3种农用抗生素对温室白粉虱及其共生菌的影响

[目的]明确农用抗生素对温室白粉虱及其共生菌的影响.[方法]采用饲喂法测定3种农用抗生素对温室白粉虱的生物活性,通过qPCR测定共生菌滴度.通过喷施烟草,测定温室白粉虱的死亡率.[结果]相对于春雷霉素和宁南霉素,嘧肽霉素对温室白粉虱成虫的LC50值最低,对粉虱共生菌Arsenophons和Portiera滴度的抑制效果...     

2%宁南霉素水剂对烟草花叶病毒的抑制及作用机制的初步研究

采用半叶法测定2%宁南霉素水剂(AS)在500 mg/L下抗烟草花叶病毒(TMV)的活体治疗、保护及钝化活性,检测2%宁南霉素AS诱导炯叶中内防御酶活性变化及病程相关蛋白基因的表达.结果表明,2%宁南霉素AS具有较高的抗TMV活性,同时2%宁南霉素AS处理可导致接种TMV烟草品种K326叶片的PAL、POD、SOD活性不同程度提高和PR-1a、PR-5基因表达上调,表明2%宁南霉素AS能启动烟草的一系列抗病防御反应,诱导烟草产生抗病性.     

热休克蛋白65-MUC1抗原肽融合蛋白效力测定方法的建立

目的建立热休克蛋白65(HSP65)MUC1抗原肽(HSP65MUC1)融合蛋白的效力测定方法。方法从人外周血中分离出单核细胞,并用人IL4和GMCSF将其诱导为未成熟的树突状细胞(iDCs),将HSP65MUC1融合蛋白加载至iDC中继续培养2d后,用流式细胞仪检测树突状细胞(DCs)表面CD80、CD83和CD86等的表达。结果HSP65MUC1融合蛋白能使iDCs表面的CD80、CD83和CD86等表达上调,其中CD86的表达上调程度与其加载HSP65MUC1融合蛋白的量成正相关。结论通过检测对人iDCs表面CD86表达的刺激作用来检测HSP65MUC1融合蛋白效力的实验方法具有操作简便、周期短和重复性好等优点。     

嘧肽霉素发酵液抗真菌组分的高效液相色谱分析

[目的]采用反相高效液相色谱法分析嘧肽霉素发酵液,外标法测定其中抗真菌组分的含量。[方法]使用DIKMA DiamonsilⅡC18反相柱和紫外可变波长检测器,以甲醇-水(体积比为20∶80)为流动相,流速为1 mL/min,检测波长为278 nm。[结果]嘧肽霉素抗真菌组分保留时间为10.2 min,方法的线性相关系数为0.999 8,样品平均回收率为99.4%,变异系数为0.25%。[结论]该方法是用于发酵控制和用药指导的理想分析方法。     

野慈姑对ALS抑制剂的交互抗药性

[目的]测定野慈姑对磺酰脲类除草剂及其他ALS抑制剂(三唑嘧啶类和嘧啶硫代苯甲酸酯类)的交互抗药性。[方法]通过剂量反应试验测定营口(R1)和鞍山(R2)2个种群对5种ALS抑制剂抗性水平。[结果]种群R2对磺酰脲类除草剂吡嘧磺隆和乙氧磺隆,嘧啶硫代苯甲酸酯类除草剂双草醚产生了交互抗药性;而对三唑嘧啶类除草剂五氟磺草胺和嘧啶硫代苯甲酸酯类除草剂嘧啶肟草醚比较敏感;相比之下种群R1仅对磺酰脲类除草剂吡嘧磺隆和乙氧磺隆产生交互抗药性。[结论]明确了2个野慈姑种群对5种ALS抑制剂的交互抗药性,为抗ALS类杂草的治理提供理论依据。     

细胞膜表面异位表达热休克蛋白70的CD4~+T细胞诱导EAE小鼠保护性免疫作用

目的探讨细胞膜表面异位表达热休克蛋白70(heat shock protein 70,HSP70)在T细胞疫苗(T cell vaccine,TCV)诱导保护性免疫中的作用。方法建立髓鞘少突胶质细胞糖蛋白多肽35-55(myelin oligodendrocyte glycoprotein,MOG35-55)诱发的C57BL/6小鼠实验性自身免疫性脑脊髓炎(experimental auto-immune encephalomyelitis,EAE)模型,以MOG35-55肽特异性CD4~+T细胞为疫苗,经尾静脉免疫小鼠。对EAE小鼠的临床神经功能进行评分,流式细胞术检测小鼠脾脏中CD4~+CD25~+Foxp3~+调节T细胞(Treg)百分比、ELISA法检测脾细胞培养上清中细胞因子IFNγ、IL-4、IL-10和IL-17含量。结果射线照射可诱导活化CD4~+T细胞表面异位表达HSP70;HSP70~+T组小鼠症状显著轻于HSP70-T封闭组(P 0. 01);HSP70~+T组小鼠脾脏中CD4~+CD25~+Foxp3~+Treg细胞百分比、脾细胞上清中IL-4、IL-10含量均显著高于HSP70-T组(P 0. 01),而IFNγ、IL-17含量均显著低于HSP70-T组(P 0. 01)。结论细胞膜表面异位表达HSP70在活化T细胞诱导的保护性免疫中发挥重要作用。     

1.8%嘧肽·多抗水剂对水稻纹枯病菌的作用机理

[目的]研究1.8%嘧肽·多抗水剂对水稻纹枯病菌的抑制作用及作用机理。[方法]采用菌丝生长速率测定等方法测定5种不同质量浓度的药剂处理对菌丝生长的抑制效果;测量经药剂处理过的菌丝麦角甾醇含量,丙二醛的含量以及菌悬液的电导率等。[结果]质量浓度22.5~90 mg/L的药剂可完全抑制病菌菌丝生长;经药剂处理过的菌丝,出现畸形、原生质外渗、菌丝分枝不明显乃至断裂的现象;嘧肽·多抗处理过的病菌,丙二醛含量明显增加;随药剂质量浓度和培养时间的增加,培养液的电导率也逐渐增大。[结论]1.8%嘧肽·多抗水剂对水稻纹枯病菌具有较好的抑制作用。该药剂对菌丝形态、菌丝细胞膜透性以及菌丝细胞膜脂质过氧化程度均有一定的影响。     

苯丙烯菌酮诱导烟草抗烟草花叶病毒(TMV)及对几种防御酶活性的影响

[目的]考察苯丙烯菌酮(IBC)诱导烟草抗烟草花叶病毒病的效果及其生理生化机制。[方法]通过室内盆栽试验测定苯丙烯菌酮的诱抗效果,通过生理生化方法测定苯丙烯菌酮对8叶期烟草体内防御酶系的影响。[结果]苯丙烯菌酮在200、40、8、1.6、0.32 mg/L质量浓度下,对普通烟草的TMV防治效果分别为42.85%、75%、60.71%、53.58%、46.42%。用质量浓度为40 mg/L药剂处理8叶期烟草,连续施药3次,每次间隔5 d。第3次施药后24 h接种TMV,叶片内SOD、PPO、PAL活性均在7 d达到峰值,分别比接种对照提高50.81%、175.14%、23.44%;POD活性在1 d达到峰值,比接种对照提高29.95%。[结论]当苯丙烯菌酮质量浓度为40 mg/L时,诱导烟草抗TMV的效果最好,对烟草花叶病毒病的防效为75%。同时,使植物体内SOD、POD、PPO、PAL 4种防御酶活性显著提高。     

防治作物病毒病新农药—宁南霉素

宁南霉素是一种广谱、高效、低毒、低残留的无公害生物农药,其产生菌是诺尔斯链霉菌西昌变种。宁南霉素系统地诱导植物产生PR蛋白,降低植物体内病毒粒体浓度,破坏病毒粒体结构,从而达到防治作物病毒病的效果。它对烟草等作物的病毒病一般防效为70％左右,最高可达90％以上。筛选后的高产菌株摇瓶发酵水平可达20000u/ml,已实现20t罐的工业化生产。     

天然化合物丁香酚抗烟草花叶病毒病作用机制初探

[目的]初步研究丁香酚对植物病毒病的作用机制.[方法]利用盆栽法测定了丁香酚对烟草花叶病毒病的预防和治疗效果;电镜法观察了丁香酚对病毒粒子的影响;体外混合法测定了丁香酚对烟草花叶病毒外壳蛋白体外聚合的影响.[结果]丁香酚对烟草花叶病毒病具有较好的预防和治疗效果;丁香酚与病毒混合处理后,病毒粒子有断裂现象;丁香酚对TMV外壳蛋白体外聚合有一定的抑制作用.[结论]丁香酚可以作为新型抗病毒剂用于防治作物病毒病.     

21%噻呋酰胺·咯菌腈·嘧菌酯悬浮种衣剂对花生白绢病的田间防效

[目的]评价21%噻呋酰胺·咯菌腈·嘧菌酯悬浮种衣剂对花生白绢病的田间防治效果,为生产上应用提供理论依据。[方法]2020年种子包衣法于山东省泰安市、新泰市2地进行了田间药效试验。[结果]2地田间试验结果表明:21%噻呋酰胺·咯菌腈·嘧菌酯悬浮种衣剂40、48 g a.i./100kg种子2个处理的防效为74.97%～80.80%和77.81%～83.71%,高于4个对照药剂。[结论] 21%噻呋酰胺·咯菌腈·嘧菌酯悬浮种衣剂对花生白绢病具有较好的防治效果,建议使用剂量40～48 g a.i./100kg种子。     

不同化学杀菌剂与多抗霉素混配对压砂西瓜炭疽病的联合生物活性及田间防效

[目的]明确不同化学杀菌剂与生物农药多抗霉素混配对宁夏压砂西瓜炭疽病的防治效果。[方法]采用菌丝生长速率法、Wadley法和田间喷雾法,测定了4种化学杀菌剂对压砂西瓜炭疽病的室内生物活性和田间防效,并将活性较强、防效较优的化学农药与多抗霉素混配测定其对西瓜炭疽病的协同增效作用。[结果]筛选出防治压砂西瓜炭疽病效果较佳的化学杀菌剂咪鲜胺、苯甲·嘧菌酯2种,并确定了其与多抗霉素的最佳质量配比分别为1∶2、1∶3,平均防效可达82%,均高于单剂防效。[结论]咪鲜胺、苯甲·嘧菌酯可作为宁夏压砂西瓜炭疽病防治的首选化学药剂,与多抗霉素混配对西瓜炭疽病防效优于单剂,可降低化学农药使用量和减少农药抗药性,不同药剂组合可交替使用。     

14%氟虫腈·嘧菌酯悬浮种衣剂防治玉米二点委夜蛾的田间药效试验

[目的]明确14%氟虫腈·嘧菌酯悬浮种衣剂对玉米二点委夜蛾的防治效果及用药量。[方法]采用药剂拌种法进行田间药效试验。[结果]14%氟虫腈·嘧菌酯FS有效成分使用剂量药种比为1∶750对玉米二点委夜蛾药后7 d的防效可达90.69%,与对照药剂50 g/L氟虫腈FS拌种处理差异显著。[结论]14%氟虫腈·嘧菌酯悬浮种衣剂能有效防治玉米二点委夜蛾,并对玉米的出苗率无不良影响。     

一种制备嘧菌酯及其中间体的高效催化剂

[目的]开发一种制备嘧菌酯及其中间体2-(2-((6-氯嘧啶-4-基)氧基)苯基)-3,3-二甲氧基丙烯酸酯的新型催化剂。[方法]以哌啶-3-甲酸乙酯为初始原料,经烷基化、迪克曼缩合、脱羧、还原得到1-氮杂双环[3.2.1]辛烷-6-醇,并以该化合物为催化剂制备嘧菌酯及其中间体。[结果]以哌啶-3-甲酸乙酯为初始原料,经4步反应制备1-氮杂双环[3.2.1]辛烷-6-醇,总收率达到71.1%。以该化合物为催化剂,高收率的合成了嘧菌酯及其中间体。[结论]1-氮杂双环[3.2.1]辛烷-6-醇可以高效的催化嘧菌酯及其中间体的制备反应,为嘧菌酯及其中间体的制备提供了新的催化剂。     

井冈霉素与嘧苷素复配剂防治白术白绢病效果及应用技术

[目的]探明井冈霉素与嘧啶核苷类抗菌素(嘧苷素)复配剂对白术白绢病的防治效果,并形成应用技术。[方法]采用生长速率法测定室内抑菌活性,并进行安全性评价、田间药效试验和应用技术研究。[结果]井冈霉素、嘧苷素对白术白绢病具有一定的离体抑菌活性,其EC50值为69.80、83.91 mg/L;筛选明确了井冈霉素与嘧苷素配比为5∶1时,具有最高活性(EC50值为65.25 mg/L)和最大共毒系数(CTC为110.06)。6%井冈·嘧苷素AS对白术生长具有较好的安全性,试验剂量下喷雾20 d后,株高抑制率为-0.52%~0.92%。田间药效试验表明,6%井冈·嘧苷素AS使用剂量为450 g a.i./hm2时,喷雾防治2次的田间防效在72.37%~84.28%之间。且连续喷雾防治3次比灌根处理可取得更好的防治效果。[结论]6%井冈·嘧苷素AS能够有效控制白术白绢病危害,可在生产上推广应用。     

嘧苯胺磺隆的合成与生物活性

[目的]嘧苯胺磺隆是嘧啶磺酰脲类除草剂,开展该类化合物的研究工作,探索其合成方法并进行生物活性测定。[方法]以邻氨基苯甲酸和2-氨基-4,6-二甲氧基嘧啶为起始原料,共经过4步反应合成目标化合物嘧苯胺磺隆,经核磁验证其结构。[结果]生物活性测定结果表明该化合物对苘麻具有优异的抑制效果。[结论]嘧苯胺磺隆具有优异的除草活性,且对水稻、小麦安全,具有很广阔的应用前景,值得重视。     

苯嘧磺草胺的合成和生物活性测定

[目的]脲嘧啶类除草剂苯嘧磺草胺具有优异的除草活性,研究其合成及分析方法,并进行除草活性测定。[方法]2-氯-4氟苯甲酸(2)经酯化、硝化、还原等反应制得2-氯-4-氟-5-氨基苯甲酸甲酯(5),化合物5与三光气反应生成异氰酸酯(6),化合物6与4,4,4-三氟-β-氨基巴豆酸乙酯(7)环合后经甲基化、水解、酰氯化后与侧链N-甲基-N-异丙基氨基磺酰胺(12)缩合得目标化合物苯嘧磺草胺(saflufenacil,1)。[结果]总收率6.26%。关键中间体和目标化合物结构通过1H NMR、IR和MS确认。经HPLC分析,产品纯度达到99.8%。[结论]目的产物与外购的商品进行了除草活性对照试验,结果显示活性基本一致。     

除草剂双氯磺草胺的合成

[目的]研究除草剂双氯磺草胺的合成方法。[方法]以2-乙氧基-4,6-二羟基嘧啶为起始原料,经氯化、氟化、肼解、环合、转位、氧氯化,最后与2,6-二氯苯胺发生缩合反应,处理后即得目标产物双氯磺草胺。[结果]在优化反应条件下,反应总收率为55.3%(以2-乙氧基-4,6-二羟基嘧啶计),含量为98%;产物结构经HPLC-MS、1H NMR确证。[结论]该反应原料易得、条件温和、操作简便,适合在工业上推广应用。     

香椿树皮提取物与宁南霉素的复配增效作用

[目的]进一步研究香椿树皮活性成分与宁南霉素对烟草花叶病毒的复配增效作用。[方法]以烟草花叶病毒(TMV)为供试病毒,采用活性跟踪法对香椿树皮活性物质进行初步分离,通过半叶枯斑法测定香椿树皮活性成分与宁南霉素的复配剂对烟草花叶病毒抑制活性。[结果]香椿的乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物对TMV均表现较好的抑制活性,并对其继续进行分离,并通过对TMV抑制活性筛选,将高活性组分与宁南霉素复配,发现组分Fr1及组分Fr13分别与宁南霉素的复配比为1∶1时,增效作用最佳;组分Fr11与宁南霉素的配比为1∶2时,增效作用最佳,优于单剂。     

人热休克蛋白70基因的克隆、表达及鉴定

目的克隆人热休克蛋白70(HSP70)基因,构建其原核高效表达载体。方法将PCR扩增的HSP70基因克隆到原核高效表达载体pET-28b中,转化大肠杆菌JM109。挑选阳性克隆,提取质粒pE28b70F,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达目标蛋白。结果在大肠杆菌中成功表达了HSP70,表达量约占细菌总蛋白的22·3%,其中可溶性目标蛋白占上清总蛋白的12%。Westernblot表明该目标蛋白具有与鼠抗人HSP70单抗特异结合的抗原活性。通过Ni2+-NTA亲和柱,从1L诱导产物中纯化出约1520mg重组蛋白,纯度在80%以上。结论已成功表达HSP70,为进一步研究其生物学功能和作用机制奠定了基础。