黄粉虫酶解物体内外抗氧化及免疫活性研究

目的:研究黄粉虫酶解物(TMH)体内外抗氧化活性和免疫活性。方法:研究TMH的还原能力及其对DPPH自由基和超氧阴离子自由基的清除能力;通过动物试验研究TMH的体内抗氧化能力和免疫能力。结果表明:TMH具有较强的抗氧化能力,对DPPH自由基、O_2~-·自由基的清除能力分别达到88.4%(10 mg/mL),61.0%(200 mg/L),还原能力为0.653(6 mg/L);动物试验表明,TMH可以显著提高小鼠血浆、肝脏中CAT、GSHPx、T-SOD(P0.05)活力,降低MDA(P0.05)含量并抑制羟自由基能力;显著增加血清中IgG、IgM、IL-4、IFN-γ(P0.05)的含量,提高小鼠脾脏和肝脏指数,表现出较强的抗氧化能力以及改善机体免疫功能的作用。     

黄粉虫酶解产物的制备及活性研究

为获得具有体外抗氧化和降血脂活性的黄粉虫酶解产物,文章以黄粉虫脱脂粉为原料,利用响应面分析法优化酶解工艺,并对其活性组成和体外活性进行研究。结果表明,在温度60℃、液料比30 mL/g、加酶量4800 U/g、pH10、酶解3 h条件下,酶解产物DPPH自由基消除率最高。该酶解产物中含有蛋白类物质738.17 mg/g、多糖59.42 mg/g、还原糖31.01 mg/mL、黄酮6.93 mg/g。酶解产物浓度为8 mg/mL时,对DPPH自由基、超氧阴离子、羟基自由基消除率最高,分别为76.53%、22.08%和48.73%;IC₅₀值分别为2.13、27.50 mg/mL和9.61 mg/mL,对甘氨胆酸钠结合量最大为0.055μmol/mg。研究表明黄粉虫酶解产物具有一定的体外抗氧化活性和结合甘氨胆酸钠能力,为黄粉虫酶解物在降血脂方面的应用提供了理论依据。     

黄粉虫幼虫降血压肽酶解液脱色工艺的优化

采用粉末活性炭对脱脂黄粉虫幼虫降血压肽酶解液进行脱色处理。通过单因素和正交实验,考察了活性炭用量、pH、温度和吸附时间等因素对脱色率(DE)、肽损失率(LP)和溶液对血管紧张素酶(ACE)的活性抑制率(IP)的影响。结果表明,粉末活性炭用量3%,pH3,脱色温度40℃,吸附时间50min的条件下,黄粉虫幼虫降血压肽酶解液脱色效果明显,脱色率为85·3%,ACE抑制活性为70·8%。      

鸡肉蛋白的酶解特性及酶解产物的抗氧化性研究

利用碱性蛋白酶(Alcalase)酶解鸡肉蛋白,在单因素的基础上,运用响应面(RSM)以水解度为响应值对最佳工艺进行分析,探讨最佳酶解条件。结果表明:各因素对提高水解度的重要性依次为酶的添加量>酶解温度>酶解时间>液固比;最佳实验条件为:酶的添加量5μL/g(鸡肉)、反应时间5h、温度47.3℃、pH=8.5、液固比=5,此时水解度为25.53%。对不同水解度的酶解液进行羟自由基(.OH)清除能力和抗氧化能力(AOV)研究,发现酶解产物具有明显的清除羟自由基(.OH)活性和较大的抗氧化能力(AOV),且在一定范围内抗氧化活性随着水解度的增加而增大。      

海参肠胶原蛋白酶解工艺及抗氧化性研究

目的 研究木瓜蛋白酶加酶量、pH值、酶解时间、温度对海参肠胶原蛋白水解度的影响。 方法 分别探讨4种蛋白酶对海参肠胶原蛋白水解能力, 确定以木瓜蛋白酶为最佳用酶。采用木瓜蛋白酶对海参肠进行酶解, 通过分析酶解液对Fe3 还原力、清除羟自由基及DPPH能力来研究其抗氧化活性。结果 酶解的最佳条件: 木瓜蛋白酶添加量1.0%、pH 7.0、时间4.0 h、温度65 ℃, 水解度达42.20%。结论 酶解液对Fe3 有较好的还原作用, 对羟自由基和DPPH都有很好的清除作用。     

核桃多肽的制备及其体外抗氧化性研究

以核桃蛋白为原料,以水解度为指标,通过单因素和正交试验优化了碱性蛋白酶酶解核桃蛋白制备抗氧化肽的工艺参数。得到碱性蛋白酶最佳酶解条件为酶添加量5%,底物浓度3%,酶解温度55℃,酶解p H为9.0,酶解时间6 h;在各酶最佳条件下获得的核桃多肽具有一定的抗氧化性。     

超声波频率对谷朊粉酶解产物抗氧化性的影响

随着谷朊粉产量日益增大,研究谷朊粉的新用途已经势在必行。采用碱性蛋白酶酶解谷朊粉,研究了超声波不同频率对谷朊粉水解度以及酶解产物产物抗氧化能力的影响,为拓宽谷朊粉的应用范围提供一定的理论基础。试验结果表明:经过超声波辅助酶解,水解度和酶解产物的抗氧化能力都有所提高,低频辅助酶解效果最佳,水解度提高至5.16%,比未加超声波时(空白)高出1.06%;酶解产物亚铁离子螯合能力的IC50值为0.515 mg/mL,比空白(0.792 mg/mL)小0.277 mg/mL;当酶解产物的蛋白质质量浓度为2.4 mg/mL时,还原能力达到0.378,比空白高出0.048。     

超声波对中性蛋白酶酶解谷朊粉影响的研究

以活性谷朊粉为原料,研究超声作用及超声功率对不同的底物浓度、酶浓度、反应温度、pH经中性蛋白酶水解的谷朊粉水解度的影响。结果表明,超声作用既不改变酶解反应的最适温度和pH,也不改变水解度与水解温度、pH、底物浓度、酶浓度之间关系曲线的变化趋势,但超声作用可明显提高水解度;200W的超声波对中性蛋白酶水解谷朊粉具有明显的促进作用。      

海参酶解液的体外抗氧化活性研究

分别选用木瓜蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、胰蛋白酶和菠萝蛋白酶水解海参体壁,以DPPH·清除能力、O2-·清除能力、Fe2+螯合力和还原力为抗氧化指标,研究不同海参酶解液体外抗氧化活性的差异。结果表明,随着水解时间的增加,5种酶解液基本上均表现出酶解液的抗氧化能力先增加后下降的趋势。菠萝蛋白酶和碱性蛋白酶酶解液的DPPH·清除能力和O2-·清除能力较强;胰蛋白酶酶解液的Fe2+螯合能力最强;而木瓜蛋白酶酶解液的还原力最大。从清除自由基角度上,菠萝蛋白酶和碱性蛋白酶可作为开发海参抗氧化肽的优选工具酶。      

超声波对中性蛋白酶酶解谷朊粉影响的研究

以活性谷朊粉为原料,研究超声作用及超声功率对不同的底物浓度、酶浓度、反应温度、pH经中性蛋白酶水解的谷朊粉水解度的影响。结果表明,超声作用既不改变酶解反应的最适温度和pH,也不改变水解度与水解温度、pH、底物浓度、酶浓度之间关系曲线的变化趋势,但超声作用可明显提高水解度;200W的超声波对中性蛋白酶水解谷朊粉具有明显的促进作用。     

黄粉虫成虫体内脂类抗菌物质的抑菌活性

用乙酸乙酯对黄粉虫成虫体内的脂类抗菌物质进行浸提,并用硅胶柱层析法对粗提物进行分离,检测成虫脂类抗菌物质对3种细菌(大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌)、3种病原真菌(黑曲霉、苹果炭疽、梨黑星)的抑制效果。结果表明:黄粉虫成虫脂类粗提物的乙醇洗脱成分及加热组都对革兰氏阴性菌有较好的抑制作用,且热稳定性好;成虫脂类抗菌物质对3种病原真菌均有显著的抑制效果,将其应用于食品(苹果、梨、豆腐干)防腐上也有一定的效果,脂类抗菌物质质量浓度为50mg/mL时,苹果腐烂率下降了13.24%,梨腐烂率下降了16.9 0%,并能有效延长豆腐干的保质期。     

富硒对黄粉虫蛋白分布及其酶解多肽抗氧化活性的影响

本实验讨论了富硒对黄粉虫蛋白及其硒含量的影响;按照溶解性依次提取水、盐、醇和碱四种可溶性蛋白,通过原子荧光光谱仪进行硒含量的测定;对富硒黄粉虫蛋白进行酶解来获得含硒多肽,并以红细胞溶血为模型对比了富硒前后黄粉虫水解多肽的细胞抗氧化活性。结果发现,富硒后黄粉虫蛋白所占干重比例由53.86%上升至59.12%,分子量对应75 ku和37 ku的蛋白电泳条带在富硒后变深;富硒黄粉虫中(Se-TM)总硒含量为573.32μg/kg,其中有机硒含量为524.91μg/kg,占总硒含量的91.56%;在可溶性蛋白中,硒主要存在于碱溶蛋白中,占总硒的26.62%,此外,有46.63%的硒存在于不溶性组分中;富硒黄粉虫水解得到的多肽(Se-TMP)对红细胞溶血的抑制率在样品浓度为3 mg/m L时为87.32%,在实验各样品浓度下Se-TMP对红细胞氧化溶血的抑制率均高于未富硒黄粉虫水解多肽(TMP)。     

贻贝蛋白的酶解及其酶解物的抗氧化活性研究

比较了6种不同的蛋白酶(胰蛋白酶、风味蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、复合蛋白酶、碱性蛋白酶)对贻贝粗蛋白的酶解效果,确定碱性蛋白酶为最适用酶。用此酶制备不同水解度(DH 6%、DH 11.5%、DH16%、DH 20%、DH 25%)的贻贝蛋白酶解物,考察不同DH酶解产物的抗氧化活性。试验结果表明:贻贝酶解产物具有较强的抗氧化活性,并呈一定的量效关系;当DH为25%时,贻贝酶解物对DPPH自由基、超氧自由基、羟基自由基的清除率最高,分别为77.4%、75.2%、43.4%,同时具有最强的金属螯合率(64.7%);而DH为16%时,酶解物对亚油酸的过氧化抑制作用较还原型谷胱甘肽强,达65.6%。DH对酶解产物的抗氧化活性有一定的影响,但在不同的抗氧化体系中,影响趋势不一致。     

水酶法提取黄粉虫油工艺优化

对碱性蛋白酶和胰蛋白酶复合水解黄粉虫提取黄粉虫油的工艺条件进行了研究。在酶解时间、加酶量、液料比、温度、pH五个单因素试验的基础上,以提油率为评价指标,利用响应面分析法优化了温度、加酶量、pH等酶法提取黄粉虫油的条件。优化的工艺条件为:酶解温度50.04℃,加酶量799.38U/g(原料),pH8.49,液料比5:1,酶解时间120min,此条件下提油率为78.51%。水酶法提取黄粉虫油品质优于石油醚提取,采用GC-MS法对黄粉虫油脂肪酸组成进行分析,共检出18种脂肪酸,其不饱和脂肪酸含量高达76.22%。     

黄粉虫抗菌肽的分离纯化及生物活性研究

本研究以黄粉虫为试材,采用碱性蛋白酶酶解黄粉虫蛋白制备获得了抗菌肽,并对其进行分离纯化,比较了不同组分及纯化后抗菌肽的抑菌活性、热稳定性及分子量。结果表明:大孔吸附树脂对蛋白酶酶解液动态吸附并梯度洗脱后得到5个组分,抑菌试验表明无水乙醇洗脱组分的抑菌活性最强。采用制备型HPLC对无水乙醇洗脱组分进一步纯化,得到两个组分(H-1,H-2),其中组分H-2对大肠杆菌、沙门氏菌和金黄色葡萄球菌均表现出较强的抑菌活性,且其最小抑菌浓度(MIC)为0.512 mg/m L。热稳定性试验表明,H-2具有较好的热稳定性,121℃加热20 min仍能保持较高活性。液质联用(LC-MS)结果表明,H-2的分子量为756.82u。本研究为黄粉虫抗菌肽的高效分离和纯化提供了科学依据,为黄粉虫抗菌肽在食品防腐中的应用提供了基础数据。     

黄粉虫内生菌的分离鉴定及其对淀粉、纤维素和木质素的降解活性的测定

目的 分离培养黄粉虫体内细菌, 并测定这些菌对淀粉、纤维素及木质素的降解活性。方法 对黄粉虫表面消毒, 以LB和高氏一号培养基分离虫体内部细菌并进行16S rRNA基因序列分析。变色圈法测定降解活性。结果 共分离到8株细菌, 16S rRNA基因序列分析表明, 1株属于肠球菌属, 3株属于乳酸球菌属, 2株属于芽胞杆菌属, 另2株属肠杆菌属。水解酶测定结果表明, 菌株FJAT-18107具有淀粉和木质素水解作用, 其16S rRNA基因序列与解淀粉芽胞杆菌Bacillus amyloliquefaciens (NR_075005)最相似。结论 本研究为了解昆虫内生菌功能提供了参考。     

黄粉虫油对高脂血症小鼠血脂水平及抗氧化能力的影响

目的：探讨黄粉虫油对高脂血症小鼠血脂水平及抗氧化能力的影响。方法：以高脂饲料喂养雄性ICR小鼠,建立高脂血症模型,以不同剂量(5、10、20mL/(kg·d))的黄粉虫油对小鼠进行灌胃,观察各实验组小鼠血脂水平和肝脏抗氧化能力的变化情况。结果：黄粉虫油能显著降低高脂血症小鼠血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)浓度,升高高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)的浓度,同时动脉粥样硬化指数(AI) 亦显著降低;黄粉虫油能降低小鼠肝脏丙二醛(MDA)含量,增加肝脏过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性,提高肝脏总抗氧化(T-AOC)能力。结论：黄粉虫油具有调节血脂和增强抗氧化功能的作用。     

丙酮对黄粉虫N-乙酰- β-D-氨基葡萄糖苷酶活力的影响

以丙酮为效应物,研究其对黄粉虫（Tenebrio molitor Linnaeus）N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶（NAGase）活力的影响,结果表明该酶的剩余活力随着丙酮浓度增大而呈指数下降。导致酶活力丧失50%（抑制半衰期,IC50）的丙酮浓度为7.2%,说明丙酮对黄粉虫NAGase有明显的失活作用。该酶的失活过程属于混合型,并进一步测定游离酶（E）和酶底物络合物（ES）与丙酮的结合常数（KI和KIS）,分别为5.32%和27.2%,KI〈KIS，说明底物存在对酶被丙酮的失活作用有一定的保护作用。     

大米蛋白的木瓜酶酶解及其水解物的抗氧化活性

以大米蛋白为原料,研究其酶解工艺及其水解物的抗氧化活性.选取底物浓度、加酶量、酶解pH、酶解温度为考察因素,进行了酶解工艺的单因素及正交试验.试验结果表明,底物浓度([S])10%,加酶量([E] /[S])5%,酶解pH 6.0,酶解温度60℃,酶解时间90 min为最佳酶解参数,在此条件下大米蛋白水解物的固形物含量为25.6mg/mL,对DPPH自由基清除率为54.5%.抗氧化试验显示,大米蛋白水解物具有一定的清除DPPH自由基和羟自由基能力,其IC50分别为1.738和0.238mg/mL.大米蛋白水解物同样也具有较强的还原能力.由此得出,大米蛋白水解物是一种天然的抗氧化肽.     

天然调味料——黄粉虫蛋白的开发与利用

水解黄粉虫蛋白不仅氨基酸的种类齐全，而且具有独特的香味和鲜味，将其制成营养丰富、且有保健功能的调味品，前景非常广阔。