乳清蛋白糖基化反应特性及抗氧化性的研究

通过干热糖基化反应,选择7种不同的糖基配体,研究乳清蛋白不同糖基复合物的反应特性及抗氧化特性.结果表明,在干热糖基化反应前后,7种糖类与乳清蛋白复合物在420 nm和294nm处的吸光值差异显著(P<0.05);除乳清蛋白-蔗糖复合物外,其他6种乳清蛋白糖基复合物的游离氨基酸含量均显著降低(P<0.05).除了乳清蛋白-阿拉伯胶和乳清蛋白-蔗糖复合物外,其他乳清蛋白糖基化复合物的还原能力和DPPH自由基清除能力都有所提高.乳清蛋白-乳糖复合物的抗氧化能力提高最大,而且具有比Vc和BHA更高的还原能力.     

改性乳清蛋白体外抗氧化特性

以木糖、葡萄糖、果糖、乳糖、麦芽糖、蔗糖和乳清蛋白为美拉德反应原料,按照一定比例进行湿热糖基化反应。结果表明:在湿热糖基化反应后,6种糖类与乳清蛋白复合物在420 nm和294 nm处的吸光值差异显著(P<0.05);除乳清蛋白-蔗糖复合物外,其他5种乳清蛋白糖基复合物的游离氨基酸含量均显著降低(P<0.05)。除了乳清蛋白-蔗糖复合物外,其他5种乳清蛋白糖基化复合物随浓度的增加,还原能力和DPPH自由基清除能力都有所提高,其中乳清蛋白-木糖复合物的抗氧化能力提高最大,而且SDS-PAGE显示乳清蛋白-木糖复合物反应后分子质量明显增大;傅里叶红外光谱(FTIR)结果显示,乳清蛋白-木糖和乳清蛋白-葡萄糖复合物中蛋白质的酰胺I和II明显减少。     

乳清蛋白菊粉糖基化复合物的褐变特性与抗氧化活性

以褐变程度及抗氧化活性为检测指标,研究湿热反应条件对乳清蛋白菊粉糖基化复合物的褐变特性与抗氧化活性的影响。研究结果表明:反应物浓度越大,反应温度越高,乳清蛋白菊粉糖基化产物的褐变强度越大,抗氧化活性越强;起始反应pH值越大,乳清蛋白菊粉糖基化产物的褐变强度及还原能力越强,而其DPPH.清除能力呈现先升高后降低的趋势。当反应物浓度为6%,温度为100℃,起始反应pH值为9时,所获得的乳清蛋白糖基化产物抗氧化活性较强。     

高压均质对乳清蛋白糖基化产物抗氧化的影响

通过干法糖基化,以一定质量比例乳清蛋白和岩藻多糖(1︰3)作为糖基化反应原料,研究不同均质压力(0, 70和120 MPa)条件下乳清蛋白和岩藻多糖糖基化产物反应特性以及体外抗氧化活性。试验结果表明,高压均质可促进蛋白质和多糖的糖基化反应,乳清蛋白-岩藻多糖混合物在294 nm和420 nm的吸光度随着均质压力的增加而显著变化(p0.05), 120 MPa条件处理下的样品的褐变程度要远大于未处理组。DPPH自由基清除率试验结果表明,乳清蛋白-岩藻多糖混合物经高压均质处理后可提高其抗氧化能力,但是随着糖基化反应进行,乳清蛋白-岩藻多糖糖基化产物DPPH自由基清除率无显著差异(p0.05)。     

葡聚糖糖基化处理对绿豆蛋白抗氧化性影响研究

以绿豆分离蛋白(MBPI)和葡聚糖为原料,通过湿热法制备MBPI-Dextran共价复合物。本研究通过测定产物的还原力、DPPH自由基清除能力、超氧阴离子自由基、羟自由基清除能力共同评价糖基化反应对MBPI抗氧化能力的影响。结果表明:MBPI-Dextran共价复合物具有一定的抗氧化能力,特别是90℃条件下反应得到的产物,抗氧化能力较80℃产物显著提升,这与美拉德反应程度有关,较高温度下美拉德反应进程加快,促使更多具有抗氧化能力的物质生成。因此,糖基化改性后的绿豆蛋白在抗氧化能力研究上具有一定的应用价值。     

L-赖氨酸与3种还原糖美拉德反应产物的理化特性及抗氧化活性

研究还原糖种类和反应时间对美拉德反应产物(Maillard reaction products,MRPs)理化特性和抗氧化活性的影响,采用L-赖氨酸与3种还原糖(D-葡萄糖、D-果糖、D-半乳糖)按浓度比1:1、95℃加热条件进行反应,分别得到0～6h的MRPs,测定MRPs的pH值、吸光度(A294nm和A420nm)、荧光强度、游离氨基含量以及还原能力和ABTS+.清除能力。结果表明:随着加热时间的延长,3个体系的pH值逐渐降低(P<0.05);无荧光中间产物(A294nm)和褐变产物(A420nm)显著增加(P<0.05);荧光强度在加热开始1h内急剧增加随后减小(P<0.05);游离氨基的含量逐渐降低(P<0.05);同时,MRPs的还原能力和ABTS+.清除活性显著增加(P<0.05)。在3种反应体系中,L-赖氨酸与D-半乳糖反应产生的MRPs具有最多的中间产物和最大程度的褐变,以及最强的还原能力和ABTS+.清除能力。由于L-赖氨酸与还原糖反应产生的MRPs具有一定的抗氧化活性和自由基清除能力,所以可以作为一种有效的抗氧化剂应用于食品工业中。     

温度条件对乳清蛋白糖基化反应特性和抗氧化活性的影响

利用糖基化修饰技术,以乳清分离蛋白(WPI)为研究对象,以褐变程度、pH值以及抗氧化活性为检测指标,研究反应温度对乳清蛋白糖基化反应特性和抗氧化活性的影响。研究结果表明:反应温度越高,糖基化反应后产物的pH值越低,褐变程度越大,抗氧化活性越强。不同类型糖基复合物的抗氧化活性随反应温度增大有不同程度的提高,其他核糖-WPI体系中抗氧化活性最强,其次分别为半乳糖-WPI>果糖-WPI>葡萄糖-WPI>乳糖-WPI。     

小麦胚芽蛋白糖基化产物抗氧化特性研究

目的：探究小麦胚芽蛋白糖基化产物的抗氧化特性。方法：采用超声波辅助湿热法制备小麦胚芽蛋白（WGP）与葡萄糖（Glucose）的糖基化产物（WGP-G），通过测定不同超声时间（10，20，30，40，50，60 min）、不同反应温度（70，80，90 ℃）下WGP-G的褐变程度、接枝度、还原能力、羟自由基清除能力、超氧阴离子自由基、DPPH自由基清除能力和ABTS⁺自由基清除能力等指标，综合评价糖基化反应对WGP抗氧化能力的影响。结果：WGP-G褐变度随超声时间和反应温度的不断增大而增大，接枝度、还原能力、羟自由基清除能力、超氧阴离子自由基清除能力、DPPH自由基清除能力和ABTS⁺自由基清除能力均随反应温度的不断增大而增大，但随超声时间的延长呈先增大后减小趋势。结论：超声时间和反应温度均能影响WGP-G的抗氧化特性。     

由碱性蛋白酶制备的乳清蛋白水解物抗氧化活性的研究

通过碱性蛋白酶水解乳清蛋白以研究乳清蛋白水解物的抗氧化活性。通过测定水解物对卵磷脂脂质氧化体系的氧化抑制作用、亚铁还原能力、DPPH自由基清除能力,研究乳清多肽抗氧化活性的大小。结果表明,乳清多肽的抗氧化能力与底物浓度、加酶量、水解时间、pH值、温度等有关,水解的最佳工艺条件是底物质量浓度50g／L,pH值8．5,加酶量（E／S）2％,温度65℃,水解时间为5h。研究表明,碱性蛋白酶制备的乳清蛋白水解物在卵磷脂脂肪氧化体系中可以降低硫代巴比妥酸值（TBARs）,且具有较好的还原能力和清除自由基的能力,因而具有较好的抗氧化活性。     

乳清分离蛋白美拉德反应产物的体外抗氧化特性

以乳清分离蛋白和木糖、葡萄糖、果糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖为美拉德反应原料,研究蛋白与糖的种类及混合比例对褐变程度的影响,并对反应产物进行抗氧化活性检测。结果表明:木糖与乳清分离蛋白按质量比2:1混合,湿热糖基化反应后,褐变程度最强,且在乳清分离蛋白与木糖按质量比2:1条件下反应后,乳清分离蛋白-木糖体系的美拉德反应产物(MRPs)具有较高还原能力和抗脂质过氧化能力及对DPPH自由基和O-2.具有较高的清除能力。     

β-葡聚糖糖基化对裸燕麦蛋白功能性质及抗氧化活性的影响

使用β-葡聚糖对裸燕麦蛋白进行糖基化处理,测定裸燕麦蛋白糖基化反应前后的功能性指标,观察糖基化改性过程中复合物的生成情况,分析糖基化改性作用机理,进行体外抗氧化实验。结果表明:在pH5、7、9、11环境中,糖基化反应后的裸燕麦蛋白溶解性均得到改善,pH5环境下提高了3.06倍,pH3~11范围内糖基化裸燕麦蛋白的起泡性提高明显,pH5环境下提高了5倍,在pH5环境下,糖基化裸燕麦蛋白的乳化性及乳化稳定性分别提高了2.48及2.59倍;SDS-PAGE凝胶电泳发现,糖基化改性后有大分子物质生成,内源荧光光谱分析表明糖基化反应过程中体系环境转向亲水性,红外光谱分析反映了蛋白与糖分子之间的共价结合,在圆二色谱中观察到糖基化反应改变了蛋白的二级结构;浓度为10 mg/mL时,糖基化裸燕麦蛋白DPPH·清除率是原蛋白的2.13倍,浓度为2.5 mg/mL时,糖基化裸燕麦蛋白ABTS+·清除率是原蛋白的2.09倍。裸燕麦蛋白与β-葡聚糖的糖基化反应改变了蛋白质的结构,复合物转向亲水性,功能性得到改善,且抗氧化活性也强于原裸燕麦蛋白。     

酪蛋白水解物的类蛋白反应修饰产物的分离纯化及其抗氧化活性研究

本文采用木瓜蛋白酶在pH 6.5的条件下对酪蛋白进行水解2 h,水解产物测得DPPH 35.89%±0.13%,超氧阴离子清除能力为21.39%±0.33%,还原能力为53.00%±2.00%。分别导入Tyr、Phe和Try对水解产物进行修饰,结果表明类蛋白反应时间为6 h时,三种产物的抗氧化性最高,其中Try修饰产物抗氧化性最好,测得DPPH、超氧阴离子清除能力、还原能力分别46.84%±1.16%、34.10%±0.32%、70.00%±2%(p0.05)。随后,将Try修饰下的产物进行分离纯化,使用装有G-15葡聚糖凝胶的色谱柱,水为洗脱液,上样浓度为20 mg/mL,流速为0.5 mL/min,洗脱效果最佳,得到三个峰,分别测定其抗氧化性,结果表明峰二的抗氧化性最好,测得DPPH、超氧阴离子清除能力、还原能力分别为58.46%±0.57%、38.42%±0.47%和80.00%±0.02%(p0.05)。将峰二产物通过液相色谱进一步分离鉴定,得到单一峰,证明蛋白纯化下的产物纯度较高。最后,得到了高纯度的抗氧化肽。     

2种蛋白酶酶解曲拉干酪素条件优化及抗氧化性比较

以曲拉干酪素为原料、水解度为指标,在酶解时间、酶解温度、pH值、曲拉干酪素质量浓度、酶添加量单因素试验基础上,采用响应面试验对碱性蛋白酶和胰蛋白酶酶解工艺条件进行优化,并对2 种酶解液的1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基、超氧阴离子自由基、羟自由基清除率,Fe2＋、Cu2＋螯合能力和还原力等抗氧化性指标进行比较。结果表明,碱性蛋白酶和胰蛋白酶分别在酶解时间3.8、2.5 h,酶解温度49.8、47.8 ℃,曲拉干酪素质量浓度60、35 g/L,pH 8.5、7.5,酶添加量140、2 900 U/g时水解度最大,为24.25%和13.57%。碱性蛋白酶解液超氧阴离子自由基清除率、Fe2＋螯合能力显著低于胰蛋白酶解液（P＜0.01）;羟自由基清除能力高于胰蛋白酶解液（P＞0.05）;2 种蛋白酶酶解液在酶解液质量浓度1～5 mg/mL时,Cu2＋螯合能力、DPPH自由基清除率和还原力随质量浓度均呈上升趋势,Cu2＋螯合能力低于Fe2＋螯合能力（P＞0.05）,DPPH自由基清除率和还原力二者差异显著（P＜0.01）。2 种蛋白酶对酶解物抗氧化性指标影响不同,碱性蛋白酶酶解物抗氧化性相对较优。     

Effects of casein- and whey protein–dextran conjugates on the stability of bog bilberry anthocyanin extract

Bog bilberry ( Vaccinium uliginosum ) contains a high concentration of anthocyanins. Anthocyanin stability depends on many factors, including pH, temperature and composition of food matrices in a product, such as protein and polysaccharide. The effect of casein–dextran and whey protein–dextran conjugates on the stability of bog bilberry anthocyanin extract (BBAE) was investigated in an accelerated model system. Cyanidin-3-glucoside was the main anthocyanin (79%) found in BBAE. The cyanidin-3-glucoside content, absorbance and ABTS [2, 2-Azinobis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) diammonium salt] radical scavenging activity of BBAE significantly ( P  < 0.05) decreased after heating at pH 8.0 and 80 °C for 60 min. The addition of casein–dextran and whey protein–dextran conjugates significantly ( P  < 0.05) prevented cyanidin-3-glucoside from degradation, and increased the absorbance and ABTS radical scavenging activity of heated BBAE. The protection of casein–dextran conjugate on BBAE was significantly higher ( P  < 0.05) than that of whey protein–dextran conjugate. The results suggest that protein–dextran conjugates have the ability to stabilise BBAE.     

不同乳酸菌胞外分泌物抗氧化活性的研究

以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（DPPH）自由基、羟自由基、超氧阴离子自由基清除能力和还原能力为评价指标,以维生素C作阳性对照,分析不同来源的28株乳酸菌的胞外分泌物体外抗氧化活性,并研究不同抗氧化活性测定方法间的相关性。结果表明,菌株GB8、WC5和GC2抗氧化能力较强,其中菌株GB8对超氧阴离子自由基清除率（98.26%）和还原能力最高（0.964）,菌株WC5对DPPH自由基的清除率最高,为74.90%;菌株GC2对羟自由基、DPPH自由基及超氧阴离子自由清除率分别为58.67%、73.09%、87.50%,还原能力为0.806,表现出最强的综合抗氧化能力。4种体外抗氧化活性分析方法的相关性结果表明,羟自由基与DPPH自由基（R2=0.633）、超氧阴离子与还原能力（R2=0.488）方法间达到了极显著相关（P＜0.01）;羟自由基与还原能力（R2=0.295）方法间达到了显著相关（P＜0.05）。     

葡萄糖-牡蛎酶解液美拉德反应体系的抗氧化活性

以牡蛎酶解液与葡萄糖建立美拉德反应体系,以1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl, DPPH）自由基清除率、金属离子螯合能力和还原能力为指标,通过葡萄糖质量分数、反应温度、pH值以及反应时 间4 个因素的单因素试验和正交试验优化得到具有强抗氧化活性的美拉德反应产物适宜反应条件。结果表明,葡萄 糖-牡蛎酶解液美拉德反应产物具有较强抗氧化活性的反应条件为葡萄糖质量分数4%、反应温度120 ℃、pH 7.0、 反应时间120 min。在此组合条件下,牡蛎酶解液美拉德反应得到的反应液的DPPH自由基清除率为93.2%,金属离 子螯合能力为22.5%,还原能力为1.436。     

Effect of substrate ratios and temperatures on development of Maillard reaction and antioxidant activity of silver carp (Hypophthalmichthys molitrix) protein hydrolysate–glucose system

The study of antioxidant activity of the hydrolysates is necessary during its processing in which Maillard reaction would often occur. To understand the effect of Maillard reaction on antioxidant activity of silver carp protein hydrolysates (SPH), the Maillard reaction products (MRPs) were prepared at different ratios between SPH and glucose by Maillard reaction in powdered state, respectively. MRPs possessed a strong 2, 2‐diphenyl‐1‐picrylhydrazyl (DPPH) radical scavenging activity and reducing power (P < 0.05). The hydrolysate and glucose heated with the ratio of 2:1 at 60 °C showed high browning intensity and good antioxidant properties (P < 0.05). According to the correlation coefficients of variables included in the hydrolysate–glucose system, good correlations were observed among the antioxidant activities, the absorbance at 294 nm and the loss of free amino groups. The results suggested that Maillard reaction has a good potential to improve the antioxidant activity of SPH.