酶法钝化大豆胰蛋白酶抑制剂研究

采用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、酸性蛋白酶和木瓜蛋白酶,在其最适ｐＨ值和最适温度下水解低温脱脂豆粕１小时,分别检测水解前后胰蛋白酶抑制剂活性的变化。结果表明,四种酶都可在不同程度上降解大豆胰蛋白酶抑制剂,但降解程度差异较大,碱性蛋白酶降解作用显著优于其它酶。按照四种酶水解胰蛋白酶抑制剂相对活力的大小排序为:碱性蛋白酶＞酸性蛋白酶＞中性蛋白酶＞木瓜蛋白酶。     

不同酪蛋白水解物对低脂发酵乳发酵参数的影响

研究了4种蛋白酶(中性蛋白酶Neutrase、木瓜蛋白酶PA2、碱性蛋白酶Alcatase2.4L和胰蛋白酶PTN6.0S)的酪蛋白水解物对低脂发酵乳的发酵参数(滴定酸度、pH值下降速度、终点酸度和产酸速度)的影响。结果表明,酪蛋白水解物具有明显促进低脂发酵酸奶发酵、缩短发酵时间的作用,中性蛋白酶的促进发酵效果最好,木瓜蛋白酶次之,碱性蛋白酶和胰酶的效果相差不大;各添加样在整个发酵过程中发酵速度都高于空白样,甚至高于双倍接种量的空白样。综合考虑,采用木瓜蛋白酶对酪蛋白进行水解后产物最适添加到低脂发酵乳。     

酶法钝化大豆胰蛋白酶抑制剂的研究

采用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、酸性蛋白酶和木瓜蛋白酶，在其最适pH值和最适温度下水解低温脱脂豆粕1h，分别检测水解前后胰蛋白酶抑制剂活性的变化。结果表明，4种酶都可在不同程度上降解大豆胰蛋白酶抑制剂，但降解程度差异较大，碱性蛋白酶降解作用显著优于其它酶。按照四种酶水解胰蛋白酶抑制剂相对活力的大小排序为：碱性蛋白酶＞酸性蛋白酶＞中性蛋白酶＞木瓜蛋白酶。     

鳄鱼皮酶解产物功能特性及抗氧化活性

为了解鳄鱼皮酶解产物功能特性和抗氧化活性,采用2种商业蛋白酶(木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶)在各自最适反应条件下分别酶解鳄鱼皮,研究水解度(DH)、酶种类及pH值对酶解产物功能特性及抗氧化活性的影响.结果显示:随着酶解时间延长,鳄鱼皮水解度逐渐增加,鳄鱼皮在碱性蛋白酶酶解作用下水解度较高,水解4h时可达12％;木瓜蛋白酶酶解产物与碱性蛋白酶酶解产物的溶解性差异不显著(P＞0.05).相同水解度下,碱性蛋白酶酶解产物的热稳定性在pH4时优于木瓜蛋白酶酶解产物.酶解时间在1h之内,木瓜蛋白酶酶解物亚铁离子螯合力明显增强;随着时间延长,酶解产物亚铁离子螯合能力变化不显著(P＞0.05).酶解3h后碱性蛋白酶酶解产物亚铁离子螯合能力高于木瓜蛋白酶酶解产物,但木瓜蛋白酶酶解产物具有较强的清除DPPH自由基能力.综上表明,碱性蛋白酶水解作用的鳄鱼皮水解度较高,其酶解产物乳化活性和热稳定性优于木瓜蛋白酶酶解产物;鳄鱼皮酶解产物抗氧化能力较强,有较高的开发利用价值.     

酶解对紫花芸豆清蛋白功能性质的影响

以紫花芸豆清蛋白为原料,采用4种商业蛋白酶进行酶解,通过比较水解度及水解液中蛋白分子量变化,确定最适酶;然后对酶解前后蛋白的功能性质进行了分析。结果表明木瓜蛋白酶和碱性蛋白酶水解效果较好;酶解后紫花芸豆清蛋白的抗氧化活性、起泡性及起泡稳定性明显提高;紫外吸收增强;但吸油性明显降低,乳化性及其稳定性没有明显变化。     

鹿血抗氧化肽水解条件工艺的优化

选用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和木瓜蛋白酶在最适条件下对鹿血水解,以水解度(DH)以及水解物对DPPH·的清除率和还原能力为指标,确定碱性蛋白酶作为本次试验水解最佳用酶。并且确定碱性蛋白酶最佳水解工艺参数为:底物浓度5%,酶与底物浓度比为2%,水解时间5h。     

两种蛋白酶对米渣蛋白的酶促降解作用

碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶均可水解从米渣中提取的蛋白质,前者酶解米渣蛋白的效率明显优于后者。通过分析底物浓度、酶用量、溶液酸碱度、酶解温度和时间对酶促降解米渣蛋白效率的影响,得出碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶各自水解米渣蛋白的最适条件,即碱性蛋白酶作用底物的浓度、酶的用量、溶液pH、酶解温度和时间分别为0.6%、50U/ml、8.5、45℃和4h;木瓜蛋白酶则依次为0.9%、300U/ml、6.0、70℃和4h。     

尼罗罗非鱼肠道碱性蛋白酶性质的研究

系统研究了尼罗罗非鱼肠道中碱性蛋白酶的特性,发现其最适pH为9·0,最适温度为60℃;此蛋白酶在pH6·0～10·0及60℃以下具有较好的稳定性,Ca2+及低浓度的Na+对碱性蛋白酶有一定的激活作用,而Mg2+、Ba2+、Al3+、Zn2+、Pb2+、Cu2+、Fe2+等金属离子对该碱性蛋白酶有不同程度的抑制作用;甲醇、乙醇、异丙醇、甲醛、丙酮等有机溶剂对碱性蛋白酶有不同程度的抑制作用,抑制作用大小依次为甲醛丙酮乙醇甲醇异丙醇;20mmol/L丝氨酸蛋白酶抑制剂甲苯磺酰氟(PMSF)、10mmo/L金属蛋白酶抑制剂EDTA、5mmol/L巯基还原剂DTT分别抑制了89·9%、88·8%、70·6%的酶活力;通过抑制剂对酶活性的影响初步判断出罗非鱼肠道中碱性蛋白酶主要为一类丝氨酸类蛋白酶、金属蛋白酶以及以二硫键为活性中心的蛋白酶混合物。     

蛋白酶对皮革降解性能的研究

本实验探究了蛋白酶对废弃皮革的降解过程,以三种常见蛋白酶(胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、碱性蛋白酶)对三种不同皮革(铬鞣革、无铬鞣革、膦鞣革)进行降解处理,通过对降解性能的研究表明,碱性蛋白酶对三种皮革的降解性比较好,当碱性蛋白酶浓度15 g/L,反应时间6 h条件下,皮革降解效果较好.     

乙醇对角质酶性质的影响

研究了乙醇溶液对角质酶性质的影响,同时用圆二色光谱和荧光光谱法对经过硫酸铵沉淀、镍柱亲和层析等方法获得的电泳纯角质酶进行了构象研究。结果表明,在体积分数40%、30%和20%乙醇溶液中角质酶催化反应的最适温度分别为50、55和65℃;在37℃下,酶在体积分数20%～50%乙醇中具有较好的稳定性,体积分数30%和40%乙醇对角质酶具有激活作用;角质酶在体积分数30%和50%乙醇中催化反应的最适pH分别为9.5和9.0;在体积分数30%乙醇溶液中角质酶的pH稳定范围为6.5～10.5。角质酶在50℃的乙醇溶液中的失活动力学研究表明,角质酶的失活属于一级动力学反应(R2>0.98)。从角质酶构象的研究结果可以看出,在乙醇体系中角质酶的二级结构和三级结构都发生了相应的变化。     

白芨多糖胶的酶法精制工艺条件研究

进行白芨多糖的酶法精制工艺研究,初步考察5 种蛋白酶对白芨多糖的精制效果,并选择木瓜蛋白酶进一步研究,考察加酶量、pH 值、温度和酶解时间对白芨多糖纯度和蛋白残余率的影响,确定了适宜的酶解条件：加酶量8～10mg/g 底物,pH7.0～7.5,温度45～50℃,酶解时间120～150min。精制白芨多糖中葡甘聚糖最高含量可达97.0%,蛋白含量由粗多糖的0.91% 下降到0.32%。实验同时进行了酶法随程处理研究,获得的多糖纯度达92.0%。该法提供了一种更为简单的白芨多糖提取和精制工艺。     

响应面法优化紫贻贝蛋白酶解工艺条件

分别采用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、酸性蛋白酶、复合蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶和风味蛋白酶7种蛋白酶对紫贻贝蛋白的酶解工艺条件进行研究。根据水解度和感官评定的结果,确定中性蛋白酶、复合蛋白酶、木瓜蛋白酶和风味蛋白酶可以作为紫贻贝蛋白酶解的外加蛋白酶。将上述4种蛋白酶进行两两复配,通过试验确定复合蛋白酶与中性蛋白酶按1:1进行复配,可作为紫贻贝蛋白酶解的最适复配酶。采用响应面优化分析得出复配蛋白酶最佳酶解条件为酶解时间2h、pH7、酶解温度50℃、酶添加量0.4%,在此条件进行实验,测得水解度为70.25%,游离氨基酸总量增加了388.46%。     

海藻酸钠固定化碱性蛋白酶制备及酶学性质的研究

对采用海藻酸钠固定化碱性蛋白酶的方法和酶学性质进行了研究。在单因素实验基础上,采用响应面优化方法确定固定化的最优条件,得到的最佳条件为:海藻酸钠浓度3.1%,pH9.4,CaCl2浓度3.0%,游离酶添加量10000U/g,时间1.8h,固定化酶活力可达5518U/g。固定化酶的最适pH为10,最适温度为60℃,制得的固定化酶的热力学稳定性和操作稳定性较好。此外,固定化酶重复利用5个循环后酶活力仅降低40%。     

酶法制备黑豆粕粉多肽的工艺研究

该试验以黑豆粕粉为原料,以蛋白水解度为评价指标,从风味蛋白酶、中性蛋白酶、碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶中筛选水解效果最好的蛋白酶。考察酶解pH、加酶量、酶解温度和酶解时间对黑豆粕粉蛋白质水解度的影响。在单因素试验结果基础上,采用响应面试验对黑豆粕粉多肽的酶解条件进行优化。结果表明,碱性蛋白酶最适合酶解黑豆粕粉多肽,其最佳酶解条件确定为酶解温度55 ℃、酶解pH 9、酶解时间260 min、加酶量4.3%。在此最佳条件下,蛋白水解度为35.23%,较优化前蛋白水解度提高1.93%。     

酶解虾壳蛋白制备ACE 抑制剂的工艺优化

以虾壳粉为原料,以水解度和ACE抑制率为指标,利用中性蛋白酶、碱性蛋白酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶进行酶解,其中中性蛋白酶和碱性蛋白酶有较高的ACE抑制活性,因此对碱性蛋白酶和中性蛋白酶的工艺条件进一步优化。结果表明：碱性蛋白酶酶解工艺优化条件为：温度60℃、pH9.5、底物质量浓度2.5g/100mL、加酶量4000U/g、酶解时间2.5h,在此条件下ACE抑制率最高,为67.70%,水解度为69.79%;中性蛋白酶酶解工艺优化条件为：温度50℃、pH7.0、底物质量浓度2.5g/100mL、加酶量2000U/g、酶解时间2h,在此条件下ACE抑制率最高,为84.04%,水解度为26.76%。提示中性蛋白酶酶解能够产生更多的ACE抑制肽,是酶解虾壳蛋白制备ACE抑制肽的较优酶。     

酶法水解麦胚蛋白及其产物的抗氧化活性研究

选择碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胰酶、木瓜蛋白酶和风味蛋白酶5种蛋白酶对麦胚蛋白进行水解,并考察其水解产物的抗氧化活性。结果表明,中性蛋白酶为制备麦胚抗氧化肽的最适蛋白酶,其最佳水解条件为:底物质量分数4%,酶添加量6 000U/g,酶解温度50℃,pH值7.5,水解至270min时抗氧化活性最大。     

黑豆醒酒饮料的研制

采用甲醛滴定法,对中性蛋白酶、碱性蛋白酶和木瓜蛋白酶进行筛选,确定最佳酶解黑豆蛋白的酶.结果发现碱性蛋白酶酶解较果最好,且确定了碱性蛋白酶的最适宜酶解条件:时间为5h,温度为50℃,酶的添加量为1200U/g,pH值为9.后采用正交试验的方法,确定了黑豆醒酒饮料调配的最适宜比例:黑豆蛋白肽混合液70％,蜂蜜4g/150mL,白砂糖11g/150mL.最后,根据瓦勒-霍赫法对黑豆醒酒饮料进行体外试验,得出酶解后的黑豆蛋白肽能够激活乙醇脱氢酶(ADH),而ADH能够增强乙醇的代谢,从而降低人体中乙醇的浓度,测得本实验产品对ADH的激活率达到了31.98％.     

富血红素多肽产物制备用酶的比较研究

为筛选适于生产富血红素多肽产物的蛋白酶,比较不同蛋白酶对猪血红蛋白的水解效果。在AS1398 中性蛋白酶、2709 碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶和胰蛋白酶的最适水解pH 值及温度下,以L16(45)正交试验研究酶种类、酶质量分数、底物质量分数和水解时间等因素对水解率、水解液中粗多肽含量和血红素含量等指标的影响。结果表明：酶种类和水解时间两因素对水解率指标的影响达到极显著水平(P ＜ 0.01);底物质量分数是影响粗多肽含量指标的最重要因素;酶种类对血红素含量指标的影响则达到显著性水平(P ＜ 0.05)。中性蛋白酶有利于提高水解率,木瓜蛋白酶有利于提高水解物的粗多肽含量,而碱性蛋白酶则有利于提高水解物的血红素含量。     

木瓜蛋白酶制备草鱼鳞胶原肽的工艺优化及产物特性分析

以草鱼鱼鳞为对象,研究木瓜蛋白酶酶解条件对鱼鳞蛋白酶解产物水解度和氮收率的影响,以获得较高氮收率及水解度的鱼鳞胶原肽。结果表明,水解温度、起始pH值、底物浓度和加酶量对木瓜蛋白酶水解产物的水解度和氮收率都有显著影响(p<0.05);木瓜蛋白酶在底物浓度为5%、起始pH值为5.0、加酶量为3000 U/g蛋白、水解温度为60℃条件下水解鱼鳞120 min,鱼鳞水解产物的水解度和氮收率都较好,其水解度为12.68%、氮收率为89.42%;且水解产物在酸性、中性及碱性条件下的溶解性均在97%以上,分子量呈连续分布,主要分布在200～ 5000 u之间。