小窝蛋白Cav-1介导人参皂苷Rb1对小鼠脑缺血再灌注损伤的脑保护作用

目的:探讨小窝蛋白Cav-1介导人参皂苷Rb1对小鼠脑缺血再灌注损伤的脑保护作用。方法:将120只C57BL/6小鼠按随机数字表法分成假手术组、模型组、人参皂苷Rb1组、人参皂苷Rb1+Cav-1 siRNA组、人参皂苷Rb1+siNC组，每组24只。采用大脑中动脉闭塞（middle cerebral artery occlusion,MCAO）法建立小鼠脑缺血再灌注损伤模型。人参皂苷Rb1组在造模后即刻给予人参皂苷Rb1（40 mg/kg，i.p.），假手术组和模型组给予等量生理盐水。人参皂苷Rb1+Cav-1 siRNA组和人参皂苷Rb1+siNC组在造模前24 h分别侧脑室注射Cav-1 siRNA和siNC，其他操作同人参皂苷Rb1组。再灌注24 h时测各组小鼠神经行为学评分，然后每组各取6只小鼠分别检测脑组织含水量、脑梗死体积，大脑皮质半暗带区Cav-1 mRNA和Cav-1、Bcl2、Bax蛋白表达量。结果:与假手术组相比，模型组小鼠的神经行为学评分、脑梗死体积、脑组织含水量明显增加（P<0.05），Cav-1 mRNA和Cav-1蛋白表达量、Bcl-2/Bax比值明显减少（P<0.05）。与模型组相比，人参皂苷Rb1组小鼠的神经行为学评分、脑梗死体积、脑组织含水量明显减少，Cav-1 mRNA和Cav-1蛋白表达量、Bcl-2/Bax比值明显增加（P<0.05）；与人参皂苷Rb1组相比，人参皂苷Rb1+Cav-1 siRNA组神经行为学评分、脑梗死体积、脑组织含水量明显增加,且Cav-1 mRNA和Cav-1蛋白表达量、Bcl-2/Bax比值明显减少（P<0.05）。结论:人参皂苷Rb1对脑缺血再灌注损伤小鼠具有脑保护作用。而Cav-1 siRNA使小鼠脑组织中Cav-1蛋白表达下降后，可以明显逆转人参皂苷Rb1的脑保护作用，说明Cav-1蛋白介导了人参皂苷Rb1对脑缺血再灌注损伤小鼠的脑保护作用。     

miR-145通过调节SOD活性介导人参皂苷Rb1对脑缺血再灌注损伤大鼠的脑保护作用

目的: 探讨人参皂苷Rb1是否通过减少miR-145含量来上调脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织SOD活性发挥脑保护作用。方法: 将60只SD大鼠按随机数字表法分成模型组、生理盐水对照组、人参皂苷Rb1组、人参皂苷Rb1+miR-145模拟物组、人参皂苷Rb1+miR-145质控品组,每组12只。采用大脑中动脉闭塞（MCAO）法建立大鼠脑缺血再灌注损伤模型。人参皂苷Rb1组和生理盐水对照组大鼠在制模后即刻分别腹腔注射人参皂苷Rb1（40 mg/kg）和等量生理盐水;人参皂苷Rb1+miR-145模拟物组和人参皂苷Rb1+miR-145质控品组大鼠在制模前2 d分别侧脑室注射miRNA 145模拟物和miRNA 145质控品,其他操作同人参皂苷Rb1组。再灌注损伤后24 h测各组大鼠神经行为学评分,其中6只大鼠测量脑梗死体积;另6只大鼠取大脑皮质,测定miR-145、超氧化物歧化酶（SOD）含量。结果: 与模型组比较,人参皂苷Rb1组大鼠行为学评分明显降低（P＜0.05）,脑梗死体积明显减小（P＜0.05）,miR-145含量明显减少（P＜0.05）,SOD活性明显增加（P＜0.05）。与人参皂苷Rb1组,人参皂苷Rb1+miR-145模拟物组大鼠行为学评分明显升高（P＜0.05）,脑梗死体积明显增加（P＜0.05）,miR-145含量明显增加（P＜0.05）,SOD活性显著下降（P＜0.05）。结论: 人参皂苷Rb1可以通过减少miR-145含量来上调脑缺血再灌注损伤大鼠脑组织SOD活性发挥脑保护作用。     

人参皂苷Rg1对子痫前期大鼠氧化应激和炎症的调控作用及机制研究

目的：探究人参皂苷Rg1对L-亚硝酸左旋精氨酸甲酯（L-NAME）诱导的子痫前期模型大鼠的改善作用及其机制。方法：实验分为4组（n=15）：空白组、模型组、人参皂苷Rg1低剂量组（25 mg/kg）和高剂量（50 mg/kg）。通过L-NAME诱导建立子痫前期大鼠模型。给药组则在妊娠第5天开始给予相应剂量的人参皂苷Rg1。在第7、13、15、17、19天检查各组实验大鼠的收缩压、舒张压及动脉压；以及测定第20天的24 h尿蛋白。在第21天处死实验大鼠，收集组织样本。采用免疫组化测定胚胎组织中胶质细胞缺失因子1（GCM-1）蛋白；试剂盒测定血清和胚胎组织中的超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）活性，以及丙二醛（MDA）、白介素（IL）-1β、IL-6和肿瘤坏死因子（TNF）-α水平变化。Western blot实验检测胚胎组织中Nrf2、HO-1、NF-κB、IκBα、Bcl-2、Bax、Caspase-3、total Cyt-C和胞浆中Cyt-C蛋白表达。结果： 实验结果显示，人参皂苷Rg1能够明显改善模型大鼠的收缩压、舒张压、动脉压和尿蛋白升高（P<0.05），抑制胎盘组织中GCM-1、Nrf2、HO-1、Bax、Caspase-3、total Cyt-C和胞浆中Cyt-C蛋白表达降低（P<0.05），促进NF-κB、IκBα和Bcl-2蛋白表达显著性升高（P<0.05）；并能够显著性促进模型大鼠血清和胚胎组织中的SOD和CAT活性降低（P<0.05），抑制MDA、IL-1β、IL-6和TNF-α水平升高（P<0.05）。结论：Rg1能够明显改善子痫前期孕鼠的血压和尿蛋白水平，并能够促进其胎盘组织中GCM-1蛋白表达，抑制机体氧化应激损伤、炎症反应，减少胎盘组织细胞凋亡。     

甘草次酸减轻放射性炎症反应的作用机制研究

目的: 探讨甘草次酸（glycyrrhetinic acid, GA）减轻放射性炎症的作用机制。方法: 以4Gy X线照射小鼠巨噬细胞RAW264.7为辐射诱导炎症的细胞模型,采用ELISA法检测细胞上清液中的促炎症因子水平,RT-PCR法检测促炎症因子的mRNA表达水平,cell-based ELISA法检测细胞内磷酸化的p38丝裂原活化蛋白激酶（p38 mitogen - activated protein kinase, p38 MAPK）蛋白表达,凝胶电泳迁移实验（electrophoretic mobility shift assay,EMSA）检测活化蛋白-1（AP-1）的DNA结合活性,荧光酶标仪检测细胞内活性氧（reactive oxygen species, ROS）产生,细胞色素C还原法检测细胞内尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（nicotinamide adenine dinucleotide phosphate, NADPH）氧化酶的活性。结果: 甘草次酸通过抑制X线照射后RAW264.7细胞内促炎症因子IL-6、IL-1β的mRNA表达而降低其分泌。甘草次酸抑制p38MAPK磷酸化及下游转录因子AP-1的DNA结合活性。并通过抑制X线照射后RAW264.7细胞内NADPH氧化酶活性而减少ROS的产生。结论: 甘草次酸可能通过抑制NADPH氧化酶/ROS/p38MAPK信号通路而抑制电离辐射诱导的炎症反应。     

NF-κB介导的连翘酯苷B对宫颈癌细胞增殖活性的抑制作用

目的:研究连翘酯苷B是否通过抑制NF-κB调控p21/Cyclin E/CDK2信号通路,对宫颈癌细胞（HeLa）增殖产生影响。方法:在培养的HeLa细胞,不同浓度（1,2,4 μmol/L）连翘酯苷B处理24、48、72 h后采用MTT实验观察细胞活力变化。观察不同浓度的连翘酯苷B对肿瘤细胞克隆形成的影响。连翘酯苷B处理细胞后,观察转录因子NF-κB（p-p65、p65）蛋白调控变化,并检测蛋白p21、以及细胞周期蛋白Cyclin E、CDK2的表达变化。结果:连翘酯苷B浓度依赖性抑制肿瘤细胞克隆形成,且对HeLa细胞增殖效应的抑制呈时间及浓度依赖性。连翘酯苷B浓度依赖性上调p21蛋白水平,并且下调p-p65、Cyclin E与CDK2水平。 结论:连翘酯苷B通过抑制转录因子NF-κB,影响p21/Cyclin E/ CDK2信号通路抑制了HeLa细胞增殖。     

蛇床子素抑制NF-κB和p38/MAPK改善糖尿病诱导的肾脏损伤

目的：研究蛇床子素（osthole）对链脲佐菌素（STZ）诱导的1型糖尿病（T1DM）小鼠的治疗作用,并探讨其相关机制。方法：构建STZ诱导的1型糖尿病小鼠模型,将小鼠随机分为正常对照组、STZ模型组和STZ+osthole组（20 mg/kg）。观察各组小鼠体质量、血糖、尿蛋白、尿素氮和肌酐以检测肾脏功能。H&E染色和PAS染色检测肾脏组织损伤程度,Sirius Red染色检测肾脏纤维化程度。CD68和F4/80免疫荧光染色观察肾脏组织巨噬细胞浸润情况,RT-qPCR检测肾脏组织中肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α, TNF-α）和白介素-6（interleukin-6, IL-6）的mRNA表达水平,Western blot检测磷酸化的核因子κB p65（nuclear factor kappa-B p65, NF-κB p65）、NF-κB p65、NF-κB抑制蛋白（inhibitor of nuclear factor kappa-B alpha, IκBα）、p-IκBα和磷酸化-丝裂原活化蛋白激酶p38（p-p38）的蛋白相对表达水平。结果：与STZ模型组相比,在蛇床子素治疗后,尿蛋白、尿素氮、肌酐和肾重/体重均显著降低（P<0.05或P<0.01）。肾脏组织结构紊乱、系膜基质面积、胶原纤维堆积、巨噬细胞浸润均显著改善（P<0.05或P<0.01）。促炎细胞因子TNF-α和IL-6的mRNA表达水平显著降低（P<0.05或P<0.01）;磷酸化的NF-κB p65、磷酸化的IκBα和磷酸化的p38蛋白表达水平均显著下调（P<0.05或P<0.01）,而NF-κB p65、IκBα蛋白表达水平上调（P<0.05）。结论：蛇床子素可有效改善糖尿病诱导的肾脏损伤,该保护作用可能与其抑制NF-κB和p38/MAPK信号通路有关。蛇床子素可能成为防治糖尿病相关肾脏损伤的潜在药物。     

黄芪皂苷通过调控蛋白激酶R样内质网激酶途径抑制高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞自噬的研究

目的:探讨黄芪皂苷通过调控蛋白激酶R样内质网激酶（PERK）途径影响高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞（ARPE-19细胞）自噬水平。方法:体外培养人视网膜色素上皮细胞,实验分为正常对照组（5.5 mmol/L葡萄糖）,高糖组（30 mmol/L葡萄糖）,黄芪皂苷组（30 mmol/L葡萄糖+2.5、5、10 μg/mL黄芪皂苷）。噻唑蓝比色（MTT）法检测ARPE-19细胞活性,流式细胞仪检测细胞凋亡率,蛋白免疫印迹（Western blot）法检测自噬相关蛋白及PERK途径关键因子表达水平。添加PERK特异性抑制剂GSK2606414,Western blot检测对细胞自噬水平的影响。结果:与正常对照组比较,高糖组ARPE-19细胞活性降低,凋亡率升高,自噬相关蛋白LC3表达水平明显升高,另一自噬相关蛋白p62蛋白表达水平明显降低。PERK途径关键因子葡萄糖调节蛋白78（GRP78）、Perk和增强子结合蛋白的同源蛋白（CHOP）表达水平明显上调,差异具有统计学意义（P＜0.05）。与高糖组比较,黄芪皂苷组ARPE-19细胞活性升高,凋亡率降低,LC3蛋白表达水平明显下调,p62蛋白表达水平明显上调,GRP78、Perk和CHOP蛋白水平明显降低,差异具有统计学意义（P＜0.05）。PERK特异性抑制剂GSK2606414能够进一步抑制黄芪皂苷组ARPE-19细胞LC3蛋白表达水平,上调p62蛋白表达水平,差异具有统计学意义（P＜0.05）。结论:黄芪皂苷能够抑制高糖诱导的人视网膜色素上皮细胞自噬水平,其作用机制可能与抑制蛋白激酶R样内质网激酶途径有关。     

杜仲抗骨质疏松及其机制研究进展

骨质疏松是以骨质丢失和骨微体结构破坏为特征的骨代谢疾病,骨质疏松的防治形势严峻。现代药理学研究表明,杜仲可通过调节雌激素水平、骨代谢相关细胞因子及护骨素的表达对成骨细胞、破骨细胞髓间充质干细胞增殖分化综合作用,有效防治骨质疏松。杜仲防治骨质疏松的主要活性成分为木脂素类、环烯醚萜类、黄酮类及骨和苯丙素类。本文通过查阅近年来国内外杜仲研究相关文献,对杜仲抗骨质疏松药理活性、作用机制、主要活性成分研究进行分析、归纳和总结,为杜仲抗骨质疏松药物的开发及杜仲综合开发利用提供参考。     

中药及其活性成分防治抑郁症的药理靶点与临床应用

抑郁症发病机制复杂,多种转录因子、信号通路等参与其发生、发展过程。中药的多成分、多靶点作用在抑郁症的防治中具有独特优势。本文根据国内外相关文献,综述了中药及其活性成分对转录因子（CREB、NF-κB、Nrf2）、分子信号通路（BDNF-TrkB、MAPK、GSK-3β、TLR-4-NLRP3-IL-1β）等靶点干预的药理作用及中药复方防治抑郁症的临床应用。     

α-酮戊二酸脱氢酶复合物在缺血性脑卒中后的适应性再灌注中的保护作用研究

目的：研究α-酮戊二酸脱氢酶复合物（α-KGDHC）在大鼠缺血性脑卒中后的适应性再灌注中的保护作用,且探讨其作用机制。方法：建立脑中动脉闭塞（middle cerebral artery occlusion, MCAO）大鼠的缺血/再灌注（ischemia/reperfusion, I/R）模型,TTC染色后使用成像软件计算缺血后的脑梗死体积。化学方法检测α-KGDHC活性,评估α-KGDHC活性随脑缺血时间的变化趋势,并比较普通再灌注组和适应性再灌注组的差异;用CoCl2处理大鼠神经母细胞瘤细胞B35和人神经母细胞瘤细胞SH-SY5Y模拟细胞缺氧,用E1K siRNA抑制α-KGDHC活性,Western blot检测凋亡抑制蛋白Bcl-2,促凋亡蛋白Bax和Caspase 3的表达变化。结果：在MCAO模型中适应性再灌注较普通再灌注进一步减少了脑梗死体积（P<0.05）,凋亡蛋白Caspase 3表达量降低;大脑皮层和海马脑组织中α-KGDHC活性随着缺血时间延长而降低（P<0.05）,适应性再灌注抑制了α-KGDHC活性衰减的速率（P<0.05）。通过干扰α-KGDHC的组分E1K可以抑制Bcl-2的表达（P<0.05）,促进Bax的表达（P<0.05）和Caspase 3的表达（P<0.05）。 结论：研究表明,α-KGDHC是脑缺血后适应性再灌注脑保护作用的重要因子,其发挥脑保护作用可能与抑制凋亡通路的活化有关。     

妊娠期糖尿病中患者miR-138-5p通过调控缺氧诱导因子1α保护β细胞功能

目的:探讨在妊娠期糖尿病(GDM)患者中miR-138-5p对胰岛β细胞功能的影响及其相关作用机制。方法:通过RT-qPCR对比15例GDM患者与15例的正常健康孕妇外周血中miR-138-5p的表达差异;miR-138-5p mimic及inhibitor分别转染入β细胞系INS-1细胞中,过表达或抑制其在该细胞中的表达水平,并通过RT-qPCR验证转染效率;利用MTT增殖实验、Annexin V-FITC凋亡实验及胰岛素释放实验分别检测miR-138-5p对INS-1细胞的增殖、凋亡和胰岛素释放能力的影响;通过miRNA靶基因预测软件TargetScan筛选miR-138-5p的目标靶基因,并利用双荧光素酶基因报告及Western blot实验进行验证;功能挽救实验证实miR-138-5p是否通过靶向调控其目标基因而发挥对INS-1细胞的增殖、凋亡及胰岛素释放能力影响;Western blot实验检测miR-138-5p在INS-1细胞中作用的分子信号通路。结果:与正常健康孕妇相比,GDM患者外周血中miR-138-5p的表达显著低表达;在INS-1细胞中转染miR-138-5p mimic及inhibitor后可显著促进或抑制miR-138-5p的表达;过表达miR-138-5p可明显促进INS-1细胞的增殖,抑制其发生凋亡并促进细胞对胰岛素的释放能力;而下调miR-138-5p的表达,可显著抑制INS-1细胞的增殖,促进其发生凋亡及抑制细胞的胰岛素释放能力;通过miRNA靶基因预测软件TargetScan筛选缺氧诱导因子1α(hypoxia-inducible factor-1α, HIF-1α)为miR-138-5p的目标靶基因,双荧光素酶基因报告实验及Western blot实验提示miR-138-5p可抑制INS-1细胞中HIF-1α的表达;功能挽救实验证实miR-138-5p通过调控HIF-1α的表达,影响INS-1细胞的增殖、凋亡及胰岛素释放能力;Western blot实验明确miR-138-5p可能通过靶向调控HIF-1α的表达,影响PI3K/AKT信号通路中PI3K、AKT及其磷酸化后的p-PI3K、p-AKT蛋白而发挥对INS-1细胞的作用。结论:在GDM患者中,miR-138-5p可能通过靶向调控HIF-1α的表达,进而影响PI3K/AKT信号通路,促进β细胞的增殖、抑制其凋亡,并促进其胰岛素释放能力从而保护β细胞的功能。     

转化生长因子-β1介导的Smads和MAPKs信号通路在糖尿病肾病中的作用及其抑制剂研究进展

转化生长因子-β₁（TGF-β₁）参与糖尿病肾病（DN）的进程,现已作为临床慢性肾病进展的重要生物学标志物和治疗靶标。TGF-_β1通过Smads和MAPKs信号通路促进肾脏纤维化、细胞外基质集聚以及足细胞损伤等。糖尿病实验动物、糖尿病肾病患者Smad3、p38MAPK表达增加,促进了肾脏的纤维化,Smad7抑制肾脏纤维化的进程,对TGF-β₁/Smads通路起着负向调控作用。抑制p38MAPK信号通路可减少纤维粘连蛋白（FN）的表达。由于毒副作用等原因,TGF-β₁抑制剂大多停留在临床前研究阶段。     

二氢杨梅素防治磨损颗粒诱导的小鼠颅骨骨溶解的实验研究

目的: 探讨二氢杨梅素（DMY）对磨损颗粒诱导的小鼠颅骨骨溶解的作用。方法: 选用30只8周龄雄性C57BL/J6小鼠,随机分成3组,每组10只。分别为假手术组（Sham）、阳性对照组（Control）和二氢杨梅素组（DMY）。假手术组手术不加钛颗粒,阳性对照组和DMY组手术时颅骨部位注入30 mg钛颗粒构建小鼠颅骨骨溶解模型。术后DMY组每天连续予500 mg/kg DMY灌胃;假手术组和阳性对照组给予相应体积的生理盐水灌胃。14 d后取眼眶静脉血,随后处死所有实验动物并收集颅骨标本。所有标本行Micro-CT扫描、采集计算机3D重建图像并进行定量分析,随后标本脱钙后以石蜡包埋,进行病理学分析。 结果: Micro-CT扫描3D重建图像显示DMY组小鼠颅骨表面骨溶解严重程度显著低于阳性对照组;Micro-CT扫描显示DMY组小鼠颅骨骨密度明显高于阳性对照组（P<0.05）。HE染色及TRAP染色分析显示,与阳性对照组相比,DMY组小鼠颅骨骨溶解区域破骨细胞数明显减少。DMY组小鼠血清IL-1β、TNF-α、NF-κB受体激活剂配体（RANKL）水平显著低于阳性对照组（P<0.05）;骨保护素（OPG）水平显著高于阳性对照组（P<0.05）。体外细胞培养实验显示,DMY可在体外显著抑制RANKL诱导的破骨细胞分化。结论: DMY可有效抑制磨损颗粒诱导的小鼠颅骨骨溶解。     

人参皂苷诱导骨髓间充质干细胞对急性肝功能衰竭大鼠肝组织再生及Wnt/β-catenin信号表达的影响

目的:分析人参皂苷诱导骨髓间充质干细胞（BMSC）对急性肝功能衰竭（ALF）大鼠肝组织再生及Wnt/β-catenin信号表达的影响。方法:选取SPF级Wistar雄性大鼠66只,其中1只行BMSCs培养,随机选取50只大鼠制备ALF模型,24 h后随机选取其中5只断颈处死,依据大鼠肝功能与组织病理学判别其是否成功造模。剩余15只大鼠将等剂量0.9%氯化钠溶液腹腔注入,作为正常组。成功造模的45只大鼠随机分成3组,分别为BMSCs组、模型组及人参皂苷诱导BMSCs组,每组各15只。造模后6 h,模型组和正常组大鼠由尾静脉注入1 mL细胞培养液,BMSCs组注入1 mL BMSCs悬液（细胞浓度2.0×109/L）,人参皂苷诱导BMSCs组注入1 mL人参皂苷诱导分化BMSCs悬液（细胞浓度2.0×109/L）,连续给药10 d。观察大鼠肝脏组织病理状况,血清总胆红素（TBil） 、AST、ALT、TNF-α、IL-6含量,肝组织内Wnt7b、Wnt7a及Wnt2基因表达。结果:正常组大鼠肝细胞无坏死、变性,整齐排列,肝小叶结构清晰,汇管区内没有炎性细胞浸润;模型组大鼠肝细胞表征为广泛坏死,肝小叶内全部肝细胞溶解坏死,网状的支架发生塌陷,汇管区和周边存在大量粒细胞、单核细胞与淋巴细胞的浸润,残余肝细胞变性、肿胀且伴随胆汁淤积;BMSCs组及人参皂苷诱导BMSCs组大鼠肝小叶结构趋向完整,肝细胞坏死、变性数量减少,汇管区内有少许炎性细胞浸润,人参皂苷诱导BMSCs组又优于BMSCs组。和正常组相比,模型组大鼠血清TBil、AST、ALT、IL-6及TNF-α含量上升;和模型组相比,BMSCs组、人参皂苷诱导BMSCs组大鼠血清TBil、AST、ALT、IL-6及TNF-α含量降低;和BMSCs组相比,人参皂苷诱导BMSCs组大鼠血清TBil、AST、ALT、IL-6及TNF-α含量降低,差异有统计学意义（P＜0.05）。和正常组相比,模型组大鼠肝组织内Wnt7b、Wnt7a、Wnt2 mRNA相对表达量降低;和模型组相比,BMSCs组、人参皂苷诱导BMSCs组大鼠肝组织内Wnt7b、Wnt7a、Wnt2 mRNA相对表达量升高;和BMSCs组相比,人参皂苷诱导BMSCs组大鼠肝组织内Wnt7b、Wnt7a、Wnt2 mRNA相对表达量升高,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论:人参皂苷诱导BMSCs可显著改善ALF大鼠肝功能,其作用机制可能为激活Wnt/β-catenin信号通路加速肝脏再生。     

仙灵骨葆联合益生菌对骨质疏松性骨折大鼠的愈合作用

目的: 研究仙灵骨葆联合益生菌对骨质疏松性骨折大鼠的愈合作用。方法: 将雌性SD大鼠50只随机分成5组，分别为常规骨折对照组、骨质疏松性骨折模型组、仙灵骨葆组、益生菌组、仙灵骨葆联合益生菌组，每组10只。除常规骨折对照组外，其余均切除双侧卵巢制备骨质疏松模型。6周后，每组均制备右侧股骨中段横型骨折模型。然后分别灌胃给予生理盐水、仙灵骨葆（250 mg·kg^-1·d^-1）及益生菌（12.5 g·kg^-1·d^-1）。术后5周取各组右侧股骨标本，骨密度仪测量骨密度，CR摄片和Micro-CT扫描观察股骨相关参数。酶联免疫法测定大鼠血清骨源性碱性磷酸酶（BALP）、抗酒石酸酸性磷酸酶（TRACP），显色法测定钙浓度（Ca），HE染色观察骨折骨膜组织病理变化。结果: 与骨质疏松性骨折组比较，给予仙灵骨葆或益生菌组的BALP水平增高，TRACP水平降低，骨密度和骨痂量增多，骨折线模糊，骨小梁数量和厚度增加，骨小梁间隔降低，而仙灵骨葆联合益生菌组作用最明显（P<0.05，P<0.01）。结论: 益生菌和仙灵骨葆均有促进骨质疏松性骨折愈合的治疗作用，联合用药有更佳效果。     

Nrf2基因的过表达对酒精诱导的HepG2细胞损伤的保护作用及机制

目的: 探讨于人类肝癌细胞系HepG2中过表达Nrf2基因后对由酒精处理引起的细胞氧化压力和炎症反应的影响和机制。方法: 经过Keap1 siRNA预处理的HepG2细胞经含 75 mmol/L 酒精的培养基孵育 72 h 后,应用四甲基偶氮唑盐比色法（MTT法）检测细胞活性以及应用Western blot和荧光定量实时聚合酶链反应（PCR）方法检测细胞内氧化压力和促炎症蛋白的表达水平。同时,转录因子核因子κB（NF-κB）的活性以及其抑制蛋白IκBα的表达也通过Western blot检测。结果: 经含75 mmol/L酒精的培养基孵育 72 h 后,HepG2细胞的细胞活性显著下降,同时伴随着细胞内抗氧化酶表达水平的显著下降和促炎症蛋白表达的显著上升。Nrf2基因的过表达显著增加了HepG2细胞活性,恢复了细胞内抗氧化酶的表达水平,并改善了细胞内的炎症反应（P<0.05）。Nrf2的过表达亦通过恢复IκBα的水平降低了由酒精处理诱导的转录因子NF-κB的活性（P<0.05）。 结论: Nrf2基因的过表达可以有效改善酒精造成的HepG2细胞内氧化压力和炎症反应,该效应部分通过抑制NF-κB的活性来完成。     

人参皂苷通过Aldolase/AMPK/PINK1信号通路减轻油酸诱导的HL-7702细胞损伤

目的: 研究人参皂苷对油酸(OA)诱导人肝HL-7702细胞损伤的保护作用,及其对Aldolase/AMPK/PINK1信号通路的影响。方法: 体外培养HL-7702细胞,并将其分为对照组(C)、油酸刺激组(OA)、OA+人参皂苷组(OA+Rg1)、OA+Compound C组(OA+CC)、OA+Compound C+人参皂苷组(OA+CC+Rg1)。CCK8法和Hoechst染色法检测HL-7702细胞增殖活性,流式细胞术检测HL-7702细胞凋亡率和线粒体膜电位,ATP测定分析HL-7702细胞中ATP含量,Western blot分析HL-7702细胞中Cleaved caspase-3、PINK1、MFN2、Aldolase和p-AMPK蛋白表达水平。结果: 与C组比较,OA组细胞增殖活力明显降低(P<0.05),细胞凋亡率和促凋亡蛋白Cleaved caspase-3表达水平明显升高(P<0.05),ATP含量、线粒体膜电位(TMRE)和线粒体自噬蛋白PINK1表达水平明显降低(P<0.05);与OA组比较,OA+Rg1组细胞增殖活力明显升高(P<0.05),细胞凋亡率和Cleaved caspase-3蛋白表达水平明显降低(P<0.05),ATP含量、TMRE值、Aldolase、PINK1和p-AMPK蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与OA+Rg1组比较,OA+CC+Rg1组HL-7702细胞增殖活力及AMPK磷酸化水平明显降低(P<0.05);Aldolase基因沉默后,Rg1不能增高细胞中PINK1和p-AMPK蛋白表达及细胞的增殖活性。结论: 人参皂苷可通过调节Aldolase/AMPK/PINK1信号通路活性改善油酸诱导的人肝HL-7702细胞损伤。     

华佗再造丸中单体成分的细胞保护活性研究

目的: 鉴定华佗再造丸中具有细胞保护作用的化合物。方法: 采用PC12细胞和小鼠脑微血管内皮细胞（bEnd.3）氧化损伤和缺糖缺氧再灌注（OGR）损伤模型测定,从中得到的72种单体成分中具有细胞保护活性和促神经细胞增殖活性的化合物。结果: 可提高氧化损伤的PC12细胞存活率的化合物有槲皮素和异鼠李素;可提高OGR损伤的PC12细胞存活率的单体有异甘草素、3-咖啡酰奎尼酸和人参皂苷Rb1。 可促进正常PC12细胞增殖的单体化合物有人参皂苷Rg2、胆酸钠等8种化合物。可提高氧化损伤的bEnd.3细胞存活率的单体有槲皮素、芍药苷等6种化合物。可提高OGR损伤的bEnd.3细胞存活率的单体有槲皮素、人参皂苷Rg1等6种化合物。结论: 除槲皮素对不同细胞不同损伤模型细胞均有保护作用,为广谱细胞保护剂外,其余化合物均有一定的细胞选择性或模型选择性保护作用,对神经细胞增殖有促进作用的化合物未见有细胞保护作用。这些结果为华佗再造丸治疗脑血管疾病提供了进一步的药理学依据。     

Treg细胞抑制基质金属蛋白酶-9对类风湿性关节炎伴急性脑缺血损伤的研究进展

近些年的研究相继发现类风湿性关节炎（rheumatoid arthritis,RA）患者较健康人群更易得急性脑缺血等心脑血管疾病,RA的发生也会进一步加重急性脑缺血的发展。其中,基质金属蛋白酶-9（matrix metaloproteinase-9,MMP-9）可降解细胞外基质,破坏血脑屏障,引发炎性细胞和致炎因子等浸润,对构建脑缺血后炎性反应的级联放大网络起到重要作用。Treg细胞,即调节性T细胞（ regulatory T cells ）,作为免疫抑制性细胞可多途径抑制MMP-9的活性,从而治疗急性脑缺血,缓解RA症状：（1）Treg细胞可通过负反馈阻断NF-κB通路,抑制MMP-9的活性;（2）Treg细胞可调控转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1)和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor-α,TNF-α)的表达抑制MMP-9的转录;（3）Treg细胞可通过转化急性脑缺血后被激活的小胶质细胞/巨噬细胞的极化类型,抑制小胶质细胞/巨噬细胞对MMP-9的促分泌作用,加强M2型小胶质细胞/巨噬细胞的免疫耐受;（4）Treg细胞可释放抑炎因子,拮抗致炎性的Th17细胞,平衡体内免疫,缓解RA和急性脑缺血所引发的炎症等。本文综述Treg细胞在RA合并急性脑缺血中通过抑制MMP-9的活性等起治疗作用,旨在为类风湿性关节炎合并急性脑缺血的有效治疗和研究提供参考。     

刺芒柄花素对去势骨质疏松大鼠P38MAPK/MMP-9信号通路的影响

目的:观察刺芒柄花素（formononetin,FOR）对大鼠去势骨质疏松的干预作用,探讨其防治骨质疏松的机制。方法:采用切除雌性大鼠双侧卵巢法复制骨质疏松大鼠模型,按随机对照分组原则将60只清洁级SD雌性大鼠分为对照组、骨质疏松模型组、雌二醇组(50 μg/kg)及刺芒柄花素高、中、低剂量组(160、80、40 mg/kg),每组10只,除对照组外,其他组于造模后一周给予雌二醇、刺芒柄花素治疗,每天1次,连续12周,末次给药后24 h,取大鼠血清检测酒石酸酸性磷酸酶（TRACP）、Ca2+、Mg2+等指标变化;取大鼠左侧股骨采用RT-PCR检测基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、TNF-α、IL-6 mRNA表达;Western blot法检测骨组织总P38MAPK、磷酸化P38MAPK、MMP-9、TNF-α、IL-6蛋白表达;取右侧股骨进行骨密度(bone mineral density,BMD)测定。结果:与骨质疏松模型组比较,刺芒柄花素高、中剂量组可增加骨质疏松大鼠骨密度,降低骨质疏松大鼠血清中TRACP含量,升高血清 Mg2+、Ca2+含量,使骨组织MMP-9、TNF-α、IL-6 mRNA和蛋白表达下调;磷酸化P38MAPK mRNA蛋白表达上调。结论:刺芒柄花素对去势骨质疏松大鼠有较好的防治作用,其机制可能与抑制骨组织MMP-9的合成和分泌、破骨细胞的骨吸收及调控P38MAPK/MMP-9 信号通路有关。