植物组织总RNA提取方法的比较

本文综述了植物组织总RNA提取方法比较与难点对策分析。植物组织总RNA提取方法有化学试剂提取和试剂盒提取两种。化学试剂提取法有强变性剂法、CTAB法、热硼酸法及改良热硼酸法、Li Cl-尿素法、阴离子去污剂法、皂土法、硅藻土-苯酚法。其中,除皂土法和硅藻土-苯酚法是近年提出的较新的植物组织总RNA提取方法外,其余的都被广泛应用。本文可为植物组织总RNA提取方法研究提供参考。     

一种新型的油樟叶片总RNA提取方法

以油樟叶为试材,比较Trizol法、皂土法、CTAB法、Tris-SDS-异硫氰酸胍法等传统方案提取总RNA,发现效果都不理想。本文针对油樟叶片富含油脂、多酚、多糖的特点,开创性地使用了一种改良的总RNA提取流程:首次增加预处理液、乙酸乙酯抽提来减少油脂、多酚和多糖对裂解液粘稠度的影响,提取过程中使用二氯甲烷代替三氯甲烷增加对疏水性杂质的清除效果,使用混合型高盐溶液多次脱糖,结果表明使用改良的新型方法获得的油樟叶片总RNA条带清晰无明显降解,测得的A260/A280和OD260/OD230均在2.0左右,产物得率约580μg/g,通过RT-PCR扩增出了油樟18S rRNA基因序长为113bp的特异条带,说明这种改良的新型方法获得的RNA完整性、纯度和产率都远高于常规RNA提取方法,研究探索出一种新型油樟叶片总RNA的提取方法。     

泽漆总黄酮不同提取方法比较研究

目的:筛选泽漆总黄酮的提取方法,为充分利用开发泽漆总黄酮资源提供科学依据。方法:采用超声提取法,渗漉提取法,回流提取法,索氏提取法,冷浸提取法5种方法,以芦丁为考察指标,通过分光光度法对总黄酮含量进行精密测定,对提取效率进行综合分析比较。结果:5种提取方法所得总黄酮含量依次为:超声提取法(10.239 1 mg·g-1)>渗漉提取法(7.777 6mg·g-1)>回流提取法(6.163 9 mg·g-1)>索氏提取法(5.079 0 mg·g-1)>冷浸提取法(2.900 1 mg·g-1),超声提取法所得总黄酮含量最高。结论:超声提取法应用于泽漆总黄酮的提取,具有提取速度快,提取效率高的优点。     

用3种方法提取中华绒螯蟹卵巢总蛋白效果的比较

为了探寻适于中华绒螯蟹Eriocheir sinensis卵巢蛋白质组学研究的总蛋白最佳提取方法,采用RC DC Protein Assay检测蛋白浓度、SDS-PAGE分析蛋白组成等,比较分析了用裂解液法Ⅰ、裂解液法Ⅱ和TCA/丙酮沉淀法提取中华绒螯蟹卵巢蛋白的效果。结果表明:应用3种方法提取的卵巢总蛋白浓度分别为15.59、13.05、0.65 mg/m L,用裂解液法提取的效果最佳,而TCA/丙酮沉淀法不适合用于中华绒螯蟹卵巢总蛋白的提取;SDS-PAGE电泳图谱进一步显示,用裂解液法Ⅱ提取的蛋白样品组成较为丰富,且重复性好,比较适合后续蛋白质组学研究。该研究结果可为中华绒螯蟹卵巢发育蛋白质组学研究提供参考。     

二氢槲皮素提取方法的比较和优化

目的:优选二氢槲皮素的提取工艺。方法:采用热水回流提取法、乙醇回流提取法、微波提取法、乙醇超声提取法、闪式提取法5种方法提取二氢槲皮素,并采用响应面法Box-Behnken设计优化闪式提取法提取二氢槲皮素。结果:5种提取方法的提取率分别为0.17%、0.20%、0.21%、0.22%、0.47%,闪式提取法提取二氢槲皮素的提取率与其他4种方法比较有显著差异。响应面优化闪式提取法的最优条件确定为:提取时间79 s、乙醇体积分数81%和料液比1∶10在此条件下二氢槲皮素提取率可达0.47%。结论:闪式提取法可显著提高二氢槲皮素的提取率。     

沙塘木总生物碱提取工艺研究

目的:探讨沙塘木药材中总生物碱的提取工艺。方法:通过对沙塘木总生物碱提取参数中乙醇浓度、固液比、提取时间及提取次数进行单因素试验,采用正交优化试验法进一步优化,以沙塘木总生物碱提取率作为考察指标。优化沙塘木总生物碱的提取工艺。结果:经过正交试验得出的最佳工艺条件为:乙醇浓度50%,固液比1:120,提取时间1.25h,水浴回流提取4次,在此条件下沙塘木总生物碱的平均提取率为59.88μmol/g,平均浸膏得率为8.17%。结论:经优化得到的沙塘木总生物碱的提取工艺稳定、可行,沙塘木提取物中总生物碱提取率最高。     

穿山龙总皂苷提取工艺研究

目的:优化穿山龙中总皂苷的提取工艺。方法:采用回流提取法,通过单因素(料液比、乙醇浓度、提取时间、提取次数、酸的浓度、水解时间、酸的用量等因素)及正交设计法L9(34),探讨穿山龙总皂苷提取工艺。结果:单因素试验结果显示:最佳料液比为1:60,乙醇浓度为70%,提取时间为3h,提取次数为2次,酸的用量为40mL,酸的浓度为2.5mol/L,水解时间3h。水解前正交试验结果显示:用60%的乙醇提取2次,每次1.5h,料液比为1:60;水解后正交试验结果显示:2.5mol/L的硫酸水解3.5h,酸的用量为50mL。结论:该提取工艺操作简单,条件易控制,为穿山龙的开发利用提供参考。     

天冬中总氨基酸的水提取工艺研究

目的优选天冬中总氨基酸的水提取工艺。方法采用正交试验法,以提取液中总氨基酸的含量为考察指标。结果试验设计四因素中液料比有显著影响,最佳的提取工艺为:60℃温度,30倍量水,提取1次,时间20 min。结论本法操作简便,总氨基酸得率较高,且经济、可行。     

滇黄芩总黄酮不同提取方法的比较分析

目的:研究不同提取方法对滇黄芩总黄酮提取率的影响。方法:以滇黄芩总黄酮得率、干膏得率为指标,对煎煮法、乙醇回流提取法、纤维素酶-磷酸缓冲水溶液提取法、乙醇超声提取法、纤维素酶-乙醇超声提取法进行研究分析。结果:考察五种提取方法对考察指标的影响,计算综合评价指标Y值,Y值的大小顺序为纤维素酶-乙醇超声提取法>乙醇超声提取法>煎煮法>乙醇回流提取法>纤维素酶-磷酸缓冲水溶液提取法。结论:滇黄芩总黄酮的提取方法以纤维素酶-乙醇超声提取法为佳。     

胡椒总多酚的提取及其抗氧化活性研究

明确总多酚在胡椒果上的分布与抗氧化活性,建立胡椒总多酚的提取和分析方法,为胡椒总多酚的进一步研究奠定基础。以黑胡椒果实为主要原料,通过单因素和正交实验,分析乙醇浓度、提取时间、料液比、提取温度等4个因素对胡椒总多酚提取率的影响。以没食子酸作为标准物质,利用福林酚比色法测定黑胡椒提取液中总多酚含量。分析测定胡椒果皮、种子和果梗中总多酚含量。以维生素C作对比,清除DPPH自由基的半抑制浓度(IC50)作为评价抗氧化活性指标,分析总多酚含量与IC50的相关性。结果表明:胡椒总多酚的最佳提取条件为55%乙醇浓度、提取时间4 h、料液比1:30(g/m L)、提取温度90℃,黑胡椒总多酚含量为6.556 mg/g。总多酚类物质在胡椒果梗中含量最高,为12.208 mg/g,其次为果皮(12.105 mg/g),种子最低(2.891 mg/g)。胡椒总多酚含量与IC50值呈显著负相关(P<0.05)。胡椒总多酚相对维生素C具有更高的清除DPPH自由基能力。总多酚是胡椒的重要抗氧化活性成分,胡椒果梗和果皮可以作为一种良好的天然抗氧化剂物质来源。     

浅谈大学体育教学中的自主学习模式

目的:建立一种稳定高效获得广山药总DNA基因组的提取方法,为同科属及同类植物总DNA提取提供参考依据,便于应用分子生物学进行鉴定。方法:通过采用试剂盒法、改良CTAB法和SDS法对广山药的新鲜叶子、新鲜块茎、干燥块茎和新鲜嫩茎进行DNA提取,在进行琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度法进行纯度检测。结果:3种方法均可以从不同的提取部位中提取到基因组DNA,但通过天根新型植物DNA提取试剂盒提取到的DNA纯度最高,CTAB法次之,SDS法最差。结论:利用市售总DNA提取试剂盒提取DNA,方法简便高效,所提DNA效果好。     

野蔷薇不同部位总黄酮含量比较研究

目的:比较野蔷薇不同部位总黄酮含量,为今后开发利用野蔷薇提供依据。方法:采用超声提取法提取野蔷薇不同部位总黄酮,以芦丁为对照品,采用分光光度法测定的总黄酮含量为指标,对野蔷薇不同部位总黄酮含量进行比较。结果:通过比较野蔷薇叶、青果皮、青果籽、红果皮、红果籽、茎、根皮总黄酮含量得出:根皮(137.2 mg·g-1)>叶(43.22 mg·g-1)>茎(36.05 mg·g-1)>青果皮29.94 mg·g-1)>红果皮(15.25 mg·g-1)>红果籽(4.761 mg·g-1)>青果籽(4.396 mg·g-1)。结论:野蔷薇中总黄酮含量丰富,尤其根皮中含量最高,潜在应用价值大。     

老鹳草总鞣质的提取工艺优化

目的:优选老鹳草总鞣质的提取工艺,为老鹳草新药开发奠定基础。方法:采用紫外分光光度法测定总鞣质含量,检测波长为270 nm;高效液相色谱法测定柯里拉京含量,流动相为乙腈-(体积分数)0.1%磷酸溶液(85∶15)。以浸膏得率、总鞣质含量、柯里拉京含量为综合评价指标,通过正交试验考察提取溶剂、提取时间、提取次数、加水量及提取温度等对老鹳草总鞣质提取工艺的影响,以确定最佳提取工艺。结果:最佳提取工艺为A3B2C1D3,即加20倍量水,提取2次,每次2 h,提取温度100℃。结论:优选的提取工艺稳定可行,重复性好,可用于工业化生产。     

高校图书馆知识产权信息服务:国内外现状调研与发展路径

[目的 /意义]考察国内外高校图书馆知识产权信息服务类型和方式,为国内高校图书馆开展知识产权信息服务提供参考。[方法 /过程]调研国内外共12所高校图书馆官方网站,以网页公布的信息为依据展开研究。[结果 /结论 ]国内外高校图书馆开展知识产权信息服务各有侧重和特点,国外高校图书馆面向人群有区分、咨询服务细粒化、政策指引更明确,国内高校图书馆集中力量支持科学研究,专利信息服务体系较为成熟。针对国内高校图书馆知识产权信息服务还存在服务体系不完整、知识框架不完善、内容形式较单一等问题,建议国内高校图书馆融入知识产权创造全过程引领创新,紧密围绕政策指引攻坚克难。     

早期肠内营养预防特重型颅脑损伤并发上消化道出血

目的:探讨早期肠内营养预防特重型颅脑损伤并发上消化道出血的机制和效果。方法:回顾性分析采用早期肠内营养(观察组)与晚期肠内营养(对照组)的特重型颅脑损伤患者的临床资料。结果:两组入院后第1、2、3周并发应激性溃疡出血的发生率比较,差异有统计学意义(P<0.05),其中入院后第1周并发应激性溃疡出血的发生率最高。结论:对特重度颅脑损伤患者进行早期肠内营养,可有效预防并发应激性溃疡出血的发生率、减少并发症、改善预后。     

环境水体中肠道病毒浓缩方法的比较

向水样中接种已知量的脊髓灰质炎病毒，然后利用微孔滤膜吸附-洗脱法、滑石粉-硅藻土吸附层吸附-洗脱法、化学絮凝沉淀法和滑石粉-硅藻土絮凝沉淀法等4种不同的浓缩方法对水样中的病毒进行浓缩，并采用实时定量RT—PCR技术对各方法浓缩后样品中的病毒进行扩增和检测。综合考虑病毒回收率和浓缩方法的可靠性与简便性等因素，确定微孔滤膜吸附-洗脱法为最优的浓缩方案。此外，还比较了三种洗脱液和两种二次浓缩方法的效果，并对各步骤的回收率进行了分析。     

几种单头螨线粒体基因组提取方法的比较

目的:比较几种单头螨线粒体基因组提取方法。方法:参考文献的方法,分别用酚氯仿抽提法、Chelex-100抽提法和蛋白酶K法提取单头螨的总DNA,用COⅠ引物进行PCR扩增,琼脂糖凝胶电泳,比较不同抽提方法的结果。结果:酚氯仿抽提法未能扩增出目的基因,而Chelex-100抽提法和蛋白酶K法均成功扩增出了目的基因。结论:Chelex-100抽提法和蛋白酶K法均可用于单头螨线粒体基因的提取,前者获得的模板量大于后者,但是提取效率小于后者。     

A Review and a Limited Comparison of Methods for Measuring Total Volatile Organic Compounds in Indoor Air

Numerous methods attempt to measure the combined concentrations of volatile organic compounds (VOCs) in indoor air as total VOCs (TVOC). This paper reviews TVOC methods recently presented in the literature and at an international conference on indoor air quality, for the purpose of identifying common practices and of assessing the impacts that choices of sample collection media and analytical methods and instrumentation can have on TVOC results. The paper also presents the results of laboratory and field comparisons of three TVOC methods. These are a flame-ionization-detector (FID) method, a gas chromatography/mass spectrometry (GC/MS) method, and a method employing a photoacoustic infrared (IR) gas monitor. The laboratory experiments were conducted with eight different mixtures of VOCs. The FID method demonstrated an average accuracy of 93 ± 18 percent when the measured values were calculated as concentrations of carbon. The FID and GC/MS methods demonstrated average accuracies of 77±37 and 75±22 percent, respectively, when the measured hydrocarbon-equivalent values were compared to the expected mass concentrations of the mixtures. The higher uncertainty for the FID was largely due to the low mass response of 27 percent for chlorinated compounds. The response of the IR gas monitor varied between 6 and 560 percent for different classes of compounds. Air samples from ten buildings were analyzed by both the FID and GC/MS methods. The results were highly correlated and similar, with the GC/MS values approximately 20 percent higher on average.     

响应面法优化黄根游离总蒽醌的提取工艺

目的:探讨从黄根中提取游离总蒽醌的方法,并对提取方法和工艺条件进行优化。方法:选择提取时间、溶剂配比、料液比等影响因素,在单因素实验基础上,采用3因素、3水平的Box-Benhnken响应面分析法进行工艺优化。结果:优化的提取工艺条件为提取时间3.05 h,溶剂配比0.62∶1.00,料液比1.00∶18.83,提取2次,提取温度60℃时,黄根游离总蒽醌的理论提取率最高,可达0.151%。经验证,此条件下黄根游离总蒽醌提取率为0.152%,与理论值较为接近。结论:通过响应面分析法得到的最优工艺,稳定可行,重复性好。