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高表达重组人粒细胞集落刺激因子cDNA的中国仓鼠卵巢细胞株的建立 总被引:2,自引:0,他引:2
用质粒pEF-BOS的增强子、肽链延长因子基因的启动子及其第一内含子替换质粒pED-GCSF的增强子,腺病毒主要晚期启动子及杂合内含子。构建成了更高表达质粒pEF-GCSF,转染CHO-dhfr-细胞,加入并逐渐升高氨甲喋呤的浓度。结果显示:一定范围内,随着MTX浓度增高,重组人粒细胞集落刺激因子表达量随之提高;筛选并建立了一株稳定高表达rhG-CSF cDNA的细胞株,其表达量为5.0 ̄5.6μ 相似文献
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乙肝病毒融合表面抗原SA—28基因在酵母中的表达 总被引:8,自引:0,他引:8
利用基因工程技术,先将乙肝病毒表面抗原S-preS1融合基因SA-28置于酵母杂合启动子ADH2-SUC2的控制下,然后将SA-28基因的表达单元插入高稳定质粒pHCl1的BamHI位点,构建成表达质粒YFD150和YFD150-o并将其转化酿酒酵母Y19。对转化子表达SA-28基因的研究表明:表达受葡萄糖浓度调控;表达产物具有S和preS1双重抗原性,并形成密度为1.20-1.22g/ml的颗粒 相似文献
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鼠巨噬细胞集落刺激因子-1受体(mCSF-1R)部分序列与质粒pGEX-2T谷胱苷肽转移酶(GST)融合,融合蛋白GST-CD-Pst(胞浆区),GST-CTerm(C-末端)和GST-KI(激酶插入区)成功地在大肠杆菌JM109株表达。初步结果指出:(1)GST-融合蛋白在体外激酶分析中可以作为底物;(2)由PKA导致的磷酸化可能具有生理学意义;(3)mCSF-1R被CKII磷酸化。32P标记GST-CD-Pst的磷酸氨基酸分析证实,mCSF-1R的胞浆区丝氨酸上被磷酸化,已制备抗GST-CTerm,GST-KI和GST-CD-Pst兔抗体。抗血清的筛选通过野生型32D-CSF-1R转染子免疫沉淀进行。 相似文献
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将能在植物中表达的烟草花叶病毒CaMV35S启动子、GUS基因、潮霉素(Hygromycin)基因及MOS终止子组建到酵母人工染色体(YAC)载体,构建了具有能在植物细胞中表达和选择pYAV、GUS、pJS97/pJS98-HY YAC载体系体系统和一个标记YAC克隆的pUR43-HY质粒。 相似文献
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海鸥牌照相机:DF-300X机身/1228元;DF-300XD机身/1374元;DF-300M机身/910元;DF-2ETM机身/555元;DF-2机身/385元;DF-300XD带标头/1700元;DF-300X带标头/1565元;DF-300M带标头/1244元;DF-2ETM带标头/841元;DF-2带标头/670元。SC727相机/221元;SC727D相机/300元)SC737相机/320元;SC737D相机/400元;SC747相机/381元;SC747D相机/461元。4A型相机/… 相似文献
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ISO/TC213工作近况分析1996年6月14日,ISO/TC213成立大会在巴黎召开,14个国家的51名代表出席会议。会议宣布ISO技术管理局(ISO/TMB)根据原ISO/TC3-10-57/JHG(联合协调工作组)的建议,决定成立新的技术委员... 相似文献
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对探索适于昆虫表达体系重组蛋白质的分离、纯化方法,对家蚕细胞表达的重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)的纯化工艺进行了研究。利用离子交换色谱、凝胶过滤色谱及旋转等电聚集电泳等技术,建立了从家蚕血淋巴液中分离、纯化rhGM-CSF的工艺路线,经过三步分离,获得了纯度为97.24%的目标产品,总回收率达33.59%。此法可有效地去除动、植物色素且简单、经济、高效,适于和大,为rhGM 相似文献
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通过PCR二步法,构建了mCSF-1R激酶负性突变子,以及野生型和突变型CSF-1R的送病毒表达载体pCEN/MPSV。进行了125I-CSF-1受体结合分析:检测了激酶负性突变子,删除了CSF-1RC-末端氨基酸925以后部分的突变体(CTRUNC925)和删除了激酶插入区的突变体(△KI)在32D髓细胞表达。表达水平可达1~2×104受体/细胞。初步测定了通过CSF-1R所介导的促细胞分裂效应。 相似文献
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为探索适于昆虫表达体系重组蛋白质的分离、纯化方法,对家蚕细胞表达的重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF)的纯化工艺进行了研究。利用离子交换色谱、凝胶过滤色谱及旋转等电聚焦电泳等技术,建立了从家蚕血淋巴液中分离、纯化rhGM-CSF的工艺路线。经过三步分离,获得了纯度为97.24%的目标产品,总回收率达33.59%。此法可有效地去除动、植物色素且简单、经济、高效,适于进行规模放大,为rhGM-CSF的大规模制备及临床应用打下了基础。 相似文献
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用差热分析(DTA),结合X射线衍射(XRD)研究了Sm-Fe-Si-C非晶态合金的晶化动力学。结果表明:温度低于900℃时,该合金晶化相为α-Fe(Si)固溶体和Sm2(Fe,Si)17Cx。α-Fe(Si)相的晶化表观激活能为431.51kJ/mol,Sm2(Fe,Si)17Cx相的晶化表观激活能为514.43kJ/mol。上在晶化初期活能变化不大,当α-Fe(Si)相的体积分数大于70%,S 相似文献
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一、背景为了迎接电子商务给全球带来的机遇和挑战,使它在全球范围内有序地发展,世界标准化组织ISO/IEC正努力研制与市场相关的标准。1997年6月ISO/IECJTC1成立了JTC1“电子商务业务工作组”(BT-EC)。同年7月9日到7月11日在德国... 相似文献
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用DTA结合XRD了Fe73.5Cu1Nb3Si13.5B9晶合金的晶化动力学。表明,该事金在500℃时析出α-Fe(Si)相。晶化初期激活能最小为242kJ/mol,它随晶化量的增加,在XC为0.4-0.8时,呈极大值为520kJ/mol。在624℃时析出Fe2B相。 相似文献
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用差热分析(DTA),结合X射线衍射(XRD)研究了Sm8Fe83Si2C5Cu0.5Nb1.5非晶合金的晶化动力学。结果表明:温度在0 ̄1000℃范围内,该合金的晶化相为α-Fe和Sm2(FeSi)17Cx,α-Fe相的晶化表观激活能力349.53kJ/mol,Sm2(FeSi)17Cx的晶化表观激活能力316.19kJ/mol,两相在晶化初期激活能量小,随晶化量(xc)的增加激活能增大,当α- 相似文献
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P190是恶性疟原虫裂殖子表面抗原,是很有希望的疟疾疫苗候选抗原。采用PCR方法克隆了我国海南省FCC1/HN株P190抗原基因的3个保守区片段,连接到pUC18载体上进行DNA序列测定,然后分别与表达载体pGEX-2T连接,经双酶切鉴定后转化感受态JM109大肠杆菌进行高效融合表达。 相似文献
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改性双来亚酰亚胺树脂的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
合成了2,2′-亚甲基-二(4-甲基-6-烯丙基)苯酚,和它增韧二苯甲烷型双马来酰亚胺树脂,对改性双马亚酰亚胺预聚物的凝胶化时间、DSC分析和FT-IR分析的研究,得到了改性双马亚酰胺树脂体系的固化条件来180℃/1h+200℃/2h+250℃4/h;热重分析法研究了双马亚酰亚胺树脂体系的热分解反应动力学,得出体系的的热分解反应活化能为274.4kJ/mol;改性双马来酰亚胺树脂体系常弯曲强度为1 相似文献
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分形在梯度功能材料中的应用 总被引:9,自引:1,他引:8
对材料科学中的分形图形提取过程进行了研究,探索出一条行之有效的分形图形提取流程,用VisualC++可视化编程语言设计了分形维数计算程序,提取了Mo/β′-Sialon与Ta/β′-Sialon系梯度功能材料界面的分形,并利用分维计算程序对其分殂维数进行了计算,实验证实Mo/β′-Sialon与Ta/β′-Sialon系FGM界面存在扩散,且烧结过程为扩散控制。分形维数计算结果与实验吻合。 相似文献