环境中甾体激素降解菌的筛选及功能基因的克隆

利用生物技术解决环境中日益增长的甾体类激素污染的环境问题,寻找相关的菌及其关键基因就非常重要。本研究利用含1.6-4.1%NaCl的SIN培养基从大连海港附近所取海水样中筛选能够降解并利用甾体激素作为唯一碳源和能源的微生物。ELISA检测3-羟基类固醇脱氢酶/羰基还原酶(3-HSD/CR)活性。利用PCR技术克隆3,17-羟基类固醇脱氢酶基因,ELISA技术检测该基因的活性。结果表明筛选到的微生物为一种革兰氏阴性菌,命名为H5-1,具有3-HSD/CR活性,对PCR克隆的3,17-羟基类固醇脱氢酶基因经测序比对同源性为99%,ELISA检测初步证实了该基因的活性。该基因的成功克隆为后期转入受体细胞进行目的蛋白的表达、酶活性鉴定及构建甾体激素降解工程菌株等工作奠定基础。     

微生物絮凝剂产生菌筛选和廉价培养

微生物絮凝剂具有安全高效的特点,具有巨大应用潜力.为开发更多微生物絮凝剂,本研究从活性污泥中分离纯化高效絮凝剂产生菌株,初步确定其活性成分分布,并探讨利用糖蜜废液对其廉价培养的可行性.研究结果表明,16株能产生微生物絮凝剂的菌株中,呈革兰氏阴性的Y3和S1菌株的微生物絮凝特性最好,对高岭土悬浊液絮凝率分别达到98.9%和99.5%,其絮凝有效成分多为细胞外产物.稀释20倍、40倍和60倍的废糖蜜中菌株Y3和S1均可生长,在稀释40倍的废糖蜜中两种菌生长量均最大,且在废糖蜜中均保持了絮凝特性,表明糖蜜废液可用于Y3和S1菌株的廉价培养.     

一株好氧反硝化细菌生理生态特征的研究

经测定一株好氧反硝化菌X31菌株的生理生化指标,鉴定该菌株为假单胞菌属(Pseudom onas),对该菌株进行16S rDNA测序后确定为Pseudom onas chloritidismutans.该菌株在完全好氧的条件下可高效地将NO3-反硝化为N2,并不产生NO2-的累积.其培养特征为ORP降低和反硝化产碱.当初始的氧化态氮浓度为150 mg/L左右时,DO值对该菌株的反硝化效果没有影响;而pH值对反硝化效果影响很大,反硝化的最适pH值为中性或偏碱性;反硝化的最适温度为30~35℃.     

微生物对原油和铅污染中农作物种子发芽的影响

采用不同浓度原油、铅和原油-铅混合处理大白菜和玉米种子,同时采用活跃消化球菌（Peptococcus activus）菌株SH9的菌悬液处理种子,探究在污染条件下,微生物对农作物种子发芽的影响.研究结果显示,原油和铅显著抑制玉米和大白菜种子萌发,且随着浓度的升高抑制作用越强.活跃消化球菌SH9能有效提高二者发芽率.     

Pb^2＋污染区耐铅细菌吸附特性的研究

利用梯度筛选法,在Pb2＋浓度为1 100 mg/L时从被原铅锌矿区尾矿库污染的土壤中筛选出了一株耐铅细菌。对此株细菌的初步鉴定和培养条件研究显示：该细菌为革兰氏阴性好氧菌,最适摇床速率为150 r/min;对环境温度较敏感,最适培养温度为28-32℃;耐碱性环境,对酸性环境很敏感,最适pH为7.0-7.7。对该株细菌干、湿两种状态下的铅吸附特性分析结果表明：干菌的吸附量始终大于湿菌。干菌和湿菌的吸附量都会随着Pb^2＋初始浓度的增加而增加;特定初始浓度下吸附量随菌量的增加而减小,干菌大于0.4 g,湿菌大于0.8 g时,吸附量趋于平缓。     

透明颤菌的分离及鉴定

报道了L-3菌株的分离、筛选及鉴定。L-3菌株是革兰氏阴性专性好氧菌,毛发体无色、滑行、毛发体具屈绕性,在限氧条件下可诱导合成一种血红蛋白。血红蛋白用N,N,N′,N′-四甲基-对苯二胺来鉴定,迅速生成紫色标志血红蛋白存在。L-3菌株可积累PHB,被鉴定为透明颤菌(Vitreoscillasp.)。L-3菌株细胞提取液经过电泳,显出细胞内蛋白在供氧和限氧条件下的差异。     

一株用于麦芽糖生物纯化的微生物菌株筛选

经过初筛和复筛获得一株可以水解麦芽三糖、麦芽四糖等寡糖的菌株WJW-16,水解产物为麦芽糖和葡萄糖。通过形态观察、生理生化实验及16SrDNA鉴定相结合的方法将该菌株鉴定为伯克氏菌属,且该菌是好氧菌,革兰氏阳性,有芽孢生成。     

贝莱斯芽孢杆菌Vel-HNGD-F2产抗菌物质发酵条件优化及抗菌特性研究

从猪肠道微生物中筛选到的贝莱斯芽孢杆菌Vel-HNGD-F2对禾谷镰刀菌有良好的抑菌效果,有望用于禾谷镰刀菌引起的作物病害防治。为进一步提高菌株Vel-HNGD-F2的抗菌物质产量,采用响应面法对其发酵条件进行优化;通过酸沉淀法对菌株Vel-HNGD-F2的脂肽类物质进行粗提并检测抑菌活性,研究粗提物的稳定性;用已知的5种编码脂肽类抗生素的基因的特异性引物进行PCR扩增并测序分析;通过UPLC-Q-TOF-MS检测技术对脂肽粗提物的成分进行分析。结果表明：菌株Vel-HNGD-F2的最佳发酵条件为发酵温度36.49℃、发酵液初始pH 7.14、接种量3.13%,预测发酵上清液抑菌率为58.71%,实际抑菌率为58.49%;粗提物对禾谷镰刀菌有抑菌作用且具有良好的耐热性并对紫外照射不敏感;对PCR扩增产物测序结果经NCBI的在线BLAST比对,表明该菌含有与bmyB、fenD、ituC、srfAA和bacA同源的基因,推测菌株Vel-HNGD-F2可能分泌这5种脂肽;UPLC-Q-TOF-MS结果显示抗菌物质为包含surfactin、iturin和bacillomycin的混合物。菌株V...     

石油污染土壤微生物修复菌种选育研究

以原油作为惟一碳源,对长庆油田石油污染土壤中石油降解菌进行富集培养并筛选出高效石油降解菌,研究石油污染土壤微生物特性及石油降解菌降解性能．结果表明,长庆油田受污染土壤石油降解菌为杆状或球状,既有革兰氏阴性菌,又有革兰氏阳性菌;在好氧奈件下,石油烃降解优势菌株a,b,c,d有较强的降解能力,分别属于邻单胞菌属,芽孢杆菌属和动胶菌属;a和b在初始pH为9时降解率最高分别为69．81％和71．41％;c和d在初始pH为7时降油率最高分别为66．94％和65．76％．     

凡口铅锌矿废弃地植物促生长内生真菌的筛选

以粤北凡口铅锌矿废弃地优势植物香蒲(Typhaorientalis presl)、苦楝(Melia azedarach)、苎麻(Boehmeria nivea)和蓖麻(Ricinus communis)中分离筛选出的具有抗重金属铅、锌能力的45株内生真菌为研究材料,利用CAS检测液显色反应、钼锑抗比色法和Salkowski法,分别筛选出具有促进植物生长的产铁载体菌株30株、溶磷菌株3株和产吲哚乙酸(IAA)菌株18株。并选取具有产铁载体、溶磷或产IAA能力较强的菌株作为代表菌株进行形态学鉴定和ITS序列分析,鉴定结果显示：WB-21为曲霉属(Aspergillus)、BM3为旋孢腔菌属(Cochliobolus)、BM5为链格孢属(Alternaria)、菌株XP3.21为刺盘孢属(Colletotrichum)、ZMP5-3为篮状菌属(Talaromyces)。     

激发极化法在银山矿区找矿中的应用

激发极化法是以低阻高极化为特征的银铅锌多金属矿找矿中的一种常用的物探方法。银山银铅锌多金属矿区的激电异常大、范围广,且存在高极化岩性等干扰因素,给找矿带来了一定的难度,通过对矿区的地质及地球物理特征的综合分析,认为该矿区的中等电阻率中等极化率异常为有效的找矿标志异常,而非通常的低阻高极化异常,据此设计了三个钻孔对矿致激电异常进行了验证,见到较厚的银铅锌矿体,取得了较好的找矿效果。     

产高温碱性蛋白酶菌株筛选及酶学性质研究

从高温堆肥土样中筛选到一株高产蛋白酶的菌株,经鉴定为Bacillus subtilis,命名为I15.对最适产酶发酵条件进行了优化,并研究了发酵产蛋白酶的酶学性质.结果表明,玉米淀粉和豆饼粉是该菌发酵产蛋白酶的最适经济碳氮源;该蛋白酶属高温碱性蛋白酶,具有很强的热稳定性和酸碱稳定性.另外,突出的性质是该蛋白酶对表面活性剂和温和型去垢剂具有超强的耐受性,将具有广阔的市场前景.     

Artificial neural network modeling of mechanical properties of armor steel under complex loading conditions

An artificial neural network (ANN) model is established to predict plastic flow behaviors of the 603 armor steel,based on experiments over wide ranges of strain rates ( 0.001 - 4 500 s -1 ) and tempera...     

Effect of strain on the electrical resistance of carbon nanotube/silicone rubber composites

Carbon nanotube (CNT) filled silicone rubber (SR) composites were synthesized by in situ polymerization.The effect of strain on the electrical resistance of the CNT/SR composites and the structure evolution of CNT networks during tensile deformation were investigated.The results showed that the CNT/SR composites had high sensitivity of resistance-strain response.In a wide strain range (0-125%),the change of resistivity could reach 107,which was closely associated with the evolution process of the conductive CNT-network structure.The volume expansion of the composites in the tensile process led to a gradual decrease in the volume fraction of CNTs with the strain increase.When CNT loading was lower than the percolation threshold,CNT network was in disconnected state with a rapid increase in electrical resistance of the composites.Furthermore,the CNT loading had remarkable effect on the sensitivity of resistance-strain response in the composites.     

木质素降解茵的筛选及产漆酶培养条件的优化

以树枝和树皮为样品,利用愈创木酚平板法和鞣酸平板法筛选得到一株产漆酶能力强的木质素降解菌．通过菌丝形态观察,初步认为该菌株为白腐菌．时菌株高产漆酶的液体培养条件进行了优化,最后获得的优化工艺为：温度为28～35℃,转速为140r·min-1,初始pH为5,诱导剂CuSO。加入量为0．5mmol·L-1．在该条件下漆酶的产量为178．6U·mL-1．     

初始应力状态对侧限条件黏土动态压缩过程和力学性能的影响

黏土的初始应力状态对其动力学性质有显著的影响。本文采用长时、分级、高压固结方式模拟了黏土的原始应力赋存环境,采用SHPB实验装置对侧限条件下的高压固结黏土进行应变率范围为200~800 s_^-1的冲击压缩实验,分析了黏土应力记忆效应、应变率效应和动态压缩过程。实验结果表明,黏土的应力历史影响了其动态压缩过程,试样依次经历压实段—线弹性加载段—线性卸载段,在动载下黏土压实段与线弹性加载段应力拐点的均值为3.8 MPa,与先期固结应力4.2 MPa具有相关性,并且压实段应变均值约为试样破坏应变的33%;采用200 mm和300 mm的短子弹进行冲击加载时,黏土试样未发生稳定的塑性变形,分析应力-应变率曲线发现,黏土的压实过程吸收了一部分动载能量,使其无法持续进行动态压缩行为,但进入动态压缩阶段后黏土受子弹长度影响较小;黏土试样动态加卸载段模量随应变率同步增加,但加卸载模量的比值稳定在0.45左右,表明更高的冲击速度没有造成试样进一步的损伤,这与冲击后的宏观破坏现象及塑性变形分析相互印证。实验结果也说明,针对软弱、松散颗粒体材料,高压固结方式为研究其动力学性质提供了一种思路。     

薄板型腔高压充型行为的水流与计算机模拟

应用Ｆｌｏｗ３Ｄ软件对高压水流快速充型的过程进行了计算机模拟,并在相同条件下采用１０００～２０００帧／ｓ照片的高速摄影方法,对着色高速水流在透明的丙烯酸玻璃为材料制成的模具薄板型腔中的充型过程进行了拍摄,二者结果一致．显示了计算机模拟方法研究流体高压充型行为的可行性．应用同样的计算机模拟方法探讨了几种情况下的浇口、溢流槽、型腔形状与位置对其充型行为的影响．其结果对高压铸造铝、镁合金工艺参数设计具有重要参考意义．     

37Mn5钢高温变形抗力模型及动态再结晶动力学模型研究

通过Gleeble热模拟试验获得不同变形条件下37Mn5钢的应力应变试验数据,采用不同模型对试验数据进行回归,找到适合37Mn5钢高温变形时的变形抗力模型。同时,通过计算得到了该钢的动态再结晶动力学方程和动态再结晶体积分数表达式。将以上模型的计算值与实测值进行比较,结果表明,计算值与实测值非常接近。     

热处理对挤压变形AM50镁合金疲劳行为的影响

采用低周疲劳试验研究了固溶处理和时效处理对挤压变形AM50镁合金在疲劳加载条件下的变形行为和疲劳寿命的影响.结果表明，固溶和时效处理均可改变挤压变形AM50镁合金的循环应力响应行为和循环应力-应变行为，并降低挤压变形AM50镁合金的循环应变硬化指数和循环强度系数；在高的外加总应变幅下，固溶和时效处理可以提高挤压变形AM50镁合金的疲劳寿命，但当外加总应变幅较低时，固溶和时效处理则降低挤压变形AM50镁合金的疲劳寿命；固溶处理将抑制挤压变形AM50镁合金在疲劳变形期间发生动态应变时效.