纳豆菌固体发酵蚕蛹蛋白的研究

蚕蛹含有丰富的营养物质,尤其蛋白质含量较高,可以作为良好的培养基.本实验利用纳豆菌对蚕蛹进行固体发酵,目的是获得含有纳豆激酶酶活较高的发酵产物.结果表明:蚕蛹蛋白厚度0.5cm,葡萄糖2%,明胶1%,接菌量8%,37℃恒温发酵24h,产纳豆激酶酶活可达到786.36u/mL左右.     

樟芝菌液态发酵多糖富硒条件优化及其抗炎活性研究

为提高樟芝菌液态发酵硒多糖产量,探究樟芝菌多糖富硒后活性方面的变化。以生物量、多糖含量、硒含量和富硒率为评价指标,利用单因素试验和正交试验对发酵条件进行优化,综合得出最佳发酵条件。同时在脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导小鼠腹腔巨噬细胞(RAW264.7)建立炎症模型的基础上,评价樟芝菌硒多糖与无硒多糖的抗炎活性。通过发酵优化得到最佳发酵条件为Na₂SeO₃添加量2 mg/L、麦芽糖24 g/L、可溶性淀粉16 g/L、玉米浆干粉9 g/L,硫酸铵9 g/L,装液量75 mL/250 mL、初始pH值7,24℃、150 r/min发酵9 d。体外细胞实验结果表明,二者均能够显著降低促炎介质NO、TNF-α、IL-6和IL-1β的释放量,提高细胞内超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性,起到有效抑制炎症反应的作用。而且,硒多糖在提高SOD活性、抑制IL-1β释放方面效果要优于无硒多糖。综上,樟芝菌硒多糖在富硒的同时,能够具有高于无硒多糖的抗炎活性,具备一定的开发前景。     

响应面法优化纳豆菌液态发酵产抗菌物质条件的研究

本文利用豆粕水解液为基质对纳豆菌液态发酵产抗菌物质进行研究。采用Plackett-Burman的实验方法对影响纳豆菌发酵产抗菌物质的因素进行综合评价,筛选出具有显著效应的三个因素:麸皮含量、温度、初始pH;通过最陡爬坡实验接近最大响应区域;利用响应面实验进一步确定主要影响因子的最优条件:麸皮含量29.6g/L、温度33℃、初始pH7.4,在此条件下对纳豆菌发酵,△OD值为0.416,抗菌粗提液抑菌率达56.6%。      

酶法水解蚕蛹蛋白制备免疫活性肽工艺的研究

利用复合酶水解蚕蛹蛋白制备小分子多肽,通过正交实验得到水解工艺的优化组合为:木-Fla复合酶,酶用量为0.5%,底物含量为4%（1∶25）,酶解pH为7.0,反应温度为60℃,酶解时间为3h,在此条件下水解,小分子多肽得率为32.16%,同时建立了毛细管凝胶电泳测定蚕蛹多肽分子的检测方法。碳粒廓清实验表明:蚕蛹蛋白酶水解液中小分子多肽可增强小鼠网状内皮系统吞噬功能。      

纳豆菌发酵玉米蛋白粉制备玉米肽工艺优化

为了探索玉米肽的制备技术,以玉米蛋白粉为基质,应用纳豆菌发酵法制备玉米肽工艺进行了试验研究。分别对接种量体积分数、玉米蛋白粉质量分数、发酵温度、发酵时间进行了单因素试验研究,采用四因素三水平正交试验设计对玉米肽发酵工艺条件进行了优化,得到最优条件为:发酵温度40℃、发酵时间72 h、接种量体积分数4%、玉米蛋白粉质量分数5%。在此最优条件下发酵,玉米蛋白粉的水解度为11.17%,与理论预测值基本相符。     

麸皮多糖微生物发酵工艺优化及其抗炎活性

对麸皮多糖发酵制备工艺进行优化,并对其抗炎活性进行研究。以酿酒酵母以及枯草芽孢杆菌为发酵菌种固态发酵制备麸皮多糖,通过响应面法优化发酵工艺条件（发酵温度、发酵时间、总接种量和料水比）,并研究其对敌草快攻毒大鼠血浆和肝脏组织中TNF-α、IL-6、IL-2和IL-1β炎性因子水平的影响。结果表明,1）麸皮多糖最佳固态发酵工艺条件为发酵温度35.4?℃、发酵时间52.7?h、总接种量10.4%、料水比1∶1.16（g/mL）,该条件下麸皮多糖产量为130.21?mg/g;2）腹腔注射敌草快显著升高大鼠血浆和肝脏组织中TNF-α、IL-6、IL-2和IL-1β炎性因子水平（P＜0.05）;3）在敌草快引起的应激状态下,灌胃麦麸多糖可以显著降低大鼠血浆和肝脏组织中TNF-α、IL-6、IL-2和IL-1β炎性因子水平（P＜0.05）,并且随着灌服剂量的升高,大鼠血浆和肝脏组织中炎性因子水平可恢复到正常生理状态。综上所述,以响应面法优化后发酵工艺制备的麸皮多糖有一定的抗炎作用。     

液态发酵制备花生抗氧化肽的优化研究

对液态发酵法制备花生抗氧化肽的菌种进行了筛选,并对发酵条件进行了优化.试验确定以枯草芽孢杆菌20029作为发酵菌种.通过单因素试验和响应面法优化试验获得液态发酵制备花生抗氧化肽的最佳工艺参数为:发酵温度30℃,pH为8,发酵时间49.5 h.在最佳条件下进行发酵试验,测得DPPH·清除率达到63.28%.     

蚕蛹纳豆菌发酸物抗菌性研究

研究利用蚕蛹作为发酵培养基的纳豆菌发酵液的综合抑菌效果,探索其液体发酵的合适培养务件.结果表明,蚕蛹纳豆菌液体发酵粗提物对酿酒酵母菌和葡萄酒酵母菌的抑制效果最为明显,对细菌的抑制效果其次,其中,大肠杆菌的抑制效果优于金黄色葡萄球菌,对黑曲霉和米曲霉略有抑制效果.以蚕蛹为培养基纳豆菌抑菌最适培养条件为装液量15mL/100mL,初始pH6.0,摇床转速150r/min,培养温度30℃.     

龙葵果汁发酵工艺优化及其抗炎、抑菌活性评价

本文以龙葵果为原料,对益生菌发酵龙葵果汁进行工艺优化,选取初始糖度、初始pH、乳酸菌的发酵温度、接种量、发酵时间、酵母菌的发酵温度、发酵时间和接种量8个因素进行Plackett-Burman试验,确定影响总酚含量的关键因素为乳酸菌发酵温度和酵母菌接种量;用中心组合设计对发酵条件进行优化,得出发酵的最佳条件为初始糖度12%、初始pH 4.5、乳酸菌接种量5%、乳酸菌发酵温度39.5 ℃、乳酸菌发酵时间24 h、酵母菌接种量0.07%、酵母菌发酵温度25 ℃、酵母菌发酵时间20 h,优化后发酵龙葵果汁的总酚含量达到1.18±0.02 mg/mL,与优化前相比提高了21.6%。发酵龙葵果汁的抗炎及抑菌活性与发酵前相比均有显著提高,发酵龙葵果汁的透明质酸酶活性抑制率达到82.98±4.16%,抑制白蛋白变性能力达到81.57±1.24%。对金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌的抑制效果好于对埃希氏大肠杆菌的抑制效果。     

缫丝蚕蛹与黄豆的纳豆菌发酵上清液功能活性的比较

蚕蛹是我国"食品新资源"的一种,也是仅有的昆虫类原料。该文以缫丝副产物—新鲜蚕蛹为研究对象,接种纳豆菌(Bacillus natto)发酵并探讨其发酵产物的生物活性,期望发掘蚕蛹的新功能和新价值。研究表明,蚕蛹蛋白质、脂肪含量极高,氨基酸组成与黄豆相似,纳豆菌在蚕蛹培养基和黄豆培养基中的生长曲线相似。煮熟蚕蛹发酵液的抗氧化性高于新鲜蚕蛹,在发酵32 h时ABTS自由基清除率达到96. 8%,降血脂和抗凝血活性及纳豆激酶活力比鲜蛹发酵液低。2种蚕蛹发酵液在抗氧化活性、降血脂活性和抗凝血活性上的表现均优于黄豆发酵液,其中,蚕蛹发酵液在32 h时3种胆酸盐结合率都在75%以上。综上,蚕蛹纳豆菌发酵产物具有显著的优势,该研究是实现缫丝蚕蛹高价值利用的重要途径。     

高产纳豆菌液体发酵条件研究

以纳豆菌悬浊液的在660 nm下的吸光值作为检测标准,对纳豆菌的液体发酵条件进行研究,探讨种龄、接种量、温度和时间对纳豆菌生长的影响。确定最适种龄为22 h,最佳接种量为5%。其最佳发酵工艺确定为:发酵温度为35℃,发酵时间25 h。     

纳豆菌液体发酵条件的初步研究

纳豆菌为具有很多生理功能的益生菌,能开发多种有保健功能的产品.以实验室选育的纳豆芽孢杆菌(Bacillus natto)BN.0301为出发菌株,研究其液体发酵,对碳源和氮源进行了初步筛选,并确立了其发酵条件为种龄18hr,接种量1%,温度30℃,摇瓶转速180rpm,装液量40ml/250ml,初始pH值6.0,摇瓶发酵周期33hr.     

蚕蛹多肽制备工艺及其体外抗氧化活性

采用碱性蛋白酶、风味蛋白酶、复合蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶水解蚕蛹蛋白,以水解度和清除DPPH·能力为指标对酶解过程进行分析,并研究水解产物多肽的体外抗氧化活性。结果表明,碱性蛋白酶对蚕蛹蛋白具有较好的水解效果,其水解产物有较高抗氧化活性,对DPPH·、超氧阴离子自由基(O2·)和羟自由基(·OH)都具有较强的清除能力。     

微生物发酵法脱除蚕蛹蛋白臭味的研究

利用微生物发酵法脱除蚕蛹蛋白的臭味。结果表明：活性干酵母和瑞士乳杆菌发酵均可有效去除蚕蛹蛋白的臭味。活性干酵母发酵脱臭工艺条件为：从节省原料考虑,活性干酵母用量为0.3%,不加葡萄糖和其他营养物质, 37℃发酵80min 可完全除臭;从节省时间考虑,活性干酵母用量为0.3%、葡萄糖用量为2%,37℃下发酵28～35min 可完全除臭。瑞士乳杆菌发酵脱臭工艺条件为：活菌数为108CFU/ml 的瑞士乳杆菌液用量为2%、MRS 培养基用量为10%, 37℃下发酵7h 可完全除臭。     

复合酶水解蚕蛹蛋白制备功能性寡肽的工艺研究

为了制备分子量低、肽含量高的蚕蛹功能性寡肽,本文采用单素实验与响应面分析法,对不同蛋白酶及其不同组合、温度、pH值、底物浓度、酶的添加量等因素对蚕蛹分离蛋白水解工艺的影响进行了研究.研究结果表明,多酶复合水解可显著提高蚕蛹蛋白的水解度和寡肽得率,其中胰酶、风味蛋白酶与中性蛋白酶是最佳多酶组合,其最佳水解条件为底物浓度7.33％、酶添加量[E]/[S]3.62％、pH7.38、水解温度54.6℃、水解时间6h.在此条件下,蚕蛹蛋白的水解度高达29.2％,寡肽得率高达为81.14％.酶解后产品数均分子量为665.5 Da,重均分子量为726.9 Da,肽含量高达74.6％,而游离氨基酸含量仅为7.33％,表明复合酶解虽然提高了蚕蛹蛋白的水解度,但主要产物仍然是低分子寡肽,并没有大量生成游离氨基酸.     

贮藏时间及缫丝工艺对桑蚕蛹蛋白质和脂肪酸组成及蛹油体外抗氧化活性的影响

以桑蚕蛹为对象,研究其在贮藏过程中及缫丝后蛋白质、脂肪酸变化及蚕蛹油的抗氧化活性,为缫丝副产物深加工提供理论支持。按照蚕蛹的形态变化,将贮藏期分为4 个阶段,对各阶段蚕蛹进行基本化学成分析;采用十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析桑蚕蛹蛋白质组分;气相色谱-质谱联用分析蚕蛹油脂肪酸组成;此外,对蚕蛹油1,1-二苯基-2-三硝基苯肼（1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH）自由基和2,2’-联氮-二(3-乙基苯并噻唑啉-6-磺酸)（2,2’-azinobis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid),ABTS）阳离子自由基清除能力进行评价。结果表明,贮藏时间对蚕蛹基本化学成分总体有显著性影响（P＜0.05）。蚕蛹蛋白质主要分布在约30 kDa和约70 kDa处,且表达量随着蚕蛹贮藏时间延长而降低。蛹油含有16 种脂肪酸,相对含量较高的棕榈酸、硬脂酸、油酸、亚油酸和α-亚麻酸在贮藏期内变化显著（P＜0.05）。贮藏期蛹油DPPH自由基和ABTS阳离子自由基清除率的半抑制质量浓度范围分别为20.93～52.00 mg/mL和33.32～156.81 mg/mL,其体外抗氧化活性可能与其总酚含量（15.95～77.50 mg/kg）变化有关。经缫丝加工后,蚕蛹蛋白质和脂肪酸组成发生明显变化,且蚕蛹油体外抗氧化活性降低。综上,蚕茧的贮藏时间、缫丝工艺能够影响蚕蛹蛋白质、脂肪酸组成和蛹油中总酚含量,并对蚕蛹油的抗氧化活性产生较大影响。因此,可根据目的产物的表达水平或生物活性有针对性地收集各贮藏阶段的蚕蛹应用于加工生产中。     

利用纳豆菌和乳酸菌共同发酵奶液的研究

利用纳豆菌和乳酸菌共同发酵奶液,对发酵过程中发酵乳的外观、口感、酸度、微生物数量以及纳豆激酶酶活力的变化进行了研究。结果表明:接种纳豆菌8h后再接种乳酸菌进行发酵的样品,在外观、口感、乳酸菌以及纳豆激酶酶活力方面都有效好效果。     

蚕蛹蛋白及其水解产物中氨基酸组成分析

采用FMOC-OPA柱前衍生化-高效液相色谱法测定蚕蛹蛋白及水解液氨基酸含量,同时测定血管紧张素转化酶(ACE)抑制活性,研究蚕蛹蛋白水解后氨基酸组成的改变及对ACE抑制活性的影响。结果表明:水解液10kD以下组分(SN2)中疏水性氨基酸含量为49.15%,显著高于10kD以上组分(SN1)中的40.55%及蚕蛹蛋白中的45.21%,其中对ACE抑制活性影响较大的脯氨酸、芳香族氨基酸含量为7.75%和19.20%,高于SN1中的5.62%和13.59%及蚕蛹蛋白中的7.42%和15.81%,并且SN2中ACE抑制率为47.6%显著高于SN1和蚕蛹蛋白中的抑制率,表明水解后疏水性氨基酸组成的改变与ACE抑制活性的变化趋势相同,且ACE抑制活性主要集中于SN2。     

纳豆芽孢杆菌（Bacillus natto）发酵鱿鱼碎肉的工艺优化

为进一步提高鱿鱼碎肉的利用价值,本实验以鱿鱼碎肉作为纳豆芽孢杆菌发酵基质,研究料液比、葡萄糖添加量、发酵pH值、发酵时间和发酵温度对鱿鱼碎肉发酵效果的影响。在以单因素试验确定发酵时间72 h和发酵温度37 ℃的条件后,再对料液比、发酵pH值和加糖量进行三因素三水平的Box-Behnken响应面试验分析,以发酵液的氨基态氮含量为响应值,得到纳豆芽孢杆菌发酵鱿鱼碎肉最佳条件为：料液比1∶1.2（m/V）、发酵pH 8.8和加糖量3.13%。在最优发酵条件下,鱿鱼碎肉发酵液的氨基态氮实际含量达到2.457 mg/mL。氨基酸分析结果显示鱿鱼碎肉发酵液富含具有鲜味和甜味特征的谷氨酸（84.141 mg/g）、天冬氨酸（49.480 mg/g）和甘氨酸（49.425 mg/g）,达到氨基酸总量的39.05%。必需氨基酸总量为149.320 mg/g,占氨基酸总量的31.86%。Sephadex G25凝胶过滤层析显示鱿鱼碎肉纳豆芽孢杆菌发酵液由多肽、小肽及游离氨基酸组成。