红景天醇提物对乙醇诱导QZG细胞氧化损伤的保护作用

目的:研究乙醇对氧化应激损伤的作用特点和红景天醇提物的抗氧化作用.方法:采用DPPH自由基生成体系、体外鲁米诺化学发光反应(OH和O<,2><'+>)体系观察红景天醇提物对DPPH自由基、OH和O<,2><'+>化学发光强度的抑制作用以及剂量-效应关系.采用乙醇诱导人正常肝细胞系QZG细胞的氧化应激反应模型,观察红景天醇提物对乙醇诱导细胞活力和氧化应激损伤的保护作用.实验分设红景天醇提物3个不同浓度(50、100、200 mg/L)的预防给药组和治疗给药组、阳性对照组(200 mmol/乙醇干预)和阴性对照组(不加受试物).预防给药组用红景天醇提物预处理QZG细胞12 h后,再加入200 mmol/L乙醇处理6 h,治疗给药组采用红景天醇提物和乙醇同时处理QZG细胞6 h.用MTT试验和生化法测定细胞活力、细胞丙二醛(MDA)、还原型和氧化型谷胱甘肽(GSH、GSSG)和总巯基(T-SH)含量、过氧化氢酶(CAT)、超氧阴离子歧化酶(SOD)活力;免疫印迹法检测细胞抗氧化酶血红素加氧酶-1(HO-1)和核因子相关因子2(NRF-2)蛋白的表达.结果:红景天醇提物对自由基的生成具有显著的抑制作用,呈现较为明显的剂量-效应关系;红景天醇提物可有效保护乙醇所致的肝细胞活力损伤,且治疗组具有明显的剂量-效应关系.与阳性对照组相比,红景天醇提物干预组细胞的MDA含量和GSSG含量下降(P<0.05),GSH和T-SH含量显著升高(P<0.05);CAT和SOD活性也显著升高(P<0.05).免疫印迹测定结果表明,红景天醇提物可以诱导HO-1蛋白和NRF-2蛋白表达上调(P<0.05).结论:红景天醇提物在体外自由基模型中具有较强的抗自由基作用,可保护乙醇导致的QZG细胞氧化损伤,其作用机制可能和抗氧化作用相关.     

促吸收剂癸酸钠对黄连素在大鼠肠道吸收的促进作用

目的:探讨黄连素(Ber)在大鼠肠道的吸收动力学,阐明癸酸钠(SC)对Ber在小肠段吸收的影响.方法:雄性Wistar大鼠建立在体肠段灌流模型,HPLC法测定不同浓度Ber(50、100和200 μmol·L-1)和Ber与质量浓度为0.2%SC合用在小肠的吸收情况;测定肠灌流液中乳酸脱氢酶(LDH)活性,观察SC对肠道黏膜细胞的损伤.结果:Ber浓度在50～200 μmol·L-1范围内Ber吸收呈浓度依赖性;吸收速率常数(Ka)组间差异无统计学意义(P>0.05);SC能显著提高Ber在小肠的吸收量(P<0.05);SC对Ber吸收速率常数Ka无显著影响(P>0.05);Ber组、SC+Ber组肠循环液中LDH的含量与空白对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).结论:Ber在小肠吸收较差,吸收机制为被动扩散,吸收过程为一级动力学过程;SC能显著促进Ber在小肠的吸收,是一种安全、有效的促吸收剂.     

苏子提取物对高脂血症家兔血脂及脂质过氧化的影响

[目的]研究苏子提取物(EPS)对家兔高脂血症的防治作用.[方法]采用高脂饮食建立家兔高脂血症模型,分别测定正常对照组,高脂模型组,苏子提取物低剂量组(0.1g/ml)、中剂量组(0.5g/ml)、高剂量组(1.0 g/ml)血清中的TC、TG、LDL-C、HDL-C及肝匀浆MDA 含量及SOD 活性.[结果]EPS能显著降低血清中的TC、TG、LDL-C,提高血清中HDL-C的含量,降低肝匀浆MDA的含量,提高SOD的活性.[结论]EPS 具有一定的调节血脂及抗脂质过氧化作用.     

抑肽酶对实验性慢性肝损伤大鼠肝细胞增殖能力的影响

目的:探讨抑肽酶对实验性慢性肝损伤大鼠肝细胞增殖能力的影响,为抑肽酶对慢性肝损伤的保护作用研究提供理论依据.方法:Wistar大鼠随机分为正常对照组、四氯化碳(CCl4)模型组、抑肽酶小剂量组、抑肽酶中剂量组、抑肽酶大剂量组和促肝细胞生长素组,采用免疫组织化学方法检测各组增殖细胞核抗原(PCNA)阳性细胞数和形态学表现.结果:正常对照组阳性细胞数为(4±2)个/视野,模型组阳性细胞数为(5±2)个/视野,抑肽酶小、中和大剂量组阳性细胞个数分别为(39±13)个/视野、(49±14)个/视野和(57±12)个/视野,促肝细胞生长素组中阳性细胞个数为(26±8)个/视野.抑肽酶各剂量组与模型组相比,阳性细胞数目均显著增加(P<0.05);随着抑肽酶剂量的增加,阳性细胞数目也增加.抑肽酶各剂量组阳性细胞数多于促肝细胞生长素组(P<0.05).抑肽酶各剂量组PCNA阳性细胞增殖活跃,以抑肽酶大剂量组表现明显.结论:抑肽酶能够促进慢性肝损伤大鼠肝细胞增殖,其作用随着剂量的增加而增强.     

荜茇-13味治疗大鼠非酒精性脂肪肝病的实验研究

目的:研究荜茇-13味对大鼠非酒精性脂肪肝病的疗效.方法:雄性Wister大鼠40只随机分组,每组8只.正常对照组仅喂饲普通饲料,其他大鼠喂饲高脂饲料(88%标准普通饲料+10%猪油+2%胆固醇)12周.分为模型对照组和荜茇-13味低(2mg/kg)、中(4mg/kg)、高(8mg/kg)给药组.治疗组于13周开始灌胃荜茇-13味.药物干预8周末结束实验,测定体重、肝湿重和肝指数,检测血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)高密度脂蛋白胆固醇(HDL-c)、丙氨酸转移酶(ALT)、门冬氨酸转移酶(AST)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和肝组织TG、TC.结果:与对照组比较,模型组体重、肝湿重、肝指数以及血清中TG、TC、LDL-c、、ALT、AST、MDA和肝组织TG、TC含量均增加,具有显著性差异(P＜0.05,P＜0.01)而HDL-c和SOD下降(P＜0.05);与模型组比较,药物干预组大鼠肝湿重和肝指数及血清TG、TC、LDL-c、ALT、AST、MDA和肝组织TG、TC降低,且肝脏脂肪变性和炎症坏死减轻(P＜0.05,P＜0.01).结论:荜茇-13味对大鼠高脂饮食诱导的NAFLD有治疗作用.     

电压门控性氯离子通道2在血管紧张素Ⅱ促H9C2细胞肥大中的作用

目的:利用血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)体外复制心肌细胞H9C2肥大模型,观察电压门控性氯离子通道2(CLC-2)对心肌细胞肥大过程的影响,阐明其作用机制.方法:将H9C2分为对照(control)组、AngⅡ组、坎地沙坦(candesartan)组、坎地沙坦与AngⅡ联合应用(candesartan+AngⅡ)组.流式细胞术检测各组H9C2细胞体积的变化,RT-PCR和Western blotting检测各组细胞中CLC-2 mRNA和蛋白表达的变化.结果:与对照组比较,AngⅡ组大体积细胞百分比明显增加(P<0.01),细胞中CLC-2 mRNA和蛋白表达水平均增加(P<0.01);与AngⅡ组比较,candesartan+AngⅡ组大体积细胞百分比降低(P<0.01),CLC-2 mRNA和蛋白表达也降低(P<0.01).结论:AngⅡ可诱导心肌细胞H9C2肥大,其机制可能与CLC-2影响细胞内氯离子浓度有关.     

三七醇提物对大鼠肝组织体内外抗氧化作用的研究

目的:研究三七(panax notoginseng,PNG)醇提物对大鼠肝组织的体内外抗氧化作用.方法:采用羟自由基(·OH)和超氧阴离子自由基(O2-)两种化学发光体系,观察三七醇提物对化学发光强度的抑制作用;采用过氧基异丙苯(cumene hydroperoxide,CHP)、维生素C(VC)/硫酸亚铁(Fe2+)和四氯化碳(CCl)4/还原型辅酶Ⅱ(NADPH)作为激发剂,建立3种微粒体脂质过氧化(lipid peroxidation,LPO)损伤模型,观察三七醇提物对丙二醛(MDA)生成的抑制作用.用60Co γ射线辐照大鼠建立氧化损伤模型,观察三七醇提物对肝组织的氧化型谷胱甘肽(GSSG)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)含量及活性的影响,以及对MDA生成的抑制作用.结果:在两种化学发光的体系中,三七醇提物对O2-和·OH的抑制率均显著高于阴性对照组(P<0.05),且呈明显剂量-效应关系,三七醇提物对O2-和·OH的IC50分别为1.25和0.625 mg/ml;3种LPO损伤模型中三七醇提物不同浓度组的MDA含量均显著低于对照组(P<0.05);在体大鼠氧化损伤模型实验的肝组织中,三七醇提物不同剂量灌胃组[(50、225和450 mg/(kg·d)],其MDA的含量均较阳性对照组(仅做60Co γ照射)降低(P<0.05);225和450 mg/(kg·d)剂量组CAT活性较阳性对照组显著升高(P<0.05);其450mg/(kg·d)剂量组SOD的活性较阳性对照组显著升高(P<0.05);而225和450 mg/(kg·d)剂量组GSSG含量较阳性对照组显著降低(P<0.05).结论:三七醇提物对体外氧化损伤模型具有很强的抗氧化作用,对辐射引起的大鼠体内肝脏氧化损伤具有一定的抗氧化修复功效,并呈剂量-效应关系.     

亚麻籽木脂素对大鼠前列腺增生的抑制作用及其机制

目的:研究亚麻籽木脂素(SDG)对丙酸睾酮诱导的大鼠前列腺增生的抑制作用,并阐明其作用机制.方法:50只雄性Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药(非那雄胺1.0 mg·kg-1)组及SDG(1.2和0.4 g·kg-1)组.ELISA方法检测前列腺组织中一氧化氮(NO)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)和白细胞介素8(IL-8)的变化.结果:模型组大鼠前列腺组织中NO、SOD和CAT水平均低于空白组(P<0.01),TNF-α、bFGF和IL-8水平均高于空白组(P<0.01);SDG 1.2 g·kg-1组NO、SOD和CAT水平均高于模型组(P<0.01),TNF-α、bFGF和IL-8水平均低于模型组(P<0.01).结论:SDG抑制睾酮诱导的大鼠前列腺增生的机制可能与提高抗氧化酶活力、清除自由基及减少TNF-α、bFGF和IL-8相关因子含量有关.     

Bcl-2参与SCID小鼠体内齐墩果酸诱导HL-60细胞凋亡的调控作用

目的:观察齐墩果酸(OA)对白细胞移植模型小鼠脾脏浸润白血病细胞凋亡数量和Bcl-2蛋白表达的影响,探讨OA对白血病模型鼠的治疗作用机制.方法:取浓度为2×107mL-1体外培养的人早幼粒系白血病HL-60细胞0.5 mL,腹腔注射重症联合免疫缺陷(SCID)小鼠,构建SCID小鼠的HL-60细胞移植瘤模型;模型成功后小鼠分为用药组、白血病模型对照组,并设正常对照组.用药组以200 mg·kg-1OA皮下注射,用药2周后观察各组小鼠的一般状态、外周血象及骨髓象白细胞分类情况,病理学检查脾白血病细胞浸润程度,TUNEL方法测定脾浸润白血病细胞凋亡率,免疫组织化学检测HL-60细胞凋亡相关基因Bcl-2蛋白表达率.结果:成功建立SCID小鼠的HL-60细胞移植瘤模型;用药组小鼠体质量[(15.0±0.8) g]明显高于模型组小鼠[(13.9±0.9) g](P<0.01),小鼠生存期[(50.3±5.5) d]明显高于模型组小鼠[(37.1±4.4) d](P<0.01);与模型组比较,用药组外周血白血病细胞有向正常白细胞分化趋势,可见分叶的白血病细胞,骨髓象中幼稚细胞减少,脾浸润情况改善;用药组小鼠脾浸润白血病细胞凋亡率高于模型组(P<0.01),Bcl-2蛋白表达阳性细胞百分率低于模型组(P<0.01).结论:成功建立白血病移植瘤鼠模型;OA可改变白血病移植瘤模型鼠的一般状态,延长生存期;OA通过降低Bcl-2表达可诱导白血病细胞凋亡.     

人脐带间充质干细胞的分离鉴定及其修复缺血缺氧脑损伤作用

目的:研究人脐带间充质干细胞(UCMSCs)多向分化潜能,了解UCMSCs移植治疗脑缺血缺氧损伤(HIBD)大鼠的神经修复功能.方法:采用组织消化原代贴壁法分离培养人UCMSCs;取第4和10代UCMSCs进行流式细胞术检测间充质干细胞(MSCs)表面特异标志物表达;染色体分型检测染色体是否畸变;进行成神经、骨、脂诱导,了解其多向分化潜能;制备HIBD大鼠模型,穿梭箱测试对照组、HIBD细胞移植组和HIBD组大鼠的主动逃避率(AARR)和未逃避率(NARR).结果:流式细胞术结果显示,类似MSCs样细胞强表达CD29、CD44和CD105,极低表达CD34和CD45,符合UCMSCs的特征.多向分化诱导后的细胞染色和免疫荧光结果显示,UCMSCs可诱导分化为神经样细胞、脂肪细胞和成骨细胞,多次传代后仍可多向诱导,且未发生染色体畸变.穿梭箱测试提示,UCMSCs移植组大鼠在测试的第3、4和5天的AARR高于HIBD组(P<0.05).结论:UCMSCs易获取及纯化,具有多向分化潜能,多次传代功能稳定,可改善脑损伤动物的神经功能.