紫苏细胞悬浮培养生产迷迭香酸条件研究

通过诱导紫苏下胚轴和子叶外植体产生愈伤组织,建立细胞悬浮培养体系,以提高细胞产量及细胞中迷迭香酸含量。结果表明,在MS液体培养上添加3.0mg/L 6-芐氨基嘌呤(6-BA)＋0.3mg/L萘乙酸(NAA)培养基上,下胚轴愈伤组织呈嫩黄色松散状态,出愈时间短,出愈率可达100%。紫苏细胞悬浮培养产生迷迭香酸的最佳条件为培养时间7d、接种量鲜质量浓度20g/L、摇床转速110r/min、蔗糖30g/L、L-苯丙氨酸0.15g/L,此条件下可获得高达2.283mg/g的迷迭香酸。     

祈州漏芦的组织培养与快繁技术研究

目的：对祁州漏芦愈伤组织诱导培养基和生长的培养条件进行研究,构建祁州漏芦快速繁殖体系。方法：通过筛选外植体,添加不同种类及浓度的生长调节剂对祁州漏芦进行愈伤组织诱导、芽增殖培养及生根培养。结果：诱导愈伤组织适宜培养基：MS＋0.3mg/L NAA＋3.0mg/L 6-BA;芽增殖培养以MS＋0.3mg/L NAA＋5.0mg/L 6-BA为宜;生根培养以1/2MS＋0.1mg/L NAA为佳。结论：利用组织培养技术能够实现祁州漏芦快速繁殖。     

二步培养和AgNO3对甘蓝型油菜子叶和下胚轴芽再生的影响

以甘蓝型油菜（Brassica napus L．）品种浙双758为材料,研究二步培养及添加AgNO3对甘蓝型油菜子叶和下胚轴外植体离体再生的影响。外植体先在含0．5—1．5mg／L2,4-D的MS培养基上预培养3d或7d诱导愈伤组织的产生,再转到含有3mg／LBA和0．15mg／LNAA及添加或不添加2．5mg／LAgNO3的分化培养基上诱导芽的分化。结果表明,外植体愈伤组织诱导率和芽再生率与2,4-D浓度、预培养时间和AgNO3密切相关;分化培养基中添加银离子可显著增加不定芽的再生频率;二步培养及添加AgNO3可使半子叶、完整子叶和下胚轴外植体芽再生频率分别达到了96．1％,96．7％和96．7％。     

基因工程方法抗甜菜丛根病病毒育种的研究(Ⅰ)甜菜坏死黄脉病毒外壳蛋白基因转化甜菜及植株再生

采用含有甜菜坏死黄脉病毒外壳蛋白(BNYVV CP)基因的农杆菌, 分别以不同甜菜品系的叶柄、下胚轴及子叶为外植体材料进行基因转化研究.含有BNYVV CP 基因和卡那霉素抗性筛选基因(Kanr)的农杆菌与甜菜组织不同外植体共培养后,经过诱导分化培养,在含有卡那霉素(kanamycin)的培养基上,从叶柄及下胚轴分别直接诱导出抗卡那霉素再生芽,而从子叶上只诱导出紧密型绿色愈伤组织,未分化出不定芽.从叶柄及下胚轴诱导再生芽的诱导培养基分别为:MS+BA0.5+TIBA0.2+3%蔗糖+Kan200+Cb500、MS+BA0. 15+NAA0.2+3%蔗糖+Kan100+Cb500.甜菜再生植株诱导频率与甜菜品系、外植体类型、苗龄、温度、TIBA、预处理等因素有关.再生植株生根培养基为:MS+IBA2.0+2%蔗糖+Kan50.     

草珊瑚的组织培养及植株再生研究

目的 草珊瑚茎段离体培养研究,解决草珊瑚人工栽培中种苗短缺问题.方法 用茎段作外植体,以MS,White,N6和B5为基本培养基,附加不同浓度的激素进行培养.结果 MS基本培养基较佳;芽的初代诱导用MS BA 1.0 mg/L,诱导率80%;增殖继代用MS BA 2.0 mg/L NAA0.3 mg/L培养基,增殖系数达6.2;根的诱导用1/2MS IBA1.0 mg/L培养基,生根率100%.结论 本研究得出的方法可为栽培草珊瑚提供大量种苗.     

亚麻高效再生体系的优化研究

为了优化亚麻再生体系,对基因型、外植体的选择部位、基本培养基、植物生长调节剂等影响亚麻植株再生的因素进行了优化,建立了亚麻下胚轴高效组织培养再生体系.结果表明,亚麻种子消毒采用75%乙醇处理3min,再用0.1%升汞灭菌3min效果最好;亚麻下胚轴的下部是最佳外植体;在Y4培养基下（MS1＋NAA0.02mg/L＋6-BA1mg/L）,亚麻愈伤组织的诱导率和分化率最高,分别达到98.89%和95.56%;最佳生根培养基是1/2MS＋NAA0.001mg/L,生根率达90%;同时可以看出,不同基因型再生能力不同.与派克斯和华星009相比,再生能力最强的品种是中亚2号.通过再生体系优化使亚麻愈伤组织的诱导率和分化率以及再生植株的生根率都有所提高.     

云烟87烤烟品种突变株的离体快繁技术研究

以云烟87烤烟品种突变巨型株的休眠芽为试材,对其进行了打破休眠促使萌芽、愈伤组织诱导、丛生芽增殖和生根培养的研究。结果表明:打破休眠促使其萌芽的最佳培养基配方为MS+2.0mg/L 6-BA+1.0mg/L NAA;诱导产生愈伤组织效果最佳的培养基配方为MS+3.0mg/L 6-BA+0.3mg/L NAA;丛生芽增殖效果最佳的培养基为MS+1.0mg/L 6-BA+0.3mg/L NAA;MS+0.6mg/L NAA对根系的生长最为有利。      

花生组织培养及高频率植株再生

以14个花生品种为材料,对花生组织培养及植株再生进行了研究。将花生成熟胚幼叶、子叶和下胚轴外植体接种到添加0—2mg／LNAA和0～10mg／LBAP的MSB,（MS无机盐＋B5有机）培养基上诱导愈伤,再转到添加0～10mg／LBAP的分化培养基上诱导不定芽。结果表明,诱导培养基中添加的激素及其浓度对以后在分化培养基上不定芽分化有重要作用,以添加1mg／LNAA和6mg／LBAP最利于不定芽分化;分化培养基中添加4mg／LBAP利于不定芽伸长及植株再生;幼叶外植体分化不定芽频率明显高于子叶和下胚轴;不同基因型不定芽分化率存在明显差异,白沙1016和花育23幼叶外植体获得了较高的不定芽分化率,分别达到91．8％和88．5％。再生苗经生根培养和驯化后,移栽花盆可正常开花结果。     

尾穗苋种子萌发及愈伤组织的诱导研究

以尾穗苋为实验材料,对种子萌发形成无菌苗的影响因素进行了优化,并探讨了不同激素配比对尾穗苋无菌苗下胚轴和子叶愈伤组织诱导的影响.结果表明,采用0.01%升汞消毒l min,l/2MS(所有元素均减半)培养基及暗培养1 d,第7 d的种子萌发率高达82.7%;以MS+6-BA0.5mg/L+2,4-D 0.5mg/L的培养基诱导尾穗苋子叶和下胚轴形成愈伤组织效果较好,均达到100%.     

花生胚小叶的离体再生及筛选压力选择

以花生胚小叶为外植体优化离体再生条件,通过对再生苗进行筛选,为外源基因的遗传转化提供实验依据。研究表明,不同基因型胚小叶的再生能力差异显著,在供试基因型中以中花8号不定芽诱导率和成苗率最高,且外植体状态最好。中花8号胚小叶再生的最佳诱导培养基为MSB（MS无机盐＋B5有机成分）＋6-BA（4.5mg/L）＋NAA（1mg/L）＋AgNO3（2mg/L）,最佳诱导培养时间为21d。对中花8号再生苗进行筛选浓度实验,草丁膦（PPT）为20mg/L时,可筛选出抗性苗;300mg/L的卡那霉素（Km）可用于较小幼苗筛选,而对较大幼苗则需将Km的浓度提高至400mg/L以上。     

甘蔗新品种桂糖48号的组织培养技术研究

甘蔗组织培养技术是加速繁殖新品种和加快新品种大面积推广的主要手段,不同品种的离体培养中其培养基中激素配比存在差异,因此筛选合适培养基是提高品种快繁效率的关键。本文以桂糖48号为材料,以MS基本培养基加外源激素浓度梯度进行试验处理设计,对品种的愈伤组织诱导、愈伤分化、试管苗增殖和生根阶段进行培养基筛选试验,以其筛选出最合适桂糖48号的培养基配方。试验结果表明:诱导愈伤组织培养基为MS+2,4-D 3.0 mg/L;愈伤组织分化培养基为MS+BA 1.0 mg/L;初代增殖培养基为MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L+GA 0.5 g/L;继代培养基为MS+BA 2.0 mg/L+NAA 0.1mg/L;生根培养基为1/2 MS+NAA 12 mg/L。在该培养基下,生根最好,苗绿,比较高,长势好,对加快甘蔗新品种桂糖48号在广西大面积推广起到积极的作用。     

基因工程方法抗甜菜丛根病病毒育种的研究：（Ⅰ）甜菜坏死黄脉病毒外 …

采用含有甜菜坏互黄脉病毒外壳蛋白（ＢＮＹＶＶ ＣＰ）基因的农杆菌，分别以不同甜菜品系的叶柄、下胚轴及子叶为外植体材料进行基因转化研究。含有ＢＮＹＶＶ ＣＰ基因和卡那抗性筛选基因的农杆菌与甜菜组织不同外植体共培养后，经过诱导分化培养，在含有卡那霉素的培养基上，从叶柄及下胚轴分别直接诱导出抗卡那霉素再生芽，而从子叶上只诱导出紧密型绿色愈伤组织，未分化出不定芽。从叶柄及下胚轴诱导两生芽的诱导培养基分别为     

烟草愈伤组织的诱导及细胞悬浮培养体系的建立

以鄂烟1号无菌苗的叶为材料进行愈伤组织的诱导,筛选出生长培养基的最佳激素配比,初步建立了烟草细胞悬浮培养体系。结果表明,愈伤组织诱导的最优基本培养基为MS培养基,以MS NAA1.0mg/L 6-BA0.5mg/L为最佳配方;愈伤组织最佳生长培养基为MS 2,4-D0.1mg/L NAA1.5mg/L 6-BA0.3mg/L,愈伤组织培养第6天进入对数生长期,第14天干重增至最初干重的12.536倍,并以此配方建立了烟草细胞悬浮培养体系。     

利用青海大黄油菜和芥蓝合成大粒甘蓝型油菜

利用青海大黄油菜（QD,2n=20,AA）与几种不同的甘蓝（CC,2n=18）正反杂交,辅以幼胚抢救、子房培养和染色体加倍技术人工合成甘蓝型油菜。结果表明：以QD为母本的多个杂交组合获得69株杂种苗,反交组合均未得到正常发育的胚。与中迟芥蓝杂交后的QD子房在MS、1/2MS、MS＋0.2mg/L 6-BA三种培养基中得胚率依次为15.5%、8.9%和4.4%,共获得24个杂种胚,而在MS＋1.5mg/L 6-BA＋0.25mg/L NAA分化培养基上角果内未发现成熟胚。染色体加倍处理结果表明,在培养基中添加秋水仙素后加倍率最高（59.4%～86.4%）。SSR分子标记结果显示：受试材料全部为真杂种,并且没有出现新增带和缺失带。人工甘蓝型油菜在形态上介于双亲之间,千粒重较高,达到5.48g～7.45g,显著高于甘蓝型油菜品种青油14号和中双4号。     

蓖麻组织培养和植株再生的研究

建立了一种有效的蓖麻植株再生体系。以蓖麻成熟种子胚轴为外植体,在含6-BA（0．5mg／L）的MS培养基上每个外植体均能诱导出由若干不定芽组成的丛生芽,平均每个外植体可产生6．3个不定芽,健壮的不定芽经伸长、生根而发育成完整的再生植株并能全部移栽成活。本实验所用的3个蓖麻品种在产生不定芽的能力和数量上没有明显差异。利用该体系所诱导的不定芽具有生长健壮和易于生长发育等特点。该再生体系的建立为蓖麻遗传转化研究奠定了基础。     

苯乙酸对烟草单倍体植株叶脉组织培养一步成苗的效应研究

本研究探明了苯乙酸(PAA)对烟草单倍体植株叶脉切段培养一步成苗的效应,发现PAA与NAA、6-BA配合使用能有效促进一步成苗的发生。试验证明PAA对一步成苗的促进效应与各种激素浓度配比和基本培养基的种类有关,与基因型的关系不明显。烟草单倍体植株叶脉切段培养一步成苗的最佳培养基配方为MS+PAA 20 mg/L+NAA 0.5 mg/L+6-BA 1.0 mg/L+谷氨酰胺50 mg/L+麦芽糖30 g/L。试验还证明,与2,4-D诱导产生愈伤组织途径的多级成苗培养相比,本研究建立的PAA一步成苗培养具有以下优点:1)显著提高愈伤组织的诱导率;2)显著提高愈伤组织的质量,有效提高愈伤组织分化率;3)成苗率显著高于多级成苗;4)再生植株具有更好的幼苗素质;5)再生植株的染色体数目变异率也显著低于多级成苗;6)获得双单倍体植株的频率显著高于多级成苗;7)能有效缩短培养周期、节约成本。