黑皮鸡枞菌菌丝体发酵富硒条件优化及菌丝体多糖抗氧化活性研究

目的 优化黑皮鸡枞菌(Oudemansiellaraphanipes,O.raphanipes)菌丝体发酵条件,考查其富硒规律及菌丝体多糖的体外抗氧化活性。方法 以菌丝体干重、菌丝体多糖含量和硒利用率为主要考察指标,分别考察外源硒浓度和发酵条件对黑皮鸡枞菌菌丝体发酵富硒的影响。以3种自由基清除率为指标,考察菌丝体多糖及富硒菌丝体多糖的体外抗氧化能力。结果 黑皮鸡枞菌菌丝体富硒的最佳条件为:硒元素添加量5 mg/L、发酵温度25℃、装液量250 mL (500 mL三角瓶)、发酵起始pH 7.0。在该条件下,黑皮鸡枞菌的生物量、菌丝体多糖含量、硒利用率分别为(7.68±0.48) g/L、(3.82±0.24)%和(9.28±2.11)%。当富硒菌丝体多糖质量浓度为0.7mg/L时,其对羟自由基、超氧阴离子自由基和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH)自由基的清除率分别为(49.05±1.94)%、(52.43±3.05)%和(63.87±2.95)%,分别比对照组(不添加硒)高80.84%、7.75%和34.01%。结论...     

羊肚菌菌丝体锌多糖的体内、体外抗氧化作用

对羊肚菌菌丝体通过液体富锌培养获得锌多糖,对其体内、体外抗氧化作用进行了研究。采用Fenton法、 邻苯三酚自氧化法和1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）还原法对羊肚菌菌丝体锌多 糖的体外抗氧化性进行了研究。通过腹腔注射D-半乳糖（100 mg/（kg?d））诱导致衰老小鼠为对照组,羊肚菌菌 丝体多糖和羊肚菌菌丝体锌多糖（320 mg/（kg?d））为治疗组。30 d后检测小鼠肝脏、肾脏和血清中超氧化物歧 化酶（superoxide dismutase,SOD）、过氧化氢酶（catalase,CAT）活力和丙二醛（malondialdehyde,MDA）含 量,研究羊肚菌菌丝体多糖体内抗氧化作用。羊肚菌菌丝体多糖和羊肚菌菌丝体锌多糖清除羟自由基半数抑制浓度 （half maximal inhibitory concentration,IC50）分别为0.56 mg/mL和0.36 mg/mL;清除超氧阴离子自由基IC50分别为 0.62 mg/mL和0.46 mg/mL;清除DPPH自由基IC50分别为0.68 mg/mL和0.58 mg/mL。羊肚菌菌丝体锌多糖能够提高 衰老小鼠肝脏中SOD和CAT活力,显著降低MDA含量（P＜0.05）,与羊肚菌菌丝体多糖组相比使SOD活力提高了 9.32%,CAT活力提高了36.73%,MDA含量降低了90.71%。羊肚菌菌丝体锌多糖具有更强的抗氧化活性,并在设 定的质量浓度范围呈剂量效应关系。     

梯棱羊肚菌富硒条件优化工艺研究

为得到梯棱羊肚菌最佳富硒条件,在硒浓度、装液量、发酵时间及pH值单因素试验的基础上,以菌丝生物量及富硒率为指标,通过L_9(3~4)正交试验筛选出梯棱羊肚菌最佳液体富硒条件。结果表明:梯棱羊肚菌最佳液体富硒培养条件为:硒浓度20.0 mg/L、装液量125.0 mL/250.0 mL、发酵时间8 d、pH值为7.0,在此条件下菌丝生物量达到11.304 g/L,硒含量为0.683 mg/g,富硒率为37.15%。结果可为富硒羊肚菌液体菌种制备及羊肚菌富硒液体深层发酵提供参考。     

富硒香菇多糖发酵工艺的优化及其抗氧化活性

本试验利用香菇作为载体,Na₂SeO₃为添加的硒源,优化富硒香菇多糖的发酵条件并研究其抗氧化活性。采用单因素试验考察了培养基pH、硒灭菌方式、硒添加时间、硒添加量和发酵时间对富硒香菇多糖的影响,并通过 Box-Benhnken实验设计和响应面分析法确定最优发酵条件。在优化条件下得到富硒香菇多糖,并利用DPPH自由基清除能力研究其抗氧活性。结果表明:当培养基pH调至4.16,发酵至第162 h时,向发酵液中添加7.97 mg/L过滤除菌的Na₂SeO₃溶液,发酵11 d,富硒香菇胞内多糖提取量可达到71.54 mg/100 mL;当培养基pH调至4.01,发酵至第191.5 h时,向培养基中添加6.68 mg/L过滤除菌的Na₂SeO₃溶液,发酵11 d,富硒香菇胞外多糖提取量可达到853.96 mg/100 mL。DPPH自由基清除实验结果表明,抗氧化活性大小依次为富硒香菇胞内多糖 > 香菇胞内多糖 > 富硒香菇胞外多糖 > 香菇胞外多糖。硒的添加不仅促进香菇菌丝的生长及多糖的累积,同时也提高了其抗氧化活性,对DPPH有较好的清除作用。     

纤维素酶法提取富硒灵芝菌丝体多糖的研究

采用纤维素酶法,研究了纤维素酶分离提取富硒灵芝菌丝体多糖的条件,以提高菌丝体多糖的得率.利用正交试验设计,确定了优化的提取条件,即浸提加水量50 mL/g菌丝体,酶解时间80 min,加酶量300 U/mL,pH 4.5,温度55℃.在优化的实验务件下,菌丝体多糖的得率33.6%.利用Q Sepharose Fast Flow离子交换层析分离纯化菌丝体多糖,多糖的回收率达82.8%.     

乳酸乳球菌富硒及其硒多糖抗氧化活性研究

对乳酸乳球菌富硒工艺进行优化以及对其最优条件下提取的硒多糖抗氧化活性研究,结果表明:接种量、培养时间、亚硒酸钠浓度是影响乳酸乳球菌富硒量的主要因素;当接种量8%,培养时间24h,亚硒酸钠浓度14μg/mL,温度37℃,pH6.6时,乳酸乳球菌的有机硒转化率为59.87%。当最优条件下提取的硒多糖浓度达2mg/mL时,硒多糖对羟自由基和超氧阴离子的清除率为78%和59%,较同等条件下多糖的清除率分别提高了19%和18%。      

虫草与富硒虫草多糖的体外抗氧化活性

采用Fenton法和邻苯三酚自氧化法测定虫草和富硒虫草多糖对.OH、O2-.和H2O2的清除率。结果表明:虫草多糖对O-2.和H2O2的清除能力依次为富硒虫草胞外多糖>富硒虫草胞内多糖>虫草胞外多糖>虫草胞内多糖,而对.OH的清除能力依次为:富硒虫草胞外多糖>虫草胞外多糖>富硒虫草胞内多糖>虫草胞内多糖;当100mg/L多糖溶液添加量分别高于80、40、90μL时,各组多糖对.OH、O2-.和H2O2 3种自由基的抑制率均可高于50%。     

两种富硒黄牛肝菌伞多糖的制备、表征及其抗氧化活性

硒是人体必需的微量元素之一,但由于其安全域值较低,极易导致硒中毒。研究发现,硒化多糖和纳米硒有更高的安全性和生物活性,是理想的补硒制剂。本研究以黄牛肝菌伞多糖（polysaccharides from Suillellus luridus,SLPC）为原料制备硒化黄牛肝菌伞多糖（selenide polysaccharides from Suillellus luridus,Se-SLPC）和纳米硒-黄牛肝菌伞多糖（nano-selenium-polysaccharides from Suillellus luridus,SLPC-SeNPs）,比较硒化修饰前后多糖的理化性质和结构特性,观察SLPC-SeNPs的表面形貌并测定其稳定性,同时,评价两种富硒多糖的抗氧化活性。结果表明,Se-SLPC的硒含量为1.62 mg/g,是由半乳糖、葡萄糖和甘露糖组成的多糖,平均分子质量8.2 kDa,核磁共振分析显示取代反应发生在C4和糖苷键连接位点C3处。SLPC-SeNPs粒径为55.46 nm,表面呈均匀球状,在4 ℃下能稳定保持至少80 d。此外,Se-SLPC和SLPC-SeNPs的抗氧化活性均明显高于SLPC。本研究可为研发安全高效的补硒制剂提供理论支撑。     

灵芝富硒发酵条件优化及硒多糖抗运动疲劳活性研究

为研究灵芝富硒发酵最佳条件,探讨灵芝菌丝体硒多糖对小鼠运动疲劳活性的影响。以菌丝体生物量为指标,利用单因素和响应面试验优化发酵条件,并分析硒多糖的抗疲劳活性。结果显示,最佳富硒发酵条件为：Na₂SeO₃浓度39 mg/L,摇床转速185 r/min,温度28℃,此条件下,灵芝菌丝体干重12.47 g/L,富硒率96.87%,硒多糖386.52 mg/L,多糖中硒含量93.58 mg/kg。硒多糖可显著提高小鼠力竭游泳时间,降低小鼠体内血乳酸(BLA)、血尿素氮(BUN)和丙二醛(MDA)含量,提高肝糖原(HG)、肌糖原(MG)含量,提高骨骼肌细胞中抗氧化酶(SOD、GSH-Px)活性,从而缓解细胞的氧化应激损伤。综上,本研究通过富硒发酵获取的灵芝菌丝体硒多糖具有较好的抗运动疲劳活性,有深入开发利用的前景。     

富硒大豆的灵芝菌丝体液态发酵条件优化

以富硒大豆为原料,采用液体发酵技术对富硒大豆的灵芝菌丝体液态发酵条件进行研究。富硒大豆经浸泡、磨浆、过滤、煮沸后接种灵芝菌种发酵,以水解度为指标,通过单因素和正交试验对温度、初始pH值、摇瓶转速及豆浆质量分数等发酵条件进行优化。结果表明：富硒大豆的灵芝菌丝体液态发酵最佳条件为发酵温度28℃、培养基初始pH5.8、摇瓶转速160r/min、豆浆质量分数5%、发酵时间132h。在最佳发酵条件下,大豆蛋白的水解度达27.8%、大豆多肽产量7.0178mg/L、多糖产量1.75mg/L、灵芝酸产量0.66mg/L。     

羊肚菌菌丝体液体培养富锌条件的优化

通过对蛹虫草(Cordyceps militaris)、大球盖菇(Stropharia rugoso-annulata)、铆钉菇(Gomphidiaceae)、杏鲍菇(Pleurotus eryngii)、美味牛肝菌(Boletus edulis)、羊肚菌(Morehella esculenta)、灵芝(Ganoderma lucidum)和真姬菇(Hypsizygus marmoreus)等食用菌富锌能力的考察,筛选出具有较强的耐锌和富锌能力的羊肚菌做为富锌菌种,并采用液体发酵技术对羊肚菌菌丝体富锌适宜的锌源、锌浓度和发酵条件进行了优化.结果表明:羊肚菌菌丝体富锌适宜的锌源是Zn(CH3COO)2,在100～ 800mg/L的锌浓度范围内菌丝体都可以生长,菌丝体对锌的最适富集浓度为600mg/L羊肚菌菌丝体最优富锌条件为:发酵温度25℃,起始pH7,振荡转速150r/min,250mL三角瓶装液50mL,锌添加量为600mg/L,接种量5％(V∶V)培养时间4d时,羊肚菌菌丝体的生物量及含锌量达最高,总富锌率可达23.20％,富集锌的有机化程度为37.71％.     

羊肚菌菌丝体液体培养富锌条件的优化

通过对蛹虫草（Cordyceps militaris）、大球盖菇（Stropharia rugoso-annulata）、铆钉菇（Gomphidiaceae）、杏鲍菇（Pleurotus eryngii）、美味牛肝菌（Boletus edulis）、羊肚菌（Morehella esculenta）、灵芝（Ganoderma lucidum）和真姬菇（Hypsizygus marmoreus）等食用菌富锌能力的考察,筛选出具有较强的耐锌和富锌能力的羊肚菌做为富锌菌种,并采用液体发酵技术对羊肚菌菌丝体富锌适宜的锌源、锌浓度和发酵条件进行了优化。结果表明:羊肚菌菌丝体富锌适宜的锌源是Zn（CH3COO）2,在100～800mg/L的锌浓度范围内菌丝体都可以生长,菌丝体对锌的最适富集浓度为600mg/L。羊肚菌菌丝体最优富锌条件为:发酵温度25℃,起始pH7,振荡转速150r/min,250mL三角瓶装液50mL,锌添加量为600mg/L,接种量5%（V∶V）培养时间4d时,羊肚菌菌丝体的生物量及含锌量达最高,总富锌率可达23.20%,富集锌的有机化程度为37.71%。      

羊肚菌多糖纯化、结构分析及抗氧化活性

对羊肚菌多糖(Morchella esculentapolysaccharides,MEP)进行分离纯化,对多糖组分进行纯度鉴定及结构分析。利用DEAE-52纤维素层析柱和Sephadex G-100层析柱纯化得到2种组分(MEP-2和MEP-3),均为均一多糖。利用红外图谱(fourier transform infrared spectroscopy,FT-IR)和刚果红实验分析内部结构,MEP-2是一种吡喃环多糖且具有双螺旋结构,MEP-3含有甘露糖无双螺旋结构。利用高效凝胶渗透色谱法(high-performance gel permeation chromatography,HPGPC)与高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography,HPLC)测定2种组分分子量及单糖组成,MEP-2由甘露糖、葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖组成,摩尔比为2.97∶13.69∶1∶2.60,分子质量为8.3 kDa。MEP-3由甘露糖、鼠李糖、葡萄糖、半乳糖组成,摩尔比为18.25∶0.84∶1∶1.53,分子质量为11.6 kDa。扫描电镜(scanning electron microscope,SEM)和原子力显微镜(atomic foree microseope,AFM)对MEP-2和MEP-3的组成和结构进行分析,MEP-2呈现不同大小的球形构象,MEP-3主要为球状和片状。MUP-3清除DPPH自由基、·OH、ABTS·的能力、还原力优于MUP-2,清除O2-·的能力弱于MUP-2。     

羊肚菌多糖的提取优化及抗氧化活性研究

摘要：目的 对羊肚菌多糖（Morchella esculenta polysaccharides,MEP）的提取工艺进行筛选优化,获得最佳工艺和最佳活性组分。方法 采用热水浸提（Hot water extraction,HWE）、柠檬酸提取（Citric acid extraction,CAE）、碱提（Alkaline solution extraction,ASE）和低共融溶剂提取（Deep eutectic solvent extraction,DESs）4种方法,获得4种多糖（MEP-W、MEP-S、MEP-A和MEP-D）,通过比较选出最佳方法,采用响应面设计获得最佳工艺,采用乙醇分级获得三个组分MEP30、MEP60和MEP80,通过自由基清除试验（DPPH· 和·OH）和还原力测定评估其抗氧化活性。结果 HWE为最佳方法,最佳提取工艺为：时间3 h,液料比44∶1（mL/g）,温度83.6℃,提取得率为（8.13±0.38）%。MEP80在三个组分中清除·OH能力和还原力最强,EC50和RP0.5AU分别为0.44 mg/mL和1.52 mg/mL,高于其前体物MEP-W。结论 热水浸提为最佳方法,MEP80为抗氧化活性的最佳组分,值得进一步研究。     

羊肚菌菌丝体液体发酵醋的研制

研究以豆渣为基料液态培养羊肚菌菌丝体,并通过酒精发酵和醋酸发酵获得具有功能性的食用菌醋。结果显示,利用豆渣为基料培养食用菌,有利于豆渣中营养物质利用,菌丝体生长速度较快,菌丝体均匀。羊肚菌菌丝体培养的优化条件为:豆渣基料9%、葡萄糖2%、MgSO40.1%、KH2PO40.05%,接种量10%,26℃恒温振荡培养2d,羊肚菌菌丝体生物量达2.2g/100mL;酒精发酵的优化条件为:将可溶性固形物调到12Birx,酵母菌接种量0.1%,30℃恒温培养6d,酒精度达7%(V/V);醋酸发酵的优化条件为:250mL三角瓶装液量为100mL,醋酸菌接种量为8%,30℃恒温培养6d,醋酸含量为5.03g/100mL,达到了食醋的标准。      

香菇菌丝体多糖的化学结构与抗氧化活性分析

对香菇菌丝体多糖(Lentinus edodes mycelium polysaccharides,LMPS)的2种组分(LMPS-1和LMPS-2)进行化学结构特征分析,旨为香菇菌丝体多糖的构效关系研究提供依据。文中利用高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱(GC)、红外光谱(IR)分析等对其化学结构特征进行解析,并测定其抗氧化活性。构成糖分析结果显示:LMPS-1单糖组成为阿拉伯糖、木糖、甘露糖和葡萄糖,其摩尔比为2.5∶0.8∶1∶1.8;LMPS-2的单糖组成为鼠李糖、木糖和葡萄糖,其摩尔比为4.2∶1∶2.7。LMPS-1和LMPS-2均有较强的抗氧化活性,LMPS-2更为显著。香菇菌丝体多糖主要由阿拉伯糖和鼠李糖组成的吡喃型多糖,有较强的抗氧化活性。     

榆耳菌丝体多糖的体外抗氧化活性研究

利用乙醇分级沉淀法获得50%醇沉榆耳多糖、70%醇沉榆耳多糖及85%醇沉榆耳多糖,比较其抗氧化能力。结果表明:85%醇沉榆耳多糖的还原能力及对DPPH·的清除作用最强。0.5mg/mL85%醇沉榆耳多糖对DPPH·的清除率达到83.0%,IC50=29.94μg/mL。0.3mg/mL70%醇沉榆耳多糖对OH·的清除率达到84.3%,IC50=0.124mg/mL。榆耳菌丝体多糖清除超氧阴离子效果不理想,清除率仅为8.6%。榆耳菌丝体多糖具有较高的抗氧化活性。     

羊肚菌菌丝体基础培养基的优化

利用响应面分析法对影响羊肚菌菌丝体产量的基础培养基进行优化.研究碳源、氮源、生长因子对羊肚菌菌丝体产量的影响.在单因素试验的基础上,利用Box-Benhnken设计和响应面分析法以菌丝体产量作为响应值,对基础培养基最佳参数进行分析.试验结果表明,羊肚菌菌丝发酵基础培养基的最佳条件为:可溶性淀粉21.32g/L,硝酸钾2.15g/L,萘乙酸0.149g/L,由回归方程可计算出在此参数条件下菌丝体干重的理论值为4.986g/L.     

Isolation, partial characterisation and immunomodulatory activities of polysaccharide from Morchella esculenta

BACKGROUND: Polysaccharides extracted from fungi or algae have shown a variety of medical activities, and the exploitation of polysaccharides for application in pharmacy has been very promising. In this study, the immunomodulatory properties of polysaccharides from Morchella esculenta were investigated to identify immunostimulatory activity and potentially contribute to the therapeutic potential of Morchella esculenta. RESULTS: A water‐soluble polysaccharide, MEP, was obtained from the fermentation broth of Morchella esculenta. Two fractions of this polysaccharide (MEP‐I and MEP‐II) were extracted and purified. High‐performance gel permeation chromatography analysis showed the average molecular weights of two polysaccharides. Structural properties and compositions of these two fractions were examined by Fourier transform infrared and a high‐performance liquid chromatography with an evaporative light scattering detector. Active experiments suggested that the MEP had typical immunostimulatory activity. CONCLUSION: These bioactivity tests showed that the polysaccharides from Morchella esculenta presented significant immune modulating activity, and this finding may offer the basis for the popular use of polysaccharides in functional foods or medicine. Copyright © 2011 Society of Chemical Industry