17-AAG协同顺铂抑制肺腺癌A549细胞的增殖

目的: 观察热休克蛋白90(HSP90)抑制剂17-AAG与顺铂(cisplatin, DDP)联用对肺腺癌细胞株A549增殖抑制的协同效应。方法: 采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测不同浓度17-AAG、顺铂及两药联用对肺癌细胞株A549的生长抑制作用,并应用中效原理评价两药联用效应。结果: 顺铂和17-AAG均对A549细胞的生长有较好的抑制作用,并呈现一定的剂量依赖性,顺铂作用 48 h 时,其IC₅₀值为 69.627 μmol/L;17-AAG的IC₅₀值为 0.455 μmol/L。顺铂联合17-AAG显示更强的抑制作用,特别是在低剂量下协同作用更明显。结论: 17-AAG联合顺铂对肺癌细胞的增殖具有协同抑制效应。     

Oct-4基因在胃癌顺铂耐药中的作用

目的: 建立胃癌BGC-823顺铂耐药细胞株,研究Oct-4基因在胃癌顺铂耐药中的作用。方法: 使用顺铂逐步增加剂量法诱导胃癌BGC-823细胞,以建立其多药耐药细胞株BGC-823/DDP;MTT细胞毒实验检测顺铂对肿瘤细胞的细胞毒作用;半定量RT-PCR检测Oct-4基因的表达;基因转染干扰Oct-4表达;Western blot实验检测Oct-4蛋白的表达改变。结果: 经过30~34周的诱导我们建立了胃癌BGC-823顺铂耐药细胞株;MTT细胞毒实验结果显示顺铂对BGC-823和BGC-823/DDP细胞的IC₅₀值分别为(2.33±0.12) 和(21.46±0.97) μmol/L(P<0.01),与BGC-823细胞比较,BGC-823/DDP细胞对顺铂耐药是其9.21倍;半定量RT-PCR检测显示胃癌耐药株BGC-823/DDP高表达Oct-4基因;Western blot结果显示化学合成的siRNA可以靶向下调Oct-4蛋白的表达;siRNA干扰BGC-823/DDP细胞Oct-4基因的表达后,BGC-823/DDP细胞对顺铂的的IC₅₀值从(22.04±1.84 ) μmol/L 减小到(6.15±0.53) μmol/L,二者差异具有统计学意义(P<0.01)。结论: 研究结果表明,Oct-4基因的高表达在胃癌顺铂的耐药中起着重要的作用。     

OCTN2基因多态性影响结直肠癌奥沙利铂化疗敏感性

目的：研究OCTN2基因多态性是否影响OCTN2的表达和功能,以及结直肠癌细胞系SW480对奥沙利铂敏感性。方法：构建OCTN2基因4种突变（F17L、E317K、S467C和P478L）转染细胞系。Real-time RT-PCR及Western blot检测OCTN2 mRNA和蛋白水平的表达。HPLC检测细胞内奥沙利铂含量。MTS法检测细胞活性。结果：所有突变型OCTN2 mRNA和蛋白表达水平与野生型表达无统计学差异。E317K和S467C细胞系对奥沙利铂摄取（Vmax和Km）与野生型相比无差异（P>0.05）,F17L的Vmax下降到66.4%,而Km值增加到120.3%,P478L的Vmax增加到132.6%,Km值降低到82.2%,与野生型相比有统计学差异（P<0.05）。所有过表达OCTN2细胞的IC50值显著降低。与SW480-OCTN2转染细胞系比较,没有转染的SW480细胞和F17L细胞系的IC50值分别升高175%和147%,而P478L细胞则下降到76.9%,有统计学差异（P<0.05）。E317K和S467C的IC50值无明显改变（P>0.05）。结论：OCTN2转运体基因F17L和P478L错义突变可以改变OCTN2对奥沙利铂的摄取,从而影响OCTN2稳定表达细胞系对奥沙利铂的敏感性。     

芦丁联合奥沙利铂对人胃癌SGC-7901细胞增殖及凋亡的影响

目的: 探讨芦丁联合奥沙利铂对人胃癌SGC-7901细胞增殖及凋亡的影响。方法:采取对数生长期的人胃癌SGC-7901细胞作为研究对象,应用MTT法检测药物对胃癌SGC-7901细胞生长抑制率;Hoechst33258核染色观察细胞形态学变化;流式细胞术检测细胞周期及细胞凋亡率;Western blot方法分析SGC-7901细胞中caspase-3、Bax和Bcl-2蛋白表达。结果:芦丁(100、200、300 μmol/L)、奥沙利铂均可抑制SGC-7901的增殖,且呈剂量相关性;芦丁联合奥沙利铂与相同浓度奥沙利铂单用处理SGC-7901细胞相比,前者对SGC-7901细胞的抑制作用更显著(P<0.05);不同浓度芦丁与奥沙利铂联合处理SGC-7901细胞与奥沙利铂单用相比,前者显著提高了SGC-7901细胞的凋亡率(P<0.05)。芦丁作用后,caspase-3蛋白表达明显升高,Bcl-2/Bax蛋白表达的比值则明显降低(P<0.05)。结论:芦丁和奥沙利铂均可抑制SGC-7901细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与上调caspase-3、Bax及下调Bcl-2等凋亡相关蛋白表达水平有关;两者联合应用具有一定的协同效应。     

当归挥发油联合卡铂对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡的影响

目的: 探讨当归挥发油与卡铂联用对人肺腺癌A549细胞增殖及凋亡的影响。方法: MTT比色法检测两药单用及联用对A549细胞的体外杀伤活性;用流式细胞术检测A549细胞凋亡;AO/BE双荧光染色法观察A549细胞凋亡。结果: 当归挥发油单独应用及与卡铂合用对A549细胞的增殖均具有浓度依赖性抑制作用,两药联用IC50较单用IC50下降,说明当归挥发油对卡铂抑制A549细胞增殖的作用具协同效应。流式细胞术检测结果表明,当归挥发油单用及与卡铂合用均可诱导A549细胞凋亡、坏死,两药合用后细胞凋亡、坏死率显著升高。AO/BE双荧光染色法结果显示,联合用药组细胞凋亡、坏死率上升。结论: 当归挥发油与卡铂具有协同诱导A549细胞凋亡的作用。     

地塞米松对顺铂诱导的HepG2细胞凋亡及Bcl-2和Caspase-3蛋白表达的影响

目的: 探讨地塞米松对顺铂诱导HepG2细胞凋亡的影响,并观察Bcl-2和Caspase-3蛋白的表达。方法: HepG2细胞与顺铂及不同浓度的地塞米松共培养,RT-PCR检测Bcl-2、Caspase-3的mRNA表达,Western blot检测Bcl-2、Caspase-3蛋白表达,流式细胞术(FACS)检测各组HepG2细胞的凋亡情况。结果: 随着地塞米松浓度的增加,HepG2细胞中Bcl-2蛋白表达量升高,Caspase-3蛋白表达量下降。同时细胞凋亡率降低。结论: 地塞米松部分通过Bcl-2途径抑制肝癌细胞的凋亡,而Caspase-3又在调控细胞凋亡中起重要作用。     

雷公藤多苷增强耐顺铂人上皮性卵巢癌SKOV3/DDP细胞株顺铂敏感性的体外研究

目的: 探讨雷公藤多苷（GTW）对耐顺铂人上皮性卵巢癌细胞株（SKOV3/DDP）的顺铂（DDP）增敏作用及机制。方法: 将对数生长期的SKOV3/DDP细胞随机分为8组：空白对照组、10 μg/mL DDP组、50 μg/mL GTW组、800 μg/mL GTW组、3 200 μg/mL GTW组、10 μg/mL DDP+50 μg/mL GTW组、10 μg/mL DDP+800 μg/mL GTW组、10 μg/mL DDP+3 200 μg/mL GTW组,利用CCK-8法、流式细胞术、Western blot法检测各组细胞生长、细胞凋亡以及细胞谷胱甘肽S转移酶-π（GST-π）基因蛋白、P-糖蛋白（MDR1）、信号转导和转录激活因子3（STAT3）、p-STAT3的表达。结果:DDP与GTW联用在抑制SKOV3/DDP细胞生长作用上呈现相加效应;800、3 200 μg/mL GTW分别与10 μg/mL DDP联用后,可显著促进SKOV3/DDP细胞凋亡,下调p-STAT3的表达（P<0.05）。结论:GTW可显著增强SKOV3/DDP细胞对DDP的敏感性,其作用机制可能是下调STAT3信号通路中的p-STAT3表达。     

扶正康复合剂联合顺铂抑制胃癌SGC7901细胞荷瘤裸鼠肿瘤增殖作用的实验研究

目的:探讨扶正康复合剂联合顺铂抑制小鼠移植性胃癌的增殖作用。方法:将28只裸鼠随机分为4组：模型对照组，扶正组，顺铂组，顺铂+扶正组，每组7只。皮下注射胃癌SGC7901细胞株，建立胃癌荷瘤裸鼠模型，顺铂及扶正康复合剂连续给药7 d，称取体重及瘤重，计算抑瘤率，并利用PCR法和免疫组化法分别检测瘤体内细胞凋亡靶点（Bcl-2、Bax、Survivin）和血管新生促进因子（VEGF）的mRNA和蛋白的表达情况。结果:在抑瘤率方面，与模型对照组相比，各组裸鼠瘤重均有不同程度的减轻（P<0.05），且顺铂+扶正组抑瘤率最高（66.67%）。在细胞凋亡方面，扶正康复合剂联合顺铂能明显上调Bax的表达，下调Bcl-2、Survivin和VEGF的表达（P<0.05）。结论:扶正康复合剂联合顺铂具有抑制肿瘤增殖的作用。     

脂氧素A4抑制缺氧诱导的滋养细胞氧化应激和凋亡

目的: 探讨脂氧素A₄（LXA₄）对缺氧条件下人早孕细胞滋养细胞氧化应激及凋亡的影响。方法: 选取正常早孕(6～8周)绒毛,分离、纯化、鉴定得到细胞滋养细胞,分为常氧组、缺氧组、缺氧+1 nmol/L LXA₄组、缺氧+10 nmol/L LXA₄组、缺氧+100 nmol/L LXA₄组。各组细胞培养72 h后,采用 DCFH-DA探针检测活性氧（ROS）含量,黄嘌呤氧化酶法检测超氧化物歧化酶（SOD）活性,分光光度计法检测过氧化氢酶（CAT）活性,比色法检测谷胱甘肽过氧化物酶（GPx）活性,流式细胞仪检测凋亡率,免疫印迹法检测Bcl-2、Bax蛋白表达。结果: 与常氧组比较,缺氧组ROS水平升高（P<0.05）,SOD、CAT、GPx活性降低（P<0.05）,凋亡率升高（P<0.05）。与缺氧组比较,缺氧+1、10、100 nmol/L LXA4组ROS水平均降低（P<0.05）,SOD、CAT、GPx活性均升高（P<0.05）,凋亡率均降低（P<0.05）。与常氧组相比,缺氧组的Bcl-2蛋白量减少,Bax蛋白量增加（P<0.05）;缺氧+1、10、100 nmol/L LXA₄组Bcl-2蛋白量较缺氧组均升高,Bax蛋白量较缺氧组均降低（P<0.05）。结论: LXA₄可抑制缺氧诱导的人早孕细胞滋养细胞的氧化应激和凋亡,Bcl-2/Bax表达调控可能是LXA₄抗滋养细胞凋亡的一个重要机制。     

细胞色素P450 1A1基因多态性对奥沙利铂联合卡培他滨方案治疗结直肠癌患者临床疗效的影响

目的: 探讨细胞色素450（CYP450）酶的基因变异是否是奥沙利铂联合卡培他滨的方案在结直肠癌患者中的治疗结果差异的影响因素。方法: 研究入组69例接受奥沙利铂联合卡培他滨方案治疗的结直肠癌（colorectal cancer,CRC）患者,同时对细胞色素450（CYP450）基因上最小等位基因频率（MAF）≥10%的79个多态性位点进行基因分型。对这些单核苷酸多态性（SNP）位点和治疗反应率以及预后的相关性进行分析。结果: 发现仅CYP1A1的rs1048943（Ile462Val）和无进展生存期（PFS）显著相关（P=0.0003）,其他位点和治疗反应率以及总生存期（OS）无明显相关性。纳入Cox风险比例模型当中校正之后,发现该位点是影响PFS独立的预后指标（P=0.004）。结论: CYP1A1上的多态性位点rs1048943（Ile462Val）对接受奥沙利铂联合卡培他滨方案治疗的CRC患者来说可能是一个可以预测预后的独立指标。     

蛇葡萄素钠协同卡铂体外诱导肺癌Lewis细胞凋亡研究

目的: 考察蛇葡萄素钠（AMP-Na）单用及与卡铂合用对肺癌Lewis细胞增殖的抑制作用,初步探讨AMP-Na抑瘤作用机制。方法: 应用MTT法考察AMP-Na单用及与卡铂合用对肺癌Lewis细胞的细胞毒作用;使用流式细胞仪检测凋亡相关基因Bax 以及Bcl-2表达。结果: 体外细胞毒实验结果表明,AMP-Na 在12.5～200.0 μg/mL的浓度范围内对肺癌Lewis细胞的增殖具有浓度依赖性的抑制作用,其IC50为63.1 μg/mL;6.3、12.5、25.0、50.0 μg/mL的AMP-Na与卡铂3.1～25.0 μg/mL联合用药对卡铂抑制Lewis细胞的增殖作用具有协同效应;流式细胞仪检测结果显示,AMP-Na 12.5、25.0、50.0、100.0 μg/mL单用及与卡铂25.0 μg/mL联合应用处理细胞48 h后,Bax的表达升高,Bcl-2的表达降低（P<0.01）,Bcl-2/Bax比率降低。 结论: 蛇葡萄素钠单用对Lewis细胞的增殖具有一定的抑制作用,与卡铂合用,对Lewis细胞增殖具有协同抑制效应;蛇葡萄素钠可能是通过下调Bcl-2并上调Bax从而促进肿瘤细胞凋亡。     

PI3K/Akt/FOXO3a信号通路介导的保护性自噬参与肺腺癌获得性顺铂耐药表型重塑

目的：比较顺铂压力下人肺腺癌亲本A549细胞与获得性顺铂耐药表型的A549/DDP细胞自噬水平,探寻肿瘤细胞获得性耐药表型重塑的分子机制。方法：不同浓度顺铂（cisplatin, DDP）干预亲本A549细胞及获得性顺铂耐药表型的A549/DDP细胞,应用CCK-8法比较两株细胞耐药指数、免疫印迹法比较自噬相关蛋白（Beclin 1、LC3Ⅱ及p62）表达水平;应用10 μmol/L顺铂（相当于亲本A549细胞半数抑制浓度,即A549 IC50值）干预A549及A549/DDP细胞,构建细胞应激状态,CCK-8法比较两株细胞生存活力,免疫印迹法比较自噬相关蛋白（Beclin 1、LC3Ⅱ及p62）、凋亡相关蛋白（Bcl-2、Bax、Cleaved Caspase-3）、转录因子FOXO3a及其磷酸化蛋白（p-FOXO3a）表达水平,免疫荧光法观察FOXO3a亚细胞定位,并利用自噬晚期抑制剂巴弗洛霉素A1（Baf A1）干预A549及A549/DDP细胞,进一步验证顺铂压力下细胞自噬激活情况;利用蛋白激酶抑制剂干预PI3K/Akt信号通路,免疫印迹法检测顺铂压力下A549及A549/DDP细胞Akt、p-Akt及自噬相关蛋白表达水平,以探寻肿瘤细胞获得性耐药表型重塑的分子机制。结果：与亲本A549细胞相比,获得性顺铂耐药表型的A549/DDP细胞具有更强的顺铂耐药性及较高的基础自噬水平。在10 μmol/L顺铂压力下,A549/DDP细胞存活率明显高于A549细胞;A549细胞中,顺铂通过抑制PI3K/Akt/FOXO3a信号通路,上调转录因子FOXO3a表达水平,下调Bcl-2表达、促进Bax及Cleaved Caspase-3活性片段表达增加,诱导细胞凋亡;A549/DDP细胞中,相同浓度的顺铂通过抑制PI3K/Akt/FOXO3a信号通路,抑制FOXO3a磷酸化,上调Beclin 1及LC3Ⅱ表达、下调p62表达,促进细胞保护性自噬,使耐药细胞获得生存活性。 结论：顺铂诱导亲本A549细胞凋亡可能与抑制PI3K/Akt/FOXO3a信号通路,上调转录因子FOXO3a表达有关;A549/DDP细胞顺铂耐药表型的获得可能与顺铂抑制PI3K/Akt/FOXO3a信号通路,抑制FOXO3a磷酸化,上调细胞保护性自噬相关。     

盐酸表柔比星联合奥沙利铂对肝癌HepG2细胞凋亡的抑制作用

目的: 探讨盐酸表柔比星联合奥沙利铂对肝癌细胞HepG2的抑制作用。方法: 盐酸表柔比星和奥沙利铂单独及联合给药用MTT法测定HepG2细胞的增殖,用Hoechst 33258染色法检测细胞核凋亡情况,用DNA ladder检测DNA的裂解情况。结果: 人肝癌HepG2细胞经奥沙利铂、盐酸表柔比星以及两者联合作用后,在不同时间、不同浓度均能出现细胞抑制作用,并且均呈现剂量-时间依赖效应,与单药组相比,联合用药组抑制率明显增高,q值大部分为 0.85～1.15,呈现明显的相加作用,在(35+5) μg/mL 组作用 24 h,(20+2) μg/mL 组作用48、72 h 时两组实验组q值＜0.85,出现拮抗作用。(25+3) μg/mL 组作用 24 h 为最佳作用时间和作用浓度。结论: 奥沙利铂及盐酸表柔比星对肝癌HepG2细胞有增殖抑制及促凋亡作用,两药联合作用表现为相加作用,其机制需进一步研究。     

C2-神经酰胺诱导大鼠脑胶质瘤细胞C6 的早期凋亡作用

目的: 研究外源性C2-神经酰胺对大鼠脑胶质瘤细胞C6活力的抑制作用以及早期凋亡诱导作用。方法: 采用MTT 法测定C2-神经酰胺对C6 细胞活力的影响;倒置荧光显微系统观察细胞形态变化;AnnexinⅤ PI 双染色流式细胞术对细胞早期凋亡进行定量分析。结果: C2-神经酰胺可显著抑制C6 细胞的活力, IC₅₀为2.2×10^-5 mol·L^-1;荧光染色可见核浓染等细胞凋亡特征形态改变;流式细胞术分析表明C2-神经酰胺可诱导C6 细胞发生早期凋亡作用,且凋亡百分率呈时间及浓度依赖性, C2-神经酰胺2×10^-5 mol·L^-1处理24 h 后平均早期凋亡率高达49.3 %。结论: C2-神经酰胺主要通过诱导早期细胞凋亡对大鼠脑胶质瘤C6 细胞发挥细胞毒作用, 提高神经酰胺水平有望成为肿瘤化疗的新途径。     

下调lncRNA LINC00176对肺癌A549/DDP细胞顺铂耐药和自噬的影响

目的：研究下调lncRNA LINC00176对肺癌A549/DDP细胞顺铂耐药和自噬的影响及机制。方法：qRT-PCR方法测定正常支气管上皮16HBE细胞和肺癌A549、A549/DDP、NCI-H1299、SK-MES-1细胞中LINC00176的表达。将A549/DDP细胞分成对照组、si-NC组、si-LINC00176组、si-LINC00176+Anti-miR-NC组、si-LINC00176+Anti-miR-138-5p组。MTT实验检测顺铂对A549/DDP的半数抑制浓度（IC50）。流式细胞术测定细胞凋亡。Western blot测定LC3-I、LC3-II、Beclin 1、C-Caspase-3蛋白表达。利用荧光素酶报告系统鉴定LINC00176和miR-138-5p的靶向关系。结果：与16HBE细胞比较，A549、A549/DDP、NCI-H1299、SK-MES-1细胞中LINC00176表达水平显著升高（P<0.01）。与A549细胞比较，A549/DDP细胞中LINC00176表达水平显著升高（P<0.01）。与对照组、si-NC组比较，si-LINC00176组A549/DDP细胞IC50显著降低（P<0.01），LC3-II/LC3-I、Beclin 1蛋白表达显著降低（P<0.01），凋亡率、C-Caspase-3蛋白表达、miR-138-5p表达水平显著升高（P<0.01）。LINC00176与miR-138-5p直接结合。与si-LINC00176+Anti-miR-NC组比较，si-LINC00176+Anti-miR-138-5p组A549/DDP细胞IC50显著升高（P<0.01），LC3-II/LC3-I、Beclin 1蛋白表达显著升高（P<0.01），凋亡率、C-Caspase-3蛋白表达显著降低（P<0.01）。 结论：下调lncRNA LINC00176通过靶向上调miR-138-5p能够抑制肺癌A549/DDP细胞顺铂耐药，抑制细胞自噬，诱导细胞凋亡。     

蟾毒灵对食管癌细胞株Kyse150放疗敏感性影响的研究

目的: 研究蟾毒灵对食管癌Kyse150细胞株放疗敏感性的影响。方法: 使用CCK-8方法测定Kyse150细胞株中蟾毒灵的IC₅₀值。通过克隆形成实验结果拟合L-Q曲线,求得细胞存活分数（SF2）和放疗增敏比（SER）。并利用Annexin V-FITC/PI双染法和Western blot测定蟾毒灵对放射诱导食管癌细胞株Kyse150凋亡的影响。最后通过克隆形成实验检测不同剂量蟾毒灵对放疗敏感性影响的变化。结果: CCK-8检测结果显示蟾毒灵在Kyse150细胞株中的IC₅₀值为129.1 nmol/L（95% CI:105.2-158.6）。通过克隆形成实验拟合的L-Q曲线显示蟾毒灵可显著降低放疗后细胞的克隆形成率,且蟾毒灵对Kyse150放疗增敏比（SER）=1.463。Annexin V-FITC/PI双染法和Western blot结果显示蟾毒灵可提高射线诱导的细胞凋亡,并显示蟾毒灵对食管癌细胞株Kyse150放疗增敏作用呈剂量依赖性。结论: 蟾毒灵在食管癌Kyse150细胞株中具有放疗增敏作用,且该作用为剂量依赖性。     

铂类抗癌药物展望

在过去的10年里,铂类抗癌药物取得了重要的进展,又有4种新药,奈达铂、奥沙利铂、舒铂和洛铂相继于1995～2001年成功上市,同时也有多个候选药物因疗效低、毒性大,与顺铂、卡铂比较无优势而在临床试验中被淘汰。目前还有另外9种铂化合物仍在进行临床研究,这些化合物为顺铂和卡铂的类似物、亲脂性配合物、口服铂(Ⅳ)配合物、多核铂配合物以及具有空间位阻的铂配合物。新的铂类抗癌药将在今后10～20年内从那些在临床研究中显示出低毒性、抗癌谱广、与现有药物无交叉耐药性的化合物中产生。     

异丙酚、 咪达唑仑抑制交感神经节细胞钠通道电流的联合作用1

目的: 研究异丙酚、咪达唑仑对交感神经节细胞钠通道电流的联合作用, 探讨两者复合诱导时循环稳定的可能机制。 方法: 全细胞膜片钳技术记录急性分离 SD 大鼠(7~ 10 d)颈上交感神经节细胞钠通道电流;等辐射线图法分析异丙酚、 咪达唑仑复合对交感神经节细胞钠通道电流的影响。 结果: 在钳制电压(V_h ) 80 mV、 刺激电压(V_t )0 mV条件下, 临床相关浓度的异丙酚、咪达唑仑分别使钠通道电流峰值降低27.66%(P <0.01)和19.98%(P <0.05),随浓度增加,抑制作用逐渐增强,50%的钠通道电流受抑制时的浓度(IC₅₀)分别为 33.12 μmol·L^-1 和18.35 μmol·L^-1。 1/4、3/4 IC₅₀ 的异丙酚与咪达唑仑合用时的 IC₅₀ 数值点落在理论上的相加等效线的95%可信区间内; 1/2 IC₅₀ 的异丙酚与咪达唑仑合用时的 IC₅₀ 数值点落在理论上的相加等效线的 95%可信区间的左下方。结论: 临床相关浓度的异丙酚、 咪达唑仑对交感神经节细胞钠通道电流有明显的抑制作用,且呈浓度依赖性; 除等效剂量合用呈协同抑制作用外, 两者复合主要呈相加抑制交感神经节细胞钠通道流; 复合诱导时循环稳定可能与两者催眠作用明显协同导致诱导剂量的降低, 从而减弱对交感神经的抑制有关。     

miR-222、MBD2在胃癌患者中的表达及对铂类化疗敏感性的影响

目的:研究miRNA-222与甲基化CpG结合结构蛋白2（MBD2）水平在胃癌组织中的表达水平及其对铂类化疗敏感性的影响。方法:选择2016年2月至2017年5月在本院就诊的75例原发性胃癌患者作为研究对象。检测患者癌组织及癌旁组织中miR-222、MBD2表达水平；分析miR-222、MBD2水平与胃癌临床病理参数的相关性。将miR-222 inhibitor转染至胃癌SGC-7901细胞中，RT-PCR和Western blot分别检测转染后细胞中miR-222和MBD2的表达水平，MTT法、流式细胞术分别检测转染对细胞增殖、凋亡的影响。结果:胃癌组织中miR-222的阳性表达率显著高于癌旁组织（P<0.05）。胃癌组织中miR-222相对表达量显著高于癌旁组织（P<0.05）。胃癌组织中MBD2的阳性表达率显著低于癌旁组织（P<0.05）。miR-222及MBD2表达水平与分化程度、TNM分期有明显相关性（P<0.05）。转染miR-222 inhibitor的各组SGC-7901细胞中miR-222表达水平均显著低于空白对照组（Control组）和miR-NC组（NC组）（P<0.05）。转染miR-222 inhibitor的各组细胞中MBD2 mRNA和蛋白表达水平显著高于Control组和NC组（P<0.05）。转染miR-222 inhibitor的各组细胞的增殖率显著低于Control组和NC组（P<0.05），且miR-222 inhibitor+顺铂（Cisplatin，CDDP ）组的细胞增殖率显著低于miR-222 inhibitor组及CDDP 组，细胞凋亡率显著高于miR-222 inhibitor组及CDDP 组（P<0.05），且与CDDP联合运用能够更明显地抑制肿瘤细胞的增殖率，促进细胞的凋亡。结论:miR-222在胃癌组织中表达明显上调，MBD2显著下调，其表达高低与胃癌分化程度、TNM分期有明显相关性。miR-222可增强 CDDP 对胃癌的化疗敏感性，其可能通过抑制胃癌中的靶基因MBD2发挥作用。     

不同靶点的反义bcl-2 寡核苷酸对白血病细胞足叶乙甙敏感性影响的研究1

目的 探讨针对bcl-2 mRNA 蛋白编码区的反义寡核苷酸对足叶乙甙诱导HL-60 和K562 细胞凋亡的影响。方法 应用MTT 法和流式细胞仪检测反义寡核苷酸与足叶乙甙联合作用的HL60 和K 562 细胞中bcl-2 蛋白表达和细胞凋亡及足叶乙甙IC₅₀值。结果 10 μmol·L^-1 反义寡核苷酸与足叶乙甙联用能明显抑制HL60 和K562 细胞中bcl-2 蛋白表达和增强细胞对足叶乙甙诱导凋亡的敏感性, 提高细胞的凋亡率;并且针对bcl-2 mRNA 蛋白编码区的反义寡核苷酸比针对bcl-2 mRNA 翻译起始区的反义寡核苷酸作用更强。结论 针对bcl-2 mRNA蛋白编码区的反义寡核苷酸能促进HL60 和K 562 细胞足叶乙甙敏感性。