d-Penicillamine2,5-enkephalin作为底物考察三明治大鼠原代肝细胞的转运体功能研究

目的: 通过液相色谱-串联质谱(LC/MS/MS)法测定d-Penicillamine2,5-enkephalin (DPDPE)在肝细胞和Hank's缓冲液中的浓度,研究DPDPE作为底物用于“三明治”培养大鼠原代肝细胞(SCRH)的转运体功能。方法: 将SCRH与溶于Hank's缓冲液的DPDPE共温孵,采用LC/MS/MS法测定细胞内蓄积的和外排到缓冲液中的DPDPE浓度,用于评价模型药物α-萘异硫氰酸酯(ANIT)对参与DPDPE摄取的Oatp和负责DPDPE外排的Mrp2的转运功能的影响。结果: 建立的样品处理和测定方法能够满足体外转运实验需要的灵敏度和线性范围,在Hank's缓冲液中线性范围为0.5~50 ng/mL(r²=0.9995),在细胞基质中线性范围为 0.1~5 ng/well(r²=0.9997),样品处理操作简便。日内日间精密度(RSD)均小于15%;提取回收率大于65%。ANIT可抑制DPDPE在SCRH胆管侧的外排及基底侧的摄取,对基底侧外排无显著影响。结论: 该分析方法选择性好,灵敏度高,操作简便,并成功地用于将DPDPE作为探针底物研究SCRH模型上转运体的功能。     

葡萄糖和胰岛素调节三明治肝细胞中胆酸相关转运体表达及功能

目的: 测定葡萄糖、胰岛素等糖尿病血糖中的异常因素对体外培养肝细胞中胆汁酸相关转运体表达及功能的影响。方法: 分离并用三明治法培养大鼠原代肝细胞,用不同浓度葡萄糖或胰岛素培养 72 h,使用胆盐类似物Cholyl-lysyl-fluorescein(CLF)进行摄取转运体钠/胆汁酸共转运体(Na⁺/bile acid cotransporter, ntcp)及外排转运体胆盐外排泵(Bile salt export pump, bsep)转运体功能学实验,并用荧光定量PCR法测定胆汁酸相关转运体ntcp、bsep及调节胆汁酸代谢转运的核受体(Farnesoid X receptor,fxr)的mRNA表达变化。结果: 高浓度的葡萄糖和胰岛素均使CLF的胆泡排泄减少。高糖和高胰岛素均能够降低ntcp的表达(3~4倍),增加bsep的表达(约2倍),高糖能够降低fxr的水平(约 0.5 倍),高胰岛素增加fxr的水平(约 1.5 倍)。结论: 葡萄糖和胰岛素水平异常均会对胆汁酸相关转运体表达和功能造成影响;三明治原代肝细胞可用于胆酸和药物肝胆分布研究。     

镀银粉煤灰制备及其在柔性导电膜中的应用

目的 在粉煤灰表面镀银,以优化粉煤灰在柔性基体中的润湿性,提高其与柔性基体之间的界面结合力.方法 首先对粉煤灰进行高温碱洗、粗化、敏化和活化预处理,随后进行化学镀银,通过研究镀液中硝酸银、氨水和甲醛用量等工艺参数,获得导电性能优异且镀层致密、均匀的镀银粉煤灰(简称Ag/FA)粉末.最后将导电性最佳的Ag/FA粉末作为中间填料,以液体硅橡胶为柔性基体,二甲苯为溶剂,制备三明治结构柔性导电膜.采用扫描电子显微镜(SEM)、透射电子显微镜(TEM)、X-射线衍射仪(XRD)以及电阻率测试仪等设备,对不同影响因素下Ag/FA粉末与柔性导电膜的微观形貌、组成和导电性进行表征.结果 研究结果显示,粉煤灰镀银最佳配方为:硝酸银10 g/L,氨水40 mL/L,甲醛40 mL/L,温度30℃,时间30 min.该工艺条件下,Ag/FA粉末的体积电阻率可达4.68×10?4?·cm.当Ag/FA粉末在柔性硅胶膜中的质量分数为7.69％时,即可形成完整的导电通路;继续增加至25％时,三明治结构柔性导电膜的导电性优异,体积电阻率可达2.65×10?3?·cm,可反复折叠、弯曲和拉伸.结论 采用简单的化学镀银工艺可使粉煤灰表面导电功能化,改善其与柔性聚合物材料之间的结合力,开拓功能化粉煤灰在电磁屏蔽和柔性电子材料领域的应用.     

肝脏巨噬细胞及其在肝损伤和修复中的作用

肝脏巨噬细胞在肝脏损伤和修复过程中具有重要调节作用,根据不同的来源和表型,肝脏巨噬细胞分别具有清除细菌病原体、呈递抗原、促进或者抑制肝脏炎症反应的能力,直接参与肝脏疾病的发生发展和损伤修复。本文就肝脏巨噬细胞的功能及其在肝脏损伤和修复中的调节作用进行综述,并总结治疗肝脏疾病的潜在巨噬细胞靶点。     

平面图形构型及其在对头排样最优化中的应用

针对对头排样最优化中对排单元的构造问题,提出了一种基于平面图形构型算法的对排单元构造方法,有效地简化了对排样零件图形的处理,提高了排样的自动化程度和材料利用率。     

定量蛋白质组学常用研究技术及其在肝源性疾病发病机制中的应用进展

蛋白质组学是以蛋白质组为研究对象的学科,是后基因组时代重要的组学技术。蛋白质是基因表达的最终产物,蛋白质表达的整体研究,对疾病机制、药物疗效研究意义重大,其中的定量蛋白质组学近年来应用广泛。肝脏是体内最重要的药物代谢器官,超过70%的药物经过肝脏代谢。本文旨在介绍定量蛋白质组学目前为止的常用技术,以及近五年定量蛋白质组学在药物性肝损伤、非酒精性脂肪性肝病、肝纤维化和肝硬化、肝细胞癌等常见肝病中的应用进展。