鱿鱼肌肉蛋白肽的制备工艺优化及其抗氧化活性

以鱿鱼肌肉为原料,先考察了酶解时间、温度和加酶量对鱿鱼蛋白肽清除羟自由基的影响,再采用BoxBehnken实验设计和响应面分析对鱿鱼肌肉酶解工艺条件进行优化。同时采用清除自由基和小鼠体内抗氧化活性对抗氧化肽的抗氧化活性进行了研究。结果表明:酶解时间、加酶量对羟自由基清除率影响最为显著（p<0.01）,最佳工艺条件为:酶解时间6 h,加酶量0.07 g/10 g,酶解温度55℃。在该条件下,羟自由基清除率的验证值为90.31%±0.54%。鱿鱼抗氧化肽对DPPH·、OH·和O-2·的EC50分别为8.8、16.5和10.3 mg/m L。鱿鱼抗氧化肽高低剂量组的小鼠体内SOD活性分别比空白组高19.2%和14.2%。抗氧化肽高低剂量组小鼠体内的GSH比空白组提高了23.4%和14%。鱿鱼抗氧化肽具有较强的抗氧化活性。      

酶法制备鱿鱼皮胶原蛋白肽工艺

利用酶工程技术,以鱿鱼皮为原料,研究制备鱿鱼皮胶原蛋白肽粉。选用胃蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和alcalase蛋白酶进行试验,以产品得率和肽及氨基酸含量为评价指标,从5种蛋白酶中筛选中性蛋白酶作为水解用酶。进行不同料液比、不同加酶量和不同酶解时间的单因素试验,初步确定料液比1︰6 (kg/L),加酶量600 U/g,酶解时间6 h。在此基础上进行加酶量、温度、pH和时间的四因素三水平正交试验,确定最佳酶解条件:加酶量600 U/g,温度45℃, pH 6.0,酶解时间4 h。酶解得到的胶原蛋白肽粉呈淡黄色粉末状,糖含量为3.9%,总脂肪含量为0.19%,蛋白含量为73.57%,肽粉中的羟脯氨酸含量为6.35%,说明该肽粉营养价值较高,达到胶原蛋白肽粉的行业标准要求,在实际生产中有广阔的应用前景。     

酶法制备鸡血抗氧化肽及其抗氧化活性

以新鲜鸡血为原料,采用碱性蛋白酶酶解制备鸡血抗氧化肽。在单因素试验的基础上,以酶解液的还原能力为指标,研究pH、加酶量、酶解温度和酶解时间对鸡血酶解液抗氧化活性的影响,并运用Box-Behnken中心组合试验和响应面分析法优化制备鸡血抗氧化肽的酶解工艺条件。结果表明:碱性蛋白酶酶解鸡血的最佳工艺条件为:p H 11.3,加酶量10 335 U/g,酶解温度46℃,酶解时间78 min。在该条件下,鸡血酶解物具有良好的抗氧化活性, 15.0mg/m L的鸡血酶解物DPPH自由基清除率和羟自由基的清除率分别为64.58%和99.2%。     

鱿鱼皮胶原蛋白肽微胶囊制备及其特性研究

为增强鱿鱼皮胶原蛋白肽的稳定性,以产品包埋率和产率为指标,通过单因素和响应面试验优化喷雾干燥法制备微胶囊的最佳工艺,并对所得微胶囊的理化特性和稳定性进行分析。结果表明:以微孔淀粉为吸附载体,阿拉伯胶为壁材,微胶囊制备最佳条件为进风温度173 ℃,芯壁比1 ∶ 4,固形物含量17%,此条件下所得鱿鱼皮胶原蛋白肽包埋率为(74.65±0.05)%,样品得率为(72.32±0.16)%。所制备的微胶囊水分含量较低,溶解性较好,可接受度较高且热稳定性较强,鱿鱼皮胶原蛋白肽经微胶囊化后,在胃肠模拟消化中缓释效果显著,且消化稳定性提升。本研究结果为提升鱿鱼资源的精深加工和综合利用水平提供了一定的理论依据。     

酶解鮰鱼皮明胶制备ACE抑制肽的工艺条件优化

以斑点叉尾鮰鱼皮明胶为原料,采用风味蛋白酶对其进行水解,制备ACE抑制肽。通过单因素实验考察温度、pH、底物浓度、加酶量及酶解时间对明胶水解物ACE抑制率的影响,在此基础上,采用Box-Behnken实验设计和响应面分析对风味蛋白酶水解鮰鱼皮明胶制备ACE抑制肽的工艺条件进行优化。实验结果表明,风味蛋白酶水解鮰鱼皮明胶制备ACE抑制肽的优化工艺条件为水解温度50℃,pH7.0,底物浓度4.5%,加酶量2.5%,酶解时间3h,在此条件得到的明胶水解物的ACE抑制率为91.45%,验证实验结果为89.81%。     

酶法制备鱿鱼皮胶原蛋白肽工艺的条件优化

研究了鱿鱼皮胶原蛋白肽的酶解加工工艺条件。在单因素试验基础上,通过正交试验的方法对碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶及风味蛋白酶制备鱿鱼皮胶原蛋白肽工艺进行优化。优化的提取工艺条件如下:先用0.3%蛋白酶在p H10.5、温度47.5℃条件下水解4 h,再用0.4%木瓜蛋白酶复合风味蛋白酶按1∶2(质量比)的比例在p H 7.5、温度50℃的条件下继续水解4.5 h,结果酶解液的水解度可达28.89%、DPPH·清除率为88.24%,多肽转化率为49.74%,同时84.56%的胶原蛋白肽分子量分布介于180 Da~2 000 Da之间。在优化的酶解条件下,可以得到较好品质的胶原蛋白肽产品。     

三文鱼皮胶原肽的制备及其抗氧化活性的研究

目的:以三文鱼皮为原料,采用中性蛋白酶制备胶原肽,研究其抗氧化活性。方法:在单因素试验的基础上,利用正交试验优化工艺条件;用凝胶渗透色谱法测定酶解液分子质量分布;测定胶原肽成品清除2,2-二苯基-1-苦基肼(DPPH)自由基能力和还原力,评价其抗氧化活性。结果:最优酶解条件:酶量0.15%(以鱼皮计),鱼皮-水质量比1:3.0,酶解温度55℃,pH6.0,酶解时间6h。在此条件下,胶原肽的最高得率74.28%。酶解液中分子质量在180～1000Da之间的肽占88.08%。胶原肽成品具有较强的清除DPPH自由基能力,IC50为1.302mg/mL,同时也表现出较强的还原力,其中2.5mg/mL胶原肽的还原力是相同浓度BHT的0.69倍。结论:由本法所得胶原肽是以分子质量180～1000Da之间的寡肽(约2～8个氨基酸残基)为主的物质,具有较好的抗氧化活性。     

二步酶解法制备鱼鳞明胶抗氧化肽及其抗氧化活性研究

通过碱性蛋白酶进行第一步酶解,胰蛋白酶、风味蛋白酶、木瓜蛋白酶和胃蛋白酶分别进行第二步酶解制备鱼鳞明胶抗氧化肽。结果表明,二步酶解法能有效提高酶解物的水解度,降低水解物的分子量,碱性蛋白酶—胰蛋白酶水解物具有显著的自由基清除能力和Fe~(2+)螯合能力。通过响应面优化的胰蛋白酶最佳二步酶解工艺为:底物浓度100 mg/mL、pH 7.8、温度53℃、时间50min,该条件下制备的水解物的Fe~(2+)螯合率为65.72%,清除DPPH·、·OH和O_2~-·的IC_(50)值分别是7.39,0.68,1.84mg/mL。     

明胶抗氧化肽的分离、纯化及其清除羟自由基活性的研究

为制备具有抗氧化活性的明胶肽,本实验采用不同的酶水解明胶,并对酶解产物采用超滤技术分离,利用分光光度法检测超滤后所得多肽组分对羟基自由基(·OH)的清除能力;进一步对抗氧化活性较强的组分利用葡聚糖Sephadex C-25阳离子交换色谱、Sephadex G-50凝胶过滤色谱和C18反向高效液相色谱进行分离、纯化,并对其各组分清除·OH活性进行了研究,最后对所得洗脱组分中具有最强清除自由基活性的多肽组分的分析氨基酸组成,结果显示:组分中甘氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、赖氨酸含量较高的肽具有较好的抗氧化活性,·OH清除率达到55.37%。     

酶法提取鱿鱼皮胶原蛋白

采用酶解法提取鱿鱼皮中的胶原蛋白。通过单酶水解实验,确定中性蛋白酶为目标酶。并通过正交实验法和响应面分析法对提取过程的各个条件进行选择和优化,确定最佳提取工艺为:在经过前处理的鱿鱼皮中加入其质量5%的中性蛋白酶,按1:14(g:mL)的料液比加入蒸馏水,调其pH为7.0,51℃下酶解54min,在此条件下,胶原蛋白的提取率可达到97.7%。     

鱿鱼内脏中章鱼胺提取工艺优化及其抗氧化活性

以鱿鱼内脏为原料,以提取时间、提取温度、料液比为3个考察因素,在单因素试验基础上,通过响应面法优化鱿鱼内脏中章鱼胺的提取工艺,并探究章鱼胺体外抗氧化活性。通过高效液相色谱对鱿鱼内脏中章鱼胺进行定性定量分析。结果显示,章鱼胺最佳提取工艺参数：以5%三氯乙酸作为提取剂,提取时间2 h,提取温度34℃,料液比1∶5.2（g/mL）,此条件下鱿鱼内脏中章鱼胺得率为6.51 mg/g,与预测值6.25 mg/g较为接近。抗氧化试验研究表明,提取的章鱼胺具有明显的抗氧化活性。     

猪皮明胶肽体内抗氧化功效的研究

研究猪皮明胶木瓜蛋白酶水解物在小鼠体内的抗氧化作用。采用试剂盒测定小鼠血清、肝脏、肺、肌肉的总超氧化物歧化酶（T-SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH—PX）、过氧化氢酶（CAT）的活性、总抗氧化能力（T-AOC）和微量丙二醛（MDA）含量。实验结果表明,猪皮明胶木瓜蛋白酶水解物可以提高受试小鼠血清、肝脏、肺、肌肉中T—SOD、GSH—PX、CAT、T—AOC,而降低这些组织中MDA的含量,说明明胶肽具有一定的抗氧化活性。     

三酶法制备罗非鱼鱼皮胶原蛋白抗氧化肽及活性研究

为了探索制备罗非鱼鱼皮胶原蛋白抗氧化肽的最佳工艺,在碱性蛋白酶和胰蛋白酶酶解的基础上,以酶解温度、酶解时间、酶解pH值和酶与底物质量比([E]/[S])为试验因素,以水解度和DPPH自由基清除率为响应值,采用响应面分析法优化Orientase 20A酶的酶解条件。结果表明:最优工艺参数为:酶解温度为41.74℃、pH3.97、酶解时间为6h、[E]/[S]为1.5%,酶解液水解度和DPPH自由基清除率的预测值分别为9.42%和35.01%,验证值分别为9.57%和35.21%。响应面对酶解法制备罗非鱼鱼皮胶原蛋白抗氧化肽的酶解条件的优化是可行的,可以用于实际预测。抗氧化活性实验表明,酶解肽具有较强的清除DPPH自由基和ABTS+.能力,其IC50值分别为10.78mg/mL和8.26mg/mL。     

罗非鱼皮胶原肽的制备及抗氧化活性研究

采用酶法从罗非鱼皮中制取胶原肽,选用动物蛋白水解酶,当酶的添加量为0.5%,61℃,pH 6.7下水解3 h时,蛋白质的回收率为92.97%,水解度为9.37%.水解产物90%以上相对分子质量低于10 kD的胶原肽.胶原肽对由Fe^2＋引发的卵磷脂脂质体过氧化有一定抑制作用,同时对·OH具备一定的清除作用.     

鲑鱼皮明胶的提取及胶原蛋白肽的制备

以鲑鱼皮为原料,采用酸浸-水提法提取明胶,通过氨基酸分析以及紫外吸收光谱等方法分析明胶的理化性质。结果显示:明胶提取率为60.46%,纯度为83.92%,紫外最大吸收波长为233 nm,氨基酸组成符合明胶的特性。为得到低相对分子质量胶原蛋白肽,选用木瓜蛋白酶对明胶进行水解,系统考察水解时间、加酶量(质量分数)、底物质量分数、pH、温度对水解率的影响,并通过正交实验对各影响因素进行优化,确定最优酶解条件。结果表明:水解时间2.5 h,加酶量7%,底物质量分数10%,酶解温度55℃,pH 8.0,该工艺条件下水解度为12.65%。制备的胶原蛋白肽相对分子质量小,其中低于1 000的占91.5%。     

罗非鱼皮明胶酶解物及其模拟消化产物的抗氧化活性

以罗非鱼皮为原料提取罗非鱼皮明胶,选用风味蛋白酶和胰蛋白酶制备罗非鱼皮明胶酶解物,采用ABTS自由基、DPPH自由基、羟基自由基及亚油酸过氧化体系,初步评价罗非鱼皮明胶酶解物的抗氧化活性,再通过模拟体外胃肠道消化实验,结合分子质量分布测定,进一步考察罗非鱼皮明胶酶解物的抗氧化活性。结果显示,在酶解过程中,风味蛋白酶及胰蛋白酶酶解的水解度逐渐升高,在3 h时达到最高,分别达到5.8%和25.36%。在酶解60 min时其TCA可溶性肽得率最高,风味蛋白酶、胰蛋白酶酶解物分别达56.82%和54.44%。通过比较半抑制浓度（IC₅0）,确定了酶解60 min时风味蛋白酶酶解物的清除DPPH自由基及抑制亚油酸过氧化能力较胰蛋白酶酶解物强。模拟体外胃肠道消化后,酶解物羟基自由基清除活性均显著提高（p<0.05）,亚油酸脂质过氧化活性明显降低,消化前后样品分子量分布范围均主要集中于3000⁵000 Da,消化后风味蛋白酶及胰蛋白酶酶解物3000⁵000 Da组分的含量分别提高了45%及13%。以上研究结果表明,罗非鱼皮明胶酶解后制备的明胶水解物具有一定的抗氧化能力,具有潜在的开发价值。      

鳕鱼皮明胶肽硒复合物的制备及结构表征

以新西兰鳕鱼皮为原料,提取鳕鱼皮明胶并酶解获得鳕鱼皮明胶肽,以亚硒酸钠为硒源,制备并筛选出硒结合量较高的肽硒复合物,对其进行结构表征.结果显示,鳕鱼皮明胶胃蛋白酶酶解物的硒结合含量最高(13.61μg/mg),因此将其用于制备鳕鱼皮明胶肽硒复合物;鳕鱼皮明胶肽与硒结合后,紫外光谱吸收峰强度增大且红移,荧光光谱吸收峰由波...     

酶法水解牦牛皮蛋白制备抗氧化肽工艺的优化

以牦牛皮为原料,用碱性蛋白酶水解牦牛皮蛋白制备抗氧化肽。以水解度和牦牛皮蛋白水解物对DPPH自由基清除率的IC₅₀值为评价指标,在单因素实验的基础上,结合响应面（Box-Behnken）试验设计筛选出牦牛皮抗氧化肽的最佳制备工艺。结果表明,最佳制备工艺为:水解温度51 ℃,酶用量10890 U/g,水解时间10.6 h,pH8.5,底物浓度5%,此时水解度为41.39%±0.69%,牦牛皮抗氧化肽清除DPPH·、ABTS+·、·OH的IC₅₀值分别为2.884、2.110、2.523 mg/mL。综上,该制备工艺下的牦牛皮抗氧化肽对自由基有良好的清除能力,且有较强的还原能力,说明牦牛皮抗氧化肽有望作为天然抗氧化剂得到开发利用。     

鮰鱼皮明胶抗氧化肽的制备工艺研究

通过测定鮰鱼皮明胶蛋白酶解物对Fenton 体系产生的羟自由基的清除效果,筛选得出胰蛋白酶和胃蛋白酶酶解物具有较高的清除羟自由基(·OH)的活性;用正交试验L9(34)对胰蛋白酶的水解条件进行优化,确定最佳的水解条件为温度40℃、pH7.5、酶与底物质量浓度比(E/S)3.5%、底物质量浓度2.5g/100mL、酶解时间3h。此外,本研究还采用胰蛋白酶和胃蛋白酶进行了复合酶解试验,确定复合酶解的最佳水解条件为先用胰蛋白酶酶解3h,然后用胃蛋白酶酶解3h,此时得到的酶解液自由基清除率最高,达到47.38%。     

双酶分步水解制备鱿鱼皮胶原蛋白肽的工艺条件优化

通过单因素试验和正交试验对鱿鱼皮胶原蛋白肽的双酶分步提取工艺进行优化。碱性蛋白酶与木瓜蛋白酶分步提取的最佳工艺条件:先用0.3%碱性蛋白酶于p H10、50℃条件下水解4 h,再用0.2%木瓜蛋白酶于p H8、55℃条件下水解2 h。在此最佳水解条件下得到的鱿鱼皮胶原蛋白肽水解度为24.32%,DPPH清除率为90.34%,多肽转化率为58.68%。采用SDS-PAGE电泳初步分析所得胶原蛋白肽分子量范围,结果表明,其分子量基本小于3000 u。