茶叶多糖的纯化工艺

较系统地研究了茶叶粗多糖的初步纯化工艺。脱蛋白工艺中,三氯乙酸易降解茶多糖,Sevag法效果较好,而且以处理3次为好。比较大孔吸附树脂DM130、S8、HPD500、HZ801、AB8、NKA2和聚酰胺对茶多糖的脱色效果,结果表明聚酰胺的脱色效果和多糖保留率相对都较高,而且聚酰胺动态脱色效果比静态好。进一步脱色工艺中,DEAE-纤维素柱脱色效果好,但得率低,而且柱材料不能再生,而用Sephadex G50柱不仅效果好,柱材料还可以再生。因此,茶多糖初步纯化工艺可首先用Sevag法脱蛋白,然后用聚酰胺柱脱色,再用Sephadex G50进一步脱色,这样多糖的纯度可达到89%。     

玉米须多糖纯化工艺的研究

水提醇沉玉米须得到的粗多糖类物质,经脱蛋白脱色及凝胶色谱纯化后分别经液相色谱和气相色谱测定,研究中分别考察了Sevag法和TCA法脱蛋白效果,交联葡聚糖凝胶色谱G-75和G-100对玉米须多糖的分离效果。结果表明,玉米须多糖经过反胶束溶液脱色,脱色率达到91·43%,多糖回收率达到77·59%。Sephadex G-100对玉米须多糖分离效果较好。玉米须多糖通过高效液相色谱鉴定玉米须多糖的纯度,无单一对称峰出现,表明多糖类物质不纯。通过气相色谱测定了玉米须多糖的单糖组成为甘露糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖和果糖五种单糖。      

信阳绿茶中多糖的纯化工艺研究

探索大孔树脂对信阳绿茶中多糖的最佳纯化条件。通过对八种不同型号大孔树脂的吸附量、吸附率及解析率进行考察,优选最佳纯化树脂。AB-8型为最优树脂,最佳上样条件为:pH=1.0、上样浓度为5mg/mL、上样速度为2.0BV/h;最佳洗脱条件为:70%的乙醇洗脱液、洗脱剂用量为3.0BV、流速为1.0BV/h。经过该工艺纯化后,绿茶中多糖的纯度由10.6%提高到了64.3%。得出AB-8型大孔树脂能够很好的富集、纯化绿茶中的多糖,为更高效的利用绿茶资源提供了理论依据。     

普洱茶多糖分离及纯化

研究10种树脂对普洱茶多糖溶液色素脱除的效果,比较sevag法、三氯乙酸法、盐酸等电点法对普洱茶多糖的脱蛋白质效果.脱色、脱蛋白后的茶多糖经冷冻干燥、透析后,再用DEAE-52纤维素柱层析分离纯化.结果表明:D101大孔吸附树脂为普洱茶多糖脱色的最佳树脂,脱色率为72.27%,多糖保留率为46.97%,脱蛋白率为71.38%;三氯乙酸的脱蛋白效果最佳,添加2%(体积分数)质量分数为50%的三氯乙酸可脱除95.2%的蛋白质;选择水和NaCl溶液作为洗脱剂的温和条件,DEAE-52纤维素柱水洗脱的多糖得率最高,为51.23%.     

凉粉草多糖提取及纯化工艺的研究

研究Na2CO3浓度、料液比、提取时间对多糖提取率的影响,双氧水浓度和加入量对多糖脱色效果的影响,比较截留分子量为10K与50K中空纤维膜管对多糖超滤纯化的效果。结果发现,凉粉草多糖的最佳提取工艺为:碳酸钠溶液1.5%(M/V),料液比9/250(M/V),提取1.5h。在此条件下,测得凉粉草多糖的提取率为41.00%,总糖含量为3.495%;100mL料液中加入10%的双氧水20mL时脱色效果可达超滤工艺要求;截留分子量为10K的中空纤维膜管在超滤后多糖的保留率高于50K的。因此可选择截留分子量10K的中空纤维膜管对凉粉草多糖进行纯化。     

苦荞茶多糖的体外抗氧化活性及其分离纯化

对苦荞茶多糖(tartary buckwheat tea polysaccharide,TBTP)进行分离纯化和活性分析,为苦荞的进一步推广和应用提供理论依据。采用水提醇沉法获得TBTP,利用苯酚-硫酸法测定粗多糖中的糖含量,通过体外抗氧化评价体系研究TBTP对DPPH自由基、羟基自由基(·OH)、超氧阴离子(O2-·)的清除活性以及TBTP的总还原能力,并利用DEAE-52纤维素和G-150葡聚糖凝胶柱对获得的粗多糖进行纯化、分组。结果表明:TBTP的多糖含量为58.75%;在质量浓度为8.0 mg/m L时,对DPPH·的清除率为94.16%,对·OH的清除率为82.25%;在质量浓度为4.0 mg/m L时,对O2-·的清除率为98.05%。同时经DEAE-52纤维素和G-150葡聚糖凝胶柱对TBTP进行分离纯化后,将TBTP分为3个成分均一的组分,分别为TBTP-1、TBTP-2、TBTP-3。苦荞茶作为食源性物质,其多糖有明显的抗氧化活性。DEAE-52纤维素和G-150葡聚糖凝胶柱对该多糖有很好的分离、纯化效果。     

银杏外种皮多糖的提取和纯化工艺研究

考察温度、料液比、时间以及提取次数对多糖提取率的影响,确定最佳提取条件。水提醇沉得到的银杏外种皮中多糖（GBEP）含有一定的蛋白质,以多糖的损失率和蛋白质的去除率为指标,比较三种方法:三氯乙酸法、Sevage法、酶法去除GBEP中蛋白质的效率。结果表明,用酶法除蛋白时,多糖的损失率最低;Sevage法除蛋白最彻底,重复多次操作后可以得到不含蛋白质的多糖,虽然多糖损失较多,但有利于进一步的实验研究。AB-8树脂对多糖脱色率为66.35%。      

银杏外种皮多糖的提取和纯化工艺研究

考察温度、料液比、时间以及提取次数对多糖提取率的影响,确定最佳提取条件。水提醇沉得到的银杏外种皮中多糖(GBEP)含有一定的蛋白质,以多糖的损失率和蛋白质的去除率为指标,比较三种方法:三氯乙酸法、Sevage法、酶法去除GBEP中蛋白质的效率。结果表明,用酶法除蛋白时,多糖的损失率最低;Sevage法除蛋白最彻底,重复多次操作后可以得到不含蛋白质的多糖,虽然多糖损失较多,但有利于进一步的实验研究。AB-8树脂对多糖脱色率为66.35%。     

茶多糖的提取、分离、纯化、组成研究概况

茶多糖（TPS）是茶叶中的一种生理活性物质,是一类与蛋白质结合在一起的酸性多糖或酸性糖蛋白总称,具有降血糖、降血脂、防辐射、增强机体免疫力等广泛的药理作用。本文就其提取、分离、纯化及组成的研究进展作一综述。     

南瓜多糖的提取及纯化

南瓜是一种具有药用价值的食品,实验用热水浸提、醇析、Severge法除蛋白,水相透析得到南瓜粗多糖,通过DEAE-Sepharose和SephadexG-100柱的分离纯化得到2种水溶性多糖,经酸解,纸色谱分析得组分1的单糖组成为D-葡萄糖、L-阿拉伯糖、D-半乳糖和葡萄糖醛酸,组分2的单糖组成为D-葡萄糖、D-半乳糖、D-木糖和葡萄糖醛酸。     

茶叶粗多糖的提取及纯化研究

利用Sevag法脱游离蛋白、乙醇沉淀、二次透析等手段得到了初步纯化的茶叶粗多糖,该粗多糖经SephadexG100凝胶柱层析纯化,0.1mol/LNaCl洗脱,获得一较大组分,命名为TGP,通过凝胶渗透法测定其平均分子量为6×104道尔顿.     

茶叶多糖的提取纯化及其单糖组分的鉴定

研究了用水煮醇沉法提取茶叶多糖,用savage法除蛋白,苯酚-硫酸法测多糖含量,通过正交试验确定茶叶多糖的最佳提取条件;粗多糖经Sephadex-100柱层析纯化,得到精制茶叶多糖;薄层层析法鉴定单糖组分。结果表明:最佳提取条件为95℃,料液比1∶20(g:mL),提取时间2h,提取3次,茶叶多糖含量为35.92mg/g。茶叶多糖中含有2种不同的多糖,水解得到单糖D-半乳糖、D-甘露糖、D-葡萄糖、L-阿拉伯糖等。     

乌龙茶多糖的聚酰胺柱层析法纯化工艺

为研究乌龙茶多糖（oolong tea polysaccharides,OTPS）聚酰胺柱层析脱色脱蛋白的效果,首先采用单因素试验,以脱色率、脱蛋白率和多糖保留率为评价指标,从上样量、上样体积、吸附平衡时间以及洗脱速率4 个方面确定了聚酰胺柱层析的洗脱条件。然后通过脱色率、脱蛋白率、多糖保留率、产品得率和抗氧化活性5 个方面,比较了OTPS聚酰胺柱层析与常用的Sevag-H2O2联用法脱色脱蛋白的效果。结果表明：OTPS聚酰胺柱层析法脱色脱蛋白的最佳工艺条件为4 mg OTPS/mL聚酰胺,2/5 倍柱体积去离子水溶解上样,吸附平衡20 min,3 mL/min速率洗脱;聚酰胺柱层析对OTPS的脱色率和脱蛋白率略低于Sevag-H2O2联用法,但多糖保留率、产品得率和抗氧化活性显著高于Sevag-H2O2联用法,而且方法简单,无环境污染,是一种较好的OTPS脱色脱蛋白方法,也可应用于其他多糖的脱色脱蛋白。     

茶叶酸性多糖的分离、纯化及其理化性质研究

采用水提醇沉法从采自江西婺源的粗老绿茶中提取茶叶多糖,通过Sevag法脱蛋白得到精制茶叶多糖,应用高效凝胶渗透色谱法（high performance gel permeation chromatography,HPGPC）分析茶叶多糖纯度并测定其分子质量,进一步测定茶叶多糖的糖含量、蛋白质含量、单糖组成、糖醛酸组成等理化指标,同时对其进行紫外和红外光谱扫描,考察其光谱性质。结果表明：该茶叶多糖组分为均一性高的酸性多糖组分,分子质量约为289 734 D,糖含量为55.1%,蛋白质含量为1.8%。该茶叶多糖酸性组分主要由鼠李糖、核糖、阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖组成,其物质的量比为1.26∶3.18∶4.08∶1.00∶1.52∶3.92,该茶叶多糖酸性组分中含有大量半乳糖醛酸,含量为33.5%。     

茶多糖的结构特征与降血糖活性

探讨茶多糖的结构特征与抗糖尿病机制,为多糖的应用与糖尿病天然药物的开发提供理论依据。从粗老茶叶中分离茶多糖并纯化,分析了其单糖组成、分子质量、紫外与红外吸收特征。以四氧嘧啶诱导小鼠非肥胖型糖尿病,茶多糖以100 mg/（kg·d）剂量灌胃治疗糖尿病小鼠42 d,以格列本脲为阳性药物对照,测定血清和肝脏中的空腹血糖浓度、血清胰岛素含量和总抗氧化状态,苏木精-伊红染色法观察胰岛、肝脏组织变化。结果表明,从粗老茶叶中分离的茶多糖分子质量为119 600 Da,由D-葡萄糖醛酸、鼠李糖、D-岩藻糖、L-阿拉伯糖、D-木糖、D-甘露糖、D-葡萄糖和D-半乳糖8 种单糖组成,其物质的量比为32.61∶1.00∶5.46∶8.13∶3.84∶2.37∶15.36∶7.52,紫外与红外光谱扫描结果推测其可能为一种不含蛋白、核酸的吡喃型酸性杂多糖。茶多糖药物组小鼠肝糖原含量显著升高,血糖浓度从18.98 mmol/L降至正常水平,其血浆和胰脏中胰岛素含量与正常组无显著差异（P＞0.05）,血清与肝脏中超氧化物歧化酶活力显著高于四氧嘧啶模型组（P＜0.05）,而肝脏中一氧化氮合酶活力和丙二醛含量接近阴性组水平,一氧化氮含量显著低于模型组（P＜0.05）,其作用效果与格列本脲相近。病理组织形态学结果显示,茶多糖药物组小鼠胰岛β细胞得到修复,肝脏组织病理形态恢复正常。本研究表明茶多糖通过改善胰岛素分泌、胰岛β细胞功能和抗氧化状态发挥抗糖尿病作用。     

茶多糖的分离纯化及其抗凝血活性

为了研究茶多糖不同组分对抗凝血活性的影响,通过水提醇沉的方法对茶多糖进行提取,经聚酰胺柱脱色、脱蛋白,采用离子交换柱DEAE Sepharose CL-6B对多糖进行分离纯化,用高效凝胶渗透色谱测定其分子量,并对多糖组分抗凝血活性进行了研究。结果表明:聚酰胺法脱色、脱蛋白效果较好,脱色率、蛋白去除率和多糖保留率分别为75.1%、91.2%和79.2%;经纯化后得到4个组分,分别为TPS-1、TPS-2、TPS-3和TPS-4;HPGPC法测定TPS-1、TPS-2和TPS-3分子量分别为20760、24230和250643,为均一多糖,TPS-4含两个组分,其分子量分别为689 113和4 150,为非均一多糖。体外抗凝血实验显示TPS-4能延长活化部分凝血活酶时间(APTT)和凝血酶时间(TT),说明是通过内源性途径来影响凝血的。     

茶多糖对小鼠肠道健康及免疫调节功能的影响

本实验以从江西婺源绿茶中提取的茶多糖(tea polysaccharides,TPS)为研究材料,研究不同剂量TPS对正常小鼠肠道健康及免疫调节功能的影响。实验小鼠随机分为正常组和低、中、高剂量TPS干预组。TPS干预21 d后,收集小鼠腹腔巨噬细胞,进行中性红吞噬实验检测腹腔巨噬细胞的吞噬能力,解剖获取小鼠脾脏、胸腺后称其质量并计算脾指数和胸腺指数。气相色谱法检测小鼠结肠内容物中短链脂肪酸(short chain fatty acids,SCFAs)的含量;靛酚蓝比色法测定结肠内容物中氨含量;p H计检测结肠内容物p H值;恒质量法检测结肠内容物含水量。结果显示:高、中、低剂量TPS干预组的小鼠免疫器官指数均显著增大,腹腔巨噬细胞吞噬能力呈剂量依赖性增强,结肠内容物的乙酸,丙酸和正丁酸的含量升高,而异丁酸、正戊酸、异戊酸的含量无明显变化;结肠内容物中氨含量下降,结肠内容物p H值下降,含水量升高。实验结果提示TPS具免疫调节功能及促进小鼠肠道健康的作用。     

水法提取茶多糖工艺条件优化

本文研究了茶多糖提取工艺中浸提时间、浸提温度、料水比、浸提次数对茶多糖提取率的影响，并对这4个工艺参数进行了优化。结果表明，浸提时间、料水比和浸提次数对茶多糖提取率的影响程度都达到高度显著水平，浸提温度对茶多糖提取率没有显著影响，二次回归方程为：Y=-4．279 0．006A 0．045B 87．03C-0．392D-470．96C^2 0．212D^2。岭脊分析结果表明水法提取茶多糖的最佳工艺条件为：浸提时间90min，浸提温度为70℃，料水比1：10，浸提次数3次．     

响应面法优化超声-微波协同辅助提取茶多糖工艺

以水作为提取溶剂,粗绿茶作为原料,通过响应面优化超声-微波协同辅助提取茶多糖的最佳工艺条件,比较传统水浴浸提法和超声-微波协同辅助提取法对茶多糖得率、纯度和结构的影响。结果表明:超声-微波协同辅助提取茶多糖的最佳工艺条件为提取时间23min、料液比1:30(g/mL)、微波功率90W。与传统的水浴浸提法相比,超声-微波协同辅助提取法在较短的超声提取时间下,茶多糖的得率从2.95%提高到4.19%,纯度从70.15%提高到86.08%,两种提取方法所得的茶多糖基团基本相同。     

香薷多糖的提取与纯化研究

利用热水浸提、乙醇醇沉提取水溶性香薷粗多糖,脱蛋白、除色素后所得的精制多糖经DEAE-52 纤维素阴离子交换色谱得两个组分Ⅰ和Ⅱ。主要组分Ⅱ经Sephacryl S-300 葡聚糖凝胶色谱进一步纯化,得单一多糖组分,命名为HMP Ⅱ。经高效凝胶渗透色谱检测其纯度为93.55%。