剑叶龙血树化学诱导结血物中龙血素A、龙血素B的测定及诱导剂效果评价

目的建立高效液相测定剑叶龙血树人工诱导结血物中龙血素A、B的方法,用于筛选有效的剑叶龙血树结血诱导剂。方法高效液相色谱法(HPLC)法,色谱柱安捷伦ZORBAX Eclipse XDB C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-1%冰醋酸(40∶60),流速1.0 m L/min,柱温25℃,检测波长为280 nm。结果龙血素A在0.021 6~0.194 8μg范围内呈线性关系,回归方程为Y=-0.783 6X+1.825 1,r=0.999 8,龙血素B在0.020 1~0.181 1μg范围内呈线性关系,回归方程为Y=-0.478 5X+1.054 8,r=0.999 7,不同诱导剂诱导所得龙血素A含量在0.013%~0.099%,龙血素B含量在0.044%~0.097%。结论该方法快速、准确,可用于剑叶龙血树人工诱导结血物中龙血素A、B的检测,茉莉酸甲酯(50 mg/L)-苯甲酸(2 g/L)、硫酸镁(5%)-苯甲酸(2 g/L)、3吲哚丁酸(5 mg/L)-苯甲酸(2 g/L)、的诱导结血效果较好。     

龙血竭中龙血素和剑叶龙血素的HPLC分离研究

在优化了流动相组成、比例、流速、洗脱方式和柱温等条件后,选择乙腈和0.5%磷酸水溶液为流动相,流速为1.0 mL/min,柱温为35℃,检测波长为217 nm,采用梯度洗脱,建立了一个同时分离测定血竭中龙血素A、龙血素B和剑叶龙血素C的高效液相色谱法。该方法在29 min内实现了这3个组分的有效分离与测定,其工作曲线的线性范围对于龙血素A和B均为2.5²50μg/mL,对于剑叶龙血素C为1.0250μg/mL,对于剑叶龙血素C为1.0²50μg/mL。将该方法用于测定不同来源血竭样品中龙血素A、B和剑叶龙血素C的含量,相对标准偏差在5.0%以内,回收率在95%250μg/mL。将该方法用于测定不同来源血竭样品中龙血素A、B和剑叶龙血素C的含量,相对标准偏差在5.0%以内,回收率在95%¹10%之间。     

龙血素A和龙血素B的酶联免疫检测方法的建立

建立了龙血素A和龙血素B间接竞争酶联免疫吸附分析方法,并用于测定龙血素A和龙血素B的含量。分别合成龙血素A和龙血素B人工抗原制备其多克隆抗体,建立二者间接竞争酶联免疫吸附分析方法并评估其分析性能。结果表明:抗龙血素A血清和抗龙血素B血清的效价分别达到8 000和30 000;龙血素A和龙血素B的最低检测限分别为3.9ng·mL-1和26.1ng·mL-1,批内精密度分别为CV≤10.7%和CV≤9.9%,批间精密度分别为CV≤11.5%和CV≤12.3%,回收率分别为87.4%~110.8%和109.8%~113.5%,与各自的6种类似物的交叉反应率最大分别为9.20%和3.64%,在4种龙血竭药物中的最大含量和最小含量分别相差4.05倍和3.57倍。龙血素A和龙血素B间接竞争酶联免疫吸附分析方法的检测精密度、准确度和特异性均较好,可快捷有效地用于药物检测和分析。     

进口血竭与国产血竭的比较性研究

比较进口血竭药材与国产血竭药材的色谱图,并建立高效液相色谱法(HPLC)测定不同产地血竭中龙血素A和龙血素B的含量,为血竭药材质量控制提供有效的方法。采用超声波提取法,通过HPLC法对不同产地血竭进行比较,其色谱条件:Agilent Zorbax SB-C18色谱柱,流动相为:A乙腈,B 0.4%磷酸水,梯度洗脱,流速为1 m L/min,柱温为室温,检测波长为280 nm,记录时间60 min,进样量10μL。国产血竭与进口血竭,两者高效液相色谱图差异明显,进口血竭中龙血素A和龙血素B的含量明显高于国产血竭。     

聚酰胺树脂提取血竭龙血素

研究了聚酰胺树脂对血竭中龙血素A和龙血素B的提取效果。采用HPLC进行定量分析,考察了上样方法、洗脱剂体积分数、洗脱流速、树脂使用次数等因素对提取效果的影响,并确定了适宜的梯度洗脱方式。结果表明,将血竭样品用乙酸乙酯溶解后,与聚酰胺树脂混合,然后将溶剂蒸发完全进行吸附,树脂的吸附量为1g·（g树脂）-1。在0．8mL·min-1洗脱流速下,7BV的50％乙醇可梯度洗脱被聚酰胺树脂吸附的龙血素A和龙血素B,解吸率均达91％以上,聚酰胺树脂使用3次后即需再生。该工艺收率高、操作简便,适于血竭龙血素的提取。     

不同产地鸡血藤药材中芒柄花素及总黄酮的含量测定

比较了不同产地鸡血藤药材芒柄花素和总黄酮含量。芒柄花素采用高效液相色谱法(HPLC)法测定,色谱柱Thermo Hypersil BDS C18(4.6 mm×250 mm,5μm),流动相为乙腈-0.4%磷酸梯度洗脱,流速1.0 m L·min-1,柱温25℃,检测波长为250 nm。总黄酮用50%乙醇超声提取,紫外-可见分光光度法测定。芒柄花素在0.0402~0.3219μg范围内呈线性关系,回归方程为Y=-0.5600X+1.910,相关系数(r)=0.9999,低、中、高水平的添加回收率为95.4%~98.2%,RSD值为1.52%~2.59%。不同批次的鸡血藤中芒柄花素含量介于0.018%~0.028%,总黄酮含量介于3.34%~5.28%。芒柄花素HPLC测定法具有操作简便,结果稳定可靠,可用于鸡血藤的质量评价。不同产地鸡血藤药材的芒柄花素和总黄酮含量存在一定差异,但广西、云南两产地鸡血藤芒柄花素和总黄酮含量差异不显著。     

高效液相色谱法测定不同配伍比例甘草、威灵仙药对中甘草苷、甘草酸的含量

目的:建立测定不同配伍比例甘草、威灵仙药对中甘草苷、甘草酸的含量的方法,探讨不同配伍比例配伍的药对的合理性。方法:色谱柱Agilent 20RBAX XDB-C18(4.6 mm×250 mm,5μm)流动相为乙腈(B)-0.1%磷酸盐溶液(A),洗脱方式为梯度洗脱,0~10~19~20~24~70~75min,乙腈(B)为:15%~25%~25%~32%~80%~15%,0.1%磷酸盐溶液(A)为:85%~75%~75%~68%~20%~20%~85%。检测波长254 nm,流速为1 m L·min~(-1),柱温为室温,进样量20 L。结果:配伍比例为4∶1时,甘草苷、甘草酸含量分别为:10.67 mg·g~(-1)、30.54 mg·g~(-1)。甘草苷在0.0123~0.04305 mg·m L~(-1)浓度内呈良好线性关系,回归方程Y=509.31X-0.237,R2=0.9998;甘草酸在0.03684~0.12897 mg·m L~(-1)浓度范围呈良好线性关系回归方程Y=493X+0.6841,R2=0.9982。甘草苷、甘草酸平均回收率分别为97.50%,97.10%。结论:最佳的配伍比例为4∶1。     

HPLC法测定牡丹籽饼、牡丹叶、牡丹籽外壳中芍药苷的含量

建立牡丹籽饼、牡丹叶、牡丹籽外壳中芍药苷含量的测定方法。采用Agilent5TC-C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈-0.1%磷酸水溶液(15∶85)为流动相,检测波长225 nm,流速1.0 mL/min,柱温30℃,进样体积10μL。结果表明,芍药苷在0.04⁰.2 mg/mL范围内与峰面积具有良好的线性关系,回归方程为:Y=10 091X+21.22(r=0.999 5),精密度、稳定性、重复性的相对标准差(RSD)分别为1.09%,1.36%,2.24%,平均加样回收率为102.65%,RSD为2.88%。测得牡丹籽饼、牡丹叶、牡丹籽外壳中芍药苷含量依次为10.95,19.32,2.74 mg/g。该方法简便、准确,可用于牡丹籽饼、牡丹叶、牡丹籽外壳中芍药苷含量的测定。     

HPLC法测定海棠合剂中雷公藤甲素的含量

目的:建立HPLC测定海棠合剂中雷公藤甲素含量测定方法。方法:采用HPLC法,色谱柱为Diamonsil C18柱(250mm×4.6mm,5μm)柱;以乙腈(A)-水(B)为流动相,梯度洗脱(0~20分钟,20%A→50%A;20~21分钟,50%A→20%A),流速为1.0m L/min,柱温35℃,UV检测波长为220nm。结果:雷公藤甲素在进样量在0.02096~0.2096μg范围内与峰面积呈很好的线性关系,回归方程和相关系数:回归方程为A=1586.937C+2.495342,r=0.9999;平均回收率为93.5%,RSD=2.95%(n=6)。结论:该方法灵敏快速,操作简便,重现性好,可用于海棠合剂的质量控制。     

HPLC法测定牡丹籽饼、牡丹叶、牡丹籽外壳中芍药苷的含量

建立牡丹籽饼、牡丹叶、牡丹籽外壳中芍药苷含量的测定方法。采用Agilent5TC-C18(150 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,乙腈-0.1%磷酸水溶液(15∶85)为流动相,检测波长225 nm,流速1.0 mL/min,柱温30℃,进样体积10μL。结果表明,芍药苷在0.04~0.2 mg/mL范围内与峰面积具有良好的线性关系,回归方程为:Y=10 091X+21.22(r=0.999 5),精密度、稳定性、重复性的相对标准差(RSD)分别为1.09%,1.36%,2.24%,平均加样回收率为102.65%,RSD为2.88%。测得牡丹籽饼、牡丹叶、牡丹籽外壳中芍药苷含量依次为10.95,19.32,2.74 mg/g。该方法简便、准确,可用于牡丹籽饼、牡丹叶、牡丹籽外壳中芍药苷含量的测定。     

河水中抑霉唑的SPE-RP-HPLC动态分析

建立固相萃取-反相高效液相色谱法测定河水中抑霉唑的动态分析方法.色谱柱为Shim-pack VP-ODS 150 mm×4.6mm,流动相为V(甲醇)/V(离子对水溶液)=75/25,流速为0.85mL/min,进样量20μL.抑霉唑在15.0～960.0 μg/ kg(r=0.999 4)浓度范围内与峰面积成良好线性...     

高效液相色谱法测定化妆品中间苯二酚和水杨酸

采用高效液相色谱法同时测定化妆品中间苯二酚和水杨酸。色谱条件:Kromasil C8(250 mm×4.6 mm i.d.,5μm)色谱柱,以流动相甲醇+0.01 mol/L磷酸氢铵缓冲溶液进行梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长275 nm。结果表明,在此条件下间苯二酚和水杨酸均在0.5～150μg/mL内与相应的峰面积具有良好的线性关系(相关系数r分别为0.999 7和0.999 8),线性回归方程分别为A=12 420ρ-6 301和A=15 500ρ-8 810,回收率在95.9%～103.5%,RSD为0.61%～0.88%。     

高效液相色谱法同时测定云南白花木瓜不同部位中5个成分的含量

建立了一种采用高效液相色谱(HPLC)法同时测定白花木瓜中绿原酸、芦丁、金丝桃苷、齐墩果酸、熊果酸的质量浓度的方法,比较了果皮、果肉中绿原酸、芦丁、金丝桃苷、齐墩果酸、熊果酸质量浓度的差异.结果显示,在以A相(甲醇)和B相(体积分数为16％乙腈,体积分数为0.3％磷酸水溶液)为流动相的梯度洗脱条件下,绿原酸、芦丁、金丝...     

反相高效液相色谱法测定化妆品中巯基乙酸

采用反相高效液相色谱法测定化妆品中巯基乙酸的含量。色谱条件为:Kromasil C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为V(乙腈)∶V(0.01 mol/L KH2PO4溶液(磷酸调pH=2.5))=10∶90的混合溶液,流速1.0 mL/min,检测波长215 nm,柱温30℃,进样量20μL。结果表明,此条件下巯基乙酸在5.0～150.0μg/mL质量浓度范围内与峰面积线性良好,线性回归方程为Y=5 100X-13 400(r=0.999 8),平均回收率在98.4%～100.8%,RSD为0.09%～0.84%。     

高效液相色谱法快速测定血清中的维生素C

建立了一种高效液相色谱法快速测定血清维生素C含量的方法。Shim-pack VP-ODS C18色谱柱,流动相为0.05 mol/L KH2PO4,pH值为3.0,流速为1 mL/min,检测波长为254 nm。血清样品经50 g/L偏磷酸溶液提取。结果表明,维生素C在浓度为0.5～25μg/mL范围内有良好的线性关系,线性回归方程为Y=(2.429 227×10-5)X+(-8.645 801×10-2),相关系数为0.999 1,方法回收率为98%～102%,相对标准偏差小于3%。本测定方法简便,快速,准确,稳定。     

高效液相色谱法测定重组人干扰素α1b滴眼液中苯扎氯铵的含量

目的采用高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)测定重组人干扰素α1b(recombi-nant human interferonα1b,rhIFNα1b)滴眼液中苯扎氯铵(benzalkonium chloride)的含量。方法采用HPLC法测定rhIFNα1b滴眼液中苯扎氯铵含量,色谱条件:流动相:乙腈:5 mmol/L醋酸铵[含1%三乙胺,用冰醋酸调节pH值至(5.0±0.2)]体积比为65∶35;流速:1.0 ml/min;检测波长:262 nm;进样量20μl;柱温:室温。对该方法进行验证,并应用该方法检测3批rhIFNα1b滴眼液中苯扎氯铵的含量。结果该方法检测苯扎氯铵专属性和系统适应性良好;最低检测限和定量限分别为0.53μg/ml和1.48μg/ml;苯扎氯铵在10～50μg/ml浓度范围内,标准曲线的线性关系良好,R2=0.999 1;连续6次进样,峰面积的RSD=1.78%;苯扎氯铵理论浓度为22、24、26μg/ml的加样回收率平均为97.90%,RSD=0.96%。3批rhIFNα1b滴眼液中苯扎氯铵的相对含量分别为19.27、19.89和19.76μg/ml,分别为标示量的96.34%、94.46%和98.80%。结论 HPLC法简便、灵敏、准确,可用于测定rhIFNα1b滴眼液中苯扎氯铵的含量。     

QuEChERS结合高效液相色谱-串联质谱法测定酱油中的4-甲基咪唑

建立了QuEChERS技术结合高效液相色谱-串联质谱对酱油中的4-甲基咪唑进行测定的HPLC-MS/MS法。样品以水和乙腈提取后,盐析离心分层,上清液用固相吸附剂(Primary Secondary Amine,PSA)进行净化。在优化的色谱及质谱条件下,采用ESI正离子模式电离,多反应监测(Multi-selected reaction monitoring,MRM)模式扫描测定。4-甲基咪唑在5.0~200μg/L范围内线性良好,相关系数r为0.999 4,3个浓度添加水平的平均回收率范围在90.7%~103.6%之间,相对标准偏差为2.76%~5.72%。方法检出限(LOD)和定量限(LOQ)分别为3.0μg/kg和10μg/kg。该方法操作简便快速,方法学结果表明方法回收率高、灵敏度高、精密度好,可用于实际测定酱油中的4-甲基咪唑。