果表明:酶催化水解速率随水解进程呈指数递减。根据水解度及酶活力的变化规律,在大量实验研究的基础上,建立起描述中性蛋白酶催化水解小麦蛋白的动力学方程,为合理确定酶解反应实验的各种参数提供了理论依据。