转化生长因子-β1介导的Smads和MAPKs信号通路在糖尿病肾病中的作用及其抑制剂研究进展

转化生长因子-β₁（TGF-β₁）参与糖尿病肾病（DN）的进程,现已作为临床慢性肾病进展的重要生物学标志物和治疗靶标。TGF-_β1通过Smads和MAPKs信号通路促进肾脏纤维化、细胞外基质集聚以及足细胞损伤等。糖尿病实验动物、糖尿病肾病患者Smad3、p38MAPK表达增加,促进了肾脏的纤维化,Smad7抑制肾脏纤维化的进程,对TGF-β₁/Smads通路起着负向调控作用。抑制p38MAPK信号通路可减少纤维粘连蛋白（FN）的表达。由于毒副作用等原因,TGF-β₁抑制剂大多停留在临床前研究阶段。     

玉夏胶囊对自发性高血压大鼠心肌纤维化的影响

目的: 观察玉夏胶囊对自发性高血压（SHR）大鼠心肌纤维化的影响及可能机制。方法: SHR 28只,随机分为模型组(0.5% CMC-Na 5 mL/kg)、玉夏胶囊高（0.6 g/kg）、中(0.3 g/kg)、低(0.15 g/kg)剂量组,每组7只。另设Wistar-Kyoto（WKY）正常对照组(0.5% CMC-Na 5 mL/kg)大鼠7只。每天灌胃一次,连续10周。VG染色观察心肌胶原纤维变化;检测心肌羟脯氨酸（Hyp)、血管紧张素II(AngII)含量;免疫组化法检测转化生长因子β₁（TGF-β₁）蛋白的表达;Western blot检测心肌I型胶原纤维(Col I）、III型胶原纤维(Col III)和结缔组织生长因子（CTGF）蛋白的表达。结果: 玉夏胶囊能减轻SHR心肌组织胶原纤维沉积,降低Hyp和AngII的含量,减少TGF-β₁、CTGF、Col I和Col III的蛋白表达。结论: 玉夏胶囊可改善SHR的心肌纤维化,其机制可能与降低AngII含量,下调TGF-β₁和CTGF表达, 减少Hyp、Col I和Col III产生有关。     

自发性高血压大鼠颈动脉中膜基质金属蛋白酶-9和基质金属蛋白酶抑制剂-2的表达及替米沙坦的干预作用

目的:观察自发性高血压大鼠(SHR)颈动脉基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)的表达, 并探讨替米沙坦对其的干预作用。方法:30只雄性12周龄的SHR 随机分为3组:高血压组(SHR)、替米沙坦低剂量组(TelL)、替米沙坦高剂量组(TelH), 并设同周龄雄性的WKY 大鼠为对照组(WKY, n=10)。干预18周, 观察各组大鼠SBP 、颈动脉中膜胶原面积百分比。用免疫组化评估MMP-9和TIMP-2在颈动脉中膜的表达水平。结果:两周后TelH 组SBP 明显低于SHR 组(P<0.01), 其降压作用持续至实验结束, 而TelL 组SBP 与SHR 组无统计学差异(P>0.05)。SHR 组中膜胶原面积百分比明显高于WKY 组(P<0.01), TelH 、TelL 组的中膜胶原面积百分比低于SHR 组(P<0.05)。SHR 组中膜MMP-9的吸光度值(IOの明显低于WKY 组(P<0.01), TelH 、TelL 组中膜MMP-9的IOD 值高于SHR 组(P<0.05)。SHR 组中膜TIMP-2的IOD 值明显高于WKY 组(P<0.01), TelH 、TelL 组中膜TIMP-2的IOD 值低于SHR 组(P<0.05)。结论:SHR 颈动脉中膜MMP-9表达减少, TIMP-2表达增多, 替米沙坦能通过降压及上调MMP-9、下调TIMP-2的表达, 从而减轻颈动脉的纤维化。     

芹菜素纳米乳抗大鼠肝纤维化作用及对MMP-1，TIMP-1的影响

目的: 观察芹菜素纳米乳对CCl4诱导大鼠肝纤维化模型的作用及对基质金属蛋白酶-1（MMP-1）、金属蛋白酶抑制因子-1（TIMP-1）的影响。方法: 采用CCl₄复制大鼠肝纤维化模型,自造模之日开始,灌胃给药,1次/d,连续8周。末次给药后24 h,取大鼠血和肝脏,观察芹菜素纳米乳对血清肝功能指标（ALT、AST）、肝纤维化指标（HA、LN、Ⅲ-C、Ⅳ-C）和肝组织中超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醛（MDA）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、羟脯氨酸（Hyp）、MMP-1、TIMP-1水平的影响。结果: 与模型组比较,各给药组肝功能和肝纤维化均有不同程度的改善。结论: 芹菜素纳米乳对CCl4诱导肝纤维化大鼠具有一定的治疗作用,其作用可能与抗脂质过氧化反应、影响MMP-1和TIMP-1表达有关。     

miR-200a对肾小管上皮细胞转分化的调控作用

目的: 探讨miR-200a对TGF-β₁诱导的肾小管上皮细胞间质转分化的影响。 方法: 体外培养肾小管上皮细胞（HK-2）,TGF-β₁(终浓度为10 ng/mL)作用12、24、48 h,采用qPCR检测miR-200a的表达,qPCR和Western Blot检测上皮转分化相关蛋白E-cadherin和ɑ-SMA的mRNA和蛋白表达;用agomir和antagomir分别转染细胞,其中转染agomir后用TGF-β₁诱导肾小管上皮细胞,qPCR、Western Blot和细胞免疫荧光检测E-cadherin和ɑ-SMA的mRNA和蛋白表达情况。 结果: 在TGF-β₁诱导下miR-200a的表达随着时间逐渐降低（P<0.05）,E-cadherin表达呈降低趋势（P<0.05）,ɑ-SMA表达逐步上调（P<0.05）;agomir使miR-200a表达明显升高（P<0.05）,antagomir使miR-200a表达降低（P<0.05）;与转染NC-miRNA相比,agomir在mRNA和蛋白水平上调E-cadherin的表达（P<0.05）,下调ɑ-SMA的表达（P<0.05）;antagomir则抑制E-cadherin的表达（P<0.05）,增加ɑ-SMA的表达（P<0.05）,细胞免疫荧光表达情况与蛋白水平相符。 结论: miR-200a能减弱TGF-β₁诱导的肾小管上皮细胞转分化。     

MMP-9/TIMP-1 在哮喘气道重塑中的作用及抗-RANTES 抗体的干预作用

目的:通过抗-RANTES 抗体对细胞外基质(ECM) 代谢相关因子基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及基质金属蛋白酶抑制剂-1 (TIMP-1) 表达的影响, 探讨抗-RANTES 抗体对哮喘气道重塑的干预机制。方法:雄性Wistar 大鼠36 只, 随机分为3组:生理盐水对照组(对照组)、卵蛋白致敏及激发的哮喘组(哮喘组)、抗-RANTES 抗体干预组(干预组) 。肺组织切片用免疫组化法标记MMP-9、TIMP-1, 并用图像分析MMP-9、TIMP-1 表达水平,用ELISA 方法测定RANTES 。结果:哮喘组肺组织中MMP-9、TIMP-1 表达水平明显高于对照组(P<0.05), MMP-9/TIMP-1 比值下降, RANTES 与MMP-9/TIMP-1 呈负相关;抗-RANTES 抗体干预后MMP-9、TIMP-1 明显下降(P<0.05), MMP-9/TIMP-1 逐渐恢复, 与对照组比较无统计学差异(P<0.05);干预组气道炎症等病理学变化较哮喘组明显减轻, 临床症状明显改善。结论:抗-RANTES抗体可调节哮喘大鼠肺组织MMP-9/TIMP-1 比例的平衡, 干预细胞外基质重塑, 延缓哮喘气道重塑的发生。     

黄芩苷对哮喘大鼠气道重塑作用的实验研究

目的: 初步探讨黄芩苷对支气管哮喘气道重塑的防治作用及其作用机制。方法: 用卵清白蛋白（OVA）致敏大鼠制备支气管哮喘气道重塑动物模型,经黄芩苷干预治疗,用免疫组化法检测各组大鼠肺组织匀浆中α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、磷酸化细胞外信号调节激酶1/2（p-ERK1/2）及气道组织中转化生长因子-β1（TGF-β1）蛋白的表达量;用RT-PCR检测气道平滑肌（ASM）中p-ERK1/2的mRNA水平。结果: 实验结果显示,p-ERK1/2、α-SMA、TGF-β1蛋白的表达量在模型组中有明显的增加,地塞米松组、黄芩苷高剂量组和低剂量组的p-ERK1/2、α-SMA、TGF-β1蛋白的表达量均低于模型组（P<0.05,P<0.01）。结论: 黄芩苷可降低TGF-β1、α-SMA的蛋白表达,并影响ERK信号传导通路,下调p-ERK1/2 mRNA含量,从而减轻气道炎症,延缓气道重塑。     

中药玉夏胶囊对自发性高血压大鼠肾纤维化的改善作用及TGF-β1 /Smads信号通路的影响

目的: 观察中药玉夏胶囊对自发性高血压大鼠（SHR）肾损伤的改善作用,并探讨其可能存在的机制。方法: 14周龄雄性SHR大鼠随机分为SHR模型组（0.5%羧甲基纤维素钠,CMC-Na 5 mL/ kg）、玉夏胶囊高、中、低（0.6、0.3、0.15 g/kg）剂量组,每组7只。另设WKY（0.5%CMC-Na 5 mL/kg）正常对照组7只,每日灌胃给药一次,连续10周。于给药前及给药后每两周尾袖法测血压;末次给药后收集大鼠24 h尿液并检测尿微量白蛋白（U-mAlb）含量;腹主动脉取血测定血清β2-微球蛋白（β2-MG）、血浆及肾组织血管紧张素II(AngII)含量;HE及Masson染色观察肾脏病理组织学和胶原纤维变化;Western blot法测定肾组织TGF-β1、Smad4、Smad7蛋白含量及Smad2/3蛋白磷酸化水平表达。结果: 玉夏胶囊能明显降低SHR大鼠血压(P<0.05或P<0.01),降低U-mALb、血β2-MG含量、血浆及肾组织AngII水平(P<0.01),明显减轻肾脏病理组织损伤和胶原纤维沉积,上调肾组织Smad7蛋白表达,下调TGF-β1、Smad4蛋白表达及Smad2/3蛋白磷酸化水平(P<0.01)。结论: 中药玉夏胶囊能有效改善SHR大鼠肾纤维化,在一定范围内呈剂量依赖性,其机制可能与降低血压,下调AngII水平,抑制过度激活的TGF-β1/Smads 信号通路有关。     

哮喘大鼠中性粒细胞基质金属蛋白酶9和血清基质金属蛋白酶抑制剂-1的表达及地塞米松对其的影响

目的:观察基质金属蛋白酶9(MMP-9)在哮喘大鼠血中性粒细胞(PMN)中的表达及地塞米松对其的影响, 探讨血PMN 中MMP-9和基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的相关性。方法:采用哮喘大鼠模型, 随机分成哮喘组、正常对照组、地塞米松治疗组, 对血PMN 进行分离纯化, 免疫细胞化学法检测MMP-9的表达水平, ELISA 法检测血清TIMP-1的蛋白浓度。结果:哮喘组(0.196±0.011, OD 值)和地塞米松治疗组(0.135±0.008,OD 值)中MMP-9的表达水平均显著高于正常对照组(0.100±0.010, OD 值)(P<0.01), 地塞米松治疗组MMP-9的表达水平显著低于哮喘组(P<0.01)。哮喘组[(34.96±4.54)ng/mL] 血清TIMP-1的表达水平分别显著高于正常对照组[(26.14±3.43)ng/mL] 和地塞米松治疗组[(29.89±3.43)ng/mL] (均P<0.01), 地塞米松治疗组TIMP-1的表达水平显著高于正常对照组(P<0.05)。MMP-9与TIMP-1的表达水平呈显著正相关(n=29, r=0.741, P<0.01)。结论:PMN 能合成MMP-9, 且哮喘时其合成水平增加。PMN 可能部分通过MMP-9起作用来参与哮喘的炎症过程, 其合成功能可以被地塞米松所抑制。MMP-9及其抑制物TIMP-1共同参与哮喘的发病机制。     

氟伐他汀对心衰大鼠基质金属蛋白酶、转化生长因子及左室重构的影响

目的: 了解基质金属蛋白酶-2(MMP-2)及转化生长因子-β₁(TGF-β₁)在心肌梗死大鼠左室重构及心衰发展过程中的改变,以及氟伐他汀的干预作用,探讨心梗后心衰的发生机制。方法: 选用雄性SD大鼠67只随机分为假手术组、心梗组和心梗他丁组,经冠状动脉前降支结扎术建立心肌梗死后心衰模型,手术24 h后心梗他汀组大鼠管饲氟伐他汀4 mg·kg^-1·d^-1,假手术组和心梗组大鼠管詞安慰剂。术后3 d、4周、8周检测大鼠非梗死区心肌MMP-2 的含量（Westem-blot 法）、胶原、TGF-β₁的改变（免疫组化法）,压力传感器记录左室血流动力学改变。结果: 术后各时点非梗死区心肌的MMP-2含量,心梗组及心梗他汀组显著高于假手术组（P <0.05),而心梗他汀组显著低于心梗组（P<0.05);术后各组各时点非梗死区心肌TGF-的表达的变化趋势与MMP-2相同;与心梗组比较,心梗他汀组术后4周和8周的心功能明显改善,股原容积分数(CVF)及 I/III 型脱原比值（Ratio of type I/HI)降低(P<0.05)。结论: 氟伐他汀通过减少非梗死区心肌MMP-2和TGF-J3,的含量,而减轻心梗后非梗死区心肌胶原网络的破坏及反应性胶原的过度沉积,从而子页防和逆转心室重构,改善心脏功能。     

姜黄素衍生物对四氯化碳诱导肝纤维化的治疗作用

目的: 探讨姜黄素衍生物(Curc-OEG)对四氯化碳诱导肝纤维化的治疗效果。方法: 以四氯化碳诱导形成大鼠肝实质损伤性肝纤维化模型。大鼠分为正常对照组(A组)、模型组(B组)、低剂量组(C组)、中剂量组(D组)、高剂量组(E组)、秋水仙碱组(F组)。除A组外,各组给予四氯化碳和橄榄油混合液皮下注射,2次/周,4周后B组给予生理盐水尾静脉注射,C、D、E组分别给予25、50、100 mg·kg^-1·d^-1的Curc-OEG尾静脉注射,F组给予0.1 mg·kg^-1·d^-1秋水仙碱灌胃。10周后测定肝功能及肝组织羟脯氨酸(Hyp)含量;做肝脏HE和天狼星红染色;定量PCR法测金属蛋白酶抑制因子-1(TIMP-1)、金属蛋白酶-13(MMP-13)基因的表达,Western Blot法测CollagenⅠ蛋白的表达。结果: 与模型组比较,中、高剂量组ALT、AST明显降低(P<0.05),羟脯氨酸及CollagenⅠ蛋白表达明显降低(P<0.05),MMP-13 mRNA明显上调(P<0.05),以及TIMP-1 mRNA明显下调(P<0.05),并且HE及天狼星红染色结果也观察到肝脏炎症及纤维化程度明显减轻。结论: Curc-OEG能减轻四氯化碳诱导的大鼠肝纤维化。     

中药玉夏胶囊对自发性高血压大鼠肾纤维化的作用研究

目的：探讨中药玉夏胶囊改善自发性高血压大鼠（spontaneously hypertensive rat, SHR）肾纤维化的作用及其相关机制。方法：以WKY大鼠（Wistar Kyoto rat）为正常对照组（0.5%羧甲基纤维素钠,5 mL/kg）;SHR大鼠随机分为SHR模型组（0.5% 羧甲基纤维素钠,5 mL/kg）、玉夏胶囊高剂量组（0.6 g/kg）、中剂量组（0.3 g/kg）及低剂量组（0.15 g/kg）,每组7只。连续10周,每日灌胃给药一次。测量大鼠给药前与给药后第2、4、6、8、10周舒张压（DBP）;测量给药前与给药后第3、5、8周大鼠尿量;检测血清肌酐（Scr）、尿素氮（BUN）含量;免疫组化法检测肾组织TGF β1阳性细胞表达水平;RT-qPCR检测肾组织TGF β1 mRNA表达水平;Western blot法检测肾组织ERK1/2、p ERK1/2、P38、p-P38、MMP-9、TIMP-1蛋白表达水平。结果：玉夏胶囊能剂量依赖性地降低SHR大鼠DBP,增加尿量,降低血清中Scr和BUN含量以及肾组织中P38、ERK1/2、TGF β1、MMP 9、TIMP 1蛋白表达（P<0.05, P<0.01）。结论：玉夏胶囊具有减轻SHR大鼠肾纤维化的作用且在一定范围内呈剂量依赖性,其机制可能与其利尿、降压,抑制P38/MAPK、ERK/MAPK相关通路,降低TGF β1、MMP 9、TIMP 1表达水平,恢复MMP 9/TIMP 1比值平衡有关。     

夏枯草总三萜对PDGF-BB干预的肝星状细胞中TGF-β1/Smad通路调控作用

目的: 观察夏枯草总三萜（TTP）对血小板衍生因子（PDGF-BB）干预的肝星状细胞（HSC-T6）中TGF-β₁/Smad通路调控以及其抑制HSC增殖的作用。方法: 用不同浓度的TTP（10、30、100、300、1 000 μg/mL）及PI3K抑制剂（LY294002,10 μmol/L）对PDGF-BB刺激的HSC-T6进行处理,四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测细胞增殖;RT-PCR和Western blot法检测HSC-T6中TGF-β₁信号转导通路下游中介分子smad2、smad3、smad7表达。结果: TTP给药组可抑制PDGF诱导的HSC-T6增殖,下调smad2、smad3表达,升高smad7表达。结论: TTP对PDGF-BB刺激的HSC-T6增殖具有较好的抑制作用,其机制可能与阻断TGF-β₁/Smad信号通路传导有关。     

苦参素对实验性肝纤维化的防治作用及对MMP-2 表达的影响

目的: 观察苦参素预防及治疗大鼠肝纤维化的疗效并探讨其作用机制。方法: 采用CCl₄ 诱导大鼠肝纤维化模型, SD 大鼠28 只, 随机分为4 组:正常对照组、模型对照组、苦参素预防组、苦参素治疗组。实验10 周末, 测定血清丙氨酸氨基转移酶(ALT) 、天冬氨酸氨基转移酶(AST) 、总胆汁酸(TBA)及谷氨酸转移酶(GGT); 光镜、电镜观察肝细胞结构和肝纤维化程度;RT-PCR 和蛋白酶谱法检测肝组织中MMP-2 mRNA 、MMP-2 蛋白的表达。结果: 苦参素预防与治疗给药均能明显降低CCl₄ 诱导的肝纤维化大鼠血清ALT 、AST 、TBA 及GGT 水平(P<0. 05,P<0. 01) 。苦参素预防组、治疗组大鼠胶原纤维沉积明显减轻, 假小叶结构明显减少。苦参素预防组、治疗组肝细胞结构接近正常, Disse 间隙、肝细胞内胶原纤维明显减少, 且苦参素预防组肝纤维化程度轻于治疗组。苦参素预防组、治疗组肝组织中MMP-2mRNA 、MMP-2 活性蛋白的表达显著低于模型组(P<0. 05, P<0. 01) 。结论: 苦参素对CCl₄ 诱导的肝纤维化有预防及治疗作用, 其部分机制为通过减少MMP-2mRNA 、MMP-2 活性蛋白的表达, 促进细胞外基质(ECM) 的降解, 抑制ECM 沉积, 从而减轻或逆转肝纤维化。     

复肾功方对慢性肾功能衰竭大鼠肾脏α-平滑肌肌动蛋白表达的影响

目的: 研究复肾功方对慢性肾功能衰竭（chronic renal failure, CRF）大鼠肾组织α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）表达的影响,探讨其减轻肾间质纤维化的作用机制。方法: 将55只雄性SD大鼠随机分为正常组,模型组,复肾功方低、中、高剂量组,每组11只。正常组常规饲养,其余四组大鼠食用含 0.5% 腺嘌呤饲料制造慢性肾功能衰竭模型,连续造模 21 d。造模成功后,所有大鼠改用常规饲料。正常组和模型组按 20 mL/kg 灌胃生理盐水,复肾功方低、中、高剂量组分别以4、8、16 g 生药/kg体质量灌胃复肾功方,1日1次,连续 30 d。实验结束后,检测各组大鼠血清血肌酐(Scr)和尿素氮（BUN）水平,Masson染色检测肾间质纤维化程度,免疫组化和Western blot 法检测α SMA蛋白的表达。结果: 与正常组比较,模型组大鼠Scr和BUN水平及肾组织α-SMA表达明显升高(P<0.05),肾间质出现明显纤维化病变。经复肾功方治疗后,各剂量组大鼠Scr和BUN水平及肾组织α-SMA表达明显降低。结论: 复肾功方能显著改善CRF大鼠肾纤维化病变,其机制可能与降低肾组织α-SMA表达有关。     

环孢素A 改善异丙肾上腺素所致心肌损害和纤维化可能由抑制内皮素通路所介导

目的:研究环孢素A(Cyclosporine A, CsA)对异丙肾上腺素(isoproterenol, Iso) 诱导心肌损害和纤维化的改善, 探讨内皮素通路在其过程中的作用。方法:SD 大鼠给予Iso(2 mg°kg^-1°d^-1, s.c.) 10 d, 建立大鼠心肌损害和纤维化病变。CsA治疗组预先给予CsA (25 mg/kg, s.c.) 一次。结果:Iso 损害心肌, 引起心功能下降, 使左室心肌中羟脯氨酸(hydroxyproline, Hyp) 含量增高, 内皮素-1(ET-1) 及受体(ETA R)、结缔组织生长因子(CTGF)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9) mRNA 和蛋白表达上调。CsA 明显改善心功能, 降低Hyp 含量, 减轻升高的mRNA 和蛋白表达。结论:CsA 改善Iso引起的大鼠心功能损害和纤维化, 与抑制内皮素通路相关。     

复方山菊对自发性高血压大鼠主动脉损伤的保护作用及机制

目的: 探讨复方山菊对自发性高血压大鼠(SHR)主动脉的保护作用及可能机制。方法: SHR 35只,随机分为SHR(蒸馏水 5 mL·kg^-1·d^-1,n=7)模型组、复方山菊高、中、低(0.45、0.15、0.05 g·kg^-1·d^-1,n=7)剂量组、卡托普利(0.03 g·kg^-1·d^-1,n=7)阳性对照组,另设WKY(蒸馏水 5 mL·kg^-1·d^-1,n=7)阴性对照组,连续灌胃给药16周,每天1次。尾袖法每两周测定大鼠动脉血压。16周后,HE染色观察主动脉病理组织学变化;Masson染色观察主动脉胶原纤维变化;免疫组化法观察主动脉内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)、转化生长因子-β₁(TGF-β₁)蛋白的表达。结果: 随着复方山菊剂量的增加, 主动脉的病理损伤得到不同程度的改善,主动脉中膜胶原面积逐渐减小,胶原纤维沉积逐渐减轻;主动脉TGF-β₁蛋白表达逐渐减少,eNOS蛋白表达逐渐增加。结论: 复方山菊可明显减轻主动脉的病理损伤,减少主动脉胶原纤维沉积,下调TGF-β₁及上调eNOS蛋白的表达,对SHR主动脉具有一定的保护作用。     

汉防己甲素延缓肾小球硬化机理的实验研究1

目的 探讨汉防己甲素对肾小球硬化大鼠肾脏转化生长因子(TGF-β₁)基因表达的影响。方法 27只雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组、肾小球硬化模型组、汉防己甲素组和氨氯地平组,用单侧肾切除加2次注射阿霉素制备肾小球硬化动物模型,用Northern 印迹杂交,观察肾皮质TGF-β₁mRNA表达。结果 汉防己甲素使肾小球硬化大鼠肾皮质TGF-β₁mRNA表达较模型组明显下调,肾小球细胞外基质较模型组明显减少。结论 汉防己甲素通过下调TGF-β₁表达而减少肾小球ECM沉积,从而延缓肾小球硬化。     

季德胜蛇药片对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用

目的: 探讨季德胜蛇药片对大鼠肺缺血再灌注损伤的保护作用及其机制。方法: 将30只清洁级SD雄性大鼠分为季德胜蛇药组(D组)、对照组(C组)和缺血再灌注组(I/R组),每组10只。建立大鼠肺缺血再灌注模型,检测大鼠肺组织湿干重比;光学显微镜及透射电镜下观察肺组织损伤程度;通过明胶酶谱法测定肺组织匀浆液中明胶酶即金属蛋白酶-2、-9(MMP-2、MMP-9)的活力;逆转录酶PCR方法检测MMP-2、MMP-9 mRNA在大鼠肺组织中的表达变化。结果: 与缺血再灌注组比较,蛇药组肺湿干重比降低(P<0.01),肺组织损伤程度减轻,肺组织匀浆液MMP-9酶活力显著下降,MMP-2酶活力略有降低,肺组织中MMP-9、MMP-2的mRNA表达均降低。 结论: 季德胜蛇药片通过抑制MMP-9、MMP-2的活性及表达,使基底膜的降解降低,从而对大鼠肺缺血再灌注损伤有一定的保护作用。     

右归饮影响大鼠软骨细胞增殖及分泌基质金属蛋白酶的研究

目的: 探讨右归饮在缓解关节软骨退变中,对软骨细胞增殖以及分泌基质金属蛋白酶的影响。方法: 将SD大鼠分成右归饮组和生理盐水对照组,分别予右归饮和0.9%生理盐水灌胃,1周后取大鼠血清,制备成浓度为5%、10%、15%右归饮含药血清和含0.9%生理盐水血清。再取正常大鼠膝关节软骨细胞,鉴定后培养至第3代,分别加入5%、10%、15%右归饮含药血清和含0.9%生理盐水血清培养,培养24、48、72 h后分别加入MTT新鲜溶液进行检测,确定右归饮干预的最佳浓度及时间,以该浓度及时间培养软骨细胞,应用ELISA、RT-PCR测定含右归饮和生理盐水血清培养的细胞上清液中基质金属蛋白酶-3（MMP-3）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、基质金属蛋白酶-13（MMP-13）的含量。结果: 不同浓度右归饮含药血清对培养软骨细胞均有增殖促进作用（P<0.01）,其中15%含药血清培养48 h的增殖作用最明显与稳定（P<0.01）;ELISA 、RT-PCR检测见与含0.9%生理盐水血清比较,右归饮含药血清可使大鼠软骨细胞MMP-3、MMP-9、MMP-13 mRNA表达量下降（P<0.01）。结论: 15%浓度右归饮含药血清培养48 h为最佳干预的浓度和时间,右归饮可以促进大鼠软骨细胞的增殖,抑制软骨细胞分泌MMP-3、MMP-9、MMP-13。