杜仲疏松愈伤组织诱导条件的优化筛选

杜仲愈伤组织生长过于致密从而导致难以实现悬浮培养,因此获得疏松、生长快速愈伤组织是实现杜仲细胞悬浮培养的前提.本文研究了不同外植体、激素和培养基对杜仲愈伤组织诱导率、疏松程度以及褐化率的影响,结果表明：上胚轴和子叶更容易被诱导为疏松愈伤组织,MS培养基是最适诱导培养基;适当增加6-BA浓度有助于褐化的减轻且提高愈伤组织疏松程度,杜仲疏松愈伤组织诱导最适激素配比为1.0mg/L 2,4-D＋1.0mg/L NAA＋1.0mg/L 6-BA.     

紫薯愈伤组织诱导和培养条件优化及绿原酸类化合物的积累

以紫薯叶片为外植体,通过筛选培养基和培养条件建立了紫薯愈伤组织培养体系。研究6-苄基氨基嘌呤(6-BA)及萘乙酸(NAA)不同浓度组合对紫薯愈伤组织诱导的影响,之后分别考察基础培养基MS、1/2MS、B5、WPM、White及NAA、6-BA、2,4-二氯苯氧乙酸(2,4-D)三种激素对紫薯愈伤组织继代生长的影响。确定最适基础培养基后,对激素进行单因素实验后再做正交实验。结果表明1/2MS基本培养基中添加1.5 mg/L 6-BA和0.4 mg/L NAA适合紫薯愈伤组织诱导,诱导率为81.82%。MS为优选基础培养基,通过正交实验优化的激素配比组合为1.0 mg/L NAA,0.4 mg/L 6-BA,1.0 mg/L 2,4-D。最佳继代培养基为MS+1.0 mg/L NAA+0.4 mg/L 6-BA+1.0 mg/L 2,4-D+6 g/L琼脂+30 g/L蔗糖,此优化激素条件下愈伤组织的生物量增长倍数为23.46倍,3-咖啡酰奎宁酸、3,5-二咖啡酰宁酸、4,5-二咖啡酰宁酸三种绿原酸类化合物含量分别为0.30%、1.91%、1.10%,三者总含量3.31%,因此,通过紫薯愈伤组织培养生产绿原酸类化合物是可行的。     

拳参愈伤组织的诱导及增殖效应的研究

目的研究适宜拳参愈伤细胞的诱导、组织分化及快速生长的培养基成分。方法以拳参的幼嫩叶柄为外植体,接种于附加2,4-D、N A A、6-B A、K T及其组合的M S培养基上,观察拳参愈伤组织的诱导、分化及愈伤细胞的生长状态。结果MS 0.4 mg/L 6-BA 2.0 mg/L NAA对拳参愈伤组织的诱导效果最好。MS 0.2 mg/L 6-BA 2.0 mg/L 2,4-D增殖培养的愈伤组织较适合于器官的分化,MS 0.2 mg/L 6-BA 4.0 mg/L NAA增殖培养的愈伤组织较适合于做细胞悬浮培养的材料。结论建立拳参愈伤组织诱导,愈伤组织分化和愈伤细胞快速增殖体系,为进一步研究药用植物拳参细胞的分子机制及次生代谢等提供资料。     

烟草愈伤组织的诱导及细胞悬浮培养体系的建立

以鄂烟1号无菌苗的叶为材料进行愈伤组织的诱导,筛选出生长培养基的最佳激素配比,初步建立了烟草细胞悬浮培养体系。结果表明,愈伤组织诱导的最优基本培养基为MS培养基,以MS NAA1.0mg/L 6-BA0.5mg/L为最佳配方;愈伤组织最佳生长培养基为MS 2,4-D0.1mg/L NAA1.5mg/L 6-BA0.3mg/L,愈伤组织培养第6天进入对数生长期,第14天干重增至最初干重的12.536倍,并以此配方建立了烟草细胞悬浮培养体系。     

不同培养条件对银杏愈伤组织生长及黄酮含量的影响

以胚为外植体,通过固体培养,研究了培养基,激素和光照对银杏愈伤组织诱导的影响,以及继代培养中激1素和活性炭对愈伤组织生长和产黄酮的影响,结果表明:愈伤组织的诱导的最佳条件为DCR培养基+1.0mg/L2,4-D+0.5mg/LBA+完全暗条件培养。继代培养过程中既能促进愈伤组织生长又使黄酮含量最高的处理为0.3mg/LBA+2.0mg/L2,4-D,活性炭抑制愈伤组织生长但能促进黄酮的积累。     

外源激素对紫苏愈伤组织诱导及迷迭香酸积累的影响

以紫苏叶片为外植体,通过向B5培养基中添加不同浓度的激素组合,进行正交实验,研究其对紫苏叶片愈伤组织诱导率的影响。结果表明,在B5培养基中,添加2,4-D1.0 mg/L+KT0.4 mg/L+6-BA1.0 mg/L+NAA1.5mg/L时,愈伤组织诱导率最高。通过高效液相色谱法测定,紫苏叶片中迷迭香酸含量为0.25%,而在最佳培养基中培养40 d的愈伤组织中的含量为3.85%,有了显著的提高。研究为紫苏迷迭香酸高产细胞系的建立提供了理论依据。     

培养基和外源激素对银杏愈伤组织诱导、生长及叶绿素含量的影响

以银杏胚为外植体,通过应用MS、WS、White培养基和不同组合的外源激素研究对愈伤组织的诱导及其叶绿素的含量.结果表明:MS培养基诱导效果最好;外源激素对银杏愈伤组织叶绿素含量的影响程度为KT＞6-BA＞NAA＞2,4-D;1/4MS NAA2 mg/L KT 3 mg/L组合由于有很高的诱导率、较高的生长量、最高的叶绿素含量成为最适宜的培养基.     

蒲公英愈伤组织诱导条件的研究

以蒲公英幼嫩叶片为外植体,以MS为基本培养基,通过添加不同配比的6-BA、NAA、2,4-D植物激素,探讨外植体愈伤组织的诱导。研究结果表明:叶片在含0.2mg/LNAA和2mg/L6-BA的MS培养基中培养20天后形成明显的愈伤组织,诱导率达到86.6%,且绝大多数愈伤组织状态、长势良好,呈比较湿润的嫩黄色颗粒状。     

小麦成熟胚愈伤组织诱导及分化

该实验对5种不同小麦品种的成熟胚愈伤组织诱导和分化进行了研究,结果表明:在MS+2,4-D2.0mg/L培养基上,愈伤组织诱导率平均为96.6%;不同品种间诱导率差异不是很大,愈伤组织的质量与诱导率的高低无关;在MS+2,4-D0.5mg/L+1.5mg/L KT培养基上,分化率可达69.6%。     

黑麦草组织的快速繁殖

为加快草坪草无性系的选择、推广和应用,以黑麦草成熟种子为外植体进行组织培养,筛选出较理想的愈伤组织分化、芽分化、增殖和生根培养基,即愈伤组织培养基选用MS+2.0 mg/L2,4-D+0.5 mg/L6-BA,愈伤率可达80.0%;芽分化、增殖培养基为MS+0.1 mg/L 2,4-D+1.0mg/L6-BA,芽分化率可达44.8%;生根培养基为1/2MS+0.5 mg/LNAA,生根时间短,生根率可达到88.2%以上.     

电位滴定法测定苦瓜中总生物碱的含量

苦瓜分别经酸水提取、乙醇回流提取、超声波提取和碱浸提取,得到的样品以电位滴定法滴定,以苦瓜中的奎宁为基准物计算苦瓜中总生物碱的含量,由此建立苦瓜中总生物碱的含量测定方法。结果表明:电位滴定法具有良好稳定性、灵敏度和重现性,检测结果稳定可靠,且测定操作简便,可用于苦瓜中总生物碱的定量分析。四种提取方法得到生物碱的含量分别为4.644、4.428、6.804和8.964 mg/g,适宜的提取方法为碱浸提取法。     

苯乙酸对烟草单倍体植株叶脉组织培养一步成苗的效应研究

本研究探明了苯乙酸(PAA)对烟草单倍体植株叶脉切段培养一步成苗的效应,发现PAA与NAA、6-BA配合使用能有效促进一步成苗的发生。试验证明PAA对一步成苗的促进效应与各种激素浓度配比和基本培养基的种类有关,与基因型的关系不明显。烟草单倍体植株叶脉切段培养一步成苗的最佳培养基配方为MS+PAA 20 mg/L+NAA 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+谷氨酰胺50 mg/L+麦芽糖30 g/L。试验还证明,与2,4-D诱导产生愈伤组织途径的多级成苗培养相比,本研究建立的PAA一步成苗培养具有以下优点:1)显著提高愈伤组织的诱导率;2)显著提高愈伤组织的质量,有效提高愈伤组织分化率;3)成苗率显著高于多级成苗;4)再生植株具有更好的幼苗素质;5)再生植株的染色体数目变异率也显著低于多级成苗;6)获得双单倍体植株的频率显著高于多级成苗;7)能有效缩短培养周期、节约成本。      

苦瓜皂甙预防去卵巢大鼠骨质疏松的实验研究

以去卵巢骨质疏松症模型大鼠为研究对象,以血清参数、骨密度(BMD)、股骨和子宫组织形态为指标,研究连续给与苦瓜皂甙65、130、260mg/(kg bw·d) 12 周后对去卵巢大鼠骨质疏松的预防作用。结果表明：苦瓜皂甙用药组大鼠与模型组相比较血清雌二醇、Ca2+ 水平提高,股骨骨密度提高,股骨近端干骺端骨组织形态得到改善,而体质量、子宫质量以及子宫组织形态与模型组大鼠无显著差异。因此,苦瓜皂甙可预防去卵巢大鼠骨质疏松的形成。     

低分子量胶原蛋白肽交叉苦瓜素辅助降低糖尿病小鼠血糖作用特性

采用小鼠糖尿病模型研究低分子量胶原蛋白肽交叉苦瓜素辅助降血糖的作用特性。对糖尿病模型小鼠进行胶原蛋白肽交叉苦瓜素灌胃处理,测定给药前后小鼠的空腹血糖值、体重、脏器指数与肝组织抗氧化能力,进行糖耐量实验。结果表明,胶原蛋白肽交叉苦瓜素将糖尿病模型小鼠的血糖含量降低至7.5~17.8 mmol/L,葡萄糖耐量曲线下面积(AUC)降低至32.62~38.66 mmol/(min·L),肝脏指数和肾脏指数降低至44.98~57.17 mg/g和11.29~17.95 mg/g,脾脏指数提高至2.71~3.52 mg/g,超氧化物歧化酶(SOD)活力增强至88.18~158.38 U/mg prot,丙二醛(MDA)含量降至1.66~3.00 nmol/mg prot。与模型组相比,胶原蛋白肽交叉苦瓜素处理的糖尿病模型小鼠,第28 d的血糖值和第21 d的AUC显著降低(p<0.05),肝脏指数和肾脏指数下降,脾脏指数上升,肝组织抗氧化能力提高,其中石斑鱼骨胶原蛋白肽交叉苦瓜素的中剂量组与罗非鱼皮胶原蛋白肽交叉苦瓜素的中剂量组和高剂量组效果较显著。研究表明胶原蛋白肽交叉苦瓜素可使糖尿病小鼠的血糖值显著降低(p<0.05),且血糖值降低与肝脏抗氧化能力提高相关联,同时胶原蛋白肽交叉苦瓜素可促进糖尿病模型小鼠的脏器损伤修复,提高其自身免疫能力。     

大孔树脂对苦瓜多酚吸附分离研究

开发一种高效、实用的分离提纯苦瓜多酚的技术方法,以多酚吸附量和解吸率为指标,对6种不同类型的树脂进行了筛选,并研究吸附与解吸优化条件.所选出的非极性大孔树脂H103,对苦瓜多酚的吸附量和解吸率最大,分别达到64.166 7 mg/mL和92.72%.H103型树脂能很好地用于吸附分离苦瓜多酚.     

混合型苦瓜保健酒的发酵工艺优化及其抗氧化活性研究

以苦瓜汁与苹果菠萝混合果汁为原料,选用酿酒酵母（Saccharomyces cerevisiae）及植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）作为发酵菌种定向发酵苦瓜保健酒。以酒精度、感官评价及苦瓜皂苷产率为评价指标,采用Box-Behnken中心组合试验优化发酵条件,同时以维生素C作为阳性对照,采用清除羟自由基和Fe3+还原能力分析苦瓜保健酒的抗氧化活性。结果表明,苦瓜保健酒的最佳发酵工艺条件为苹果菠萝混合果汁∶苦瓜汁=1.5∶1、发酵时间10 d、酵母添加量为1 mL/L、乳酸菌添加量6 mL/L、发酵温度26 ℃的条件下可生产出质量最佳的苦瓜保健酒。此条件下成品果酒的品质最佳,皂苷含量达到2.78%,酒精度为11.2%vol。抗氧化试验结果表明,苦瓜保健酒有一定的抗氧化活性,0.1 mg/mL的苦瓜保健酒对羟自由基的清除率达到25%以上,对Fe3+也有一定还原能力,且其抗氧化化性与皂苷质量浓度呈正相关。     

苦瓜黄酮的提取条件及其抗氧化活性研究

本研究以乙醇为溶剂,以乙醇浓度、回流时间、回流温度等做L9(33)正交试验研究苦瓜中黄酮类物质的最优提取工艺,并比较了各提取液的抗氧化能力。实验结果表明:在乙醇浓度为70%,回流温度为40℃,回流时间为3h的条件下苦瓜中黄酮类物质的提取率最高126.56mg/100g,且其对·OH的清除率也最好75.37%,接近于VC对·OH的清除率80.10%。