超高效液相色谱-飞行时间质谱法定性定量检测乌头类植物中14种乌头生物碱及其 代谢产物的含量

目的 建立超高效液相色谱-飞行时间质谱(ultra performance liquid chromatography- quadrupole-time of flight mass spectrometer, UPLC/Q-TOF)同时定性定量检测乌头类植物中14种乌头生物碱及其代谢产物的含量的分析方法。方法 采用SPE固相萃取小柱提取净化, 用超高效液相色谱串联四级杆飞行时间质谱, Dual AJS ESI源, 正离子模式下采集的数据进行定性定量分析。色谱柱为Aglient SB-C18(2.1 mm×50 mm, 2.7 ?m), 流动相为乙腈-0.1%甲酸水(含5 mmol/L乙酸铵), 梯度洗脱, 流速0.3 mL/min。结果 14种乌头生物碱及其代谢产物在10~100 ng/mL范围内具有良好的线性关系, 相关系数均大于0.99, 检出限为0.1~5.0 ng/mL, 定量限为0.5~10 ng/mL, 加标回收率为81.2%~113.7%(相对标准偏差(relative standard deviation, RSD)<10%, n=6)。 结论 该方法能快速、准确地对乌头类植物中的乌头生物碱成分进行定性定量检测, 对该植物毒性和药效的深入研究提供了一种新的方法。     

超高压液相色谱-串联质谱法快速测定人尿液和全血中3种乌头生物碱

目的建立快速检测人尿液和全血中乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的超高压液相色谱-串联质谱分析方法。方法尿液样品直接进样,全血样品经乙腈-甲醇(9:1,v/v)沉淀蛋白,以甲醇和5.0 mmol/L碳酸氢铵水溶液作为流动相进行梯度洗脱,在BEH C18色谱柱上实现分离,电喷雾正离子多反应监测方式检测,以那可丁作为内标的基质标准内标法定量。结果尿液和全血中3种乌头生物碱的平均加标回收率分别为93.9%～108%和89.7%～109%,相对标准偏差为1.3%～11%和1.1%～18%(n=6),定量限(S/N=10)分别为0.05μg/L和0.1μg/L。结论此方法灵敏、准确,已成功应用于一起中毒事件的检测。     

超高压液相色谱-串联质谱法快速测定人尿液和全血中3 种乌头生物碱

目的 建立快速检测人尿液和全血中乌头碱、新乌头碱和次乌头碱的超高压液相色谱-串联质谱分析 方法。 方法 尿液样品直接进样, 全血样品经乙腈-甲醇(9:1, v/v)沉淀蛋白, 以甲醇和 5.0 mmol/L 碳酸氢铵水溶 液作为流动相进行梯度洗脱, 在 BEH C18 色谱柱上实现分离, 电喷雾正离子多反应监测方式检测, 以那可丁作 为内标的基质标准内标法定量。 结果 尿液和全血中 3 种乌头生物碱的平均加标回收率分别为 93.9%~108%和 89.7%~109%, 相对标准偏差为 1.3%~11%和 1.1%~18% (n=6), 定量限(S/N =10)分别为 0.05 μg/L 和 0.1 μg/L。 结论 此方法灵敏、准确, 已成功应用于一起中毒事件的检测。     

HPLC测定黄连提取物中生物碱含量

目的 建立黄连提取物高效液相色谱法（HPLC）含量测定方法.方法 采用HPLC同时测定黄连提取物中表小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱等生物碱的含量.色谱柱为Kromasil 100-5 C18,流动相为乙腈-磷酸盐缓冲液（53：47,v/v）,流速为1 mL/min,检测波长为345 nm,进样量为10 μL.结果 盐酸小檗碱在0.1032～2.5800 μg范围内进样量与其峰面积线性关系良好（r=0.9999,n=7）,平均回收率为100.19％（RSD=1.77％）.测定6批黄连提取物,其中表小檗碱、黄连碱、巴马汀、小檗碱含量分别不少于5.5％,11.5％,9.0％,44.0％,总生物碱含量不少于70.0％.结论 本文建立含量测定方法简便可行,准确、重现性好,可用于黄连提取物的质量控制.     

乌头总生物碱贴片皮肤安全性的研究

目的观察乌头总生物碱贴片对动物皮肤的毒性作用。方法用健康新西兰兔进行皮肤单次及多次给药刺激性实验;用健康豚鼠进行皮肤过敏性实验。结果乌头总生物碱贴片中剂量组单次给药时未见对新西兰兔完整皮肤有刺激性反应,对破损皮肤有轻度刺激性;多次给药对兔完整皮肤无刺激反应,对破损皮肤有中度刺激反应。但停药后刺激反应消失,皮肤恢复正常。乌头总生物碱贴片中剂量组对豚鼠完整皮肤无致敏作用。结论乌头总生物碱贴片皮肤局部用药有较好的安全性,为临床应用提供了安全性保证。乌头总生物碱贴片的处方合理,制备工艺可靠。     

湘莲莲房中主要生物碱成分提取方法优化与含量测定

目的以莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱为湘莲莲房质量评价指标,优化提取工艺参数,建立高效液相色谱法同时测定3种物质。方法用酸性80%乙醇作溶剂超声提取莲房生物碱类成分,碱化后分离定量。经Waters XSelect C₁₈色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)进行分离,以甲醇-0.05 mol/L磷酸二氢钠为流动相进行梯度洗脱。结果莲心碱、异莲心碱、甲基莲心碱分别在1.994~79.76μg/mL(r²=0.9993,n=6)、1.951~78.05μg/mL(r²=0.9996,n=6)、1.972~78.87μg/mL(r²=0.9998,n=6)范围内线性关系良好,回收率分别为99.5%、98.2%、98.7%(n=9)。结论该方法简便、回收率高,实验结果为莲房中生物碱定量分析和湘莲莲房质量评价提供参考。     

乌头总生物碱贴片皮肤安全性的研究

目的观察乌头总生物碱贴片对动物皮肤的毒性作用。方法用健康新西兰兔进行皮肤单次及多次给药刺激性实验;用健康豚鼠进行皮肤过敏性实验。结果乌头总生物碱贴片中剂量组单次给药时未见对新西兰兔完整皮肤有刺激性反应,对破损皮肤有轻度刺激性;多次给药对兔完整皮肤无刺激反应,对破损皮肤有中度刺激反应。但停药后刺激反应消失,皮肤恢复正常。乌头总生物碱贴片中剂量组对豚鼠完整皮肤无致敏作用。结论乌头总生物碱贴片皮肤局部用药有较好的安全性,为临床应用提供了安全性保证。乌头总生物碱贴片的处方合理,制备工艺可靠。     

高效液相色谱法测定小茴香中总生物碱的含量

采用高效液相色谱法测定小茴香中生物碱的含量。色谱条件∶以甲醇-水溶液(30∶70,v/v)为流动相,流速1.0mL/min;检测波长270nm。相对标准偏差0.57%,本实验该色谱条件下测出小茴香中生物碱的含量为2.9%。     

异麦芽低聚糖含量测定方法的研究

采用高效液相色谱法,以Intersil-NH2:为固定相,Waters 2410型示差折光仪为检测器,研究异麦芽低聚糖含量的测定方法.结果表明,异麦芽低聚糖含量最佳测定条件为:流动相为乙腈:水:乙醇72:21:7;流速为1.4～2.0mL/min;柱温为25～35℃.该方法分离效果好,分离度(Rs)大于1.2;线性范围较宽,线性好,相关系数>0.9993;重复性好,相对标准偏差<0.31,变异系数<3.85%,平均回收率为90.8%-99.3%.     

异麦芽低聚糖含量测定方法的研究

采用高效液相色谱法,以Intersil-NH2为固定相,Waters2410型示差折光仪为检测器,研究异麦芽低聚糖含量的测定方法。结果表明,异麦芽低聚糖含量最佳测定条件为:流动相为乙腈:水:乙醇72:21:7;流速为1.4².0mL/min;柱温为25³5℃。该方法分离效果好,分离度（Rs）大于1.2;线性范围较宽,线性好,相关系数>0.9993;重复性好,相对标准偏差<0.31,变异系数<3.85%,平均回收率为90.8%⁹9.3%。      

竹叶石膏汤中人参药材鉴别及含量测定

目的对竹叶石膏汤中人参药材进行鉴别并测定其含量。方法通过薄层色谱法对竹叶石膏汤中人参药味进行定性鉴别,通过高效液相色谱法对竹叶石膏汤中人参含量进行测定。结果在所建立的薄层方法中,竹叶石膏汤供试品与人参单煎、人参药材、人参对照药材及人参皂苷标品相同位置呈现相同斑点,证明复方中人参药材的存在。建立了竹叶石膏汤中人参含量测定的高效液相色谱方法,其方法学考察结果良好。测得人参皂苷Re、人参皂苷Rg_1、人参皂苷Rb_1含量分别为0.25、0.21、0.22mg/g。结论建立的竹叶石膏汤中人参药材鉴别及含量测定方法的专属性、重现性良好,操作方便快捷,可用于竹叶石膏汤的质量控制。     

反相高效液相色谱和超高效液相色谱法测定 饮料中咖啡因含量的比较研究

目的对原反相高效液相色谱(RP-HPLC)方法进行转化并优化,建立超高效液相色谱(UPLC)方法,为饮料中咖啡因的含量测定提供更快速、高效、灵敏和环保的方法。方法分别采用RP-HPLC法和UPLC法测定饮料中咖啡因的含量,并对比二者的精密度、稳定性、重复性和加标回收率。结果 2种方法所得8种市售饮料中咖啡因的含量测定结果变化趋势一致,但UPLC法含量测定结果比RP-HPLC法含量测定结果偏高,二者精密度、回收率均符合要求。结论 UPLC法可以成功替代RP-HPLC法,为饮料中咖啡因的快速定性定量分析与检测提供新的途径。     

博落回生物碱提取工艺优化

目的探讨优化博落回叶片中生物碱的提取方法。方法采用甲醇提取法、超声-甲醇提取法、超声-甲醇补足提取法、超声-乙醇提取法和乙醇提取法5种方法提取博落回叶片中的生物碱,采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定其中原阿片碱(protopine,PRO)、别隐品碱(allocryptopine,ALL)、血根碱(sanguinarine,SAN)和白屈菜红碱(chelerythrine,CHE)4种生物碱的含量。结果超声-甲醇补足提取法提取光泽县野生博落回叶中的总生物碱含量最高,为(104.939±0.449) mg/g。三明明溪、南平光泽2地博落回叶片均有4种生物碱,所有提取方法提取的生物碱含量都满足ALL PRO SAN≈CHE。超声与回流相比提取率更高,乙醇为提取溶剂时,超声辅助的影响较小。结论超声-甲醇补足提取法为博落回生物碱的最优提取方法,此方法适用于博落回中总生物碱的提取。     

食品中蔗糖检测方法的研究

采用高效液相色谱仪(配示差折光检测器),摸索出对食品中蔗糖测定的色谱条件和前处理方法,进行准确定量测定的研究。标准曲线有较好的线性关系,方法回收率在95%～105%之间;RSD<3.0%,精密度高;方法最低检出限为0.9g/kg,方法定量限为3.0g/kg。     

高效液相色谱和液相色谱串联质谱技术在检测苹果制品中展青霉素的研究进展

展青霉素是一种有害的真菌毒素代谢物,主要对人类的中枢神经系统造成影响,且对消化系统和肾脏也造成不同程度的毒害影响。展青霉素在食品中的污染是世界各地普遍存在的问题,尤其在苹果汁、苹果脯、苹果蜜饯、苹果酱等食物中。考虑到它的毒性和广泛性,很多管理机构对食品基体中展青霉素的含量做出了严格的限制。因此控制展青霉素污染对于保障食品安全具有重要意义。目前液相色谱技术是苹果制品中展青霉素的主要检测方法。本文系统地总结了检测苹果制品中展青霉素的前处理方法,并综述了高效液相色谱和液相色谱联用质谱技术在苹果制品中展青霉素检测的最新研究进展。     

高效液相色谱法测定咖啡因的不确定度评定

目的建立高效液相色谱法测定咖啡因的不确定度的评估方法。方法试样中的咖啡因用甲醇:水:磷酸=100:400:0.5(V:V:V)混合溶液进行提取,在波长280 nm下,经流动相洗脱,色谱系统分离,采用外标法测定咖啡因的含量,然后依据JJF 1059.1-2012《测量不确定度评定与表示》,对标准物质、仪器重复测量、精密度和样品称量等因素引入的不确定度进行分析和计算。结果当试样中咖啡因含量为7.50%时,在95%的置信区间下,其扩展不确定度为±0.13%(k=2)。实验过程中的不确定度主要来源于仪器测量、标准物质及人员操作。结论该不确定度评定适用于高效液相色谱法测定咖啡因含量的过程分析,对检测结果准确度的控制具有指导意义。     

荞麦类黄酮成分的含量测定与分析研究

目的 建立高效液相色谱法同时测定荞麦中芦丁、金丝桃苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、芹菜素和山奈酚6种黄酮成分的含量, 并比较分析不同产地荞麦中黄酮类成分差异情况。方法 荞麦样品加入 20 mL体积分数为80%甲醇水溶液超声辅助提取。高速离心后, 经Shiseido CAPCELL PAK C18 MGⅡS5色谱柱(4.6 mm×250 mm, 5.0 μm), 以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相, 梯度洗脱; 流速为1.2 mL/min; 柱温为30.0±5 ℃, 检测波长为361 nm。采用统计学方法分析不同产地荞麦的黄酮类成分差异。结果 各黄酮类化合物在浓度为0.5~50.0 mg/L的范围内线性关系良好(r>0.999),平均加标回收率为73.20%~114.90%, 相对标准偏差(relative standard deviations, RSD)为2.02%~6.81%; 精密度、稳定性、重复性实验的RSD值均小于5.35%, 6种黄酮化合物的检出限为0.07~0.14 mg/L, 定量限为0.23~0.45 mg/L。荞麦实际样品分析结果表明不同产地的荞麦中6种黄酮成分含量和总黄酮含量差异显著(P<0.05)。结论 该方法分析快速简便、稳定和重复性好, 可用于荞麦中芦丁、金丝桃苷、山奈酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、芹菜素和山奈酚6种黄酮成分含量的测定。为荞麦中黄酮的开发利用和含量的测定分析提供参考依据。     

高效液相色谱法测定粮食中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇

本文建立了一种使用岛津超高效液相色谱仪LC-30A快速测定粮食中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的方法。玉米样品经磨碎后用水匀浆提取,提取液经过免疫亲和柱净化,超高效液相色谱LC-30A紫外检测器检测。试验结果表明：线性范围0.05~10.00μg/mL,相关系数大于0.999 9;标准样品的仪器检出限为0.016μg/mL,仪器定量限为0.05μg/mL;3个浓度标样的保留时间和峰面积相对标准偏差分别在0.041%~0.043%和0.11%~1.57%之间;玉米样品3个浓度加标回收率在81.2%~90.0%之间。该方法简便快速,且易操作。     

HPLC法测定食品中的叶黄素含量

为了测定食品中的叶黄素的含量,建立方便可靠的测定方法,采用高效液相色谱法对食品中叶黄素含量进行了测定.使用硅胶色谱柱(4.6mm×250 mm,5μm),以环己烷∶乙酸乙酯=75 ∶ 25为流动相,检测波长445nm.该方法最低检出量1.0mg/kg,RSD 为1.2%,加标回收率为93.85.6%,RSD 为3.1%～4.1%.该方法简便、准确,有良好的重现性,技术参数指标符合食品理化分析的要求.     

HPLC法测定食品中的叶黄素含量

为了建立测定食品中的叶黄素含量的可靠方法,采用高效液相色谱法进行了测定.使用硅胶色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以环己烷∶乙酸乙酯=75∶25为流动相,检测波长445nm.该方法最低检出量1.0 mg/kg,RSD为1.2%,加标回收率为93.8%～105.6%,RSD为3.1%～4.1%.该方法简便、准确,有良好的重现性,技术参数指标符合食品理化分析的要求.